学术投稿

日本刺沙蚕纤溶酶的酶学性质及其分类

张连芝;王少华;邓志会;薄其青;葛鑫;洪敏

关键词:日本刺沙蚕, 酶学性质, 丝氨酸蛋白酶, 最适pH, 最适温度
摘要:目的:探讨日本刺沙蚕纤溶酶(NJF)的适反应温度和适反应pH 值以及金属阳离子和蛋白酶抑制剂对酶活性的影响,确定NJF的酶学分类.方法:采用偶氮酪蛋白(azocasein)水解法测定NJF的适温度及适pH 值;利用10种金属阳离子(Na+、K+、Cu2+、Ca2+、Zn2+、Co2+、Fe2+、Fe3+、Al3+和Hg2+)确定金属离子对NJF酶活性的影响;采用9种蛋白酶抑制剂(PMSF、EDTA、EGTA、β-巯基乙醇、苯甲脒、碘乙酸、抑肽酶、胃酶抑素A和大豆胰蛋白酶抑制剂)确定NJF的蛋白酶分类.结果:NJF具有较宽的热稳定性及pH稳定性范围,在40~80℃及pH7~11范围内有较好的稳定性,NJF酶适温度为60℃,适pH值为9;Hg2+能够强烈地抑制NJF的酶活性,Cu2+具有较弱的抑制作用,而其他金属阳离子对酶活性无明显抑制作用;NJF的酶活性能被典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF完全抑制.结论:NJF是一种典型的丝氨酸蛋白酶.
吉林大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 特异性下调GRP78基因表达对卵巢癌细胞耐药性的影响

    目的:探讨RNA干扰技术沉默葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因对人卵巢癌细胞耐药性的影响,阐明GRP78基因沉默逆转肿瘤细胞耐药性的生物学机制.方法:构建pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒,脂质体介导转染至SKOV3/DDP细胞;RT-PCR和Western blotting法检测GRP78基因的蛋白的表达;Western blotting法检测caspase-4和caspase-3蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:转染GRP78 siRNA重组质粒的SKOV3/DDP细胞GRP78基因和蛋白表达较转染空质粒组明显降低(P<0.05);加用顺铂后,转染GRP78 siRNA重组质粒细胞组较未转染GRP78 siRNA重组质粒细胞组caspase-4和caspase-3表达明显增加(P<0.05),细胞凋亡率也明显增加(P<0.05).结论:抑制GRP78基因表达能通过上调caspase-4和caspase-3表达及增加顺铂诱导的SKOV3/DDP细胞凋亡率,降低SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性.

    作者:范丽梅;张立会;崔松花;崔满华 刊期: 2011年第02期

  • 尾加压素Ⅱ和组织型转谷氨酰胺酶在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义

    目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)和组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义,为进一步明确UⅡ致纤维化的机制提供实验依据.方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=8),采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型.术后第2周末处死各组大鼠.采用HE和Masson染色观察肾组织病理学改变;采用免疫组化法检测肾间质中UⅡ、tTG和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用RT-PCR技术检测UⅡ和tTG mRNA的表达水平.结果:HE和Masson染色可见,模型组大鼠肾间质增宽,胶原纤维明显增生.免疫组化显示,假手术组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管、肾间质区有少量表达,肾小球内除UⅡ有微量表达外,tTG和FN无阳性表达;模型组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管和肾间质区的表达信号较假手术组明显增强(P<0.01),模型组大鼠UⅡ的蛋白表达与FN的蛋白表达呈正相关关系(r=0.724,P<0.05).模型组UⅡ和tTG的基因表达明显高于假手术组(P<0.05),模型组大鼠肾内UⅡ基因和蛋白表达与tTG基因和蛋白表达均呈正相关关系(r=0.647,P<0.05;r=0.787,P<0.01).结论:UⅡ和tTG可能共同参与肾间质纤维化,UⅡ的致纤维化作用可能部分是通过tTG的活化而实现的.

    作者:曲萌;王丹;李才;李相军;苗春生;李蕴潜 刊期: 2011年第02期

  • 不同酸蚀处理方法对氟斑牙托槽脱落率的影响

    目的:观察不同酸蚀方法对氟斑牙粘结托槽的脱落率的影响,筛选一种降低氟斑牙托槽脱落率的临床可行的酸蚀方法.方法:选择14例中度氟斑牙患者的226颗牙齿为研究对象,按左右分为28个区,随机分为4组(每组7个区):分别为酸蚀1 min组(n=56)、酸蚀2 min组(n=57)、酸蚀3 min组(n=57)和酸蚀2次组(n=56),记录第4、8和12周托槽脱落率和托槽脱落后牙面上残留的粘接剂残留指数(ARI).结果:酸蚀2次组和酸蚀2 min组的托槽脱落率明显低于酸蚀1 min组和3 min组(P<0.05);ARI高于酸蚀1 min组和3 min组(P<0.05).酸蚀2次组的托槽脱落率低于酸蚀2 min组,但差异无统计学意义(P>0.05);ARI高于酸蚀2 min组,但差异亦无统计学意义(P>0.05).各组前磨牙脱落率均明显高于前牙(P<0.05),酸蚀2次组的前磨牙脱落率低于其他各组(P<0.05).结论:酸蚀2 min能明显降低氟斑牙托槽脱落率,2次酸蚀比1次酸蚀托槽脱落率降低,尤其是前磨牙托槽脱落率明显降低.

    作者:史瑞新;朱宪春;陈远萍;周延民 刊期: 2011年第02期

  • 巨噬细胞炎性蛋白1α mRNA在人炎症牙髓组织中的表达及意义

    目的:探讨炎症牙髓中巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)的表达,揭示MIP-1α在牙髓炎发生及发展中的可能作用.方法:选择正常牙髓组织及炎症牙髓组织各4例,采用HE染色观察正常牙髓组织及牙髓炎牙髓组织形态学改变,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测正常牙髓组织及牙髓炎牙髓组织中MIP-1α的表达.结果:正常牙髓组织镜下可见成纤维细胞、胶原纤维、毛细血管及组织细胞;炎症牙髓组织可见血管扩张充血,淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞和中性粒细胞浸润,受损区可见毛细血管增生和胶原纤维的形成.正常牙髓组织中MIP- 1α mRNA表达率为0;而炎症牙髓组织中MIP-1α mRNA表达率为100%,各例相对表达量分别为1.07、1.11、1.21和0.96.经确切概率法分析,炎症牙髓与正常牙髓组织中MIP-1α mRNA水平比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:MIP-1α在正常牙髓组织中无表达,而在炎症牙髓组织中有表达,MIP-1α参与了牙髓的炎症反应.

    作者:李男男;张志民;王成坤;王金蕊;孟秀萍 刊期: 2011年第02期

  • 乳腔镜与传统手术治疗乳腺疾病的效果评价

    目的:比较乳腔镜与传统手术方法治疗乳腺疾病的效果,探讨两种方法的优缺点.方法:选取本科经乳腔镜治疗的各类有代表性乳腺疾病手术患者20例,并随机选取本科同期行传统手术治疗的患者100例作为对照,对两组患者美容效果、手术时间、并发症及疗程等进行回顾性研究.结果:与传统手术比较,乳腔镜手术美容效果明显,乳腔镜患者美容满意率(95%)高于而传统手术(34%)(P<0.01);与传统手术比较,乳腔镜手术出血、积液和感染等并发症发生情况差异无统计学意义(P>0.05);但术后疼痛及组织损伤发生率低于传统手术(P<0.01),手术切口明显缩小(P<0.01),疗程缩短(P<0.05);在观察期间恶性肿瘤复发率两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:乳腔镜在乳腺疾病治疗中,美容效果突出,是一种先进的乳腺疾病外科治疗方法.

    作者:石爱平;李嗣杰;路璐;宋东;韩冰;李星亮;李万峰;范志民 刊期: 2011年第02期

  • 肝肿瘤造影图像质量与声诺维造影剂用量的关系

    1 临床资料1.1 一般资料肝肿瘤患者60例,男性33例,女性27例,年龄23~72岁,平均(54±12.8)岁,病灶直径6~93mm.1.2 检查方法 采用东芝Toshiba Aplio彩色多普勒超声显像仪,探头中心频率3.5 MHz,机械指数0.07~0.10.造影剂使用SonoVue(Bracco,Italy),造影微泡为磷脂包裹的六氟化硫(SF6).

    作者:李国政;苑敏;丰立忠;吴子芳;刘增强;刘丽艳 刊期: 2011年第02期

  • 腰交感神经切除术治疗血栓闭塞性脉管炎的研究进展

    血栓闭塞性脉管炎(TAO)是一种累及中小动静脉的阶段性闭塞性炎症疾病.腰交感神经切除术(LS) 通过使动脉痉挛逆转、改善肢体缺血状态、缓解疼痛、促进溃疡愈合成为TAO主要的外科治疗方法,虽然LS有70余年的历史,但手术作用仍有争议.本文作者对LS治疗TAO的现状和并发症的防治做一综述.

    作者:张阳;孙思翘;赵文光;王嘉桔 刊期: 2011年第02期

  • 三氧化二砷对T315I突变细胞株KBM5R细胞周期的影响

    目的:探讨三氧化二砷(ATO)对T315I突变的伊马替尼(IM)耐药慢性粒细胞白血病(CML)细胞株KBM5R细胞周期的影响,为对抗CML患者的IM耐药性提供理论依据.方法:选择野生型KBM5细胞作为T315I点突变KBM5R细胞的阴性对照组,根据是否经过ATO处理将实验分为KBM5R细胞空白对照组、KBM5R细胞ATO处理组、KBM5细胞空白对照组和KBM5细胞ATO处理组.应用MTT法检测IM和ATO作用后KBM5和KBM5R细胞的增殖活性;流式细胞术检测ATO作用后KBM5和KBM5R细胞周期的变化;Western blotting法检测ATO作用后KBM5和KBM5R细胞周期调节相关蛋白P21和P27表达的变化.结果:IM作用后耐药组KBM5R细胞IC50与野生型KBM5细胞比较明显增高(P<0.01);不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 μmol·L-1)ATO于不同时间点(24、48、72和96 h)作用于KBM5和KBM5R细胞,与空白对照组比较,ATO处理组细胞均表现为显著的增殖抑制,且随药物浓度增加或作用时间延长细胞的增殖抑制率显著增加(P<0.05);在相同的药物浓度和时间点,ATO对KBM5R细胞的增殖抑制作用强于野生型KBM5细胞(P<0.05);2.0、4.0和8.0 μmol· L-1 ATO作用细胞48 h后,KBM5和KBM5R细胞周期中G2/M期细胞所占比例均随药物剂量的增加而增加,且相同药物浓度时KBM5R细胞周期中G2/M期细胞所占比例与KBM5细胞比较差异无统计学意义(P>0.05);ATO作用KBM5和KBM5R细胞48 h后,2.0、4.0和8.0 μmol·L-1 ATO处理组与空白对照组比较细胞内P21和P27蛋白表达均增加,且随药物剂量增加而增加.结论:ATO通过上调P21和P27蛋白水平使KBM5R细胞周期阻滞于G2/M期,细胞周期阻滞是ATO抑制T315I点突变细胞株KBM5R增殖的原因之一.

    作者:李小丰;刘秋菊;李景贺;王秀丽;沈卫章;卢爱萍;郏博;陈鹏 刊期: 2011年第02期

  • 127株非发酵菌的耐药性分析

    1 资料与方法1.1 菌种来源 收集2008年6月-2010年6月本院门诊及住院患者送检的脓液、尿液、血液、胸腹水、胆汁和各种穿刺液等标本,分离的革兰阴性杆菌共280株,其中非发酵革兰阴性杆菌127株.

    作者:包东武;满永宏 刊期: 2011年第02期

  • 纳米SiO2颗粒在HepG2细胞中的分布及其细胞毒性

    目的:检测纳米SiO2颗粒作用于HepG2细胞后纳米颗粒的细胞摄取、分布情况及颗粒对细胞的毒性作用,初步探讨纳米颗粒的摄取、分布与细胞毒性的关系.方法:采用透射电镜(TEM)及动态光散射法检测纳米SiO2颗粒的表征;纳米SiO2颗粒作用HepG2细胞后,用荧光显微镜及TEM观察纳米SiO2颗粒的细胞摄取及细胞内分布情况;不同浓度纳米SiO2颗粒(0、25、50、100 及200 mg·L-1)作用于HepG2细胞24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,用Rhodamine123标记流式细胞术检测线粒体膜电位变化.结果:TEM结果显示,纳米SiO2颗粒呈球形,分散性好,大小均一.动态光散射法结果显示,纳米SiO2颗粒在无血清DMEM中粒径约为94 nm,分散性较好.纳米SiO2颗粒作用于HepG2细胞3 h即可进入细胞;作用24 h后,可以单一颗粒或成簇的形态分散在胞质内,并在线粒体等细胞器内沉积;不同浓度纳米SiO2颗粒作用于细胞24 h后,各组细胞存活率及线粒体膜电位较对照组均有显著下降(P<0.05),且随着剂量增加细胞存活率和线粒体膜电位降低.结论:纳米SiO2颗粒进入细胞并在细胞器中沉积,可导致线粒体等细胞器的损伤,进而产生细胞毒性作用,抑制细胞增殖.

    作者:孙磊;李阳;刘晓梅;杜忠君;金明华;孙志伟 刊期: 2011年第02期

  • 脉冲磁治疗骨关节炎疼痛20例临床分析

    1 临床资料2009年6月-2009年12月来本站就诊的骨关节炎引起的膝部、肩部、髋部及足跟疼痛患者20例,年龄45~80岁,皆为女性.病程1个月~2年.膝关节疼痛13例,肩关节疼痛4例,髋关节疼痛2例,足跟疼痛1例.患者疼痛程度中度,NRS评分4~6分,均有相应程度的关节功能障碍.患者在行脉冲磁治疗前皆服用过消炎止痛药,或外涂消炎止痛乳剂及敷贴活血止痛类膏药,但止痛效果不甚满意.

    作者:杨锐利 刊期: 2011年第02期

  • 芯针穿刺活检在恶性淋巴瘤诊断中的应用

    目的:探讨芯针穿刺活检诊断恶性淋巴瘤的临床应用价值,阐明其有效性.方法:采用HE和免疫组织化学染色方法,对88例芯针穿刺活检诊断为恶性淋巴瘤及淋巴组织非典型增生的病例进行回顾性研究,观察芯针穿刺活检诊断的准确率.结果:本组患者穿刺活检诊断恶性淋巴瘤的准确率为87.5%(77/88),恶性淋巴瘤90%(70/77)可区分组织类型.诊断为淋巴组织非典型增生11例,其中5例通过手术切除活检确诊为恶性淋巴瘤,6例不能明确诊断.在住院患者中,恶性淋巴瘤诊断的准确率为91%(53/58).结论:芯针穿刺活检是诊断恶性淋巴瘤可靠的方法,绝大多数患者可得到明确的分类.

    作者:王铁延;杨华;王连有;王英;卢振霞;张丽荣;崔亚南 刊期: 2011年第02期

  • RNA干扰PTEN基因对HCT-8细胞增殖能力的影响

    目的:观察小干扰RNA(siRNA)对结肠癌相关基因PTEN表达的抑制作用及其对结肠癌细胞增殖能力的影响.方法:构建携带有针对PTEN基因序列的siRNA真核绿色荧光表达载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4,脂质体法转染入结肠癌HCT-8细胞(分别为p1、p2、p3和p4组),同时设转染阴性对照质粒组(p5组)和亲本细胞组(p6组),实时 PCR方法检测PTEN mRNA表达,MTT法分析细胞增殖活性变化.结果:通过荧光显微镜观察计数,细胞转染率为58%.实时 PCR方法检测结果显示,siRNA 重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4的抑制率分别为48.3%、76.5%、29.4%和61.2%,与p6组比较差异均有统计学意义(P<0.05).MTT结果表明,细胞增殖抑制能力明显增强.结论:PTEN基因在肿瘤的发生发展中可能起到一定的作用.

    作者:吕强;唐亮;李建华;宫鹏涛;徐晓芳;田甜;李泽中;雒伟伟;邢沈阳;张西臣;高久春 刊期: 2011年第02期

  • 髓内钉与钢板治疗肱骨干骨折患者的疗效及安全性比较

    目的:通过对新鲜肱骨干骨折患者分别采用顺行交锁髓内钉和锁定加压钢板治疗,比较两种方法的疗效及安全性.方法:42例新鲜肱骨干骨折患者随机分为髓内钉固定组和钢板固定组,分别采用两种方法治疗,术后随访时间10~25个月,平均13个月.随访期间失访患者7例,得到随访患者35例(髓内钉组21例,钢板组14例),比较两组患者的术后功能恢复情况、愈合时间及并发症发生率.结果:钢板固定组的优良率(92.8%)高于髓内钉固定组(71.5%)(P<0.05);髓内钉组延迟愈合(>16周)患者10例(47.6%),钢板组延迟愈合患者3例(21.4%),延迟愈合率组间差异有统计学意义(P<0.05).髓内钉组无桡神经损伤、无感染;钢板组桡神经一过性损伤1例(7.1%),发生感染1例(7.1%).结论:新鲜肱骨干骨折患者采用交锁髓内钉固定和钢板固定均可达到治疗目的,钢板固定后功能恢复优于髓内钉固定,钢板固定后延迟愈合患者比例低于髓内钉固定患者,临床可根据骨折的部位和类型选择内固定;在适应证相同的情况下,建议使用钢板内固定治疗新鲜肱骨干骨折.

    作者:李丹;王刚;谷贵山;王铁军;孙大辉 刊期: 2011年第02期

  • 糖尿病肺纤维化的研究进展

    糖尿病可能是肺纤维化发病的高危因素之一,但糖尿病是否为肺纤维化的独立危险因素仍然不明确.本文作者阐述了糖尿病与肺纤维化的关系,着重强调作为糖尿病重要并发症之一的糖尿病肺纤维化已经被忽视,并从组织病理学到分子水平和生物化学改变探讨其潜在机制,旨在提高人们对糖尿病肺并发症的认识.

    作者:杨俊玲;赵凤莲;薛倩菲;蔡露 刊期: 2011年第02期

  • 细胞黏附分子SLeX和CD24在喉鳞状细胞癌组织中的表达

    目的:探讨细胞黏附分子唾液酸化Lewis-X抗原(SLeX)和CD24在喉鳞状细胞癌组织中的表达,阐明其在喉鳞状细胞癌发生发展中的作用.方法:采用免疫组织化学方法分别检测42例喉鳞状细胞癌患者的42个原发灶、24个相应癌旁组织及20例睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)手术患者的咽部正常黏膜组织中SLeX和CD24的表达情况.结果:喉癌组织、癌旁组织及对照正常黏膜组织中SLeX阳性表达率分别为71.4%、37.5%和30.0%;强阳性表达率分别为50.0%、8.3%和5.0%.CD24的阳性表达率分别为64.3%、33.3%和25.0%;强阳性表达率分别为35.7%、4.2%和0.0%.3组间两两比较,喉癌组织与癌旁组织、正常黏膜组织阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.01);癌旁组织与正常黏膜组织阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05).SLeX、CD24强阳性表达与颈部淋巴结转移情况、临床分期及组织病理学分级相关(P<0.05).SleX和CD24在喉癌组织中的阳性率呈显著正相关关系(r=0.695,P<0.05).结论:SLeX及CD24蛋白表达与喉鳞状细胞癌的发生发展密切相关,其检测对喉癌的生物治疗和预测预后具有一定的临床意义.

    作者:李光宇;姜晓丹;孟粹达;高鸽;朱冬冬 刊期: 2011年第02期

  • 氯丙嗪致阴茎异常勃起1例报告

    1 临床资料患者,男性,42岁.因阴茎持续勃起伴疼痛30 h急诊入院.患者14年前诊断为精神分裂症,一直服用氯丙嗪治疗,大量450 mg·d-1,6年前开始持续服药,300 mg·d-1,否认镰状细胞病及肿瘤,无会阴部外伤,无服用违禁药品史.

    作者:万洪泉;庞治兴;刘畅 刊期: 2011年第02期

  • 负压吸引治疗急性根尖周炎的临床疗效分析

    目的:观察急性根尖周炎常规开髓引流后进行负压引流以减轻临床症状的疗效.方法:将本院收治的急性根尖周炎的患者142例,随机分为实验组(72颗患牙,负压吸引引流)和对照组(70颗患牙,常规开髓引流).比较两组患者临床症状的缓解情况以及根管内白细胞介素1β(IL-1β)、前列腺素E2(PGE2)及C反应蛋白(CRP)水平的变化.结果:两组数字化疼痛评判法(VAS)差值比较差异具有统计学意义(P<0.05).实验组IL-1β、PGE2和CRP变化的差值大于对照组(P<0.05),实验组的治疗有效率高于对照组(P<0.05).结论:应用负压引流等一系列处置能有效缓解急性根尖周炎的症状,愈后良好.

    作者:刘影;李春艳;邵海峰;梁爽 刊期: 2011年第02期

  • 精神障碍住院患者的流行病学特征及相关危险因素分析

    目的:探讨精神障碍住院患者病种构成及精神分裂症、心境障碍和癔症3种主要精神疾病的流行病学特征,并分析其相关危险因素.方法:采用自行设计的调查问卷,以中国精神障碍分类诊断标准第2版修订本为标准,对2008-2010年烟台地区住院精神障碍患者的2 453份病历进行统计分析.结果:住院患者女性多于男性,男女比为0.74∶1,住院患者平均年龄(38.74±15.45)岁,平均发病年龄(35.98±16.08)岁,女性发病年龄高于男性(P<0.001).病种构成中居于前3位的依次是精神分裂症(45.1%)、心境障碍(26.3%)和癔症(7.8%).三者比较,精神分裂症的发病年龄早(P<0.001).与精神分裂症比较,癔症患者文化程度较低、多无吸烟及饮酒史,而常具有疾病既往史和因诱因起病(P<0.05);与精神分裂症比较,心境障碍患者以城市人群居多,由诱因引起,且有疾病既往史和饮酒史(P<0.05).结论:不同种类精神疾病患者具有不同的发病特征,应采取有针对性的预防和治疗措施来降低和减缓疾病的发生及发展.

    作者:闫莉;谢冰;姚燕;马琳;王诗镔;李卓林;王崇;牛克珍;李涛;于雅琴 刊期: 2011年第02期

  • 半导体激光治疗带状疱疹的疗效评价

    2008年6月-2009年10月本文作者应用半导体激光治疗带状疱疹患者132例,疗效满意,现报道如下.1 临床资料

    作者:陈永梅 刊期: 2011年第02期

吉林大学学报(医学版)杂志

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