学术投稿

MORF4基因诱导HeLa细胞衰老

蔡哲;石超;范林洋;李晓阳;杨春蕾

关键词:细胞衰老, MORF4基因, PCNA, 细胞增殖
摘要:目的 建立MORF4基因高表达诱导HeLa细胞衰老模型,探索MORF4基因对HeLa细胞衰老的影响.方法 分别将pcDNA3.1(+ )/Flag-MORF4和pcDNA3.1(+)空载质粒转染人宫颈癌HeLa细胞株.SA-β-Gal染色检测细胞衰老,MTT法及流式细胞术检测细胞周期变化及细胞的增殖活力,两者共同确定MG-132处理的适条件.Western印迹检测MORF4、PCNA基因的表达.结果 质粒经酶切和测序鉴定,证明pcDNA3.1(+ )/Flag-MORF4质粒中含有目的基因序列;经浓度梯度l.25、2.5、5、10 μmol/L MG-132处理转染细胞2、4、24、48 h后,SA-β-Gal染色和MTT 检测结果显示10 μmol/L MG-132处理24 h的转染细胞明显衰老,细胞活力降低;细胞周期被阻滞在Go/G1期,S期细胞明显减少,增殖受到抑制;Western印迹检测结果显示MORF4蛋白在细胞中的含量明显升高,而与增殖相关基因PCNA表达下调.结论 构建的pcDNA3.1(+)/Flag-MORF4 质粒在HeLa细胞中表达;并在MG-132作用下,使MORF4基因的表达产物积累,从而影响PCNA蛋白的表达量,抑制HeLa细胞的增殖活性,阻滞细胞周期的进行,导致细胞进入衰老状态.
中国老年学杂志相关文献
  • 铁路系统职工艾滋病老龄化现况及特征分析

    目前我国艾滋病正从高危人群向一般人群蔓延,流动人群在这一过程中起着流行传播的作用.铁路系统职工是一个比较特殊的群体,人数多、分散、流动性强,特别是近年来铁路改革加快,路局重组、站段合并集中到较大的城市,造成更多职工上班与居住地的分离,加大职工的流动性.人群流动或迁移所处的环境和可能具备的行为增加了艾滋病的易感性及与艾滋病有关的危险性[1].本文探讨铁路系统职工艾滋病流行现状及特征,为铁路及企业职工预防和控制艾滋病提供依据.

    作者:吕榜军;唐青山;聂雄芳 刊期: 2012年第12期

  • 中药益气活血方对老年性下肢骨折后骨量丢失的预防作用

    目的 探讨中药益气活血方对老年性下肢骨折后骨量丢失的预防作用.方法 老年下肢骨折患者68例,随机分为观察组与对照组,全部患者在治疗骨折同时服用维生素D3(钙尔奇D),观察组在此基础上加服益气活血组方中药综合治疗,观察随访半年,比较两组患者临床症状变化、骨折愈合时间、治疗前与治疗后3及6个月骨量丢失情况.结果 与对照组比较,观察组临床症状改善明显,骨折愈合时间明显缩短(P<0.05);两组患者治疗前骨量丢失无显著差异(P>0.05),而治疗后有显著差异(P<0.05),且6个月较3个月时更明显(P<0.05).结论 中药益气活血方预防老年性下肢骨折后骨量丢失疗效肯定,并随时间延长效果更明显.

    作者:于学美;崔西泉;张延明;吴雅迪;孙建翠 刊期: 2012年第12期

  • 论居家养老服务老年人力资源开发

    居家养老成为养老模式主体,已是社会共识.居家养老是个宏大的社会系统工程,短短几年来,四级居家养老服务组织网络已基本健全;社区居家养老服务设施不断得到充实,基本能满足服务;服务内容和形式明确,并不断丰富;城市居家养老服务管理信息系统正在各市如火如荼地展开.这些均是物质框架,通过行政命令、加大投入、开展调查、系统开发很快就能创建出来.而这需要一个为重要的要素——人力资源来通领.居家养老服务业是劳动密集型服务产业,能否建立业务精、素质好、热情为老年人服务的居家养老服务人力资源队伍,是居家养老服务事业成败的关键.

    作者:孙钦荣 刊期: 2012年第12期

  • 乳腺癌患者血清可溶性E-选择素和E-钙黏素的含量及临床意义

    目的 探讨乳腺癌患者血清可溶性E-选择素(sE-sel)和E-钙黏素(sE-cad)含量及其临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验检测60例乳腺癌患者、20例正常女性血清sE-sel和sE-csd的含量.并比较60例乳腺癌患者手术前及术后2w血清sE-sel和sE-cad含量的变化.结果 乳腺癌患者血清sE-sel和sE-cad含量明显高于正常人(P<0.01);淋巴结转移组二者含量高于无淋巴结转移组(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ期比较有显著差异(P<0.05);二者含量与年龄、肿瘤大小无明显相关.乳腺癌患者手术后2w血清sE-sel和sE-cad含量明显低于手术前(P<0.01).结论 sE-sel和sE-cad可能与乳腺癌的发生发展及浸润转移有关,联合检测有助于乳腺癌的诊断、浸润转移和手术效果的判断、评价患者的预后.

    作者:冯俊伟;王爱军;张志勇;郑宝军;施华;王红钰;吴肖 刊期: 2012年第12期

  • 老年女性尿失禁患者应对方式与生活质量相关性

    目的 探讨老年女性尿失禁患者生活质量、应对方式现状及其相关性与对策.方法 采用医学应对问卷、尿失禁生活质量量表对上海某三级甲等医院门诊120名年龄大于60周岁老年女性尿失禁患者进行调查.结果 老年女性尿失禁患者回避和屈服得分均高于常模(P<0.05);老年女性尿失禁患者的面对与患者生活质量的心理影响维度、社会活动受限维度呈负相关(P<0.05);老年女性尿失禁患者的回避与患者生活质量的避免和限制性行为维度、心理影响维度呈负相关(P<0.05).结论 面对、回避是影响老年女性尿失禁患者生活质量的主要因素.提高老年女性尿失禁患者健康意识,帮助患者采用积极的应对方式能提升老年女性尿失禁患者生活质量.

    作者:宫克;王莉;白姣姣;王峥 刊期: 2012年第12期

  • 机构养老人员慢性病管理调查

    社会养老作为居家养老的重要补充,推进作为社会养老事业发展重要载体的养老机构建设势在必行.建设养老机构是构建和谐社会的要求,是解决“空巢”老人增多问题的需要.1对象与方法1.1对象河北省衡水市区内18所老年公寓、托老康复中心、敬老院等养老机构人住的>-60岁老人共1 193名.男655名,女538名.年龄60~ 101岁.年龄性别构成见表1.夫妻同住养老机构者76人.文化程度:无文化119人、小学670人、初中193人,高中及以上211人.职业:农民706人、工人256人、干部、教师、医生及其他脑力劳动者213人、其他18人.婚姻状况:有配偶686人、丧偶448人、未婚44人、离异15人.

    作者:吕冬梅;张雪坤;张志文 刊期: 2012年第12期

  • 磁共振心肌灌注成像量化参数S、Sp对冠心病心肌缺血诊断的价值

    目的 研究磁共振心肌灌注成像量化参数S、Sp对冠心病心肌缺血诊断的临床应用价值.方法 选择临床通过DSA冠脉造影诊断为冠心病的患者20例,进行磁共振心肌灌注成像.结果 应用GE AW4.0工作站心肌灌注图像分析软件,得到心肌灌注时间-信号强度曲线量化指标S及Sp.心肌缺血区域时间-信号强度曲线首过时相上升斜率S及峰值强化率SP明显减低(P<0.05).结论 磁共振心肌灌注成像是一种无创性诊断冠心病心肌缺血的影像学检查方法.

    作者:程绍玲;曲晓峰;王晓梅;周霞 刊期: 2012年第12期

  • O-去甲基文拉法辛对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶亚型CYPlA2、CYP2C9、CYP2C19活性的影响

    目的 研究O-去甲基文拉法辛(ODV)对大鼠肝微粒体内细胞色素P450酶CYP1A2、CYP2C9 、CYP2C19活性的影响.方法 以生理盐水为对照,大鼠每日灌胃给予22.90 mg/kg的O-去甲基文拉法辛琥珀酸盐水合物,连续7d,然后测定其肝徽体CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19的活性.结果 与生理盐水对照组比较,ODV组CYPlA2、CYP2C9、CYP2C19活性无变化(P>0.05).结论 ODV对大鼠CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19活性无影响.

    作者:刘明远;杨光远;杨艳;孙严彤;赵锦程;朱秋双;张明远;白雪;杨玉;张波 刊期: 2012年第12期

  • PDE4D基因多态性与辽宁省汉族人群缺血性脑卒中的相关性

    目的 探讨磷酸二酯酶( PDE)4D基因多态性与辽宁省汉族人群缺血性脑卒中(IS)潜在的遗传发病机制分子流行病学依据.方法 采用病例对照的研究方法,检测PDF4D基因多态性位点SNP83、SNP 87、SNP219和SNP220在病例组、对照组中的频率分布.结果 病例组SNP83位点CC基因型和C等位基因型频率分布均高于对照组(CC:P=0.001;OR=1.788;95%CI:1.280~2.497;C:P=0.003;OR=1.368;95%CI:1.115 ~1.678).SNP219位点AA基因型和A等位基因型频率高于对照组(从:P=0.029;0R=1.444;95% CI:1.037~2.010;A:P=0.048;OR=1.228;95%CI:1.001~1.505).经条件Logistic回归校正后,SNP83CC基因型分布频率仍然高于对照组(P=0.036;OR=1.603;95% CI:1.032 ~2.489),SNP219AA基因型分布频率也仍然高于对照组(P=0.046;OR=1.567;95%CI:1.008~2.436).由SNP219、SNP220位点构建的单体型中,AA单体型频率病例组高于对照组(P=0.013:OR=1.296;95% CI:1.056~1.591).GA单体型频率病例组低于对照组(P=0.005;OR =0.650;95%CI:0.482 ~0.878).结论 PDE4D基因SNP83、SNP219位点可能与辽宁省汉族人群大血管性IS具有相关性,而在由SNP219、SNP220位点构建的单体型中,从可能是危险性单体型,GA可能是保护性单体型.

    作者:李楠;何志义 刊期: 2012年第12期

  • 小肠恶性肿瘤患者癌组织Bcl-2和Bax基因表达及其作用机制

    目的 检测Bcl-2及Bax基因在小肠癌中的表达,探讨其在小肠癌发生、发展及治疗中的作用.方法 取50例小肠肿瘤患者标本,并取30例癌组织附近正常组织,Bcl-2及Bax基因表达检测采用Western印迹法,而细胞凋亡指数(AI)检测采用TUNEL方法.结果 相对于癌组织附近正常组织,Bcl-2、Bax基因及AI在癌组织中表达明显偏高(P<0 05);小肠癌中Bcl-2积分与AI呈负相关,相反,Bax积分则与AI呈正相关.结论 Bcl-2很有可能参与小肠癌发生及发展,并同时对细胞凋亡起抑制作用;而Bax则部分升高癌细胞凋亡水平.

    作者:辛向红 刊期: 2012年第12期

  • 老年抑郁状态与家庭支持的相关性

    目的 探讨老年抑郁状态与家庭支持情况的相关性.方法 采用老年人抑郁量表(GDS)与家庭关怀度指数问卷(APGAR)对300例老年人进行问卷调查,分析老年人抑郁状态与家庭支持的相关性.结果 有抑郁情绪的老年人占54%.老年人抑郁状态与婚姻状况、身体疾病、居住情况以及家庭支持程度有关(P<0.05).结论 老年人抑郁与家庭生活关系密切,应该对老年人抑郁情绪给予足够重视,提高其生活质量.

    作者:阳中华;邓云龙;陈向一 刊期: 2012年第12期

  • 重庆市敬老院老年人生活状况调查

    目的 了解重庆市敬老院老年人的生活现状,为制定改善其生活状况的政策措施提供依据.方法 采用整群方便抽样的方法,自编调查问卷,对重庆市主城区敬老院149名老年人进行问卷调查并分析.结果 重庆市老年人慢性疾病患病率较高,但其相关医疗费用与患病情况并不相符,有52.48%的老年人医疗保健年消费不足2 000元,高达28.78%每半年到医院就诊一次,每年就诊一次的为27.34%.膳食方面,17.57%几乎不吃水果,多数人的摄入量难以满足机体要求;在锻炼及休闲娱乐方式上,老年人多倾向于看电视(80.54%)、聊天(71.14%)、看报(34.90%)等活动.50%以上都有购买保健品的习惯,但65.03%认为保健品无效或持观望态度.多因素分析结果显示,影响敬老院老年人保健品使用率的因素为:文化程度低、平均月收入居中、认为保健品有效、参加过保健品推介会.结论 重庆市敬老院老年人的膳食平衡和锻炼情况均不理想,医疗保健知识相对薄弱,对保健品了解较为浅显,需要有关部门以及社会各界深入敬老院宣传医疗保健知识,提高文化素养,指导其选择正确合适的保健品,同时改善其收人,提高老年人的总体健康水平.

    作者:王天怡;刘晓;罗莉娅;王栋芳;韩丹;刘婷;陈曦;曾缓 刊期: 2012年第12期

  • 肠道菌群与溃疡性结肠炎

    溃疡性结肠炎(UC)是一组病因和发病机制不明的肠道慢性非特异性炎症性疾病.近年来研究认为UC可能主要由遗传基因易感个体决定,免疫反应增强是关键的直接发病机制;并且许多研究都表明肠道菌群在UC的发病机制中起到了重要的启动作用,环境、饮食、精神心理等因素可能是发病的重要诱因.基于此理论,微生态制剂在治疗炎症性肠病中得到广泛的应用.通过临床观察发现应用肠道益生菌治疗炎症性肠病,特别是对UC缓解期的治疗起到了明显的效果,说明肠道益生菌在炎症性肠病的治疗中起到了有益的作用.

    作者:徐佰国;王英凯;王策;孟祥伟;王丽波 刊期: 2012年第12期

  • 丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的保护作用

    目的 观察丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的保护作用.方法 雄性SD大鼠36随机分为3组:正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组.链脲佐菌素(STZ,25 mg/kg,连续3d)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型;待模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4g·kg-1·d-1)35 d.免疫组织化学染色观察胰岛β细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠胰岛β细胞Bax蛋白的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显降低(P<0.01);与模型大鼠相比,丝胶治疗组大鼠胰岛β细胞Bax蛋白的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显升高(p<0.01).结论 丝胶可通过上调胰岛β细胞Bcl-2蛋白的表达、下调胰岛β细胞Bax蛋白的表达,抑制2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡,对糖尿病时胰岛细胞损伤具有一定的保护作用.

    作者:刘晓燕;付秀美;高宇;陈志宏 刊期: 2012年第12期

  • 黄芪注射液联合阿维A治疗银屑病的疗效

    目的 观察黄芪注射液联合阿维A治疗老年银屑病的临床效果,及对角质形成细胞(HaCaT)细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响.方法 回顾性分析2009年9月至2010年12月经病理活检确诊银屑病的老年患者225例,分别观察黄芪注射液联合阿维A和阿维A治疗银屑病的疗效.采用MTT法分析黄芪注射液联合阿维A和阿维A对HaCaT细胞增殖的抑制作用.采用流式细胞仪分析黄芪注射液联合阿维A和阿维A对HaCaT细胞周期和凋亡的影响.结果 联合治疗组治愈135例、显效24例、有效18例、无效6例,有效率96.72%,治愈率73.77%,疗效显著高于单独治疗组(P<0.05).在用药浓度为125 mg/ml以下时,联合药物和单独药物的抑制作用具有剂量依赖性,且抑制率随着药物浓度增加而增加,且联合药物抑制率较单独药物高.混合药物1C50 =68.3 mg/ml,单独药物lC50=128.5 mg/ml.联合药物抑制HaCaT细胞增殖的效果显著高于单独药物(P<0.05).250mg/ml黄芪注射液和250mg/ml阿维A混合液作用后的HaCaT细胞凋亡峰明显高于250mg/ml黄芪注射液单独作用后的细胞.结论 黄芪注射液联合阿维A对银屑病的治疗效果显著,并强于黄芪注射液.

    作者:闫铁夫 刊期: 2012年第12期

  • 复方苦参素联合咪唑斯汀治疗慢性荨麻疹96例

    慢性荨麻疹主要表现为皮丘风团,时多时少,反复发生,且部分伴皮肤划痕征,病程长达数月或数年[1],是常见的皮肤病.多数患者不能找到病因,治疗困难,寻找有效的治疗方法是亟待解决的问题.2009年1月至2011年7月,笔者应用苦参素葡萄糖注射液治疗慢性荨麻疹136例,取得了满意的疗效.

    作者:姜兰香;王爽;庞传超 刊期: 2012年第12期

  • 葛根素通过激活胆碱能抗炎通路抑制大鼠脑缺血再灌注损伤

    目的 从胆碱能抗炎通路方面探讨葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法 130只大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、葛根素组、α银环蛇毒素组和尼古丁组.葛根素组、α银环蛇毒素组大鼠尾静脉注射葛根素,尼古丁组尾静脉注射尼古丁,预给药5d后,应用线栓法建立大鼠右侧大脑中动脉闭塞再灌注模型.缺血再灌注即刻,α银环蛇毒素组尾静脉注射α银环蛇毒素.观察各组动物神经功能损伤评分、海马区脑组织病变,检测缺血侧脑组织炎症因子含量.结果 尼古丁和葛根素均能减轻模型大鼠的神经功能损害,改善海马区脑组织炎症细胞浸润,降低促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量,升高抗炎因子IL-10含量;α银环蛇毒素可阻断上述抗炎效应;尼古丁与葛根素抗炎效应无显著性差异.结论 葛根素对大鼠脑缺血再灌注炎症损伤有保护作用,可能是通过激活胆碱能抗炎通路完成的.

    作者:王明智;梅志刚;曾永保;刘晓洁 刊期: 2012年第12期

  • 艾地苯醌治疗急性脑梗死31例

    急性脑梗死(ACI)是临床上的常见病及多发病且具有高致残率及致死率,常规治疗该病常常难以取得满意的疗效.我们在临床中联合艾地苯醌治疗ACI,取得较满意的疗效.1资料与方法1.1 诊断标准所有病例均符合全国第四届脑血管病学术会各类脑血管疾病诊断要点[1],入院时(即病后48 h内)均做颅脑CT或MRI检查明确脑卒中的诊断.

    作者:侯率;车玉琴;那丽;窦文波 刊期: 2012年第12期

  • 无张力疝修补术后复发再修补10例

    疝是普外科常见病,多发病.疝修补有多种术式.无论术式有多少种,终都是修补腹壁的缺损,主要的是修补内环的缺损.目前多采用无张力疝修补,术后恢复时间短,无明显不适感,能早日恢复工作,但是仍有1%~3%的复发率[1].本文分析我科近3年无张力疝修补术后复发病例的复发原因.

    作者:汲崇德;于威;刘庆良 刊期: 2012年第12期

  • 他汀类药物抗脓毒症作用研究进展

    脓毒症是由于感染引起的全身炎症反应综合征,并常导致组织损伤和器官功能异常,进一步发展可导致脓毒症休克、多器官功能障碍综合征.虽然近些年关于脓毒症的治疗方法取得一定进展,如重组人活化蛋白C (rh-APC)[1],早期液体目标治疗等[2],但脓毒症的发病率仍在不断提高,并且是导致危重患者死亡的主要原因之一.他汀类药物即3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂作为广泛应用的降脂药物,用于治疗高脂血症,降低患冠心病的风险,其有益作用源于其限制胆固醇的生物合成,因此减少体内循环的胆固醇量,这种作用与降低血脂有关.

    作者:张立涛;赵鹤龄 刊期: 2012年第12期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅