万洪泉;庞治兴;刘畅
目的:探讨日本刺沙蚕纤溶酶(NJF)的适反应温度和适反应pH 值以及金属阳离子和蛋白酶抑制剂对酶活性的影响,确定NJF的酶学分类.方法:采用偶氮酪蛋白(azocasein)水解法测定NJF的适温度及适pH 值;利用10种金属阳离子(Na+、K+、Cu2+、Ca2+、Zn2+、Co2+、Fe2+、Fe3+、Al3+和Hg2+)确定金属离子对NJF酶活性的影响;采用9种蛋白酶抑制剂(PMSF、EDTA、EGTA、β-巯基乙醇、苯甲脒、碘乙酸、抑肽酶、胃酶抑素A和大豆胰蛋白酶抑制剂)确定NJF的蛋白酶分类.结果:NJF具有较宽的热稳定性及pH稳定性范围,在40~80℃及pH7~11范围内有较好的稳定性,NJF酶适温度为60℃,适pH值为9;Hg2+能够强烈地抑制NJF的酶活性,Cu2+具有较弱的抑制作用,而其他金属阳离子对酶活性无明显抑制作用;NJF的酶活性能被典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF完全抑制.结论:NJF是一种典型的丝氨酸蛋白酶.
作者:张连芝;王少华;邓志会;薄其青;葛鑫;洪敏 刊期: 2011年第02期
目的:对大肠杆菌表达的放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白LTB-FAP进行提取和纯化,为其用于牙周病的治疗提供理论依据.方法:将重组质粒pET28a/LTB和pET28a/LTB-FAP分别转化到大肠杆菌中进行表达,通过超声裂解法获得以包涵体形式表达的重组外源蛋白LTB-FAP;用2,4,6和8 mol·L-1尿素缓冲液对重组蛋白进行洗涤、溶解;然后用阴离子交换和凝胶过滤柱层析对重组蛋白进行纯化,采用薄层扫描仪对蛋白纯度进行测定.结果:目的包涵体蛋白经过3次4 mol·L-1尿素洗涤,6 mol·L-1尿素溶解后,经薄层扫描可获得纯度为60%的目的蛋白;经离子交换层析纯化,蛋白纯度可达约75%;Sepharose 6B行凝胶过滤层析获得了纯度可达90%的重组蛋白LTB-FAP.结论:阴离子交换和凝胶过滤柱层析的方法可提取、纯化重组蛋白LTB-FAP,获得的LTB-FAP可以用于免疫机体.
作者:李毅;郭学军;杨涛;冯书章;孙宏晨 刊期: 2011年第02期
2009 年5月-2010年10月本文作者对100例手足口病患儿应用喜炎平联合利巴韦林治疗, 疗效满意,现报道如下.1 临床资料
作者:郑元胜;冷艳秋 刊期: 2011年第02期
目的:探讨RNA干扰技术沉默葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因对人卵巢癌细胞耐药性的影响,阐明GRP78基因沉默逆转肿瘤细胞耐药性的生物学机制.方法:构建pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒,脂质体介导转染至SKOV3/DDP细胞;RT-PCR和Western blotting法检测GRP78基因的蛋白的表达;Western blotting法检测caspase-4和caspase-3蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:转染GRP78 siRNA重组质粒的SKOV3/DDP细胞GRP78基因和蛋白表达较转染空质粒组明显降低(P<0.05);加用顺铂后,转染GRP78 siRNA重组质粒细胞组较未转染GRP78 siRNA重组质粒细胞组caspase-4和caspase-3表达明显增加(P<0.05),细胞凋亡率也明显增加(P<0.05).结论:抑制GRP78基因表达能通过上调caspase-4和caspase-3表达及增加顺铂诱导的SKOV3/DDP细胞凋亡率,降低SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性.
作者:范丽梅;张立会;崔松花;崔满华 刊期: 2011年第02期
目的:探讨细胞黏附分子唾液酸化Lewis-X抗原(SLeX)和CD24在喉鳞状细胞癌组织中的表达,阐明其在喉鳞状细胞癌发生发展中的作用.方法:采用免疫组织化学方法分别检测42例喉鳞状细胞癌患者的42个原发灶、24个相应癌旁组织及20例睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)手术患者的咽部正常黏膜组织中SLeX和CD24的表达情况.结果:喉癌组织、癌旁组织及对照正常黏膜组织中SLeX阳性表达率分别为71.4%、37.5%和30.0%;强阳性表达率分别为50.0%、8.3%和5.0%.CD24的阳性表达率分别为64.3%、33.3%和25.0%;强阳性表达率分别为35.7%、4.2%和0.0%.3组间两两比较,喉癌组织与癌旁组织、正常黏膜组织阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.01);癌旁组织与正常黏膜组织阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05).SLeX、CD24强阳性表达与颈部淋巴结转移情况、临床分期及组织病理学分级相关(P<0.05).SleX和CD24在喉癌组织中的阳性率呈显著正相关关系(r=0.695,P<0.05).结论:SLeX及CD24蛋白表达与喉鳞状细胞癌的发生发展密切相关,其检测对喉癌的生物治疗和预测预后具有一定的临床意义.
作者:李光宇;姜晓丹;孟粹达;高鸽;朱冬冬 刊期: 2011年第02期
1 临床资料1.1 一般资料 2009年3月-2010年3月在本院门诊就诊的睡眠障碍患者122例,均符合<中国精神疾病分类方案与诊断标准>(CCND-2-R)中关于睡眠障碍的诊断标准,其中男性76例,女性46例,年龄22~73岁,平均年龄(45.2±5.4)岁,病程1~15个月.所有患者每晚入睡困难,每晚醒2次以上,每晚总睡眠时间<6 h,伴有睡眠不深、多梦等睡眠障碍表现,白天困倦、工作效率下降.所有患者均无心、肺、肾等功能障碍及严重基础性疾病,无服用抗精神病药物病史,无酒石酸唑吡坦片用药禁忌,排除妊娠期或哺乳期妇女.
作者:樊文萍 刊期: 2011年第02期
1 临床资料1.1 一般资料 2009年9月-2010年5月本科术前通过肠镜检查诊断为直肠癌的患者29例,采用腹腔镜直肠癌根治术治疗(腹腔镜组),其中男性17例,女性12例,年龄39~67岁,平均51岁.随机抽取同期术前通过肠镜检查诊断为直肠癌的患者29例,采用开腹直肠癌根治术(开腹组),其中男性15例,女性14例,年龄在36~70岁,平均年龄52岁,术后均进行病理检查.两组患者的性别、年龄及病理类型比较差异无统计学意义(P>0.05).
作者:李博 刊期: 2011年第02期
1 资料与方法1.1 一般资料 本院2010年6月-2010年8月接诊的门诊患者新鲜尿液标本40份.1.2 检测方法 ①精密度试验:取新鲜尿液标本2份,尿液总蛋白浓度分别为样本Ⅰ160mg·L-1和样本Ⅱ560mg·L-1,做日内精密度试验.②亚硝酸盐干扰试验:40份不同总蛋白浓度尿液标本分为4组.第1组浓度约135mg·L-1,第2组浓度约300 mg·L-1,第3组浓度约450mg·L-1,第4组浓度约600 mg·L-1,每组尿液标本各10份,每份标本分6管,每管2mL尿液,分别加入6个不同剂量的亚硝酸盐10 μL,其浓度分别为0、50、100、200、400和800 μmol·L-1.
作者:张艳华 刊期: 2011年第02期
目的:对比研究免疫组织化学方法(IHC)检测乳腺癌HER2蛋白表达和荧光原位杂交技术(FISH)检测HER2基因状态的一致性,并评价其临床意义.方法:采用IHC法及FISH法分别检测77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本的HER2蛋白表达和HER2基因状态,并进行对比分析.结果:77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本用IHC检测HER2蛋白表达阳性者37例,占总数的48.05%(37/77);表达阴性者40例,占51.95%(40/77).FISH检测HER2基因扩增32例,占41.56%(32/77);基因非扩增45例,占58.44%(45/77).37例HER2蛋白为阳性的患者中,HER2基因扩增30例,符合率为81.08%(30/37);40例HER2蛋白为阴性的患者中,HER2基因非扩增38例,符合率为95.00%(38/40).两种方法检测结果比较差异无统计学意义(χ2=1.78,P=0.1824).Kappa检验结果,κ=0.7647,表明一致性较好.结论:IHC检测乳腺癌HER2蛋白与FISH检测HER2基因结果一致性较高.
作者:邵飞飞;康丽花;刘敏;白晶;宋艳秋 刊期: 2011年第02期
目的:了解中国东北吉林省德惠市城乡居民高血压、糖尿病(DM)、血脂紊乱、酒精性肝病(ALD)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、代谢综合征(MS)及肥胖(Obesity)等9种非传染性慢性疾病的流行病学现状,并对这些慢性病危险因素进行分析.方法:采用分层抽样方法,对德惠市11个居委会和9个村共6 043人进行问卷调查和体格检查.采用多因素Logistic回归分析对各疾病的相关危险因素进行分析.结果:东北地区德惠城乡居民的高血压、DM、血脂紊乱、ALD、NAFLD、MS、超重和中心型肥胖的患病率分别为28.67%、4.82%、51.00%、3.74%、15.5%、21.54%、58.22%和36.67%;不同疾病患病率性别间比较有差异,高血压患病率男性多于女性(P<0.001),中心性肥胖、血脂紊乱、MS和NAFLD患病率女性大于男性(P<0.05).高龄(OR=1.04,95%CI为1.03~1.05)、脂肪肝(OR=19.42,95%CI为11.62~32.4)、高血糖(OR=1.15,95%CI为1.06~1.26)、高胆固醇血症(OR=1.38,95%CI为1.19~1.59)、高甘油三酯血症(OR=1.32,95%CI为1.1~1.49)和高体重指数(OR=1.42,95%CI为1.3~1.47)是非传染性慢性病的主要危险因素.结论:中国东北部地区德惠市部分非传染性慢性病的发病率较高,且随着年龄的增长患病率逐渐增高;慢性病的发病和进展与本地区的生活、饮食习惯、经济水平、教育程度、地区差异有明显相关性.
作者:石晓东;魏琪;何淑梅;陶育纯;孙捷;牛俊奇 刊期: 2011年第02期
短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack,TIA)是脑血管病的一种,发病急、恢复快,一般不留任何后遗症,但有少部分TIA短期内可发展至脑梗死.本文作者通过对100例TIA发展至脑梗死患者的临床资料进行了分析,探讨由TIA发展至脑梗死的相关因素.
作者:闫俊杰;韩珂;姚永华 刊期: 2011年第02期
目的:观察小干扰RNA(siRNA)对结肠癌相关基因PTEN表达的抑制作用及其对结肠癌细胞增殖能力的影响.方法:构建携带有针对PTEN基因序列的siRNA真核绿色荧光表达载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4,脂质体法转染入结肠癌HCT-8细胞(分别为p1、p2、p3和p4组),同时设转染阴性对照质粒组(p5组)和亲本细胞组(p6组),实时 PCR方法检测PTEN mRNA表达,MTT法分析细胞增殖活性变化.结果:通过荧光显微镜观察计数,细胞转染率为58%.实时 PCR方法检测结果显示,siRNA 重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4的抑制率分别为48.3%、76.5%、29.4%和61.2%,与p6组比较差异均有统计学意义(P<0.05).MTT结果表明,细胞增殖抑制能力明显增强.结论:PTEN基因在肿瘤的发生发展中可能起到一定的作用.
作者:吕强;唐亮;李建华;宫鹏涛;徐晓芳;田甜;李泽中;雒伟伟;邢沈阳;张西臣;高久春 刊期: 2011年第02期
目的:探讨炎症牙髓中巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)的表达,揭示MIP-1α在牙髓炎发生及发展中的可能作用.方法:选择正常牙髓组织及炎症牙髓组织各4例,采用HE染色观察正常牙髓组织及牙髓炎牙髓组织形态学改变,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测正常牙髓组织及牙髓炎牙髓组织中MIP-1α的表达.结果:正常牙髓组织镜下可见成纤维细胞、胶原纤维、毛细血管及组织细胞;炎症牙髓组织可见血管扩张充血,淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞和中性粒细胞浸润,受损区可见毛细血管增生和胶原纤维的形成.正常牙髓组织中MIP- 1α mRNA表达率为0;而炎症牙髓组织中MIP-1α mRNA表达率为100%,各例相对表达量分别为1.07、1.11、1.21和0.96.经确切概率法分析,炎症牙髓与正常牙髓组织中MIP-1α mRNA水平比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:MIP-1α在正常牙髓组织中无表达,而在炎症牙髓组织中有表达,MIP-1α参与了牙髓的炎症反应.
作者:李男男;张志民;王成坤;王金蕊;孟秀萍 刊期: 2011年第02期
1 临床资料患儿,男,11岁.因反复左眼突出2年余入院.患儿2年前发现左眼突出,逐渐明显,入院前2个月曾就诊于本院眼科,诊断为眼眶异物行手术治疗,病理显示肿物呈灰褐色,切面灰白质硬.镜下示:左眼眶内泪腺导管周围有大量急、慢性炎细胞浸润,纤维组织增生,嗜酸性粒细胞丰富,有淋巴滤泡形成.术后患儿左眼恢复正常,给予球后注射激素治疗.
作者:陈鹏;许忠;田昕;张思瑾;郑百红;郭楠;刘锋 刊期: 2011年第02期
目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)和组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义,为进一步明确UⅡ致纤维化的机制提供实验依据.方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=8),采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型.术后第2周末处死各组大鼠.采用HE和Masson染色观察肾组织病理学改变;采用免疫组化法检测肾间质中UⅡ、tTG和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用RT-PCR技术检测UⅡ和tTG mRNA的表达水平.结果:HE和Masson染色可见,模型组大鼠肾间质增宽,胶原纤维明显增生.免疫组化显示,假手术组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管、肾间质区有少量表达,肾小球内除UⅡ有微量表达外,tTG和FN无阳性表达;模型组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管和肾间质区的表达信号较假手术组明显增强(P<0.01),模型组大鼠UⅡ的蛋白表达与FN的蛋白表达呈正相关关系(r=0.724,P<0.05).模型组UⅡ和tTG的基因表达明显高于假手术组(P<0.05),模型组大鼠肾内UⅡ基因和蛋白表达与tTG基因和蛋白表达均呈正相关关系(r=0.647,P<0.05;r=0.787,P<0.01).结论:UⅡ和tTG可能共同参与肾间质纤维化,UⅡ的致纤维化作用可能部分是通过tTG的活化而实现的.
作者:曲萌;王丹;李才;李相军;苗春生;李蕴潜 刊期: 2011年第02期
1 临床资料2009年6月-2009年12月来本站就诊的骨关节炎引起的膝部、肩部、髋部及足跟疼痛患者20例,年龄45~80岁,皆为女性.病程1个月~2年.膝关节疼痛13例,肩关节疼痛4例,髋关节疼痛2例,足跟疼痛1例.患者疼痛程度中度,NRS评分4~6分,均有相应程度的关节功能障碍.患者在行脉冲磁治疗前皆服用过消炎止痛药,或外涂消炎止痛乳剂及敷贴活血止痛类膏药,但止痛效果不甚满意.
作者:杨锐利 刊期: 2011年第02期
目的:探讨五味子多糖对人甲状腺癌SW579细胞株的生长抑制作用及其机制.方法:48只成年雄性Wistar大鼠分为阴性对照组和药物组,阴性对照组予以生理盐水,药物治疗组予以不同剂量的五味子多糖,分别提取其血清.SW579细胞分为空白组、阴性对照组和药物组.空白组为15%小牛血清的RPMI-1640培养液,阴性对照组细胞加入阴性组大鼠的纯化血清,药物组分别加入不同浓度(100、200 和 400 mg·kg-1)的含药血清,AO/EB荧光染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况,MTT法检测细胞增殖情况,Western blotting检测细胞survivin的表达.结果:流式细胞术结果显示,低、中和高剂量药物组细胞凋亡率为8.63%、35.63%和38.32%,明显高于空白对照组和阴性对照组细胞凋亡率(4.23%和4.10%)(P<0.01),并随剂量增加而增加.阴性对照组细胞生长抑制率为(0.12±0.06)%,低、中和高剂量药物组细胞生长抑制率为(27.51±1.62)%、(34.69±0.79)% 和(45.83±1.33)%,药物组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).Western blotting 检测低、中、高剂量药物组细胞survivin的表达明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01).结论:五味子多糖能有效抑制人甲状腺癌细胞株SW579中survivin基因表达,诱导SW579细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖.
作者:许珂玉;肖建英 刊期: 2011年第02期
目的:观察不同酸蚀方法对氟斑牙粘结托槽的脱落率的影响,筛选一种降低氟斑牙托槽脱落率的临床可行的酸蚀方法.方法:选择14例中度氟斑牙患者的226颗牙齿为研究对象,按左右分为28个区,随机分为4组(每组7个区):分别为酸蚀1 min组(n=56)、酸蚀2 min组(n=57)、酸蚀3 min组(n=57)和酸蚀2次组(n=56),记录第4、8和12周托槽脱落率和托槽脱落后牙面上残留的粘接剂残留指数(ARI).结果:酸蚀2次组和酸蚀2 min组的托槽脱落率明显低于酸蚀1 min组和3 min组(P<0.05);ARI高于酸蚀1 min组和3 min组(P<0.05).酸蚀2次组的托槽脱落率低于酸蚀2 min组,但差异无统计学意义(P>0.05);ARI高于酸蚀2 min组,但差异亦无统计学意义(P>0.05).各组前磨牙脱落率均明显高于前牙(P<0.05),酸蚀2次组的前磨牙脱落率低于其他各组(P<0.05).结论:酸蚀2 min能明显降低氟斑牙托槽脱落率,2次酸蚀比1次酸蚀托槽脱落率降低,尤其是前磨牙托槽脱落率明显降低.
作者:史瑞新;朱宪春;陈远萍;周延民 刊期: 2011年第02期
本文作者应用磷酸肌酸钠(creatine phosphate sodium,CP)治疗窒息新生儿缺氧缺血性心肌损伤,并与参附注射液治疗进行对比,现报道如下.1 临床资料
作者:李珍 刊期: 2011年第02期
妊娠并发子宫肌瘤的发病率约占子宫肌瘤患者的0.5%~1.0%,占妊娠者的0.3%~1.2%.剖宫产同时进行肌瘤剔除一直存有争议.近年来已有研究证实剖宫产同时剔除子宫肌瘤的可行性.现对本院92例剖宫产同时剔除子宫肌瘤的患者进行回顾性分析,报道如下.
作者:陈清冉;邹海琼;孟龙 刊期: 2011年第02期