学术投稿

RNA干扰PTEN基因对HCT-8细胞增殖能力的影响

吕强;唐亮;李建华;宫鹏涛;徐晓芳;田甜;李泽中;雒伟伟;邢沈阳;张西臣;高久春

关键词:PTEN, 人结肠癌HCT-8细胞, 小于扰RNA
摘要:目的:观察小干扰RNA(siRNA)对结肠癌相关基因PTEN表达的抑制作用及其对结肠癌细胞增殖能力的影响.方法:构建携带有针对PTEN基因序列的siRNA真核绿色荧光表达载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4,脂质体法转染入结肠癌HCT-8细胞(分别为p1、p2、p3和p4组),同时设转染阴性对照质粒组(p5组)和亲本细胞组(p6组),实时 PCR方法检测PTEN mRNA表达,MTT法分析细胞增殖活性变化.结果:通过荧光显微镜观察计数,细胞转染率为58%.实时 PCR方法检测结果显示,siRNA 重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4的抑制率分别为48.3%、76.5%、29.4%和61.2%,与p6组比较差异均有统计学意义(P<0.05).MTT结果表明,细胞增殖抑制能力明显增强.结论:PTEN基因在肿瘤的发生发展中可能起到一定的作用.
吉林大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 日本刺沙蚕纤溶酶的酶学性质及其分类

    目的:探讨日本刺沙蚕纤溶酶(NJF)的适反应温度和适反应pH 值以及金属阳离子和蛋白酶抑制剂对酶活性的影响,确定NJF的酶学分类.方法:采用偶氮酪蛋白(azocasein)水解法测定NJF的适温度及适pH 值;利用10种金属阳离子(Na+、K+、Cu2+、Ca2+、Zn2+、Co2+、Fe2+、Fe3+、Al3+和Hg2+)确定金属离子对NJF酶活性的影响;采用9种蛋白酶抑制剂(PMSF、EDTA、EGTA、β-巯基乙醇、苯甲脒、碘乙酸、抑肽酶、胃酶抑素A和大豆胰蛋白酶抑制剂)确定NJF的蛋白酶分类.结果:NJF具有较宽的热稳定性及pH稳定性范围,在40~80℃及pH7~11范围内有较好的稳定性,NJF酶适温度为60℃,适pH值为9;Hg2+能够强烈地抑制NJF的酶活性,Cu2+具有较弱的抑制作用,而其他金属阳离子对酶活性无明显抑制作用;NJF的酶活性能被典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF完全抑制.结论:NJF是一种典型的丝氨酸蛋白酶.

    作者:张连芝;王少华;邓志会;薄其青;葛鑫;洪敏 刊期: 2011年第02期

  • 表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用

    目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据.方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况.结果:成功构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,将2个载体瞬时共转染PEF;经潮酶素B筛选出Cre重组酶稳定表达的MCF-7细胞系瞬时转染pStop-eGFP,在荧光显微镜下观察2种细胞均有绿色荧光蛋白的表达.而单独转染pStop-eGFP的MCF-7细胞系和PEF均未见绿色荧光蛋白的表达.结论:重组载体Cre-pCEP4在细胞内能够表达Cre重组酶,并且表达的Cre重组酶能够识别loxP位点,删除两同向loxP间的DNA片段.

    作者:周杨;朱建国;唐小春;闫森;宋娜;张明军;李莉;欧阳红生;逄大欣 刊期: 2011年第02期

  • 短暂性脑缺血发作发展至脑梗死相关因素分析

    短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack,TIA)是脑血管病的一种,发病急、恢复快,一般不留任何后遗症,但有少部分TIA短期内可发展至脑梗死.本文作者通过对100例TIA发展至脑梗死患者的临床资料进行了分析,探讨由TIA发展至脑梗死的相关因素.

    作者:闫俊杰;韩珂;姚永华 刊期: 2011年第02期

  • 中国东北地区成人非传染性慢性疾病的流行病学调查及影响因素分析

    目的:了解中国东北吉林省德惠市城乡居民高血压、糖尿病(DM)、血脂紊乱、酒精性肝病(ALD)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、代谢综合征(MS)及肥胖(Obesity)等9种非传染性慢性疾病的流行病学现状,并对这些慢性病危险因素进行分析.方法:采用分层抽样方法,对德惠市11个居委会和9个村共6 043人进行问卷调查和体格检查.采用多因素Logistic回归分析对各疾病的相关危险因素进行分析.结果:东北地区德惠城乡居民的高血压、DM、血脂紊乱、ALD、NAFLD、MS、超重和中心型肥胖的患病率分别为28.67%、4.82%、51.00%、3.74%、15.5%、21.54%、58.22%和36.67%;不同疾病患病率性别间比较有差异,高血压患病率男性多于女性(P<0.001),中心性肥胖、血脂紊乱、MS和NAFLD患病率女性大于男性(P<0.05).高龄(OR=1.04,95%CI为1.03~1.05)、脂肪肝(OR=19.42,95%CI为11.62~32.4)、高血糖(OR=1.15,95%CI为1.06~1.26)、高胆固醇血症(OR=1.38,95%CI为1.19~1.59)、高甘油三酯血症(OR=1.32,95%CI为1.1~1.49)和高体重指数(OR=1.42,95%CI为1.3~1.47)是非传染性慢性病的主要危险因素.结论:中国东北部地区德惠市部分非传染性慢性病的发病率较高,且随着年龄的增长患病率逐渐增高;慢性病的发病和进展与本地区的生活、饮食习惯、经济水平、教育程度、地区差异有明显相关性.

    作者:石晓东;魏琪;何淑梅;陶育纯;孙捷;牛俊奇 刊期: 2011年第02期

  • 性病门诊无症状女性患者单纯疱疹病毒2型的检测及其意义

    目的:探讨性传播疾病(STD)门诊无症状女性患者血清单纯疱疹病毒2型(HSV2)的感染情况,为预防和控制生殖器疱疹传播提供依据.方法:STD门诊732例女性患者分为无症状组(n=355)、疑似生殖器疱疹(GH)组(n=132)及不典型症状组(n=245),同时设健康对照组(n=260),采用ELISA法检测血清HSV2抗体.结果:无症状组患者HSV2抗体检出阳性率为55.8%(198/355);疑似GH组、不典型症状组及健康对照组HSV2抗体检出阳性率分别为62.9%(83/132)、57.1%(145/245)和11.9%(31/260).无症状组HSV2抗体检出阳性率显著高于健康对照组(P<0.05),但与疑似GH组和不典型症状组比较差异无统计学意义(P>0.05).在355例无症状的患者中,STD患者HSV2感染率显著高于非STD患者(P<0.05),本组感染HSV2的患者主要以20~40岁为主.结论:STD门诊女性HSV2隐性感染的比率较高,HSV2隐性感染在STD患者中更常见.

    作者:钟淑霞;李珊山;刘鹤松;郑华;邢甄月;宋洋 刊期: 2011年第02期

  • 腹腔镜直肠癌根治术29例疗效观察

    1 临床资料1.1 一般资料 2009年9月-2010年5月本科术前通过肠镜检查诊断为直肠癌的患者29例,采用腹腔镜直肠癌根治术治疗(腹腔镜组),其中男性17例,女性12例,年龄39~67岁,平均51岁.随机抽取同期术前通过肠镜检查诊断为直肠癌的患者29例,采用开腹直肠癌根治术(开腹组),其中男性15例,女性14例,年龄在36~70岁,平均年龄52岁,术后均进行病理检查.两组患者的性别、年龄及病理类型比较差异无统计学意义(P>0.05).

    作者:李博 刊期: 2011年第02期

  • 127株非发酵菌的耐药性分析

    1 资料与方法1.1 菌种来源 收集2008年6月-2010年6月本院门诊及住院患者送检的脓液、尿液、血液、胸腹水、胆汁和各种穿刺液等标本,分离的革兰阴性杆菌共280株,其中非发酵革兰阴性杆菌127株.

    作者:包东武;满永宏 刊期: 2011年第02期

  • 剖宫产同时行子宫肌瘤剔除术92例临床分析

    妊娠并发子宫肌瘤的发病率约占子宫肌瘤患者的0.5%~1.0%,占妊娠者的0.3%~1.2%.剖宫产同时进行肌瘤剔除一直存有争议.近年来已有研究证实剖宫产同时剔除子宫肌瘤的可行性.现对本院92例剖宫产同时剔除子宫肌瘤的患者进行回顾性分析,报道如下.

    作者:陈清冉;邹海琼;孟龙 刊期: 2011年第02期

  • 硒和维生素E对克山病病区粮喂饲大鼠心肌纤维化的影响

    目的:观察适时适量补充硒(Se)和维生素E(VE)对心肌纤维化和心肌重构的影响,探讨克山病病区的低Se和低VE膳食是否在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用.方法:30只Wistar 大鼠随机分为:正常对照组(Control,混合饲料喂养)、病区粮饲料组(EG,病区粮喂养)、病区粮饲料加Se组(EG+Se)、病区粮饲料加VE组(EG+VE)和病区粮饲料加Se加VE组(EG+Se+VE).喂养21 d后,取大鼠心脏,比色法测定大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;硫代巴比妥法测定血清丙二醛(MDA)含量;马松三色染色测定大鼠细胞外基质沉积情况;免疫组织化学法和Western blotting法测大鼠心肌组织中转化生长因子β(TGF- β)和结缔组织生长因子(CTGF)表达.结果:与正常对照组比较,EG组心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力下降(P<0.01),MDA含量升高(P<0.05),心肌组织胶原蛋白大量沉积,并伴有TGF-β和CTGF表达上调(P<0.01).与EG组比较,EG+Se组和EG+Se+VE组病区粮心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力均提高(P<0.01 和P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);大鼠心肌细胞外基质沉积缓解;克山病大鼠心肌TGF- β和CTGF表达下调(P<0.01).结论:低Se和低VE在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用,适时适量补充Se和VE有利于减轻和逆转过度的心肌纤维化和心肌重构.

    作者:贾春澍;陈爱军;李敏;李相军;苗春生;李希宁;任立群 刊期: 2011年第02期

  • 人脐带间充质干细胞的分离鉴定及其修复缺血缺氧脑损伤作用

    目的:研究人脐带间充质干细胞(UCMSCs)多向分化潜能,了解UCMSCs移植治疗脑缺血缺氧损伤(HIBD)大鼠的神经修复功能.方法:采用组织消化原代贴壁法分离培养人UCMSCs;取第4和10代UCMSCs进行流式细胞术检测间充质干细胞(MSCs)表面特异标志物表达;染色体分型检测染色体是否畸变;进行成神经、骨、脂诱导,了解其多向分化潜能;制备HIBD大鼠模型,穿梭箱测试对照组、HIBD细胞移植组和HIBD组大鼠的主动逃避率(AARR)和未逃避率(NARR).结果:流式细胞术结果显示,类似MSCs样细胞强表达CD29、CD44和CD105,极低表达CD34和CD45,符合UCMSCs的特征.多向分化诱导后的细胞染色和免疫荧光结果显示,UCMSCs可诱导分化为神经样细胞、脂肪细胞和成骨细胞,多次传代后仍可多向诱导,且未发生染色体畸变.穿梭箱测试提示,UCMSCs移植组大鼠在测试的第3、4和5天的AARR高于HIBD组(P<0.05).结论:UCMSCs易获取及纯化,具有多向分化潜能,多次传代功能稳定,可改善脑损伤动物的神经功能.

    作者:江伟;沈洁;史源;龚敏;瞿平;张赟;魏小平;刘友学;陈洁;李廷玉 刊期: 2011年第02期

  • 纳米SiO2颗粒在HepG2细胞中的分布及其细胞毒性

    目的:检测纳米SiO2颗粒作用于HepG2细胞后纳米颗粒的细胞摄取、分布情况及颗粒对细胞的毒性作用,初步探讨纳米颗粒的摄取、分布与细胞毒性的关系.方法:采用透射电镜(TEM)及动态光散射法检测纳米SiO2颗粒的表征;纳米SiO2颗粒作用HepG2细胞后,用荧光显微镜及TEM观察纳米SiO2颗粒的细胞摄取及细胞内分布情况;不同浓度纳米SiO2颗粒(0、25、50、100 及200 mg·L-1)作用于HepG2细胞24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,用Rhodamine123标记流式细胞术检测线粒体膜电位变化.结果:TEM结果显示,纳米SiO2颗粒呈球形,分散性好,大小均一.动态光散射法结果显示,纳米SiO2颗粒在无血清DMEM中粒径约为94 nm,分散性较好.纳米SiO2颗粒作用于HepG2细胞3 h即可进入细胞;作用24 h后,可以单一颗粒或成簇的形态分散在胞质内,并在线粒体等细胞器内沉积;不同浓度纳米SiO2颗粒作用于细胞24 h后,各组细胞存活率及线粒体膜电位较对照组均有显著下降(P<0.05),且随着剂量增加细胞存活率和线粒体膜电位降低.结论:纳米SiO2颗粒进入细胞并在细胞器中沉积,可导致线粒体等细胞器的损伤,进而产生细胞毒性作用,抑制细胞增殖.

    作者:孙磊;李阳;刘晓梅;杜忠君;金明华;孙志伟 刊期: 2011年第02期

  • 细胞黏附分子SLeX和CD24在喉鳞状细胞癌组织中的表达

    目的:探讨细胞黏附分子唾液酸化Lewis-X抗原(SLeX)和CD24在喉鳞状细胞癌组织中的表达,阐明其在喉鳞状细胞癌发生发展中的作用.方法:采用免疫组织化学方法分别检测42例喉鳞状细胞癌患者的42个原发灶、24个相应癌旁组织及20例睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)手术患者的咽部正常黏膜组织中SLeX和CD24的表达情况.结果:喉癌组织、癌旁组织及对照正常黏膜组织中SLeX阳性表达率分别为71.4%、37.5%和30.0%;强阳性表达率分别为50.0%、8.3%和5.0%.CD24的阳性表达率分别为64.3%、33.3%和25.0%;强阳性表达率分别为35.7%、4.2%和0.0%.3组间两两比较,喉癌组织与癌旁组织、正常黏膜组织阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.01);癌旁组织与正常黏膜组织阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05).SLeX、CD24强阳性表达与颈部淋巴结转移情况、临床分期及组织病理学分级相关(P<0.05).SleX和CD24在喉癌组织中的阳性率呈显著正相关关系(r=0.695,P<0.05).结论:SLeX及CD24蛋白表达与喉鳞状细胞癌的发生发展密切相关,其检测对喉癌的生物治疗和预测预后具有一定的临床意义.

    作者:李光宇;姜晓丹;孟粹达;高鸽;朱冬冬 刊期: 2011年第02期

  • 神经生长因子修复周围神经的临床疗效观察

    2007年1月-2008年2月本文作者采用神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)治疗周围神经损伤患者120例,疗效满意,现报道如下.

    作者:张涵亮;陈俊 刊期: 2011年第02期

  • 镍铬烤瓷冠修复后牙龈及龈沟液中镍和铬含量的变化

    目的:探讨镍铬烤瓷冠修复后牙龈组织和龈沟液中镍和铬含量的变化,为修复材料的选择提供参考.方法:选择镍铬烤瓷修复后牙龈增生并需行牙龈修整术者作为实验组,需要拔除第三磨牙且口内无任何修复体者为对照组,使用Whatman 3号滤纸汲取龈沟液并切取牙龈,运用电感耦合等离子体质谱法测量牙龈组织及龈沟液中镍和铬的含量.结果:实验组牙龈组织和龈沟液中的镍和铬含量均高于对照组,两组龈沟液中的铬含量比较差异有统计学意义(P<0.05),两组牙龈组织及龈沟液中的镍含量比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:镍铬烤瓷冠修复后的镍和铬离子在牙龈组织及龈沟液中沉积,对牙龈组织有影响.

    作者:沈晓艇;刘丽;章燕珍 刊期: 2011年第02期

  • 病毒性心肌炎73例临床分析

    1 临床资料1.1 一般资料 本院2005年3月-2010年7月间收治急性病毒性心肌炎73例,男性46例,女性27例,年龄18~23岁,均符合1999年全国心肌炎心肌病专题研讨会制定的诊断标准,排除其他心脏疾病、甲亢及精神因素.其中束支传导阻滞13例,1例为完全性左束支传导阻滞;室性早搏21例;心电广泛性ST-T改变17例.有11例既往患该病,其中7例已反复发病数次,且治疗效果不佳,医生接诊后行X胸片、心电图、心脏彩超、心肌酶及肌钙蛋白Ⅰ检查.

    作者:姜利杰;祝雁 刊期: 2011年第02期

  • 应用MR弥散和灌注技术分析大脑中动脉狭窄供血区血流状况的比较

    目的:探讨磁共振的动态磁敏感对比增强(DSC-MRI)技术和动脉自旋标记(ASL)方法的差异,并明确ASL方法在缺血性脑血管病患者脑血流灌注中的应用价值.方法:回顾性分析48例经磁共振血管造影(MRA)证实的一侧大脑中动脉(MCA)狭窄或闭塞的短暂性脑缺血发作(TIA)患者的影像学资料,并选择35例健康志愿者作为对照,通过ASL和DSC两种灌注加权成像(PWI)技术扫描,得到平均脑血流量(CBF)图和灌注参数图,与弥散加权成像(DWI)所得参数图比较,观察两种方法判定MCA狭窄侧脑组织血流灌注的差异.结果:ASL方法显示,患侧脑组织局部脑血流量(rCBF)为(30.4±8.2) mL·100 g-1·min-1,对侧脑组织的rCBF为(58.3±11.4)mL·100 g-1·min-1,患侧脑组织rCBF低于正常侧脑组织(P<0.05);DSC方法显示,患侧rCBF为(28.7±12.8)mL·100 g-1·min-1,对侧脑组织的rCBF为(54.2±9.5) mL·100 g-1·min-1,患侧rCBF低于正常侧脑组织(P<0.05);ASL和DSC方法检测同一血管狭窄侧脑组织的rCBF,两组rCBF的差异无统计学意义(P>0.05).ASL和DSC方法显示,健康志愿者的rCBF分别为(56.8±10.7) mL·100 g-1·min-1和(55.2±9.8) mL·100 g-1·min-1,与血管狭窄对侧的正常脑组织的rCBF两两比较差异无统计学意义(P>0.05);DWI显示狭窄动脉供血区域异常的病灶表观弥散系数(ADC)平均值为(522.3±57.2)×10-6 mm2·s-1,对侧正常脑组织的ADC平均值为(756.8±67.6)×10-6 mm2·s-1,狭窄动脉供血区域ADC平均值低于对侧正常脑组织ADC平均值(P<0.05).结论:ASL方法可以判定MCA狭窄患者的低灌注状态,弥散结合灌注扫描可以判定侧脑组织狭窄患者的缺血半暗带.

    作者:王静;周宏伟;孔博玉;程艳华;谷艳英 刊期: 2011年第02期

  • 喜炎平联合利巴韦林治疗小儿手足口病疗效评价

    2009 年5月-2010年10月本文作者对100例手足口病患儿应用喜炎平联合利巴韦林治疗, 疗效满意,现报道如下.1 临床资料

    作者:郑元胜;冷艳秋 刊期: 2011年第02期

  • 全凭静脉麻醉下脑电双频谱指数监测在术中知晓预防中的作用

    目的:探讨全凭静脉麻醉下应用脑电双频谱指数(BIS)监测术中知晓的发生情况,评价BIS监测对术中知晓的预防作用.方法:丙泊酚全凭静脉麻醉下行择期手术患者300例,随机分成A、B两组(n=150).两组患者均进行BIS监测,A组根据BIS值调控麻醉深度,确保麻醉期间BIS值<60;B组术中遮蔽BIS值,根据经验调控麻醉深度.记录两组患者麻醉诱导、手术开始、麻醉停药、手术结束、麻醉苏醒、拔管时BIS值及术中知晓的发生情况.结果:两组患者基础BIS值、诱导结束时、清醒时及拔管时BIS值比较差异无统计学意义(P>0.05),手术开始时、麻醉维持和麻醉结束时BIS值比较差异有统计学意义(P<0.05).A组无知晓病例及怀疑知晓病例.B组无知晓病例,但存在2例怀疑知晓病例,2组怀疑知晓率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:全凭静脉麻醉时采用BIS监测能够维持合适的麻醉深度,预防术中知晓的发生.

    作者:曲晓霞;麻海春;苑野;冯春生 刊期: 2011年第02期

  • RNA干扰PTEN基因对HCT-8细胞增殖能力的影响

    目的:观察小干扰RNA(siRNA)对结肠癌相关基因PTEN表达的抑制作用及其对结肠癌细胞增殖能力的影响.方法:构建携带有针对PTEN基因序列的siRNA真核绿色荧光表达载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4,脂质体法转染入结肠癌HCT-8细胞(分别为p1、p2、p3和p4组),同时设转染阴性对照质粒组(p5组)和亲本细胞组(p6组),实时 PCR方法检测PTEN mRNA表达,MTT法分析细胞增殖活性变化.结果:通过荧光显微镜观察计数,细胞转染率为58%.实时 PCR方法检测结果显示,siRNA 重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4的抑制率分别为48.3%、76.5%、29.4%和61.2%,与p6组比较差异均有统计学意义(P<0.05).MTT结果表明,细胞增殖抑制能力明显增强.结论:PTEN基因在肿瘤的发生发展中可能起到一定的作用.

    作者:吕强;唐亮;李建华;宫鹏涛;徐晓芳;田甜;李泽中;雒伟伟;邢沈阳;张西臣;高久春 刊期: 2011年第02期

  • 特异性下调GRP78基因表达对卵巢癌细胞耐药性的影响

    目的:探讨RNA干扰技术沉默葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因对人卵巢癌细胞耐药性的影响,阐明GRP78基因沉默逆转肿瘤细胞耐药性的生物学机制.方法:构建pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒,脂质体介导转染至SKOV3/DDP细胞;RT-PCR和Western blotting法检测GRP78基因的蛋白的表达;Western blotting法检测caspase-4和caspase-3蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:转染GRP78 siRNA重组质粒的SKOV3/DDP细胞GRP78基因和蛋白表达较转染空质粒组明显降低(P<0.05);加用顺铂后,转染GRP78 siRNA重组质粒细胞组较未转染GRP78 siRNA重组质粒细胞组caspase-4和caspase-3表达明显增加(P<0.05),细胞凋亡率也明显增加(P<0.05).结论:抑制GRP78基因表达能通过上调caspase-4和caspase-3表达及增加顺铂诱导的SKOV3/DDP细胞凋亡率,降低SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性.

    作者:范丽梅;张立会;崔松花;崔满华 刊期: 2011年第02期

吉林大学学报(医学版)杂志

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