学术投稿

Skp2-siRNA对Eca-109食管癌细胞系p27kip1蛋白表达的影响

赵振伟;胡国秋

关键词:S期激酶相关蛋白2, p27kip1, RNA干涉
摘要:目的 观察通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)使Skp2基因沉默转染后对食管癌Eca-109细胞株中p27kip1表达的影响.方法 以Eca-109食管癌细胞系作为实验对象,设计合成针对Skp2的siRNA并进行转染.实验分为转染组、空白对照组、转染对照组、阴性对照组.采用免疫组化方法(SP法)检测各组Eca-109食管癌细胞系p27kip1蛋白表达的情况,采用Imageproplus(IPP)测定累积光密度值(IOD).每张切片选5个视野,求IOD 均值.采用方差分析进行组间均数比较,以p<0.05表示差异有统计学意义.结果 ①RNAi-Mate转染Eca-109细胞6 h后用荧光显微镜检测,计数转染Eca-109细胞的效率>80%,本实验选此比例作为实验浓度.②经过转染后24 h的细胞开始变圆,生长比同时间正常培养的对照组细胞缓慢,48 h后细胞出现凋亡,有部分细胞脱落,72 h后细胞脱落变多.③免疫组化检测结果显示:转染 24 h后p27kip1蛋白表达开始上升IOD值为7.295±0.277、48 h后上升明显IOD值为9.075±0.880、72 h 后p27kip1蛋白表达开始下降IOD值为3.506±0.160,与空白对照组相比较,差异有显著统计学意义(P<0.01,psiRNA=0.000),转染组24 h、48 h、72 h之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 将人Skp2-siRNA转染入Eca-109食管癌细胞系后,能有效通过下调Skp2的表达,而上调p27kip1蛋白的表达.说明Skp2在Eca-109食管癌细胞增殖调控中起到重要作用,RNAi技术有可能作为抑制肿瘤细胞生长的一种手段.
中国老年学杂志相关文献
  • 初诊2型糖尿病患者短期胰岛素泵强化治疗对血浆FGF-21水平及胰岛素敏感性的影响

    目的 探讨短期胰岛素泵强化治疗对初诊2型糖尿病(T2DM)患者胰岛素敏感性和血浆成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)水平的影响.方法 采用自身前后对照,运用高胰岛素-正葡萄糖钳夹术评价30例新诊断T2DM患者接受2 w短期胰岛素泵 (CSII) 强化治疗前后胰岛素敏感性的变化,并采用酶免法测定治疗前后血浆FGF-21水平.结果 T2DM患者血浆FGF-21水平明显高于对照组[(1.6±0.1) vs (1.1±0.4) μg/L,P<0.01].T2DM患者经胰岛素泵强化治疗2 w后,血浆FGF-21水平较治疗前明显下降[(1.6± 0.1) vs (1.3 ± 0.1) μg/L,P<0.05].多元逐步回归分析表明,WHR、2 h PBG、SBP及FFA是影响血浆FGF-21水平的独立相关因素(YFGF-21=0.625XWHR+0.034XPBG+0.003XSBP-0.419XFFA+0.626).结论 短期胰岛素泵强化治疗可明显降低T2DM患者血浆FGF-21水平,血浆FGF-21水平与代谢紊乱有关,并可能参与了T2DM的发生和发展.

    作者:董靖;杨刚毅;李伶;刘东方;李钶 刊期: 2011年第08期

  • ubiquilin3基因在小鼠组织中的表达及意义

    目的 探讨ubiquilin3基因在小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、小肠、大肠、睾丸、卵巢、子宫等多种组织及不同周龄小鼠睾丸组织的表达及其意义.方法 分别利用PCR、Western、Northern等方法,观察ubiquilin3基因在小鼠多种组织、不同周龄的小鼠睾丸组织,mRNA和蛋白水平的表达.结果 在mRNA和蛋白水平上,ubiquilin3基因在其他组织中均没有表达,而在小鼠睾丸组织中特异性表达;在不同周龄的小鼠睾丸组织中,从2周龄的小鼠睾丸组织开始表达,3周表达量逐渐增加,至4周小鼠中表达量达高,且在成熟小鼠中持续表达.结论 ubiquilin3基因在小鼠睾丸组织特异表达,在成熟小鼠中表达量达到高值,推测其与小鼠精子生成及精子成熟过程相关.

    作者:张杰;郑慧丽;闫威 刊期: 2011年第08期

  • 唐山退休矿工便秘现状及其影响因素

    目的 探讨退休矿工便秘现状及其发生的影响因素.方法 随机选取唐山市文化楼、北滦楼、增胜楼、西北井等小区的退休矿工,采用自行设计影响因素量表、便秘罗马Ⅱ诊断标准、社会支持评定量表共调查300人,回收有效问卷280份.结果 唐山退休矿工便秘患病率为26.1%,井上工作者、吃蔬菜种类少者、不喝茶者、不经常运动者、不固定时间排便者、经常抑制排便者、情绪状态差者、睡眠差者、社会支持程度低者便秘发生率明显高(P<0.05或P<0.01).结论 应重视退休矿工便秘问题,加强健康教育.

    作者:潘钟平;陈长香;何慧;朱巧珍;徐兴波 刊期: 2011年第08期

  • 健身操结合钙和骨化三醇对中老年女性髋部骨量的影响

    除了与绝经相关的雌激素水平下降有关外,体内钙调节系统紊乱在加速骨量丢失、导致骨质疏松的发生中也起重要作用.骨化三醇是活性维生素D代谢物中具活性的药物,对钙平衡的调节有着重要作用.

    作者:李云清;姜凤云 刊期: 2011年第08期

  • 输尿管镜气压弹道碎石术治疗老年人泌尿系结石63例

    老年泌尿系结石患者多因伴有高血压、高血脂、冠心病、糖尿病等多种疾病,导致开放手术的难度和风险大,特别是70岁以上患者.输尿管镜下气压弹道碎石术是治疗输尿管结石非常有效的方法,吴开俊等报道开放手术率小于2%[1].

    作者:王俊卿;安永寿;王敏;王红 刊期: 2011年第08期

  • 罗格列酮对OLETF鼠股骨骨密度及骨形成蛋白-2表达的影响

    目的 探讨罗格列酮对OLETF鼠股骨骨密度(BMD)及骨形成蛋白-2(BMP-2)表达的影响及机制.方法 OLETF雄性大鼠 20只,定期口服葡萄糖耐量试验(OGTT)监测血糖.喂养至30 w时,共有成模的2型糖尿病(T2DM)OLETF大鼠12只,随机分为罗格列酮组和模型组(每组6只),LETO鼠8只作为对照组,各组均给药12 w.双能X-线骨密度仪(DEXA)测定股骨BMD.股骨经固定、脱钙后,制成切片,光镜观察其病理变化,并运用免疫组化方法对BMP-2表达情况进行检测,应用图像分析软件进行分析.结果 与模型组相比,罗格列酮组股骨BMD及成骨细胞BMP-2阳性表达强度明显降低(P<0.01),对照组BMD及BMP-2阳性表达强度明显升高(P<0.01).结论 2 型糖尿病本身可干扰成骨细胞功能和活性,而罗格列酮对自发肥胖型T2DM大鼠股骨有加重损害作用.

    作者:吴海清;梁玉;王世忠;胡志梅;华超 刊期: 2011年第08期

  • 马来酸桂哌齐特联合依达拉奉治疗急性脑梗死52例疗效及安全性分析

    急性脑梗死(ACI)的治疗由于给药方式及联合用药种类不同,疗效各有差异.本文对ACI患者在常规静脉用药的同时,加用依达拉奉联合马来酸桂哌齐特治疗,并进行疗效观察.

    作者:王胜文;刘凯;魏敏 刊期: 2011年第08期

  • 老年慢性阻塞性肺病合并肺结核临床分析

    目的 探讨老年慢性阻塞性肺病(COPD)合并肺结核的临床特征.方法 回顾性分析2000年1月至2010年1月10年间于本院治疗的1 251例COPD患者的临床资料,选择65岁以上符合诊断标准的老年COPD合并肺结核者83例纳入治疗组;从剩余的患者中,随机选出2倍于病例组人数患者纳入对照组(排除有心脑肾并发症者),对两组病例的临床资料进行分析.结果 1 251例COPD患者,病例组83例(6.63%),以男性为多(89.16%,74/83),平均年龄(69.32±11.02)岁,有吸烟史者59例(71.08%),吸烟(31.64±15.51)包/年;对照组166例,平均年龄(66.32±9.41)岁,吸烟者105例,吸烟(27.04±11.32)包/年.统计学分析发现两组性别、吸烟史、低热、盗汗、乏力、咯血、营养不良有显著差异(P<0.05);病例组中PPD试验阳性52例(62.65%)、结核抗体阳性61例(73.49%)、ESR加快74例(89.16%)、痰集抗酸杆菌阳性11例(13.25%)、抗酸杆菌培养阳性21例(25.3%)、病理学检测阳性23例(27.71%),白细胞增高16例,病例组影像学表现为斑片状及大片状阴影23例(27.71%)、空洞影31例(37.35%),中下野病变37例(44.58%)、多肺野病变31例(37.35%).结论 (1)老年COPD合并肺结核患者,以男性及吸烟者多见;(2)临床表现不典型,对有低热、盗汗、乏力、咯血、营养不良患者要注意进一步检查;(3)影像学表现多以中下肺野病变及多肺野病变多见;(4)痰抗酸杆菌检出率低,痰快速培养、纤支镜检查、病理学、肺部CT联合检查可以提高诊断率.

    作者:吴俐健;邹博;吴立华;王笑歌 刊期: 2011年第08期

  • 五味子多糖对CCl4诱导的肝损伤大鼠亚细胞水平的保护作用

    目的 研究五味子多糖对CCl4引起肝损伤大鼠超微结构的保护作用.方法 Wistar大鼠被随机分为对照组、CCl4损伤组、不同浓度的五味子多糖处理组,分别予以生理盐水、10% CCl4和不同浓度的五味子多糖提取液(100、200和400 mg/kg).检测血清ALT、AST活性;肝匀浆MDA、SOD、ATPase和γ-谷氨酰基转肽酶(γ-GT)酶活性及含量变化;透射电镜下观察肝脏超微结构的改变.结果 大鼠摄入五味子多糖后的低、中、高剂量组与CCl4诱导的肝损伤大鼠血清ALT、AST活性比较显著降低(P<0.01),肝中MDA的生成量显著减少[对照组(0.91±0.27),模型组(3.69±0.34),低剂量组(1.30±0.26),中剂量组(0.99±0.13),高剂量组(0.96±0.43),P<0.01],SOD、ATPase和γ-GT酶活性均明显增强(P<0.01),并呈现剂量依赖效应.经治疗后肝脏组织的总抗氧化能力显著提高,电镜下可见CCl4引起的肝脏组织气球样变、脂肪变性、炎症浸润及线粒体肿胀的超微结构均得到明显改善.结论 五味子多糖提取物对肝细胞具有明显的保护作用,这种作用可能与其拮抗CCl4毒性代谢产物导致的脂质过氧化对肝亚细胞结构的损伤有关.

    作者:许珂玉;柳春 刊期: 2011年第08期

  • 失笑散对大鼠血管平滑肌细胞细胞间黏附分子-1表达的影响

    目的 探讨失笑散对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞细胞间黏附分子(ICAM)-1表达的影响及抗动脉粥样硬化的可能机制.方法 取4~6周龄雄性SD大鼠,进行血管平滑肌细胞的原代培养,当细胞纯度达95%以上,取第3~4代细胞用于实验.按照实验设计将培养细胞分为五组:①空白对照组,②模型组,③失笑散低剂量组,④失笑散中剂量组,⑤失笑散高剂量组.采用流式细胞术、逆转录聚合酶链反应,观察失笑散对TNF-α诱导的平滑肌细胞ICAM-1蛋白及mRNA水平表达.结果 TNF-α可诱导血管平滑肌细胞ICAM-1表达增强;而失笑散可降低TNF-α诱导的ICAM-1 mRNA水平及蛋白表达,且呈剂量依赖性.结论 失笑散通过抑制TNF-α诱导的血管平滑肌细胞ICAM-1的表达,延缓了动脉粥样硬化的病变进程.

    作者:曹晋;黄文权 刊期: 2011年第08期

  • 体重指数对枸橼酸莫沙必利分散片治疗糖尿病性胃轻瘫的影响

    糖尿病性胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)是糖尿病患者常见并发症之一,主要有胃排空延缓,出现反酸嗳气、早饱、恶心呕吐、腹胀及厌食等临床表现,在糖尿病患者中有研究报道其发病率为50%[1].枸橼酸莫沙必利分散片是新一代胃肠动力药,在治疗DGP方面具有较好的效果[2].本文通过回顾性分析方法,观察不同体重指数(BMI)对枸橼酸莫沙必利分散片治疗DGP患者的影响.

    作者:刘冬梅;郭慧云;卢冬敏;刘丽梅 刊期: 2011年第08期

  • 摄入热能及宏量营养素与良性前列腺增生

    目的 探讨摄入热能及宏量营养素与良性前列腺增生(BPH)的关系.方法 采用病例对照研究方法.病例组为2007~2009年施行BPH手术,年龄55~90岁的360例男性患者;对照组为与病例年龄相同的360名患其他疾病的男性.采用标准调查表和一份有效的半量化食物频率调查表(FFQ),对研究对象的一般状况和膳食情况进行调查.采用多元回归模型分析各研究因素与BPH 关系的比值比(OR)及其相应的95%可信区间(CI).结果 病例组居住农村者所占的比例高于对照组(P<0.05),分别为28.33%(102/360)和16.67%(60/360).病例组男性总热能、总蛋白质及总脂肪的摄入量均值均高于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05).调整了年龄及热能的摄入量后,总热能的摄入量与BPH呈正相关(χ2=11.091,P=0.011).与摄入量低四分位数的对照组相比较,病例组摄入量高四分位数者的OR值显著性增加(OR=1.552,95% CI:1.012~2.381,P=0.044).摄入蛋白质(χ2=8.324,P=0.040)和脂肪(χ2=8.981,P=0.030)与发生BPH的危险性呈正相关,并且随着摄入量的增加,发生BPH的危险性明显升高.病例组高四分位数和对照组低四分位数相比较分别为OR=1.614,95% CI:1.051~2.480,P=0.029和OR=1.595,95% CI:1.027~2.477,P=0.037.结论 总热能、总蛋白质及总脂肪的摄入量与BPH危险性增加有关,是BPH的重要危险因素.

    作者:卢智泉;张黎月;文娟;齐建军;闫佳;张迪;孙文慧;姜腾轩 刊期: 2011年第08期

  • 颈动脉粥样硬化中医舌象108例临床分析

    目的 通过对颈动脉粥样硬化(CAS)中医舌象特征的分析探讨CAS的中医病机特点,为临床对此病的辨证分型和治法方药方面提供一定的依据.方法 收集108例病例(男56例,女52例)采用彩色多普勒超声诊断仪检测患者双侧颈动脉,按超声检查结果分为三组:颈动脉内膜中膜增厚组38例;稳定型斑块组37例;不稳定型斑块组33例.舌象信息由两名有相关临床工作经验3年以上的临床医师达成统一的认识之后,记录舌色、舌形、舌苔、舌下络脉情况.全部统计资料采用 SPSS 13.0 统计软件进行分析.结果 CAS患者舌色中淡红舌的出现频率高(27.8%),其次是淡暗舌(25.9%),舌下络脉曲张的患者亦占到近1/3(32.4%);舌形中,齿痕舌、胖舌和嫩舌出现频率较高(分别为47.2%、33.3%、37.0%);苔色中白苔出现频率高(35.2%);苔质中,腻苔、润苔、稍厚苔和厚苔出现频率较高(分别为38.0%、37.0%、38.9%、22.2%).此外,在CAS患者中,淡红舌、淡暗舌、舌下络脉曲张、齿痕、嫩、白苔、薄苔、厚苔、润苔、腻苔在不同病情程度下存在显著差异(P<0.05),尤其是舌下络脉曲张、厚苔、腻苔的出现频率呈现不稳定型斑块组>稳定型斑块组>颈动脉内膜中膜增厚组的趋势.结论 脾肾气虚、痰、瘀、热是CAS进展的重要病机,病位多累及脾、肾,以虚实夹杂为主,而湿热化瘀亦可能是CAS发生发展的重要病理环节.

    作者:卓明峰;徐尚华 刊期: 2011年第08期

  • 巴曲酶联合银杏达莫治疗老年急性脑梗死的临床观察

    目的 观察巴曲酶与银杏达莫联用治疗老年急性脑梗死的疗效和安全性.方法 将102例老年急性脑梗死患者随机分为治疗组52例,对照组50例,对照组在常规治疗基础上给予银杏达莫注射液治疗,治疗组常规治疗、银杏达莫用法用量同对照组,同时于病程的第1、3、5天给予巴曲酶10 BU、5 BU、5 BU+生理盐水,应用神经功能检测量表及实验室指标对比观察两组的治疗效果和安全性.结果 治疗组与对照组比较,总有效率、神经功能缺损评分、生活能力状态改善和血液流变学指标均有显著性差异(均P<0.05),治疗前后凝血四项和血小板指标均无显著差异(P>0.05).结论 巴曲酶联合银杏达莫治疗老年急性脑梗死疗效优于对照组.

    作者:王玥坤;王存选;张东菊 刊期: 2011年第08期

  • 山西省老年人不良生活方式相关慢性病与体质指数、腰围及腰臀比的关系

    目的 了解山西省老年人健康状况及其危险因素并提出相应的改进措施.方法 采用整群随机抽样方法抽取山西省大同、长治、运城、太原市、太谷县60岁以上老年人共2 490名,采用面对面调查形式,进行问卷调查.结果 总患病率为40.7%,患病率由高到低依次为高血压、肥胖、糖尿病、冠心病、脑血管疾病.上身肥胖者高血压患病率高;高血压、肥胖、糖尿病、冠心病的超重和肥胖的患病率要远大于体重过低和正常范围的患病率.体质指数、收入、职业、腰围、腰臀比与慢性病的发病率有一定的相关性.结论 生活方式相关的慢性病患病率较高,老年人生活状况和慢性病患病率之间有一定的相关性,针对不同情况应采取不同的预防措施,以提高老年人的健康水平和生存质量.

    作者:杜丽洁;郭珍;李甲男;王忠霞;张金梅 刊期: 2011年第08期

  • 奥氮平与氯氮平治疗老年精神分裂症患者疗效比较

    奥氮平是一种有效的抗精神病药物,能同时改善阳性、阴性症状,对兴奋、冲动的控制有较好的疗效,安全性高,依从性好.

    作者:刘桂霞;成孝军 刊期: 2011年第08期

  • ACS患者单核细胞MMP-9及其抑制物TIMP-1mRNA的表达

    目的 探讨单核细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织型基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达与急性冠脉综合征(ACS)之间的关系.方法 分离8例ACS、8例稳定性心绞痛(SAP)及8例对照循环血单核细胞,采用异硫氰酸胍-酚-氯仿抽提法提取总RNA,扩增目的 基因MMP-9及TIMP-1 mRNA.根据冠脉造影进行冠脉狭窄程度计分并测定血清ox-LDL水平.结果 ①ACS患者外周血单核细胞MMP-9 mRNA表达与对照组比较增加(P<0.05),而TIMP-1 mRNA表达在各组间无差异;②ACS组血清ox-LDL浓度高于SAP组及对照组(P<0.05),且SAP组高于对照组(P<0.05),③单核细胞MMP-9 mRNA表达与血清ox-LDL浓度正相关(r=0.458,P=0.024);而与冠脉狭窄计分(CSS)无相关性.结论 ACS患者外周血单核细胞MMP-9、TIMP-1 mRNA表达比例失衡,可能直接参与了不稳定斑块的形成及破裂.

    作者:李如意;于薇;曹东平;齐晓勇 刊期: 2011年第08期

  • 黄芪对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

    目的 探讨黄芪对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响,以及与缺血预处理(IP)作用效果的比较.方法 清洁级健康雄性SD大鼠96只,随机分为假手术组、缺血再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IP组)、黄芪组,每组又按再灌注时间(1、3、6、24 h)分为4个时相,每组各时相为6只.制作70%肝缺血再灌注模型,测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;测肝组织髓过氧化物酶(MPO)含量;用免疫组化法检测IL-10、TNF-α表达;以及光镜及电镜观察大鼠肝形态学变化.结果 IR、IP、黄芪组ALT、AST、LDH和MPO含量均明显高于假手术组(P<0.01).与IR组相比,IP、黄芪组各个时相点的值均下降(P<0.05).与IP组比较,黄芪组各个时相点的值均降低(P<0.05).IR、IP、黄芪组肝组织TNF-α、IL-10的阳性细胞表达率均比假手术组高(P<0.05);与IR组比较,IP、黄芪组TNF-α的表达减少,而IL-10的表达增强(P<0.05);与IP组比较,黄芪组TNF-α的表达减少,IL-10表达增强(P<0.05).在光镜及电镜下观察肝形态学变化,可见IR组损伤甚为明显,IP及黄芪组损伤程度较IR组轻,黄芪组更轻,而假手术组肝形态正常.结论 IP和黄芪都可减轻缺血再灌注对肝脏的损伤,且后者较前者效果好.

    作者:殷涛;毕旭东;庞世刚;李志 刊期: 2011年第08期

  • 中长波紫外线筛网照射治疗老年疱疹后遗神经痛的疗效

    疱疹后遗神经痛(PHN)是急性带状疱疹后常见的并发症,好发于老年人,疼痛剧烈,严重影响患者的生活质量.我科采用中长波紫外线筛网照射治疗疱疹后遗神经痛,取得了很好的效果.

    作者:王欢;关爽;乔士兴;夏玲;刘忠良 刊期: 2011年第08期

  • 老年糖尿病患者126例使用胰岛素泵常见问题及护理对策

    胰岛素泵完全模拟正常胰腺分泌胰岛素的工作,达到像患糖尿病前胰腺功能状态.对于2型糖尿病患者,胰岛素泵治疗不仅能很快改善血糖控制,而且可以保护β细胞的功能,有助于恢复Ⅰ相胰岛素分泌[1],是目前预防和延缓糖尿病并发症有效的方法之一.但在临床应用中也存在一些问题,尤其对老年人.本文总结老年糖尿病患者使用胰岛素泵常见问题及护理对策.

    作者:蒙连新;韦华;罗桂情;欧丽娜 刊期: 2011年第08期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅