吴又明;丁彦青;李纳;王金生;郭周庆;冷雷;黄东
影响切片质量的因素较多,要制出高质量的切片,每一操作步骤都至关重要[1,2],组织切片的制作程序包括脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封固.其中切片是制片过程中手工操作较复杂而又重要的环节,切片质量的好坏直接影响诊断工作[1].在实际工作中,由于空气干燥,尤其是冬天切片易出现龟裂和空洞现象(图1).往往靠对每张切片组织块表面哈气来补救,或者蘸温水加湿组织表面,该方法不仅效果差,而且影响制片速度.笔者摸索出一种简单有效的方法,解决了切片易出现龟裂、空洞的问题,现介绍如下.
作者:付先利;吴建农 刊期: 2013年第07期
目的 探讨采用线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(CO1)基因特异性序列鉴定临床无虫病理标本中裂头蚴感染的可靠性.方法 应用免疫曼氏裂头蚴的兔血清检测病理切片中裂头蚴的抗原,有2例呈阳性,疑似裂头蚴感染的无虫病例,按照DNA提取试剂盒说明书提取核酸,用曼氏裂头蚴线粒体CO1基因特异性序列的两对引物作扩增.结果 经PCR 2次扩增后得到目的 序列,电泳条带出现在预期的位置.2例病理标本扩增的核苷酸序列与已知基因片断序列比对,引物F650/R800扩增条带符合率分别为100%和97%,引物F965/R1120扩增条带符合率均为100%.结论 用裂头蚴线粒体CO1特异性基因引物作重复PCR扩增,对鉴定无虫病理标本曼氏裂头蚴感染有诊断意义.
作者:兰智华;粟占三;贺美;张祖萍;胡勉娟;曾庆仁 刊期: 2013年第07期
检测细胞凋亡的方法较多,目前TUNEL染色较多应用于石蜡切片.作者在实验中发现,用蛋白酶K消化切片的染色方法不易操作和控制,为此对免疫组化热修复法进行改进,染色效果满意,且简便易行,现介绍如下.
作者:李梅;吴建农 刊期: 2013年第07期
目的 观察Ataxin-3蛋白在人胃癌组织中的表达及分布,探讨其在胃癌发生、发展过程中的意义及与临床病理学特征的关系.方法 采用免疫组化SuperVision两步法检测Ataxin-3在胃癌(265例)、正常胃黏膜(209例)、胃低级别上皮内瘤变(86例)及高级别上皮内瘤变(75例)组织中的表达,并对其表达与临床病理学特征的关系进行统计学分析.结果 Ataxin-3的表达,在胃癌组织中低于正常胃黏膜组织(P<0.001);胃癌组与低级别上皮内瘤变组中的表达有差异(P﹤0.001),而胃癌组与高级别上皮内瘤变组比较表达无差异(P>0.05);Ataxin-3表达与胃癌的Lauren组织学分型、肿瘤分化、远处转移及p53突变蛋白的表达存在相关性(P均<0.05).结论 Ataxin-3蛋白很可能在胃癌的发生、发展过程中起重要意义.
作者:曾丽霞;马韵;王超;龙喜带;王华 刊期: 2013年第07期
全自动免疫组化染色仪使实验室技术人员从繁琐的手工操作中解放出来,大大提高了免疫组化的工作效率,由于其都有相应的加强二抗相匹配,所以染色强度和染色阳性率均相应提高[1].即用型抗体的优点在于使用方便,一般不需要使用者重新摸索稀释的比例[2].但在实际工作中我们发现部分即用型抗体在全自动免疫组化染色仪上染色后组织切片背景有着色,因此我们尝试把即用型抗体再稀释后,再进行全自动免疫组化染色,取得较为满意的效果.
作者:孙廷谊;谢红建;孔令非 刊期: 2013年第07期
目的 探讨胰腺浆液性微囊性腺瘤(serous microcystic adenoma,SMA)临床病理特征、诊断与鉴别诊断.方法 回顾性分析13例SMA患者的临床影像学特征、组织病理学及免疫表型,并复习相关文献.结果 13例SMA中女性10例,男性3例;年龄39~74岁,平均58.8岁;8例为体检时发现,无临床症状.9例伴肝和(或)肾囊肿,其中3例中央可见骨化.镜下见肿瘤主要由大小不等的囊腔组成,囊壁衬覆单层立方上皮,细胞质透明并富含糖原.肿瘤细胞核小而圆,居中,无核仁,无核分裂象.间质可见粗大的纤维组织分隔.免疫表型:上皮细胞CK(AE1/AE3)、CK7、CK19、CK8/18、Cyclin D1和EMA均阳性,CEA、CD34、ER和PR均阴性.随访2~65个月,未见复发及转移.结论 胰腺SMA是发生于胰腺外分泌部的少见肿瘤,结合临床影像学、病理组织学和免疫表型有助于诊断及鉴别诊断.手术切除肿瘤后预后良好.
作者:林生明;张声;陈余朋;刘雪咏;王鹏程;蔡珊珊;熊令根;王行富 刊期: 2013年第07期
随着分子生物学的不断发展,越来越多的分子生物学技术广泛运用于临床及基础医学的研究,荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)检测是分子诊断的重要工具.由于探针合成的成本较高,影响FISH技术在临床应用中的普及.本文推荐一种新型探针稀释液,效果良好,可降低其成本,现介绍如下.
作者:时姗姗;章如松;饶秋 刊期: 2013年第07期
目的 探讨上皮样黏液纤维肉瘤的临床病理特征.方法 对1例上皮样黏液纤维肉瘤进行光镜观察及免疫组化标记,并复习相关文献.结果 上皮样黏液纤维肉瘤好发于中老年人,多发于四肢.肿瘤呈多结节浸润性生长,疏松区和致密区交替出现,疏松区具有普通黏液纤维肉瘤的特征,致密区肿瘤细胞呈片状排列,并显示上皮样形态特点.免疫表型:肿瘤细胞vimentin阳性,Ki-67增殖指数10%~15%.结论 上皮样黏液纤维肉瘤是黏液纤维肉瘤罕见的亚型,多数为高级别肿瘤,且较普通的高级别黏液纤维肉瘤更具侵袭性.
作者:管雯斌;王立峰;吴湘如 刊期: 2013年第07期
目的 探讨鼻咽癌组织中梭形癌细胞是否具有上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)特性.方法 以33例鼻咽慢性炎组织作为正常对照,采用免疫组化SP法检测98例鼻咽癌组织梭形癌细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin、OCT4、SOX2和ALDH1的表达.结果 与鼻咽慢性炎组织相比,鼻咽癌组织中梭形癌细胞上皮标志物蛋白E-cadherin明显下调(P<0.001),而间叶标志物蛋白N-cadherin和vimentin明显上调(P均<0.001).梭形癌细胞中E-cadherin与N-cadherin(P=0.020)和vimentin(P=0.001)的表达呈明显负相关.与鼻咽慢性炎组织相比,鼻咽癌组织中梭形癌细胞中CSCs标志物OCT4、SOX2和ALDH1蛋白明显升高(P均<0.001),二者差异有统计学意义.此外,梭形癌细胞中E-cadherin与OCT4(P=0.029)及ALDH1(P=0.000)的表达均呈负相关.结论 鼻咽癌组织中梭形癌细胞具有EMT及CSCs特性,可作为判断转移性鼻咽癌的形态学指标.
作者:罗伟仁;姚开泰 刊期: 2013年第07期
目的 探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其与临床病理因素的相关性.方法 采用免疫组化SP法检测92例肺癌组织及10例正常肺组织中CIP2A与c-Myc蛋白表达及相关性,干扰CIP2A的表达并检测其对细胞增殖的影响.结果 在NSCLC组织中,CIP2A的表达定位于细胞质与细胞核中,以胞质表达为主.CIP2A阳性率为70.65%(65/92),高于正常肺组织(P<0.05).c-Myc在CIP2A阴性的肿瘤中阴性率为77.78%(21/27),阳性率为22.22%(6/27);c-Myc在CIP2A阳性的肿瘤中阳性率为76.92%(50/65),阴性率为23.08%(15/65).CIP2A、c-Myc的表达与患者不良预后相关,CIP2A阳性与患者年龄、性别、肺癌类型、TNM分期、淋巴结转移均无相关性.转染CIP2A特异性siRNA于A549和H1299肺癌细胞系中,发现CIP2A表达下降的同时,c-Myc蛋白水平明显下调,细胞增殖能力明显下降(P<0.05),集落数目明显减少(P<0.05).结论 CIP2A在肺癌中过表达,且与c-Myc表达及患者预后明显相关,干扰CIP2A可下调c-Myc表达并抑制肺癌细胞增殖.
作者:韩丽华;苏秋香 刊期: 2013年第07期
目的 探讨乳头状弹力纤维瘤的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断及预后.方法 对3例乳头状弹力纤维瘤进行HE、免疫组化及弹力纤维染色,并复习相关文献.结果 镜下见肿瘤呈细乳头状,表面被覆单层扁平或立方内皮细胞,上皮形态规则.免疫表型:肿瘤细胞CD31和CD34均(+),弹力纤维染色示乳头中心较多弹力纤维.结论 心脏乳头状弹力纤维瘤十分罕见,临床缺乏特征性症状和体征,手术切除标本后送病理组织学检查可确诊.
作者:薛霜;赵跃武;许梅;孔令非 刊期: 2013年第07期
医院医疗质量建设的重点是规范科室的质量与安全管理团队工作,切实加强科室质量与安全管理团队建设,有效地推进科室管理工作,持续提升科室医疗质量和服务水平是确保医疗质量和医疗安全的根本.为规范科室工作、指导科室开展质量与安全管理工作,本文就如何提高病理实验室质量与安全管理团队建设水平介绍如下.
作者:马恒辉;周晓军 刊期: 2013年第07期
目的 对锯齿状腺瘤(traditional serrated adenoma,TSA)、传统腺瘤(traditional adenoma,TA)及锯齿状腺癌(serrated adenocarcinoma,SAC)中端粒酶、p53及Ki-67的免疫表型进行分析和比较.方法 运用免疫组化MaxVision快捷法对52例TSA、50例TA及51例SAC组织标本中端粒酶、p53、Ki-67的表达进行检测.结果 端粒酶在TSA、TA与SAC组表达差异均有显著性,SAC组阳性率高于TSA(P<0.01),TSA组高于TA组(P<0.01);Ki-67在TSA与TA组表达差异无显著性(P>0.05),SAC组阳性率则明显高于TSA和TA组(P<0.01);p53在SAC组阳性率高于TA组(P<0.01),TA组高于TSA组(P<0.01).结论 TSA是一种具有增殖活性的腺瘤,端粒酶的激活可能在其癌变过程中起一定作用.
作者:吴又明;丁彦青;李纳;王金生;郭周庆;冷雷;黄东 刊期: 2013年第07期
目的 探讨7例肾上腺皮质嗜酸细胞癌临床及病理特点.方法 回顾性分析7例肾上腺皮质嗜酸细胞癌的临床特点、组织形态学特征,并复习相关文献.结果 7例肾上腺皮质癌中皮质醇增多症1例,原发性醛固酮增多症2例,无功能性4例.7例均为肾上腺超声诊断,术后病理诊断均为肾上腺皮质嗜酸细胞癌.6例进行随访,随访时间(21.7±20.6)个月,死亡3例.结论 肾上腺皮质嗜酸细胞癌罕见,诊断依据病理学及免疫表型,多为无功能性(57.1%),亦可表现内分泌功能异常(42.9%),非低恶性度肿瘤,治疗以手术为主.
作者:许敬平;吴大为;黄江梅;高艳明;邵俊涛 刊期: 2013年第07期
目的 探讨恶性血管周上皮样细胞肿瘤(malignant perivascular epitheliod cell tumor,PEComa)的临床、病理特征及鉴别诊断.方法 对2例恶性PEComa进行临床、病理形态学、免疫表型及电镜观察,并复习相关文献.结果 镜下见肿瘤组织由梭形细胞及上皮样细胞构成,细胞异型性明显,细胞胞质透明或嗜酸,细胞核大,有核仁,瘤细胞由纤细的纤维结缔组织及薄壁血管将其分隔成巢状、腺泡状、片状结构,部分区域可见多核瘤巨细胞伴肿瘤坏死,核分裂多见.免疫表型:肿瘤细胞表达HMB-45、S-100、SMA及desmin;电镜下见肿瘤细胞胞质内可见高电子密度核心的内分泌小体和少许不成熟的黑色素小体.结论 恶性PEComa罕见,病理形态多样,熟悉其临床、病理形态、免疫表型及电镜下改变,有助于临床、病理医师对其正确诊断及鉴别诊断.
作者:石峰;昌红;王莉 刊期: 2013年第07期
目的 观察结直肠癌原发灶K-ras基因的突变,探讨其与临床病理特征的关系.方法 运用实时荧光定量PCR法检测230例结直肠癌组织K-ras基因12、13密码子的突变,利用χ2检验分析其与临床病理特征的相关性.结果 230例结直肠癌患者中,84例K-ras基因发生突变,突变率为36.5%,其中12密码子突变65例(28.2%)、13密码子突变19例(8.3%).结直肠癌肺转移患者K-ras基因突变率较无肺转移患者高(P=0.022),12、13单密码子突变与临床病理特征(患者年龄、性别、肿瘤部位、病理分型、TNM分期、Dukes分期、区域淋巴结及肝肺转移)无关(P>0.05).结论 结直肠癌K-ras基因突变可能与肺转移存在相关性,检测K-ras基因突变对结直肠癌患者临床个体化治疗具有指导意义.
作者:杨瑞钦;杨春康;徐可;许元基 刊期: 2013年第07期
目的 探讨计算机辅助阅片系统(ThinPrep imaging system,TIS)在宫颈液基细胞学诊断中的应用价值.方法 对10 000例宫颈液基细胞学标本运用TIS辅助阅片+人工阅片进行诊断,记录阅片时间及诊断结果,并分别与2011年同期10 000例单纯人工阅片的阅片时间及诊断结果进行比较.结果 单纯人工阅片平均时间为4.8 min/片,TIS辅助阅片后的人工阅片平均时间为2.6 min/片,阅片速度提高84.62%,二者差异有统计学意义(P<0.001).两种阅片方法对比鳞状上皮细胞异常标本检出率显示:使用TIS后非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells,ASC)以上的细胞增加9.82%,其中未明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells-undetermined significance,ASC-US)增加12.01%;低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)增加6.71%;高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)增加22.73%,不除外高级别鳞状上皮内病变的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells-cannot exclude HSIL,ASC-H)降低27.78%,两组相比差异无显著性(P>0.05).两种阅片方法对比细胞学与组织学的诊断符合率显示:细胞学诊断为LSIL以上的与组织学诊断为子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的符合率分别为90.32%和91.47%,使用TIS后诊断为LSIL的、组织学诊断为CIN1的符合率由71.59%升至74.45%,HSIL组织学诊断为CIN2以上的符合率由77.78%升至82.05%,差异无统计学意义(P>0.05).结论 TIS能显著提高阅片速度,降低诊断医师的劳动强度,提高工作效率,并具有与单纯人工阅片相似的病变检出率,是一种具有较高应用价值的子宫颈癌筛查技术手段.TIS对HSIL的高敏感性,有待探讨.
作者:周东华;田杰;王夷黎;秦艳;平静;刘小燕;陈莹;范菊花 刊期: 2013年第07期
目的 探讨Beclin1在食管鳞状细胞癌(esophagus squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及意义,分析其过表达对人ESCC细胞株TE1体外生长活性的影响.方法 分别采用免疫组化SP法和RT-PCR技术检测57例ESCC及癌旁正常食管黏膜组织中Beclin1蛋白及mRNA的表达;利用基因转染、RT-PCR及Western blot法观察外源性Beclin1过表达对ESCC细胞株TE1的影响;MTT法分析外源性Beclin1过表达对TE1细胞增殖的影响;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测转染后肿瘤细胞的细胞周期和凋亡;在荧光显微镜下观察转染后肿瘤细胞的自噬.结果 免疫组化染色结果示,在ESCC中Beclin1蛋白的阳性率为29.82%(17/57),明显低于癌旁正常食管黏膜组织100%(57/57)(P<0.00),Beclin1蛋白的表达与ESCC患者的分化程度(χ2=6.158,P=0.046)、淋巴结转移(χ2=5.664,P=0.017)有关;与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度无关;RT-PCR检测结果示,在ESCC中Beclin1 mRNA的表达量(0.168±0.038)明显低于癌旁正常食管黏膜组织(0.280±0.052)(P<0.00).pCMV6-Entry-Beclin1脂质体法转染TE1细胞后,在mRNA和蛋白水平Beclin1的表达均高于TE1PE组及TE1组.在TE1细胞中过表达Beclin1后可抑制肿瘤细胞的体外生长,抑制率为57.21%.FCM检测pCMV6-Entry-Beclin1转染后G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少,细胞增殖受到抑制;凋亡率为5.91%,高于TE1PE组和TE1组(P<0.05).在荧光显微镜下见TE1Beclin1组中MDC标记的自噬囊泡数量明显增加.结论 自噬相关基因Beclin1 mRNA及蛋白在ESCC中表达下调,自噬活性的降低可能与ESCC的发生、发展及侵袭转移有关;Beclin1过表达可抑制人ESCC细胞株TE1的增殖,并诱导其自噬和凋亡,利用自噬基因Beclin1对ESCC基因治疗也许具有可行性.
作者:吴娟;杜芸 刊期: 2013年第07期
目的 探讨Destrin蛋白表达与结肠癌发生、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期的关系.方法 将87例结肠癌、26例结肠上皮内瘤变及34例正常结肠组织标本制成组织芯片,采用免疫组化SP法检测Destrin表达.结果 Destrin在正常结肠黏膜中的阳性率为20.59%(7/34),低于结肠上皮内瘤变(42.31%),二者差异无显著性(P>0.05).Destrin在低级别上皮内瘤变中表达低于高级别上皮内瘤变,二者差异无显著性(P>0.05).Destrin在高级别上皮内瘤变组织中的表达明显高于正常结肠黏膜组织(P<0.05);Destrin在结肠癌中阳性率为80.46%(70/87),明显高于正常结肠黏膜和上皮内瘤变(P<0.05).Destrin在高、中、低分化腺癌中的阳性率分别为70.00%(7/10)、80.85%(38/47)与83.33%(25/30),三者之间差异无显著性(P>0.05).结肠癌中Destrin表达与肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0.05).结论 Destrin表达与结肠癌的发生、肿瘤大小、淋巴结转移和临床分期密切相关,其可能是结肠癌诊断及预后的重要生物学标志物.
作者:苏坚;颜鸿飞;周钰娟;廖前进;史玲;杨晶;苏琦 刊期: 2013年第07期
患者男性,44岁,左大腿无痛性肿块2年,无外伤史.查体:左大腿深部触及一大小3 cm×2.5 cm×2 cm肿物,质实,界限清,无明显压痛,无其它阳性体征.
作者:汤晓晖;王晨;温铖彩 刊期: 2013年第07期