学术投稿

肺癌石蜡包埋组织及新鲜标本组织芯片制备方法学探讨

韩瑞刚;张建中;黄英武;郑燕华;赵尔增;周金莲;张卫国

关键词:组织芯片, 肺肿瘤, 石蜡包埋组织, 新鲜组织, 基因表达
摘要:目的:探讨和建立石蜡包埋组织和新鲜冷冻标本制备组织芯片的方法,以及在基因表达分析中的应用.方法:选取肺癌石蜡包埋组织90例,新鲜液氮冻存肺癌及癌旁肺组织20例,常规切片HE染色下确定穿刺部位,石蜡包埋组织芯片制作按Kononem等方法(1998),每例穿取0.6 mm组织柱2条,制备180点阵组织芯片;而新鲜组织芯片参考Fejzo 等方法(2001),并略作改良,制备50点阵组织芯片.所有组织芯片模块,经4 μm切片、常规组织学染色和免疫组化染色,以评价其在形态学及基因表达分析中应用的可行性.结果:180点阵石蜡包埋肺癌组织芯片,组织排列整齐,HE染色后组织形态可观察率在98%以上;p53、c-myc、bcl-2、bax和Ki-67等免疫组化染色后,肺癌组织可见不同程度的抗原表达,组织点阵的形态可观测率在89%~95%之间.新鲜组织芯片经HE染色后,形态可观测率和基因表达可分析率在70%左右.结论:手工法组织芯片制备简便易行,使用组织少,不破坏原蜡块;实验均一性、可比性好,且节省试剂.与常规组织切片相比,2点0.6 mm组织可以获得原蜡块95%以上的信息,完全可以用于组织形态学和蛋白水平上的基因表达分析;新鲜组织芯片技术已经初步建立,但尚有待于进一步完善制备技术和mRNA 分析方法.
临床与实验病理学杂志相关文献
  • 乳腺浸润性导管癌中HPV18、HPV16感染的研究

    目的:了解乳腺浸润性导管癌中HPV18、HPV16的感染情况,分析其是否是乳腺癌发生的危险因素及与临床病理的相关性.方法:根据HPV16、HPV18的DNA序列,合成相应特异的寡核苷酸片段,用加尾标记法制备地高辛标记探针,用原位杂交法检测51例乳腺浸润性导管癌、10例相应正常乳腺上皮及15例良性乳腺病变中HPV18、HPV16的感染,并分析其与患者发病年龄、肿块大小及淋巴结转移的相关性.结果:浸润性导管癌中HPV18或16的总阳性率达70.6%, 其中HPV18与HPV16的阳性率分别为58.8%、45.1%, 均明显高于正常乳腺上皮的感染率(30.0%、10.0%;P<0.05);乳腺良性病变的HPV18、16阳性率分别是60.0%、6.0%, 其中HPV18的阳性率亦显著高于正常乳腺上皮(P<0.05).结论:(1) HPV16和18可能是乳腺浸润性导管癌发生的致病因子,HPV18尚可能与乳腺良性病变的发生有关.(2) HPV的感染与患者年龄、肿块大小及淋巴结转移无相关性.

    作者:周晓燕;朱伟萍;金爱萍;施达仁 刊期: 2002年第04期

  • 肾脏原发性淋巴瘤临床病理特征

    目的: 探讨肾脏原发性恶性淋巴瘤(PRL)的诊断标准,为临床和病理早期诊断PRL提供依据.方法: 对2例PRL患者行肾脏穿刺活检,镜下观察其病变特点,同时用LCA、CD20、CD45RO、CD3等抗体对其进行免疫组织化学标记,并结合临床资料综合分析.结果: 2例病变极为相似,均显示肾小球及肾小管间散在大量异型细胞,肾小管显萎缩.2例肿瘤细胞免疫组化标记LCA、CD45RO和CD3均为阳性; CD20、CD79、CD68、CK、HHF35、S-100蛋白、Lys和NSE均为阴性,结果证实2例PRL均为外周T细胞淋巴瘤.结论: 要诊断肾脏淋巴瘤,首先需排除它处淋巴瘤或白血病侵犯肾脏,并结合临床表现和形态学特征来综合考虑;肾脏穿刺活检结合免疫组织化学标记也不失为一种诊断PRL准确而又简捷的方法.

    作者:尹红玲;黎岳南;颜亚晖;杨晓静;吴晓英 刊期: 2002年第04期

  • 提高免疫组织化学表达肿瘤基因效果的方法

    用免疫组化方法检测肿瘤基因,阳性率偏低的主要因素是DNA双股螺旋没解开,碱基对不能外露.根据原位杂交技术,用盐酸水解蛋白质,高温使DNA解链,快速冷却让自由单链成线团结构(变性),再用氢氧化铝钾修复和聚集抗原,造就了抗原与抗体在分子表面互补性结合的环境.结果显示免疫组化法表达的肿瘤基因有较高的阳性率,特别是阳性物质如ER、PR受体,p16、p53蛋白,Ki67,c-myc等能准确的表达于细胞核.

    作者:杜德利;范慧;王万忠 刊期: 2002年第04期

  • 肾血管平滑肌脂肪瘤31例临床病理分析

    目的:探讨肾血管平滑肌脂肪瘤(angiomyolipoma, AML)的临床病理特征.方法:对31例肾AML的临床病理特征进行分析,并做免疫组化检测,其中4例做电镜观察.结果:31例肾AML按其组织形态可分为典型型(67.7%)、非典型型(6.5%)、平滑肌瘤样型(9.7%)、脂肪瘤样型(9.7 %)、炎症型(6.5%)5型.免疫表型:肿瘤细胞特征性表达HMB45、Melan-A、gp-100、HHF35、SMA、CD68.其中1例电镜下肿瘤细胞内可见黑色素小体.结论:肾AML的组织形态多样,特征性免疫组化标记为诊断提供依据.掌握形态特征及其鉴别诊断要点有助于临床的正确治疗.

    作者:何向蕾;张宏斌;李仲宜 刊期: 2002年第04期

  • 石蜡切片后粘胶技术在免疫组化染色中的应用

    在临床病理诊断中,免疫组化染色是必不可少的技术,特别是外院来会诊的石蜡切片和蜡块,大多数是需要进行免疫组化染色,但这些切片往往经抗原修复技术处理后部分或全部从载玻片上脱落,延误诊断.我们在工作中发现石蜡切片后粘胶技术能克服这种现象,现报道如下.

    作者:张芸;文晓笛;刘健;陈森林 刊期: 2002年第04期

  • 肺尖帽:肺外科病理中一种形态独特而尚未确认的病变

    作者: 刊期: 2002年第04期

  • 幼儿分泌性乳腺癌1例

    患者男性,3岁,左侧乳腺肿块进行性增大2年,无疼痛,无乳头溢液,体检左侧乳晕外侧可及一质硬、活动、界清的肿块,直径约4 cm.

    作者:李小雪;吴波 刊期: 2002年第04期

  • 病理学Internet网站的建设

    目的:通过病理学网站的建设实例,探讨了在Internet上建立病理学网站的设计方案和方法.方法:(1)建设病理学网站的基本条件,(2)病理学网站的定位,(3)病理学网站要实现的主要功能,(4)网站的栏目设置.结果:实现了预定的建设目标,建立了网站<病理学家>.网址:http://pathol.126.com/.本网站分为19个功能模块,包括新闻与信息、病理学论坛、网上读片会、病理咨询室、远程病理会诊、远程教育、Medline检索等.结论:就病理学网站建设的意义、栏目设置、网站管理维护、远程会诊等诸方面问题作了探讨.互联网站反映了本单位的形象,是面向世界的窗口.

    作者:陶瑜 刊期: 2002年第04期

  • 原发性膀胱透明细胞癌1例

    患者女性,61岁,无痛性肉眼血尿1周,经抗炎治疗无效,来我院就诊.膀胱B超检查:膀胱右侧壁见-1 cm×3 cm低回声团块与膀胱壁相连,基底宽.膀胱镜检查:膀胱右侧壁见一乳头状新生物,直径约3 cm,其周围见3个直径约0.5 cm大的肿物,色淡.IVU示双肾及输尿管显影正常,膀胱右下侧壁充盈缺损.入院后,行膀胱探查术.术中见肿物未侵出膀胱壁,将4个肿物行电刀切除,术后肿物送病理检查.术中探查腹腔、盆腔其他脏器未见异常发现.术后抗炎对症治疗、免疫治疗、化疗一个疗程.术后9个月患者出现尿频、尿急、排尿困难,再次住院.膀胱镜检查,见膀胱壁不规则增厚,三角区及左侧、右侧膀胱壁见多个肿物,肿物直径1~3 cm,基底宽.再次手术,术中见膀胱顶部与腹膜广泛粘连变硬,并与盆腔粘连,固定.无法根治性切除,取肿物活检送病理检查.术后3个月,患者死于原发癌肺转移.

    作者:张淑英 刊期: 2002年第04期

  • RT-PCR法检测软组织肿瘤石蜡包埋组织中小片段mRNA

    有研究报道RT-PCR方法可以在石蜡包埋组织中检测融合基因表达,并可用于诊断和鉴别诊断中[1].我们采用RT-PCR方法,检测了一组软组织肿瘤石蜡包埋组织中看家基因卟吩胆色素原脱氨酶(phosphobinigen deaminase,PBGD)小片段mRNA表达情况,探讨软组织肿瘤石蜡组织中小片段mRNA保存情况及RT-PCR的可行性.

    作者:魏永昆;孙孟红;王坚;朱雄增 刊期: 2002年第04期

  • 影响胸腹水细胞学阳性率的技术因素分析

    胸、腹水细胞学诊断因具有快速、准确、简便以及患者痛苦少等优点,在临床上得以广泛应用,并逐渐成为诊断疾病的重要手段之一.准确的诊断对临床治疗至关重要.因此,如何减少胸、腹水细胞学诊断的漏诊、误诊,提高其诊断阳性率具有重要的实际意义.正确掌握良、恶性细胞学特征是准确诊断的关键;然而,制片方法等技术因素恰当与否,对胸、腹水细胞学诊断阳性率同样具有重要影响,为此,笔者就影响其阳性率的技术因素进行分析探讨.

    作者:肖楚梅;汪波;石灵春;张维彬 刊期: 2002年第04期

  • 大鼠肝内移植肿瘤与肥大细胞关系的形态学研究

    目的:研究大鼠肝内移植肿瘤与其周边肥大细胞的关系.方法:建立40只雄性Wistar大鼠肝内移植肿瘤模型,运用HE染色,肥大细胞(mast cell, MC)Alcian blue特殊染色,苦味酸-天狼猩红染色和电镜等技术,观察移植肿瘤肝组织的形态学改变,肿瘤周边浸润MC的数量以及MC与肿瘤组织的关系,8只正常大鼠为对照组.结果:肿瘤组织周边部分肝细胞形态学异常;肝组织内胶原纤维增生,主要为Ⅰ型和Ⅲ型胶原,并包绕肿瘤组织,肿瘤周边MC浸润,并沿胶原纤维分布,不同大鼠其肿瘤周边MC数量不一,有的差异明显.超微结构观察显示MC通过多个接触点与肿瘤细胞紧密相连,并释放胞质颗粒内容物,导致肿瘤细胞崩解.结论:MC与肿瘤组织有着非常密切的关系,MC可能通过多种途径直接和间接地发挥抗肿瘤作用.

    作者:阮幼冰;官阳;张志勇 刊期: 2002年第04期

  • 胸腹水沉淀物琼脂石蜡双包埋切片法与常规涂片法的对比

    长期以来医院病理科常规采用胸腹水直接涂片法检查,但常规涂片法中癌细胞的检出率低,是目前临床病理工作中普遍存在的问题.原因之一是常规的细胞涂片法所收集的细胞数量少而致癌细胞检查出现假阴性,而标本中大量细胞又随残液弃去.同时,由于涂片法存在厚薄不均,细胞重叠堆积和浓厚的涂片背景,以及只能观察少数细胞及单个细胞形态变化等缺点,常常造成诊断困难,有时须多次送检才能得出结论.为了克服这一不足,笔者将胸腹水沉淀物先用琼脂包埋后,再用石蜡包埋切片,制出的切片结果满意.为了比较胸腹水沉淀物琼脂石蜡双包埋切片法和常规涂片法的诊断价值,我们收集了600例胸腹水标本采用胸腹水沉淀物琼脂石蜡双包埋切片法和常规涂片法对比观察,结果如下.

    作者:郭智俊;彭桂香;潘乃梁 刊期: 2002年第04期

  • 脾脏炎性假瘤2例

    例1,男性,45岁.因反复畏寒、发热1月入院.腹部B超示脾门旁实质内3.0 cm×3.3 cm异常回声区.术中见脾脏大小、色泽正常,质软.病理检查:脾脏1个,10.5 cm×7.0 cm×4.5 cm,切面脾实质内散在多个灰白小结节,直径0.5~0.8 cm,界清,质中等.镜检:病变处脾正常结构消失,大量淋巴细胞、浆细胞及少量嗜酸性粒细胞和灶性中性粒细胞浸润,多量泡沫细胞形成,血管增生,并可见小灶性坏死,间质细胞梭形似纤维母细胞伴胶原纤维形成(图1,2).免疫表型:CD3及UCHL-1弥漫阳性,L26及CD79灶性阳性,Kappa(+),Lambda(+),间质梭形细胞vimentin(+)、SMA(+)(图3)、actin(+)(图4).病理诊断:脾脏炎性假瘤.

    作者:袁键群;盛彩霞;许敬尧 刊期: 2002年第04期

  • 单核苷酸多态性的研究及应用

    1 单核苷酸多态性(SNPs)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNPs)是指在基因组水平上由于单个核苷酸变异所引起的DNA序列多态性.在含有30亿个碱基的人类基因组中,估计平均每1 000个碱基出现1个SNP[1].SNPs可分为编码区SNPs(cSNPs)、基因调控区SNPs(pSNPs)和存在于连接两个基因之间的DNA中的随机非编码区的SNPs(rSNPs) 3类[3].其中有意义的SNPs存在于基因的编码区和基因调节域,它们能够导致基因功能改变,对表型产生很大的影响[2,3].并有研究报道那些能够使基因功能丧失,导致死亡的SNPs在人群中将随着年龄增长而降低[4].

    作者:徐恩萍;来藏德 刊期: 2002年第04期

  • 腹膜播散型平滑肌瘤病1例

    患者女性,25岁.孕10个月.B超示:足月妊娠,盆腔及腹腔弥漫性低回声结节.于硬膜外麻醉下行剖宫产术,娩出女婴重2 800 g.术中探查:子宫、卵巢及圆韧带浆膜面、大网膜、肠系膜等处见散在及簇状分布的灰白色结节100余个,大者约3 cm×2 cm×1 cm,小者似米粒样,酷似恶性肿瘤的种植和转移.快速冷冻切片提示组织学良性,形态似平滑肌瘤.

    作者:刘德洁;姜青梅;武显杰 刊期: 2002年第04期

  • 胫骨皮质旁软骨肉瘤1例报道及文献复习

    目的:了解皮质旁软骨肉瘤的临床病理特征、诊断及鉴别诊断要点.方法:报道1例胫骨皮质旁软骨肉瘤临床和病理改变,结合文献对该肿瘤的临床表现、病理形态学特征及诊断和鉴别诊断要点进行讨论.结果:皮质旁软骨肉瘤大体呈结节状,切面分叶状、瓷白色半透明,有砂砾感.镜下肿瘤主要为分化良好的透明软骨成分,由纤细的纤维束分割,或由化生的骨小梁包裹,可见软骨内钙化和骨化,可见灶性区黏液变性,缺乏肿瘤性骨样基质,免疫组织化学标记显示肿瘤细胞Vim、S-100蛋白阳性,PCNA 少数细胞阳性.结论:皮质旁软骨肉瘤是罕见的恶性程度较低的软骨肉瘤.

    作者:孟凡青;吕翔;张华勇;戴晓波 刊期: 2002年第04期

  • Castleman病16例临床病理分析

    目的:探讨Castleman病的临床病理特点. 方法:复习确诊为Castleman病的16例临床资料,采用HE切片光镜观察,并对其中10例进行免疫组化检测. 结果:本组男8例、女8例;年龄8~62岁,平均40岁.临床上,12例为局灶性、4例为多中心性.组织病理学分型,透明血管型9例、浆细胞型7例. 结论:Castleman病的诊断依赖于病理组织学形态,其特征性表现为淋巴组织增生性的病理组织学改变,除外多种可以出现Castleman病形态的病变后,并须结合其临床资料.免疫组织化学在Castleman病的诊断中无特异性标记,但可帮助其鉴别诊断.

    作者:许建芳;胡锡琪;周燕南;宿杰 刊期: 2002年第04期

  • 肾上腺皮质腺瘤内髓脂肪瘤样结节1例及文献复习

    髓脂肪瘤常见于肾上腺皮质、髓质或副肾上腺,偶见于肾上腺外[1].肿瘤绝大多数单独发生,而发生于肾上腺肿瘤(或其它病变)内者(即瘤内瘤)极少见[1~4].肾上腺肿瘤内髓脂肪瘤的临床病理特征不同于单独发生者.作者报道1例肾上腺皮质腺瘤内髓脂肪瘤样结节,结合文献讨论其临床病理特征及组织来源.

    作者:姜惠峰;黄晓红 刊期: 2002年第04期

  • 以囊性变为主的回肠恶性间质瘤1例

    患者男性,27岁.因反复左下腹疼痛3月余,尤以左侧卧位时明显,伴解黑便3天入院.查体:左下腹可触及一较大的包块,质较硬、压痛,活动度差.B超示:肿块呈多房性,大小16 cm×15 cm,回声不均.在B超引导下行包块穿刺,抽出较多暗红色血性液体.手术中见肿物大部分位于腹膜后,与回肠紧密相连,累及膀胱.临床诊断:腹膜后肿瘤(恶性).

    作者:何建芳;刘旭明;黄锦叶 刊期: 2002年第04期

临床与实验病理学杂志

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主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会