学术投稿

糖尿病并发症相关基因醛糖还原酶酵母细胞模型的建立

刘静;叶玲;刘建伟

关键词:醛糖还原酶, 酵母, 绿色荧光蛋白, 基因表达, 克隆
摘要:目的构建由绿色荧光蛋白(GFP)标记的糖尿病慢性并发症相关基因醛糖还原酶(AR)表达载体,并在酵母细胞中表达,建立AR抑制剂筛选模型.方法构建AR与GFP的嵌合基因,将此AR::GFP嵌合基因克隆到酵母表达载体pYEX-BX中,再将重组载体pYEX-BX-AR::GFP转化至酵母宿主菌INVSC1,在SC-UD选择性培养基中表达AR::GFP.结果 PCR扩增出约1 106 bp大小片段,为AR基因片段;RT-PCR在酵母细胞中检测到AR mRNA的表达;经CuSO4诱导后可见AR::GFP融合蛋白的绿色荧光;诱导剂CuSO4终浓度在100~200 μmol/L范围内相对荧光强度较高,细胞密度适中;培养基SC-UD的pH值为6左右适合细胞生长和荧光表达.结论 AR::GFP在酿酒酵母中成功地表达,酵母细胞是研究目的基因功能与表达的良好模式菌.
中国老年学杂志相关文献
  • 老年高血压的治疗进展

    流行病学资料显示,65岁以上老年人中约2/3患有高血压[1].老年人高血压不仅发病率高,且为老年人心血管事件重要的危险因素,常伴更高的病死率与病残率.近年来,一些随机、双盲、多中心、安慰剂对照的临床试验的证据表明,积极降压治疗可显著降低老年高血压患者脑卒中、心血管事件及老年痴呆的发生率及死亡率.

    作者:姜馨;吕卓人 刊期: 2005年第11期

  • 老年人肾脏病变后腹腔镜手术21例临床分析

    目的评价老年肾脏病变后腹腔镜手术的临床应用价值.方法回顾性比较、分析21例老年人行后腹腔镜肾脏病变手术和31例非老年组的临床资料.结果老年人行后腹腔镜手术并存病显著高于非老年组(P<0.001);两者平均手术时间、平均术后住院天数及中转开放手术率、术中出血量、术后并发症均无显著性差异(P>0.05).结论后腹腔镜肾脏病变手术对老年患者是安全可靠的,但对老年患者应把握手术时机,严格掌握手术适应证,积极做好围手术期的处理.

    作者:陈岐辉;李付彪;姜凤明;王春喜;卢绩;施刚 刊期: 2005年第11期

  • 鼻中隔矫正术治疗老年人顽固性鼻出血

    临床中发现许多老年鼻出血患者除患高血压、动脉粥样硬化等多种疾病外,同时多患鼻中隔偏曲,易致严重的反复鼻出血.由于鼻中隔偏曲,特别是存在骨嵴或骨棘时,常不能进行有效的充填,且反复出血多次充填等处置时,引起黏膜损伤、溃疡、糜烂,加重了出血.本文对老年鼻出血,经治疗仍反复发作者,在鼻出血基本控制、血压稳定、全身状况特别心脏状态恢复较好、能够耐受手术情况时,行鼻中隔黏膜下矫正术,疗效满意.

    作者:关守荣;张涛;蒋秀芬;侯爱国;关莉 刊期: 2005年第11期

  • 长春市400名老年人牙体磨损的调查

    老年牙体磨损发生率高,可带来一系列并发症,如牙齿过敏症,咬合创伤,牙髓炎,根尖周炎,颞颌关节功能紊乱等.而这方面的研究和报道较少.笔者对此进行调查分析,以加强这方面的卫生宣教工作.

    作者:夏荣;明智慧;刘军 刊期: 2005年第11期

  • 英国国家服务机构与老年心血管疾病

    在英格兰,政府为≥65岁的老年人设立了国家服务机构(National Service Framework For Older People,NSFOP),其范围包括对老年人心血管及其相关疾病的管理.本文就其有关内容作一简述.

    作者:江亚文;胡中民 刊期: 2005年第11期

  • 大黄酚抗衰老作用的实验研究

    目的探讨大黄酚对小鼠抗衰老的作用.方法采用避暗实验,观察大黄酚对学习记忆的影响;通过常压耐缺氧、断头耐缺氧、亚硝酸钠中毒造成的缺氧以及负重游泳实验,观察大黄酚对小鼠缺氧及耐力的影响;以AlCl3造成急性衰老小鼠模型,观察大黄酚对小鼠血中超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果大黄酚能明显改善记忆障碍、提高小鼠耐力、并且能明显提高急性衰老小鼠血中SOD活性.结论大黄酚具有一定的抗衰老作用.

    作者:李淑娟;张力;张丹参;沈丽霞;董晓华;武海霞;李炜 刊期: 2005年第11期

  • 清热理气冲剂对实验性胆汁反流性胃炎大鼠血浆内皮素和降钙素基因相关肽的影响

    目的探讨清热理气冲剂对实验性胆汁反流性胃炎(BRG)大鼠血浆内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)的影响.方法 60只大鼠随机分为A组(中药等效剂量组),B组(中药大剂量组),C组(西沙必利等效剂量组),D组(枸橼酸铋钾等效剂量组),E组(病理对照组)和F组(正常对照组).除F组外,其余各组大鼠应用胆汁灌胃导致胃黏膜损害.2 w后分别应用清热理气冲剂等效剂量、大剂量、西沙必利、枸橼酸铋钾处理.实验第4周观察胆汁反流性胃炎胃黏膜病理形态和应用放免法测定血浆ET和CGRP含量.结果 F组可见黏膜下层充血水肿,胃小凹增生,肠上皮化生,炎性细胞浸润等,而A组和B组胃黏膜组织形态显著改善.F组电镜观察到胃黏膜细胞间的紧密连接受损,线粒体肿胀,粗面内质网扩张,微绒毛变短或丢失,A组和B组的超微结构明显的改善.A组和B组血浆ET明显低于E组(P<0.01).A组和B组血浆CGRP明显高于E组(P<0.01).结论清热理气冲剂可以减轻胃黏膜损伤,通过影响血浆ET和CGRP相关肽含量而达到治疗BRG目的.

    作者:韩俊岭;姚树坤;张瑞星 刊期: 2005年第11期

  • 新型双酶葡萄糖生物传感器的制备及其应用

    目的探讨血清葡萄糖检测新的溶胶-凝胶电化学生物传感器的制备方法. 方法将含有葡萄糖氧化酶的聚吡咯薄膜修饰到含有辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和媒介体的碳陶瓷电极表面,发展了一种新型双酶安培检测葡萄糖传感器.结果双酶传感器对葡萄糖检测的线性范围是8.0×10-5 ~1.3×10-3 mol/L,其检测灵敏度为1.11 μA ·mmol-1· L-1(r=0.998,n=8).该法与葡萄糖分光光度法(全自动分析仪)相比无显著性差异(P>0.05).结论在这种传感器的异相双层结构中,各种酶均保持了良好的生物活性,而且所得传感器也具有良好的抗干扰能力以及对底物检测的高灵敏度.这种方法有望于将各种H2O2 生成酶与HRP相结合,制备具有高选择性的其他生物传感器.

    作者:张雯艳;许舒野;潘维平;李凯;赵贺春 刊期: 2005年第11期

  • 血浆B型钠尿肽对高血压病左心室重构的影响

    目的初步观察高血压不同左心室构型与血浆B型钠尿肽水平的关系,探讨高血压病左心室重构的可能机制.方法 150例未经正规治疗的高血压患者根据超声心动图检查结果分为4个亚组: (1)正常构型组(29例);(2)向心性重构型组(44例);(3)向心性肥厚型组(42例);(4)离心性肥厚型组(35例),另设对照组(30例).干式快速免疫荧光法测定BNP浓度.结果 (1)高血压病组的BNP水平显著高于正常对照组[(80±46) pg/ml,(53±29) pg/ml,P<0.05)];向心性与离心性肥厚组的BNP水平均明显升高,且显著高于其他三组(P<0.05),但两肥厚组间无统计学差异(P>0.05);高血压正常构型与向心性重构型组的BNP水平虽高于正常对照组,但无统计学差异(P>0.05).(2)血浆BNP与左室质量指数(LVMI)、左心室室壁相对厚度(RWT)、室间隔厚度(IVST)和左室后壁舒张末期厚度(LVPWT)呈显著正相关.结论 BNP参与高血压病左心室重构形成,BNP水平可为高血压病左室肥厚的诊断和逆转提供客观的指标.

    作者:林文辉;王齐增;周仁芳;马湘俊;林斌;王迤凡 刊期: 2005年第11期

  • 粉防己碱对喹啉酸损伤海马神经元MDA、NOS及ATP的影响

    目的探讨粉防己碱(Tet)对喹啉酸(QA)诱导损伤的原代海马神经元丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)及Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响.方法采用海马神经元原代培养,生化法检测QA损伤后海马神经元MDA含量、NOS及Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性并观察Tet对损伤后海马神经元上述指标的影响.结果与模型组相比,Tet(10-6 和10-7 mol/L)能明显降低QA损伤后原代海马神经元MDA含量及NOS活性,增加Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(P<0.01 或0.05).结论 Tet能浓度依赖性地明显降低QA损伤后原代海马神经元MDA含量及NOS活性,增加Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,可能参与了其对兴奋毒导致的海马神经元损伤的保护作用.

    作者:朱丽霞;董志;廖红;何百成;肖艳丽 刊期: 2005年第11期

  • 卒中后抑郁的治疗及其对神经功能影响的观察

    目前,国内外学者对卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)日益重视.我们对PSD患者应用纯植物抗抑郁药物--路优泰治疗,并进行神经功能恢复情况、抑郁状态改善情况及副作用的观察.

    作者:孙肖爽 刊期: 2005年第11期

  • 阿托伐他汀对氧化低密度脂蛋白诱导的内皮基质金属蛋白酶-1表达的影响

    目的探讨不同浓度的阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)基质金属蛋白酶-1(MMP-1)mRNA表达的影响.方法体外培养人脐静脉内皮细胞,待细胞生长到融合状态时加人oxLDL(100 μg/ml),作用24 h后分别加入不同浓度的阿托伐他汀(1~30 μmol/L),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定MMP-1 mRNA的表达.结果 ox-LDL可诱导HUVECs MMP-1 mRNA的表达;不同浓度的阿托伐他汀可抑制ox-LDL诱导的MMP-1 mRNA的表达,并呈浓度依赖性(1、10及30 μmol/L)(均P<0.05).结论阿托伐他汀可抑制ox-LDL诱导的HUVECs MMP-1 mRNA的表达,并呈浓度依赖性;具有抗炎作用,其机制可能与抑制MMP-1的表达有关.

    作者:姜立清;胡大一;庞文跃 刊期: 2005年第11期

  • 谷氨酰胺对老年恶性梗阻性黄疸患者可溶性白细胞介素2受体的影响

    目的探讨免疫营养剂谷氨酰胺(Glutamine,Gln)对老年恶性梗阻性黄疸患者围手术期可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)的影响.方法选择经手术治疗的老年恶性梗阻性黄疸患者30例,随机分为常规治疗组(R组)和谷氨酰胺组(G组)各15例,另取15例单纯性胆囊炎患者血清作为对照组(C组).G组于术前1 d至术后7 d每日静脉补充丙氨酸谷氨酰胺注射液100 ml,并分别于术前1 d,术后7、14、21 d采静脉血,采用ELISA法测定血清sIL-2R水平,观察组间的差别.结果 R组及G组sIL-2R水平较C组明显升高(P<0.01),术后7d时明显高于术前(P<0.01),G组于术后14 d时sIL-2R水平接近术前,而R组则于术后21 d时达到术前水平,二者21 d时sIL-2R水平差异显著(P<0.01).结论谷氨酰胺能够降低梗阻性黄疸患者sIL-2R水平,改善机体免疫状态.

    作者:韩刚;宫路路;韩喜春 刊期: 2005年第11期

  • 老年冠心病合并高血压患者血管内皮功能的改变

    目的探讨老年冠心病合并高血压患者血管内皮功能的改变.方法将90例冠心病患者分组:52例为合并高血压病组,其中老年组(A组)35例及非老年组(B组)17例;38例为非高血压组,其中老年组(C组)25例及非老年组(D组)13例.测定血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)等,测肱动脉血压SBP、DBP,采用高分辨超声检测肱动脉基础动脉内径(D0)、内皮依赖性血流介导的舒张功能(FMD)、非内皮依赖性硝酸甘油介导的舒张功能(NID).结果 A组与B组、C组与D组、A组与C组、B组与D组的FMD、ET、NO 有显著性差异(P<0.01~P<0.05).各组D0、NID无显著性差异(P>0.05).FMD与 NO呈正相关(P<0.01);FMD与ET、SBP、DBP、TC、LDL呈负相关(P<0.01);SBP、DBP与ET呈正相关(P<0.01);SBP、DBP与NO呈负相关(P<0.01).结论老年冠心病患者存在显著的内皮功能障碍,高血压加重冠心病患者的内皮功能障碍,FMD与 NO、ET可作为反映冠心病和高血压者血管内皮功能的无创指标.

    作者:陈雯;郭进;王风;赵毅兰;王小燕;焦伟 刊期: 2005年第11期

  • 不同的脂肪酸对人血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

    目的了解游离脂肪酸(FFAs)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)凋亡及生长周期的影响.方法用不同种类,不同浓度的FFAs培养人血管内皮细胞(VEC),然后应用流式细胞术(FCM)对培养的人VEC生长周期及细胞凋亡进行分析.结果饱和脂肪酸(SFA)(C16:0,C18:0,C24:0),使培养的人VEC生长受到抑制,随浓度升高细胞凋亡率升高;不饱和脂肪酸(USFA)(C18:1,C18:2),当低浓度时,VEC凋亡率较低(P>0.05,P>0.01),而当达400或600 μmol/L时凋亡率升高(P<0.05,P<0.01).结论 SFA对培养的人VEC具有抑制增殖及诱导凋亡的作用.低浓度USFA对VEC凋亡及生长周期的影响不大,但高浓度时,其诱导凋亡的作用增强.

    作者:张文杰;史英钦;宋光耀;王智华;张咏梅 刊期: 2005年第11期

  • 老年人心肌梗死与血管紧张素原基因T174M多态性关系

    目的探讨血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)基因T174M变异与老年人心肌梗死(MI)的发病关系. 方法采用聚合酶链反应(PCR)、限制性片段长度多态性(RFLP)分析,对55例呈MI患者和60例无冠心病证据的对照组(老年人)进行AGT基因T174M等位基因检测.结果 MI患者AGT基因174MM型(7.27%)和M174等位基因(16.36%)的频率显著高于健康对照组(分别为1.67%和9.17%,χ2=7.55,P=0.022,χ2=5.79,P=0.016),经校正冠心病的主要危险因素后,AGT基因174MM仍可显著增加心肌梗死发生的危险性(比数比3.66,P=0.018).结论 AGT基因T174M可能是老年人MI发病的重要危险因素之一.

    作者:宁树成;张岸平;沈海娥;李占清;伊雪 刊期: 2005年第11期

  • 老年人睡眠呼吸紊乱是脑血管病不可忽视的危险因素

    目的探讨老年患者睡眠呼吸紊乱(SRBD)与脑血管病(CVD)的关系.方法用多导睡眠图对32例老年CVD患者和43例性别、年龄和体重指数与CVD组匹配且神经系统正常者进行研究.结果 CVD组中SRBD发病率明显增高,呼吸紊乱指数、血氧饱和度(SaO2)减低均显著大于对照组,平均和低SaO2低于对照组,低氧血症持续时间也长于对照组.CVD组睡前、醒后和平均血压均明显高于对照组,SRBD对CVD的危险性较大(OR值为6.85).结论老年人SRBD是CVD重要的危险因素之一.

    作者:彭凯润;杨红军;刘雁 刊期: 2005年第11期

  • 低剂量X射线照射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响

    目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响.方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平.结果 D1(75 mGy)、D2(4Gy)照射后,小细胞肺癌细胞的p53、Bax的 mRNA表达呈上升趋势,Bcl-2的mRNA表达呈下降趋势,但与假照组(0 mGy)比较,无明显差异;D1+D2组的p53、Bax的mRNA表达明显增多,Bcl-2 mRNA表达显著下降,与假照组(0 mGy)比较有统计学差异(P<0.05).结论 LDR在一定程度上可能上调了小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达,下调了Bcl-2 mRNA的表达,同时对其后的大剂量照射有协同作用.

    作者:姜宏宇;王冠军;丁艳华 刊期: 2005年第11期

  • 玉米须对老年小鼠细胞免疫功能的影响

    目的研究玉米须水煎剂及粗多糖对老年小鼠细胞免疫功能的影响.方法用称重法测定小鼠胸腺指数,间接荧光免疫法测量脾脏T淋巴细胞亚群,放射免疫测定法测量血清IL-2含量.以玉米须水煎剂及粗多糖灌胃老年小鼠30 d,观测其对老年小鼠上述指标的影响.结果老年小鼠模型组胸腺指数下降,脾脏T淋巴细胞亚群比例失调,血清IL-2含量下降;与老年小鼠模型组比较,药物治疗组胸腺指数升高,脾脏T淋巴细胞亚群比例由失衡恢复到平衡,血清IL-2含量提高.玉米须水煎剂与粗多糖对上述指标的影响无差别.结论玉米须有恢复老年小鼠细胞免疫功能的作用,玉米须水煎剂中发挥免疫增强作用的成份为粗多糖.

    作者:鲁彦;吴绍宇;姚嵩坡;祝丽玲;赵红宇;王明富;赵岩;周宪君 刊期: 2005年第11期

  • 不稳定型心绞痛血清瘦素水平的变化及冠状动脉支架置入术对其影响

    目的探讨瘦素在不稳定型心绞痛(UAP)患者中的作用及经皮冠脉支架置入术(PISI)对其影响.方法采用酶联免疫法测定UAP患者及PISI后6、24、48 h血清瘦素水平.结果 UAP患者血清瘦素水平明显高于对照组(P<0.05),PISI后6、24、48 h血清瘦素水平明显高于非PISI组(P<0.05),多支血管支架组血清瘦素水平稍高于单支血管支架组,统计学无显著差异(P>0.05).结论瘦素参与了UAP病理过程,PISI后给予相应治疗降低瘦素水平是必要的.

    作者:李树岩;费瑜;刘铁成;杨艳秋 刊期: 2005年第11期

中国老年学杂志

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主管:中国老年学学会

主办:中国老年学学会 吉林省卫生厅