解英俊;杨永生;赵吉生;季德刚;刘大铮;张学文
目的 构建能够调控自杀基因表达的单载体四环素基因表达调控系统.方法 以真核表达载体pcDNA3.1为载体构建骨架,将两个四环素基因表达调控元件(TetO2)克隆到pcDNA3.1载体CMV启动子下游,构建成pcDNA3.1-TetO2载体;将单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)与核糖体进位位点(IRES)相连的基因片段克隆入pcDNA3.1-TetO2载体的多克隆酶切位点,构建成pcDNA3.1-TetO2-HSV-TK-IRES载体;将四环素调控子基因(TR)克隆至pcDNA3.1-TetO2-HSV-TK-IRES载体IRES下游,从而构建成pcDNA3.1-TetO2-HSV-TK-IRES-TR载体.利用酶切与测序鉴定克隆结果.结果 载体构建过程的酶切结果以及测序结果表明载体构建正确.结论 成功构建了能够调控自杀基因表达的单载体四环素基因表达调控系统,为调控自杀基因体外杀伤肿瘤奠定实验基础.
作者:王茜;杜珍武;赵虹;张桂珍 刊期: 2009年第07期
目的 观察给予外源性环腺苷酸类似物--双丁酸环腺苷酸(db-cAMP)对脑缺血再灌注(I/R)大鼠轴突再生、患肢运动功能恢复、RhoA信号通路活动的影响,探讨其临床应用可能性及机制.方法 将大鼠分为正常组、假手术组、脑I/R对照组、脑室注射生理盐水组(生理盐水组)和脑室注射db-cAMP组(db-cAMP组),采用线栓法制作大鼠大脑中动脉I/R模型,脑室灌注在造模前完成.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测缺血灶周边脑组织生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA和RhoA mRNA的表达,用Zea Longa评分法对患肢运动功能进行评分. 结果脑I/R对照组大鼠缺血灶周边脑组织GAP-43 mRNA的表达在造模术后6 h略有降低,第24小时开始增高,第7天达到高峰,第14天开始降低但仍高于假手术组(P<0.05,P<0.01).脑I/R对照组大鼠缺血灶周边脑组织RhoA mRNA表达于造模术后6 h开始增高,第48小时达到高峰,之后开始下降,第7天和14天仍高于假手术组(P<0.01).db-cAMP组大鼠缺血灶周边组织GAP-43 mRNA在造模术后各时间点均高于脑I/R对照组和生理盐水组大鼠,第7天显著(P<0.05,P<0.01).db-cAMP组大鼠缺血灶周边组织RhoA mRNA在造模术后各时间点均显著低于脑I/R对照组和生理盐水组大鼠(P<0.05,P<0.01).脑I/R对照组,生理盐水组和db-cAMP组大鼠在造模术后各时间点神经功能缺损评分呈相同变化趋势, db-cAMP组大鼠在造模术后第14天神经功能缺损评分显著低于脑I/R对照组和生理盐水组(P<0.05).结论 db-cAMP能够促进脑I/R损伤轴突再生和运动功能的恢复,其机制与抑制RhoA信号通路活动有关.
作者:牛陵川;李长清;陈艳;刘圣山;黄莹 刊期: 2009年第07期
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导后促进胰腺损伤修复的方法.方法 应用贴壁法分离、纯化大鼠MSCs,经bFGF、EGF、HGF、2%B27、activeA、β巯基乙醇、尼克酰胺诱导12~14 d,RT-PCR鉴定后,以DAPI标记治疗胰腺损伤模型大鼠.治疗1 w后激光共聚焦显微镜观察胰岛样细胞的迁移、定位,RT-PCR鉴定参与胰腺损伤修复的细胞来源.结果 MSCs经诱导12~14 d,分化为可表达Ins1、Ins2的胰岛样细胞,经DAPI标记后治疗胰腺损伤模型大鼠1 w,使炎性细胞浸润明显、细胞结构不清、胰岛结构崩解的损伤区的胰腺组织结构开始恢复,胰岛再建;RT-PCR检测Sry进一步证实损伤区胰腺组织内存在输注的胰岛样细胞.结论 MSCs可诱导分化成胰岛样细胞,该细胞参与损伤胰腺组织的修复.
作者:滕春燕;于庭;刘爱忠;陈玉丙;金春香 刊期: 2009年第07期
作为中国医学传统名贵药材的天麻(Gastrodia elata Blume),被应用于中医治疗各种疾病已有几千年的历史.从天麻中提取的各种有效活性物质,如:天麻素等,仍是现代医学制药中不可缺少的重要组成成分.药食同源,中国历代皇宫、民间都有食用天麻的习惯.天麻是卫生部规定的可以用于保健食品的药材.过去,因为野生天麻产量低、价格高,所以天麻多以药用为主,少量用于食用.随着天麻人工栽培技术的发展成熟,天麻的产量大大提高,这就为以天麻为原料的保健食品的大规模生产提供了有利的条件.
作者:孙亚男 刊期: 2009年第07期
肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)属于纤溶酶原依赖性的生长因子家族,是一种间质来源的多效性生长因子,它作为一个旁分泌或内分泌介质,具有促细胞分裂、增生、迁移以及分化等广泛的生物学活性,通过上皮-间质的相互作用,在胚胎发生、血管生成、组织器官再生、创伤愈合、形态发生和肿瘤形成过程等方面发挥重要作用.目前HGF在增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)发生发展中的作用备受关注,现就其研究进展综述如下.
作者:郑炜;吴雅臻 刊期: 2009年第07期
目的 研究雷公藤氯内酯醇(T4)对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆障碍的影响.方法 通过大鼠海马注射Aβ1-40建立AD大鼠模型,通过Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,并进行大鼠血常规、肝肾功能检测.结果 Aβ组大鼠较假手术组逃避潜伏期延长而跨越原平台位置次数明显减少;T4组大鼠较Aβ组第2~5天平均逃避潜伏期明显缩短,跨越原平台位置次数明显增多.3组大鼠血常规、肝肾功能无明显差异.结论 T4可以有效安全地改善AD大鼠的学习记忆障碍.
作者:陈龙飞;阮志芳;李智文;许国英;陆曦 刊期: 2009年第07期
目的 应用虫草菌丝对糖尿病肾病(DN)模型大鼠进行干预,探讨其作用效果及可能的作用机制.方法 将Wistar大鼠分成正常组和糖尿病(DM)组,DM组大鼠给予链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg腹腔内注射,成模后随机分为模型组和治疗组每组大鼠分别在第4、8、16周各处死10只,在处死前留取24 h尿量测24 h尿白蛋白和尿肌酐,留取血标本离心后测血肌酐,留取肾脏标本用免疫组化和实时荧光定量PCR方法测胱抑素(CC),组织蛋白酶B(CB),Ⅳ型胶原(ColⅣ)和纤维连接蛋白(FN)的表达.结果 与正常组比较模型和治疗组大鼠内生肌酐清除率(Ccr)和24 h尿白蛋白第4周开始升高(P<0.01),免疫组化和PCR结果显示CB、CC、ColⅣ、FN在第8周出现明显上调(P<0.01或P<0.05),模型组CB在16 w下调(P<0.01),与模型组相比,治疗组的CB,CC,ColⅣ,FN在前8周无显著变化,第16周CC,ColⅣ,FN表达下调(P<0.01或P<0.05),CB的表达上调(P<0.01).结论 虫草菌丝通过调节CB、CC的平衡来减少DN细胞外基质(ECM)的沉积,起到对DN的保护作用.
作者:方华伟;傅余芹;韩亚莉;陈叶 刊期: 2009年第07期
目的 研究老年黄斑变性(AMD)脉络膜新生血管膜(CNVM)的增殖活性.方法 22例AMD病人的CNVM,用免疫组化的方法分析增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核因子(NF-κB)、c-fos在CNVM中的表达.结果 活动期CNVM的血管内皮细胞与消退期、静止期CNVM的血管内皮细胞对比,PCNA、NF-κB、c-fos均有较高的表达;在静止期CNVM的血管内皮细胞PCNA、NF-κB、c-fos无表达或表达较少(P<0.01).消退期CNVM的色素细胞与活动期、静止期CNVM的色素细胞对比,PCNA、NF-κB、c-fos均有较高的表达(P<0.01).消退期CNVM的巨噬细胞与活动期、静止期CNVM的巨噬细胞对比,PCNA、NF-κB、c-fos均有较高的表达(P<0.01).静止期CNVM的成纤维细胞与活动期、消退期CNVM的成纤维细胞对比,PCNA、NF-κB、c-fos均有较高的表达(P<0.01).结论 细胞增殖活性的细胞核内基因PCNA、NF-κB、c-fos的表达与CNVM的病理分期(活动期、消退期、静止期)具有明显的相关性.
作者:李亚萍;王玲;苏冠方;孙大军;刘早霞;吴雅臻 刊期: 2009年第07期
目的 研究硬骨鱼紧张素ⅡS89N基因(UTS2-S89N)单核苷酸多态性(SNP)与西北人群原发性高血压的关系.方法 用PCR-RFLP及电泳分析法进行基因分型;SPSS软件分析各基因型与西北人群原发性高血压的相关性.结果 198例原发性高血压患者及131例正常人在基因型、等位基因频率上均有显著差异(P=0.002,0.001).UTS2-S89N基因型SS,SN,NN的频率在病例组中分别25.7%,55.6%,18.7%;对照组分别为43.5%,45.6%,9.9%.S,N等位基因频率在病例组中分别53.5%,46.5%,对照组分别为66.8%,33.2%.结论 UTS2-S89N 基因多态性与西北人群原发性高血压相关.
作者:伊琳;顾远晖;谢小冬;周瑞霞 刊期: 2009年第07期
目的 观察化浊解毒益气方对肝纤维化大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)和组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1) mRNA表达的影响.方法 采用腹腔注射猪血清的方法建立免疫性肝纤维化大鼠动物模型,以化浊解毒益气方分别于造模的开始和第8周进行干预,以秋水仙碱作为阳性对照.分别于造模的8和12 w处死5只大鼠,提取肝组织行RT-PCR法检测TGF-β1和TIMP-1 mRNA的表达.结果 腹腔注射猪血清成功复制了免疫性肝纤维化大鼠模型,与正常对照组相比,模型对照组TGF-β1和TIMP-1 mRNA的表达明显增高(P<0.05);中药干预可降低TGF-β1和TIMP-1 mRNA的表达,其作用优于秋水仙碱(P<0.05).但中药预防组与中药治疗组之间,秋水仙碱预防组与秋水仙碱治疗组之间,差异无显著性(P>0.05).结论 化浊解毒益气方可以减轻猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化,其作用可能与降低肝组织TGF-β1和TIMP-1 mRNA的表达有关.
作者:王丽;李佃贵;孟宪鑫;王彦刚;高绍芳;张纨 刊期: 2009年第07期
腰椎管狭窄症是65岁以上老年人常见的脊柱疾病,多合并有不同程度腰椎节段不稳,大多数患者经保守治疗无效,在不稳定的晚期,可出现各种脊柱畸形、神经根以及马尾受压症状,行单纯手术减压治疗远期疗效欠佳,是脊柱外科医生面临的一个常见问题.我院2001年12月-2006年12月,采用全椎板及侧隐窝神经根管减压、后外侧植骨和椎弓根内固定术治疗老年腰椎管狭窄症合并腰椎不稳患者19例,经10~60个月随访,效果优良,现报道如下.
作者:肖文德;胡菁;姬广林;高辉;刘午阳;赖光松;吴东保;何澄 刊期: 2009年第07期
肠梗阻为外科常见疾病,病因繁多,诊治方法各不相同.术后早期炎性肠梗阻一般发生于腹部手术后1~3 w以内,因其发病早期临床表现不典型,早期诊断及正确治疗均较困难.近年来,老年患者术后早期炎性肠梗阻的发病率有明显上升趋势.本文对老年术后早期炎性肠梗阻患者28例临床资料进行分析,探讨其诊治体会.
作者:解英俊;杨永生;赵吉生;季德刚;刘大铮;张学文 刊期: 2009年第07期
目的 比较养老机构与居家老人健康现状及照顾需求,为提高机构服务及老人生活质量提供依据.方法 采用健康自测量表(SRHMS)和抑郁量表(DSI),对昆明市养老机构≥60岁的289名老人(机构组)和526名居家老人(居家组)作健康现状与照顾需求的测评与对比分析.结果 机构组老人较居家组老人社会支持更脆弱、整体健康更差;前者对健康医疗需求、社会保障、老年服务和社会尊老的期望远高于后者(P<0.01). 结论机构老人健康堪忧,机构服务在满足其健康照顾、参与发展方面尚存较大落差.
作者:张河川;岑晓钰 刊期: 2009年第07期
目的 探讨老年直肠癌Dixon术后吻合口漏的发生率、危险因素和治疗方法.方法 回顾性分析159例直肠癌行Dixon术患者的临床资料.结果 年龄、肿瘤距肛缘距离、糖尿病、术前低蛋白、术前合并肠梗阻、切口感染与吻合口漏的发生密切相关,而性别与吻合口漏的发生无关.结论 吻合口漏是直肠癌Dixon术后一种常见并发症,低位直肠癌行保肛手术增加吻合口漏发生率,大部分吻合口漏经单纯引流管冲洗可治愈,少数病例需行剖腹探查肠造瘘术.
作者:赵航;宋燕;姜洋;谢忠士;柳福海 刊期: 2009年第07期
目的 探讨肝组织胰岛素受体底物1(IRS-1)基因表达与2型糖尿病(T2DM)发病的关系,以及针刺对T2DM大鼠肝组织IRS-1基因表达的影响.方法 食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(25 mg/kg)造模成T2DM大鼠,随机分为针刺组、格列本脲组和模型组,处理4 w后,用快速血糖仪检测空腹血糖(FPG)、用放免法检测空腹胰岛素(FINS)、用实时RT-PCR法检测肝组织IRS-1 mRNA表达,并与正常组大鼠进行对照.结果 模型组FPG、FINS明显高于正常组;针刺组FPG、FINS明显下降,接近正常组水平;格列本脲组FPG明显下降,接近正常组水平,FINS有所下降,和模型组有差异;模型组IRS-1 mRNA相对含量是正常组的1/4,针刺组为正常组的2.83倍,格列本脲组为正常组的1.23倍.结论 T2DM大鼠存在肝组织IRS-1 mRNA表达低下,针刺和格列本脲均可上调T2DM大鼠肝组织的IRS-1 mRNA表达,针刺对T2DM大鼠肝组织IRS-1 mRNA表达的上调作用优于格列本脲.
作者:袁爱红;刘志诚;魏群利;蔡辉 刊期: 2009年第07期
目的 探讨p53、P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)在老年消化道肿瘤中的表达及意义.方法 对33例老年(≥60岁)消化道肿瘤组织进行p53蛋白、P-gp、GST-π和TopoⅡα免疫组化染色,并以35例(<60岁)消化道肿瘤作为对照.结果 老年组患者在临床病理学特征中,高分化腺癌(22/33)、大肠癌(22/33)患者比例明显高于对照组(均P<0.01).老年组P-gp、GST-π表达明显高于对照组(分别为P=0.009、P=0.026),p53在两组间差异不显著(P=0.293),而TopoⅡα表达则低于对照组(P=0.032).结论 老年消化道肿瘤P-gp和GST-π高表达、TopoⅡα低表达的特点与老年消化道肿瘤以高分化腺癌、大肠癌为主的临床病理特征有关.
作者:檀碧波;韩杰;吕炳蓉;耿玮;赵建辉 刊期: 2009年第07期
目的 探讨凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体在兔颈动脉狭窄模型中的表达及血流动力的作用.方法 健康日本大耳白兔15只,随机分为狭窄组、高脂组、对照组,每组5只.狭窄组及高脂组采用显微缝合加高脂饮食法建立实验性兔颈动脉狭窄模型,对照组给予标准饲料.共12 w.多普勒超声检测狭窄血管的血流动力学参数,采用RT-PCR检测狭窄近心端、狭窄处及狭窄远心端LOX-1表达.结果 在颈动脉狭窄处及狭窄远心端分别形成高切应力和低切应力区.高脂环境下LOX-1表达有升高趋势,LOX-1在血管狭窄处及狭窄远心端呈高表达.结论 血管狭窄后血流动力学改变影响LOX-1表达,低切应力水平促进LOX-1表达.
作者:王捷;邢影;李淼;徐忠信 刊期: 2009年第07期
目的 应用动态血糖监测系统(CGMS)评估果糖及木糖醇注射液对老年2型糖尿病血糖波动的影响,为老年2型糖尿病患者的补液治疗提供选择依据.方法 选择稳定期老年2型糖尿病患者20例,采用自身对照方法,随机在第1,2,3天9:00~11:00分别匀速静脉滴注0.9%生理盐水200 ml、5%果糖注射液200 ml或5%木糖醇注射液200 ml.同时用CGMS监测血糖的动态变化,比较9:00~12:00血糖波动情况.结果 生理盐水组、果糖组、木糖醇组9:00~12:00(180 min)内血糖高值[(10.63±2.42) vs (9.87±1.96) vs (10.18±1.44)mmol/L]、血糖低值[(5.34±1.72) vs (5.95±1.68) vs (5.63±1.45)mmol/L]、血糖平均值[(7.78±1.85) vs (7.73±1.42) vs (7.19±0.87)mmol/L]、血糖波动大幅度[(5.29±2.24) vs (3.93±2.53) vs (4.56±2.15)mmol/L]、血糖标准差[(1.67±0.61) vs (1.49±0.65) vs (1.62±0.61)mmol/L]及血糖曲线下面积(AUC)[(1 377.40±295.51) vs (1 391.75±258.57) vs (1 425.84±157.38)mmol·min-1·L-1].三组间血糖高值、低值、平均值、血糖波动大幅度、血糖标准差及血糖AUC均无显著区别(P>0.05).结论 果糖注射液及木糖醇注射液对老年2型糖尿病患者的血糖波动无明显影响,可作为其补液治疗的安全选择.
作者:王艳姣;赵红峰;朱佳花;汪化文;黄武;王翼;詹俊鲲;刘幼硕 刊期: 2009年第07期
目的 观察偏硅酸钠(Na2SiO3)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的ECV-304细胞与人外周血单个核细胞黏附的影响,探讨其抗动脉粥样硬化(AS)作用的机制.方法 ECV-304细胞分为5组:对照组、ox-LDL组、Na2SiO3高剂量组(硅68.5 mg/L)、中剂量组(硅34.2 mg/L)、低剂量组(硅17.1 mg/L).分离正常健康人外周血单个核细胞,计数与各组ECV-304细胞黏附数,检测细胞培养液中IL-8水平;采用流式细胞术测VCAM-1的蛋白表达量;半定量RT-PCR检测VCAM-1、IL-8mRNA的表达.结果 Na2SiO3减少ECV-304单个核细胞黏附数(P<0.01),降低IL-8浓度(P<0.01),降低VCAM-1的蛋白表达量(P<0.05),下调VCAM-1、IL-8 mRNA的表达(P<0.01).结论 Na2SiO3能够下调ox-LDL诱导的ECV-304 IL-8和VCAM-1的表达.
作者:黄伟;李丽玮;甄艳军;李志永;张莉;侯建明 刊期: 2009年第07期
低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是1992年由Semenza[1]对经缺氧处理HepG2和Hep3B细胞株的核提取物进行分析时发现的.它是哺乳动物机体功能在缺氧条件下的一个重要的氧依赖转录激活因子,通过与低氧反应元件(hypoxia responsive element,HRE)结合,引发下游诸如促红细胞生长素(EPO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等基因的转录,从而影响红细胞生成、血管发生、细胞凋亡和增殖等生理及病理过程,并使机体产生一系列的适应缺氧反应.而VEGF是机体内主要的血管生长因子,对促进血管新生有着极其重要的作用.
作者:陆蕴松;高忠礼;刘光耀 刊期: 2009年第07期