学术投稿

简易ABO基因定型试剂盒的建立

赵志弘;田亚娟;乔芳;赵倩;宋俊荣;王振雷;石翠英;何路军;张虹

关键词:ABO血型, 基因定型, 试剂盒
摘要:近年来,ABO基因分型技术克服了血型血清学方法的限制,为临床解决了一些疑难血型鉴定问题,已作为一种独立简便的分型方法,得到广泛应用.在输血和器官移植中,ABO系统是重要的人类同种抗原.在临床方面,由于疑似遗传的弱亚型或其他变异亚型、获得性A或B血型、在疾病或妊娠中暂时出现的A或B抗原表达减弱、大量或反复输血、在胎儿期早期发生的祖细胞交换或正处在干细胞移植期而造成的嵌合体和极少数的与ABO相关的新生儿溶血病等原因,造成的ABO血清学定型困难可通过ABO基因定型解决.从提高输血安全性方面考虑,向临床提供基因分型的血液制品,从供受者表型匹配逐步升级到基因型匹配,是今后的发展方向.血清学技术相对较普及,当前加强分子生物学教育显得刻不容缓[1].研制简便易行的血型基因分型试剂盒应用于临床是广大血型工作者的迫切需要.
临床输血与检验杂志相关文献
  • 浅析临床输血存在的风险及防范对策

    输血医学作为医学科学的一个分支,随着社会的进步和医学的发展,已逐步成为一门独立性的综合性学科,涉及到血液学、传染病学、免疫学、临床医学、流行病学、微生物学、病毒学及生物工程学等学科,输血已成为临床治疗的重要手段之一.

    作者:张立福;任红 刊期: 2014年第01期

  • 浅谈编写全国医师输血定期考核大纲和题库的经验

    国内对取得执业医师资格后的临床医师一直未进行规范统一的复核.2011年起,中国医师协会配合卫计委对全国各临床专业的医师进行定期考核,以此统一测评临床医师的执业水平.现报告全国医师输血定期考核大纲及题库的编写过程,并总结经验,以便发挥借鉴作用.

    作者:师红梅;刘景汉;汪德清;兰炯采 刊期: 2014年第01期

  • 献血者血液筛查中ALT与HBV、HCV的相关性研究

    目的 通过对献血者丙氨酸氨基转移酶(ALT)与HBsAg、HCV-Ab的相关性分析,探讨在献血者血液筛查时继续开展ALT检测对提高血液安全性的意义.方法 分析本地区2010~2012年203 319份献血者血液样本ALT、HBsAg、HCV-Ab的检测结果,并对ALT与HBsAg、HCV-Ab的相关性进行研究.结果 203 319份血液样本中,ALT异常3 975份(占1.96%),HBsAg阳性者422份(占0.21%)、HCV-Ab阳性288(占0.14%);HBsAg和HCV-Ab阳性标本中ALT异常18份(占2.54%);HBs Ag和HCV-Ab均阴性者中ALT异常3 957份(占1.95%).结论 ALT升高与HBV、HCV的发生不存在相关性(P>0.05),ALT检测不能作为是否感染HBV或HCV的检测指标.

    作者:程玉根;梁启忠;掌友湖 刊期: 2014年第01期

  • 新疆阿克苏地区脊髓灰质炎强化免疫期间的血液应急保障

    2011年9~12月和2012年3~5月在新疆南疆五地州对40岁以下人群开展了脊髓灰质炎强化免疫活动,按照《献血者健康检查标准》关于免疫接种后献血的有关规定,将预示着18~39岁献血主力人群将在长达5个多月的时间内均不能正常献血,致使阿克苏地区献血人数锐减,期间乌鲁木齐市正举办第一届亚欧博览会,自治区卫生厅要求全疆各地州中心血站应完成首府RhD阴性血液的调配工作,采供血工作面临前所未有的困难.

    作者:刘海英;张新龙 刊期: 2014年第01期

  • 全自动生化分析仪与气相色谱仪检测血液中乙醇的结果比较

    目的 比较全自动生化分析仪乙醇脱氢酶法和气相色谱法测定血中乙醇浓度的临床应用价值.方法 收集103例各类交通事故驾驶员的血标本,分别用全自动生化分析仪乙醇脱氢酶法与气相测谱法测定血中乙醇浓度.结果 两种方法检测血中乙醇含量的统计学分析结果显示高度一致性.讨论 全自动生化分析仪乙醇脱氢酶法检测血液中乙醇含量具有实际应用价值.

    作者:李林;孙亮;陈俊波 刊期: 2014年第01期

  • 液基薄层法与细胞DNA倍体分析在宫颈癌筛查中的应用

    目的 探讨细胞DNA定量分析法与液基薄层细胞学在宫颈癌及癌前病变诊断中联合检测的作用.方法 对本院妇科就诊的2 459名妇女进行子宫颈癌筛查,用宫颈刷取材,进行液基薄层制片,同时做液基薄层细胞学检查和全自动DNA倍体分析系统的DNA定量测定,对检查可疑的妇女在阴道镜下行宫颈组织学活检,并将其结果作为诊断标准.结果 液基薄层细胞学检查发现214例(8.01%)异常,包括156例(5.84%)ASCUS、45例(1.68%)LSIL和11例(0.41%)HSIL.DNA倍体分析系统发现105例(3.93%)异常.161例妇女行宫颈组织学活检发现:5例癌、11例CIN Ⅲ/CIS、18例CIN Ⅱ.以病理诊断结果为标准,计算DNA定量分析方法在筛查CIN Ⅲ以上宫颈病变的敏感度为58.8%,特异性为87.5%;液基薄层细胞学将LSIL定为筛查需做活检的标准,液基薄层细胞学筛查CIN Ⅲ以上的宫颈病变的敏感性为56.2%,特异性为85.5%;将HSIL定为筛查需做活检标准,液基薄层细胞学筛查CINⅢ以上的宫颈病变的敏感性为37.5%,特异性为95.8%.结论 用液基薄层细胞学和细胞DNA定量分析联合检测可明显提高宫颈病变的阳性检出率,减少漏检率.

    作者:夏大云 刊期: 2014年第01期

  • CD56在急性白血病细胞上的表达及其意义

    目的 探讨CD56在急性白血病(AL)中的表达情况,分析CD56阳性急性髓系白血病(AML)和急性淋系白血病(ALL)患者的免疫表型特点.方法 应用流式细胞术(FCM)检测76例急性白血病患者CD56的表达情况,分析CD56+AML和CD56+ALL的免疫表型特点.结果 CD56在AML患者中表达的比例为32.1%(18/56);在AML亚型中,CD56阳性患者在M1、M2、M3及M5中所占比例分别为33.3%(3/9)、47.6%(10/21)、9.1%(1/11)及28.6%(4/14).CD56在ALL患者中表达的比例为30.0%(6/20);在T-ALL中,CD56阳性患者的比例为44.4%(4/9);10例B-ALL患者中有1例表达CD56,比例为10.0%;1例NK细胞白血病表达CD56.此外,与对照组相比,CD56+AML患者中CD33的表达率明显增加(P=0.021),而CD56+ALL患者中CD7的表达率亦明显增加(P=0.024).结论 伴CD56阳性的急性白血病细胞,其在各型白血病细胞中的免疫表型各有特点,多见于M2和T-ALL.且CD56+AML患者中CD33的表达率较高,CD56+ALL患者中CD7的表达率较高,研究结果将为CD56+AL患者的治疗和预后分析提供重要的指导意义.

    作者:郑美娟;秦义组;张爱梅;徐元宏 刊期: 2014年第01期

  • ELISA实验室内质控失控的回顾性分析

    目的 分析2010年1月~2013年6月室内质控失控情况,为实验室质量管理体系持续改进提供依据.方法 根据失控原因分类统计2010年1月~2013年6月室内质控失控次数和失控率,分析失控原因的变化情况.结果 2010年1月~2013年6月室内质控失控率为1.64%.设备管理是导致失控的主要原因,占66.2%,其次是人为差错和试剂物料原因,分别占18.5%和14.5%.结论 实验室质量管理体系运行较为稳定,通过对失控原因的分析,加强不同检测系统间差异比对、继续完善室内质控框架建立是下一步质量管理体系持续改进的方向.

    作者:段友斌;寸伟 刊期: 2014年第01期

  • 昆明市医疗用血单位意见投诉原因分析

    医疗用血单位投诉管理是血站质量管理的重要组成部分.对于血站来说,主要工作是采集血液,并为临床提供安全可靠的血液制品,其终成果主要体现在满足临床需求,向临床提供高质量(合格、及时、充足)的血液制品,得到患者和临床的信赖与认可.这也是血液工作的核心问题.因此,对医疗用血单位意见投诉的处理、分析、改进,也是一个发现不足、改进采供血各环节、确保血液质量的重要途径.笔者就本中心2009~2012年医疗用血单位投诉情况进行回顾性分析,探讨存在的问题,查找原因,寻找处理、改进的方法.现报道如下.

    作者:杨振宇 刊期: 2014年第01期

  • 干化学法与速率法在不同血液样本ALT检测中的应用

    目的 探讨无偿献血者不同血液样本在干化学法与速率法丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测中的应用,找出适合两法检测的血液样本,提高检测的可靠性.方法 采用干化学法对不抗凝全血、血清、EDTA-K2抗凝血浆、EDTA-K2抗凝血袋辫血浆样本检测ALT,同时采用速率法对血清、EDTA-K2抗凝血浆、EDTA-K2抗凝血袋辫血浆样本检测ALT,将干化学法检测的不同血液样本与不抗凝全血样本,速率法检测的不同血液样本与血清样本ALT检测结果相比较,分析其-致性.结果 不同血液样本对干化学法与速率法ALT结果的差异有统计学意义(F=19.43,P<0.01;F=11.48,P<0.01).干化学法不抗凝全血样本与速率法EDTA-K2抗凝血浆样本ALT检测结果具有良好的一致性(F=2.81,P>0.05),回归方程为Y=1.044X-4.280,相关系数R=0.993 7,R2=0.987 4,表明两种方法的相关性良好.结论 不抗凝全血、血清样本适合干化学法ALT检测,EDTA-K2抗凝的血液样本不适合干化学法检测.血清、EDTA-K2抗凝血浆样本适合速率法ALT检测,血袋辫血样本因含有ACD保养液会影响干化学法与速率法ALT检测结果,使结果变低.可以采用干化学法不抗凝全血样本初筛,EDTA-K2抗凝血浆样本速率法复检.

    作者:汪辛如 刊期: 2014年第01期

  • 洛阳地区2004~2011年丙型肝炎血清流行病学分析

    目的 探讨洛阳地区献血者丙型肝炎病毒(HCV)感染情况及流行病学特征,为制定科学的防治策略和措施提供科学依据.方法 采用描述流行病学方法,对2004~2011年丙型肝炎献血者资料进行流行病学统计分析.结果 2004~2011年洛阳地区抗-HCV年均报告阳性率为36.13/万,但呈逐年下降趋势,2004年发病率达85.29/万.男性和女性抗-HCV阳性率分别为27.94/万和39.46/万.抗-HCV阳性率以市区高于乡镇,学生及AB血型者阳性率偏高,各年龄组的抗-HCV阳性率差异无统计学意义.结论 洛阳献血者抗-HCV处于低流行水平,但也应进一步加强血液制品安全管理,广泛开展群众性健康知识宣传.

    作者:于志强;吕运来;王志红 刊期: 2014年第01期

  • 冻干前负载海藻糖和葡萄糖对红细胞形态的影响

    目的 观察红细胞负载海藻糖和葡萄糖前后形态学变化,为冷冻干燥红细胞提供依据.方法 应用0.5 mol/L海藻糖和葡萄糖37C负载红细胞6h,在光镜和电镜下观察红细胞形态.结果 光镜和电镜下,负载前红细胞形态呈正常的双凹圆盘形,极少数红细胞表面有不规则突起.负载后,大多数红细胞呈现有不规则突起的棘型红细胞形态.结论 红细胞在负载前后形态学发生明显变化,应采取措施减少或阻止这种改变.

    作者:姚根宏;张国栋;吴永政;王勇 刊期: 2014年第01期

  • 瑶族无偿献血者人细小病毒B19与TTV重叠感染分析

    目的 了解广东瑶族无偿献血者人细小病毒B19及TTV重叠感染现状,探讨HPV B19与TTV感染相关性.方法 采用ELISA法检测HPV B19 IgG和抗-TTV IgG,并采用PCR法对部分血样进行HPV B19 DNA及TTV DNA检测.结果 376例无偿献血者血液标本中,检出HPV B19 IgG阳性110例,阳性率29.26%,检出抗-TTV IgG阳性176例,阳性率46.81%.147例血样检出HPV B19 DNA 10例,阳性率6.80%,检出TTV DNA 12例,阳性率8.16%.两者阳性检出率差异有统计学意义(x2=21.279,P<0.05). 67例抗-TTV IgG阳性中HPV B19的检出率为35.82%,43例HPV B19 IgG阳性中TTV的检出率为53.49%,两者检出率差异无统计学意义(x2=3.341,P>0.05).在阴性血液中,HPV B19总阳性检出率为36.25%,TTV总阳性检出率为53.85%,两者阳性率比较差异有统计学意义(x2=5.633,P<0.05).结论 广东瑶族无偿献血者存在较高的HPV B19与TTV重叠感染,目前尚未在献血人群中开展HPV B19及TTV筛查,存在输血传播的风险.

    作者:喻红玲;邓凯航;刘运保;林雪珍;虢娟;梁伟文 刊期: 2014年第01期

  • 化学发光免疫分析法检测低水平HBsAg与其他方法的比较

    目的 比较并分析化学发光免疫分析法、ELISA法、胶体金法三种方法检测低水平HBsAg的结果.方法 以化学发光免疫分析仪Architect i2000检测结果作为参考,将100例<50 IU/ml标本分为3组,分别为:<1 IU/ml,1~5 IU/ml,>5 IU/ml.采用ELISA、胶体金法对3组标本进行检测,对测定结果进行比较分析.结果 应用化学发光免疫分析仪Ar-chitect i2000与ELISA测定低水平(<1 IU /ml) HBsAg的差异有统计学意义,在<1 IU /ml组,两者符合率仅为3.8%(P<0.05),(1~5) IU/ml组和>5 IU /ml组符合率分别为76.5%和100.0%.Architect i2000与胶体金法在测定低水平HB-sAg的差异有统计学意义(P<0.05),两种方法在<1 IU/ml组符合率为0,(1~5) IU /ml组符合率为2.9%,>5 IU /ml组符合率为100.0%.结论 化学发光免疫分析法检测低水平HBsAg (<5IU /ml)灵敏度明显高于ELISA和胶体金法.

    作者:李春莉;杨桂林;李秋红 刊期: 2014年第01期

  • 无偿献血工作面临的问题和对策研究

    无偿献血工作是一项公益性社会系统工程,是一个国家、一个城市文明进步的重要标志,关系到人民群众的身体健康和社会和谐稳定.近年来,我国的无偿献血事业健康快速发展,临床用血实现了从有偿献血向无偿献血的平稳过渡.随着经济社会的快速发展,医疗水平的不断提高,临床用血量每年以10%~15%速度递增,血液供需矛盾日益凸显.文章分析了当前我国无偿献血工作面临的主要问题,并提出了相应的对策措施.

    作者:田茂生 刊期: 2014年第01期

  • 不同渗透压NaCl溶液对红细胞的影响

    目的 检测不同渗透压NaCl溶液中红细胞的溶血率、MCV和RDW的变化,探讨渗透压对红细胞影响.方法 用渗透压仪检测不同浓度NaCl溶液的渗透压;用手工法计数红细胞在不同渗透压NaCl溶液中未溶血红细胞数,计算不同渗透压NaCl溶液中红细胞溶血率;用细胞计数仪检测未溶血红细胞的MCV和RDW值.结果 0.10%~1.00%NaCl溶液浓度(g/ml)与渗透压(mOsm/kg)之间的直线回归方程为:Y=4.035 7+31 829.864 3X;NaCl溶液渗透压在195 mOsm/kg至131 mOsm/kg区间,溶液中红细胞溶血较明显;NaCl溶液渗透压在195 mOsm/kg以下时,未溶血红细胞MCV值减小较明显、未溶血红细胞RDW值增大较明显.结论 0.1%~1.00% NaCl溶液浓度与渗透压之间存在直线回归关系;且NaCl溶液渗透压降低,红细胞溶血率增高、未溶血红细胞的MCV值减小、未溶血红细胞的RDW值增大.

    作者:吴学忠;吕蓉;纪庆麟;吴君胜;魏家余;周学勇 刊期: 2014年第01期

  • 刍议《中华人民共和国献血法》修订的思路

    《中华人民共和国献血法》(以下简称《献血法》)于1996年12月15日提交八届全国人大常务委员会第23次会议初审,到1997年12月29日第29次会议通过,历时1年.这部《献血法》依据20世纪90年代我国采供血状况、公民文化素质及经济水平,借鉴了国外一些有益经验及法律制度,经过反复研究,比较慎重地处理了一些有争议的问题后通过的.

    作者:曹志刚;王桥红;袁明超;杨正;郭亦牧 刊期: 2014年第01期

  • 人类红细胞MN血型中抗-M与GYPA基因表达的相关性

    目的 研究人类红细胞MN血型系统中抗-M的产生与相关基因GYPA表达的相关性,同时揭示M抗原的表达与抗-M产生之间的关系.方法 选择无偿献血者和临床中发现的血浆中含有IgG、IgM或两者共存的16例抗-M血液样本,以血清学及分子生物学方法对样本进行MN血型检测,应用自行设计的一对特异性引物检测MN血型相关基因GYPA第二外显子的碱基序列.结果 16例样本中12例表现型为NN型,2例为MN型,2例为MM型.基因测序结果与GenBank参比序列比对,未发现突变碱基,血型表现型的基因定型与血清学定型相一致,经过谱细胞鉴定,该16例患者的血浆中全部携带抗-M抗体.结论 人类红细胞MNS血型中抗-M的产生与M抗原是否存在没有必然关联,与相关基因GYPA的表达也无明显关联.

    作者:陈云龙;梁延连;苏宇清;张印则 刊期: 2014年第01期

  • 番禺地区RhD阴性献血者部分D频率调查

    目的 分析番禺地区RhD阴性献血者部分D(partial D)基因分型特征.方法 采用微量板法对献血者进行RhD阴性筛查;采用抗人球蛋白法对初筛RhD阴性的样本进行确认;采用PCR-SSP法(RH基因变异体分型检测试剂盒)对献血者基因组DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据电泳图谱判断部分D基因分型.结果 初筛检出60例RhD阴性,经抗人球蛋白法确认59例为RhD阴性,阴性频率约为0.23%.59例RhD血清学筛选阴性的基因分型检测发现2例部分D,血清学筛选RhD阴性中出现部分D的频率约为3.4%.结论 本地区血清学RhD阴性献血者中,存在RHD-CE (5)-D、RHD-CE(6-9)-D等位基因型,采用PCR-SSP法对RhD阴性表型献血者进行基因分型,可以准确鉴定RHD基因型.

    作者:邓诗桢;谢敬文;严康峰;蓝文莉 刊期: 2014年第01期

  • 皖江地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因型及耐药性分析

    目的 研究安徽省芜湖及宿州两地临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率、基因型分布及对抗菌药物的耐药性.方法 收集两地大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs确证试验;采用PCR法对产ESBLs株进行β内酰胺酶基因的扩增;微量稀释法测定产ESBLs株对13种抗菌药物的耐药率.结果 两地大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率的差异均无统计学意义(P>0.05),但基因型存在一定差异.bla(TEM)+bla(CTX-M-13)是常见的基因检出模式.两地产ESBLs株对抗菌药物表现出不同的耐药率,但对亚胺培南和美洛培南均100%敏感.结论 芜湖和宿州地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌存在较严重的抗菌药物选择性压力;酶抑制剂复合制剂及碳青酶烯类是治疗产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染的理想药物.

    作者:凌华志;徐元宏;王中新;沈继录;浦春;郝维敏 刊期: 2014年第01期

临床输血与检验杂志

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主管:安徽省卫生和计划生育委员会

主办:安徽省立医院 安徽省输血协会