方华伟;傅余芹;韩亚莉;陈叶
目的 在毕赤酵母中高效表达重组人载脂蛋白E3(rhApoE3),制备与天然hApoE3具有相同结构和活性的rhApoE3.方法 用RT-PCR法自人肝组织RNA克隆hApoE3的cDNA,构建真核分泌型表达载体pPICZα/hApoE3.经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X33.甲醇诱导后进行SDS-PAGE、Western印迹分析,筛选高表达工程菌.结果 经PCR法克隆的hApoE3 DNA序列与GenBank登录的序列一致.SDS-PAGE和Western印迹分析均在分子量约34kD出现特异性条带,rhApoE3表达量达150mg/L.结论 在毕赤酵母菌中可经甲醇诱导产生rhApoE3,获得高效表达rhApoE3的毕赤酵母工程菌.
作者:苏曼曼;陈月;王文佳;许天敏;常伟勤;颜炜群;包晓群 刊期: 2009年第07期
目的 观察给予外源性环腺苷酸类似物--双丁酸环腺苷酸(db-cAMP)对脑缺血再灌注(I/R)大鼠轴突再生、患肢运动功能恢复、RhoA信号通路活动的影响,探讨其临床应用可能性及机制.方法 将大鼠分为正常组、假手术组、脑I/R对照组、脑室注射生理盐水组(生理盐水组)和脑室注射db-cAMP组(db-cAMP组),采用线栓法制作大鼠大脑中动脉I/R模型,脑室灌注在造模前完成.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测缺血灶周边脑组织生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA和RhoA mRNA的表达,用Zea Longa评分法对患肢运动功能进行评分. 结果脑I/R对照组大鼠缺血灶周边脑组织GAP-43 mRNA的表达在造模术后6 h略有降低,第24小时开始增高,第7天达到高峰,第14天开始降低但仍高于假手术组(P<0.05,P<0.01).脑I/R对照组大鼠缺血灶周边脑组织RhoA mRNA表达于造模术后6 h开始增高,第48小时达到高峰,之后开始下降,第7天和14天仍高于假手术组(P<0.01).db-cAMP组大鼠缺血灶周边组织GAP-43 mRNA在造模术后各时间点均高于脑I/R对照组和生理盐水组大鼠,第7天显著(P<0.05,P<0.01).db-cAMP组大鼠缺血灶周边组织RhoA mRNA在造模术后各时间点均显著低于脑I/R对照组和生理盐水组大鼠(P<0.05,P<0.01).脑I/R对照组,生理盐水组和db-cAMP组大鼠在造模术后各时间点神经功能缺损评分呈相同变化趋势, db-cAMP组大鼠在造模术后第14天神经功能缺损评分显著低于脑I/R对照组和生理盐水组(P<0.05).结论 db-cAMP能够促进脑I/R损伤轴突再生和运动功能的恢复,其机制与抑制RhoA信号通路活动有关.
作者:牛陵川;李长清;陈艳;刘圣山;黄莹 刊期: 2009年第07期
低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是1992年由Semenza[1]对经缺氧处理HepG2和Hep3B细胞株的核提取物进行分析时发现的.它是哺乳动物机体功能在缺氧条件下的一个重要的氧依赖转录激活因子,通过与低氧反应元件(hypoxia responsive element,HRE)结合,引发下游诸如促红细胞生长素(EPO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等基因的转录,从而影响红细胞生成、血管发生、细胞凋亡和增殖等生理及病理过程,并使机体产生一系列的适应缺氧反应.而VEGF是机体内主要的血管生长因子,对促进血管新生有着极其重要的作用.
作者:陆蕴松;高忠礼;刘光耀 刊期: 2009年第07期
目的 比较养老机构与居家老人健康现状及照顾需求,为提高机构服务及老人生活质量提供依据.方法 采用健康自测量表(SRHMS)和抑郁量表(DSI),对昆明市养老机构≥60岁的289名老人(机构组)和526名居家老人(居家组)作健康现状与照顾需求的测评与对比分析.结果 机构组老人较居家组老人社会支持更脆弱、整体健康更差;前者对健康医疗需求、社会保障、老年服务和社会尊老的期望远高于后者(P<0.01). 结论机构老人健康堪忧,机构服务在满足其健康照顾、参与发展方面尚存较大落差.
作者:张河川;岑晓钰 刊期: 2009年第07期
目的 实验观察了褪黑素(MT)对应激性高血压大鼠大脑外侧缰核(LHb)、室旁核(PVN)和中央杏仁核(CeA)fos蛋白样免疫反应及γ-氨基丁酸A(GABA)受体阻断剂荷包牡丹碱(bicuculline,Bic)对褪黑素所引起的c-fos表达变化的影响.方法 SD大鼠30只,随机分为正常对照组,应激1 h组,应激1 h+MT组,应激1 h+Bic+MT组,应激1 h+Bic组.采用电击足底方法制备应激大鼠模型.结果 与对照组相比,应激1 h组大鼠大脑LHb、PVN和CeA的FLI神经元显著增加,如果在应激前腹腔注射 MT,可抑制上述反应,而腹腔注射Bic 5 min后注射MT并再应激1 h,可抑制MT减少FLI神经元数量的效应.结论 MT可抑制电击足底应激所导致的c-fos表达的增加,其作用机制可能是通过GABA受体发生作用.
作者:苏建军;李华丽;黄民;赵华 刊期: 2009年第07期
腰椎管狭窄症是65岁以上老年人常见的脊柱疾病,多合并有不同程度腰椎节段不稳,大多数患者经保守治疗无效,在不稳定的晚期,可出现各种脊柱畸形、神经根以及马尾受压症状,行单纯手术减压治疗远期疗效欠佳,是脊柱外科医生面临的一个常见问题.我院2001年12月-2006年12月,采用全椎板及侧隐窝神经根管减压、后外侧植骨和椎弓根内固定术治疗老年腰椎管狭窄症合并腰椎不稳患者19例,经10~60个月随访,效果优良,现报道如下.
作者:肖文德;胡菁;姬广林;高辉;刘午阳;赖光松;吴东保;何澄 刊期: 2009年第07期
目的 研究老年黄斑变性(AMD)脉络膜新生血管膜(CNVM)的增殖活性.方法 22例AMD病人的CNVM,用免疫组化的方法分析增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核因子(NF-κB)、c-fos在CNVM中的表达.结果 活动期CNVM的血管内皮细胞与消退期、静止期CNVM的血管内皮细胞对比,PCNA、NF-κB、c-fos均有较高的表达;在静止期CNVM的血管内皮细胞PCNA、NF-κB、c-fos无表达或表达较少(P<0.01).消退期CNVM的色素细胞与活动期、静止期CNVM的色素细胞对比,PCNA、NF-κB、c-fos均有较高的表达(P<0.01).消退期CNVM的巨噬细胞与活动期、静止期CNVM的巨噬细胞对比,PCNA、NF-κB、c-fos均有较高的表达(P<0.01).静止期CNVM的成纤维细胞与活动期、消退期CNVM的成纤维细胞对比,PCNA、NF-κB、c-fos均有较高的表达(P<0.01).结论 细胞增殖活性的细胞核内基因PCNA、NF-κB、c-fos的表达与CNVM的病理分期(活动期、消退期、静止期)具有明显的相关性.
作者:李亚萍;王玲;苏冠方;孙大军;刘早霞;吴雅臻 刊期: 2009年第07期
目的 探讨罗格列酮对动脉粥样硬化 (AS)兔一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法 大耳白兔37只随机分为空白对照组、AS组、罗格列酮治疗组,14 w后检测血脂、eNOS水平.结果 罗格列酮治疗组较AS组HDL-C、eNOS水平显著升高(P<0.01).结论 罗格列酮可以改善血脂异常,增强eNOS蛋白表达,对AS有一定抑制作用.
作者:黄婷;李杰;丁健;孔俭;何淑梅;邵明柏 刊期: 2009年第07期
轻度认知功能障碍(MCI)是介于正常衰老和痴呆之间的一种认知损害状态,据统计每年约有10%~15%的遗忘型MCI患者发展为阿尔茨海默病(AD),而正常人每年转化率仅为1%[1],因此认识MCI的神经心理学特点、早期诊断并进行干预治疗对预防AD和其他类型痴呆的发生具有重要意义.目前国内外对MCI的认知损害特点没有统一的认识,而且没有统一的概念和诊断标准,本研究采用神经心理学方法对MCI患者和正常老年人的认知功能进行全面的评价分析,探讨MCI认知功能损害特点并对认知康复训练的疗效进行观察.
作者:刘敏;郇英;陈兴旺;赵修敏;张芳 刊期: 2009年第07期
目的 在体条件下观察β-淀粉样蛋白25-35和31-35片段对大鼠海马CA1区长持续长时程增强(L-LTP)的影响.方法 在体海马CA1区L-LTP记录技术;侧脑室给药技术.结果 25 nmol浓度的 Aβ31-35或Aβ25-35不影响基础突触传递(n=5,P>0.05);Aβ25-35对L-LTP的抑制具有一定的剂量依赖性效应:6.25 nmol,12.5 nmol和25 nmol Aβ25-35组和对照组相比,显著抑制了L-LTP的维持(在高频刺激后3 h:均P<0.05);12.5 nmol Aβ31-35同Aβ25-35,抑制L-LTP的维持(高频刺激后3 h,P<0.05).结论 Aβ25-35 和 Aβ31-35可显著抑制在体海马L-LTP的维持,从而损害突触可塑性.
作者:张俊芳;侯磊;祁金顺 刊期: 2009年第07期
目的 研究红景天苷对糖尿病脑病大鼠的神经保护作用.方法 Wistar大鼠分为3组:正常对照组、糖尿病组及红景天苷组.除正常对照组外,其余两组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病模型.红景天苷组给予50 mg/kg灌胃治疗.用药12 w后,监测大鼠血糖和体质量变化;Morris水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力;脑组织匀浆检测SOD、GSH-Px和CAT活性及MDA含量;HE染色观察海马CA1区形态学变化.结果 与糖尿病组相比,红景天苷组大鼠血糖浓度降低,体质量增加,学习记忆障碍得以改善,海马组织SOD、GSH-Px和CAT活性明显增高,MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),神经元损伤明显好转.结论 红景天苷对糖尿病脑病的保护作用,可能是通过抗氧化应激实现的.
作者:蔺勇;赵珩;张扬;张朝东 刊期: 2009年第07期
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导后促进胰腺损伤修复的方法.方法 应用贴壁法分离、纯化大鼠MSCs,经bFGF、EGF、HGF、2%B27、activeA、β巯基乙醇、尼克酰胺诱导12~14 d,RT-PCR鉴定后,以DAPI标记治疗胰腺损伤模型大鼠.治疗1 w后激光共聚焦显微镜观察胰岛样细胞的迁移、定位,RT-PCR鉴定参与胰腺损伤修复的细胞来源.结果 MSCs经诱导12~14 d,分化为可表达Ins1、Ins2的胰岛样细胞,经DAPI标记后治疗胰腺损伤模型大鼠1 w,使炎性细胞浸润明显、细胞结构不清、胰岛结构崩解的损伤区的胰腺组织结构开始恢复,胰岛再建;RT-PCR检测Sry进一步证实损伤区胰腺组织内存在输注的胰岛样细胞.结论 MSCs可诱导分化成胰岛样细胞,该细胞参与损伤胰腺组织的修复.
作者:滕春燕;于庭;刘爱忠;陈玉丙;金春香 刊期: 2009年第07期
肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)属于纤溶酶原依赖性的生长因子家族,是一种间质来源的多效性生长因子,它作为一个旁分泌或内分泌介质,具有促细胞分裂、增生、迁移以及分化等广泛的生物学活性,通过上皮-间质的相互作用,在胚胎发生、血管生成、组织器官再生、创伤愈合、形态发生和肿瘤形成过程等方面发挥重要作用.目前HGF在增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)发生发展中的作用备受关注,现就其研究进展综述如下.
作者:郑炜;吴雅臻 刊期: 2009年第07期
便秘是老年人常见疾病,临床多给泻药对症处理,而以结肠黏膜表面有褐色素沉着为特征的黑变病,其病因及发病机制尚不太清楚,有研究表明慢性便秘及应用蒽醌类泻药与其发病密切相关[1],但也有不同看法.
作者:陈鸿;刘芸 刊期: 2009年第07期
目的 研究瘦素受体Gln223Arg基因多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系.方法 运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定无亲缘关系的336例浙南地区汉人的瘦素受体基因Gln223Arg的基因型(其中T2DM合并肥胖组121例,T2DM非肥胖组104例,正常对照组111例),并分析Gln223Arg基因多态性与糖尿病的关系.结果 ① T2DM肥胖组Gln223Arg基因型GG、GA及AA的频率分别为0.645、0.347和0.008;G和A等位基因频率分别为0.818和0.182;T2DM非肥胖组基因型GG和GA的频率分别为0.769、0.231;G和A等位基因频率分别为0.885和0.115;正常对照组基因型GG、GA及AA的频率分别为0.802、0.189和0.009;G和A等位基因频率分别为0.896和0.104.②T2DM合并肥胖组A、G等位基因分布频率与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05),非肥胖组与正常对照组比较无明显差异(P>0.05).结论 浙南地区汉族人群存在瘦素受体基因Gln223Arg变异,它可能是该地区人群T2DM合并肥胖患者的遗传易感标记,A等位基因与T2DM发病有一定关系.
作者:应俊;石楠松;潘若望;李佩珍;张洪勤 刊期: 2009年第07期
目的 研究去卵巢大鼠体内氧化应激水平和骨质的变化及番茄红素对其影响.方法 将32只雌性SD大鼠随机分成4组:假手术组,模型组,小剂量干预组和大剂量干预组.术后1 w开始用番茄红素灌胃,于术后10 w时处死各组大鼠,并对血生化、氧化及抗氧化指标,骨密度,生物力学等参数进行检测,对其骨组织形态学进行观察.结果 在去势10 w后,与假手术组相比,模型组大鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶、丙二醛等均不同程度的升高(P<0.01,P<0.05),而血清超氧化物歧化酶水平、骨密度值及生物力学指标均不同程度的下降(P<0.01,P<0.05).药物干预组,尤其是大剂量干预组的上述参数指标与模型组相比呈现出显著差异(P<0.01,P<0.05).结论 氧化应激可能与骨质疏松的发生相关,并初步证实番茄红素对去势大鼠骨质具有保护作用.
作者:兰观华;邵增务;祝素萍 刊期: 2009年第07期
目的 观察偏硅酸钠(Na2SiO3)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的ECV-304细胞与人外周血单个核细胞黏附的影响,探讨其抗动脉粥样硬化(AS)作用的机制.方法 ECV-304细胞分为5组:对照组、ox-LDL组、Na2SiO3高剂量组(硅68.5 mg/L)、中剂量组(硅34.2 mg/L)、低剂量组(硅17.1 mg/L).分离正常健康人外周血单个核细胞,计数与各组ECV-304细胞黏附数,检测细胞培养液中IL-8水平;采用流式细胞术测VCAM-1的蛋白表达量;半定量RT-PCR检测VCAM-1、IL-8mRNA的表达.结果 Na2SiO3减少ECV-304单个核细胞黏附数(P<0.01),降低IL-8浓度(P<0.01),降低VCAM-1的蛋白表达量(P<0.05),下调VCAM-1、IL-8 mRNA的表达(P<0.01).结论 Na2SiO3能够下调ox-LDL诱导的ECV-304 IL-8和VCAM-1的表达.
作者:黄伟;李丽玮;甄艳军;李志永;张莉;侯建明 刊期: 2009年第07期
目的 研究老年2型糖尿病(T2DM)患者骨量及骨代谢生化指标的变化.方法 运用QCT测定88例年龄≥60岁正常老年人以及67例年龄≥60岁确诊为T2DM患者的腰椎松质骨骨密度,所有检测对象均记录年龄、体重指数、运动及日照时间、饮食习惯、病程(T2DM组)、绝经年限(女性),检测糖化血红蛋白(糖尿病组)、胰岛素及C肽(空腹及餐后2 h)、性激素、血钙、磷、总碱性磷酸酶、骨钙素及尿脱氧吡啶啉、尿钙、磷.对上述指标的测量结果进行分析比较.结果 ①老年T2DM组骨密度与年龄和体重指数匹配的对照组比较无显著差异(P>0.05);②老年T2DM组骨钙素水平明显高于老年正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 老年T2DM患者与正常老年人相比骨密度无明显差异,其骨形成指标(骨钙素)明显高于正常老年人,这可能与血糖控制及一定水平的胰岛素有关.
作者:吴亚楠;王琦;沈芸;吴玲;马蕾;申明月;毕鸿雁 刊期: 2009年第07期
大量研究证明,动脉粥样硬化(AS)是一种慢性、进行性、多发性血管硬化性疾病,主要侵犯体内大、中动脉,尤其以侵犯对生命健康威胁为主的颅脑动脉,引起严重的卒中事件.颅内、外动脉狭窄是缺血性卒中发作或再发作的重要原因,其发生发展与AS密切相关.随着血管检查技术的发展,在临床工作中颅内外血管的检查越来越普遍.颅内、外动脉狭窄相关危险因素的单独或综合作用、药物及手术治疗等方面成为当前研究的热点.本文就此方面的研究进展作一简要综述.
作者:于淼;孙晓江 刊期: 2009年第07期
目的 观察糖尿病大鼠应用辛伐他汀干预治疗后骨组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因、骨密度(BMD)及骨代谢的变化.方法 4月龄雄性SD大鼠30只,随机分为对照组,糖尿病组,辛伐他汀组,每组10只.糖尿病组和辛伐他汀组大鼠经腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病大鼠模型后,辛伐他汀组给予辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1灌服,对照组、糖尿病两组大鼠灌服生理盐水1.5 ml·只-1·d-1.14 w后处死大鼠,测定各组大鼠骨BMP-2 mRNA的表达、骨密度及骨代谢.结果 辛伐他汀组BMP-2 mRNA的表达水平及血清碱性磷酸酶(ALP)均明显高于糖尿病组(P<0.05);糖尿病组骨密度显著低于对照组(P<0.01);辛伐他汀组骨密度明显高于糖尿病组(P<0.05);辛伐他汀组抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)显著低于糖尿病组(P<0.01).结论 辛伐他汀能使糖尿病大鼠骨组织BMP-2基因表达增强,骨密度增加,改善了骨代谢.
作者:王娟;阳文琳;陈隽 刊期: 2009年第07期