陈永梅
目的:建立检测大鼠神经激肽1(NK1)受体mRNA的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法,为检测大鼠NK1受体基因表达提供有效的手段.方法:提取大鼠中脑总RNA,扩增NK1受体基因片段,将其克隆入pMD-18T载体,制作NK1受体标准品质粒;应用SYBR Green Ⅰ双链嵌合染料,对连续稀释的标准品质粒进行实时PCR分析,评价所建立方法的检测灵敏度;对PCR产物进行溶解曲线分析评价其特异性.结果:成功构建NK1受体标准品质粒,经酶切及测序鉴定,目的片段已插入pMD-18T载体;所建立的实时定量PCR方法的低检测限度均为每反应102个拷贝,在每反应102～109拷贝范围内,荧光信号达到设定阈值所经历的循环数(Ct值)与起始模板浓度具有良好的线性关系,r=0.999.结论:所建立的检测大鼠NK1受体mRNA的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法具有敏感性高、特异性强和线性范围广等特点,适用于对大鼠各种组织NK1受体的大量样本检测.
作者：姚刚；满玉红；毛西京；于挺敏 刊期： 2011年第02期
目的:对大肠杆菌表达的放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白LTB-FAP进行提取和纯化,为其用于牙周病的治疗提供理论依据.方法:将重组质粒pET28a/LTB和pET28a/LTB-FAP分别转化到大肠杆菌中进行表达,通过超声裂解法获得以包涵体形式表达的重组外源蛋白LTB-FAP;用2,4,6和8 mol·L-1尿素缓冲液对重组蛋白进行洗涤、溶解;然后用阴离子交换和凝胶过滤柱层析对重组蛋白进行纯化,采用薄层扫描仪对蛋白纯度进行测定.结果:目的包涵体蛋白经过3次4 mol·L-1尿素洗涤,6 mol·L-1尿素溶解后,经薄层扫描可获得纯度为60%的目的蛋白;经离子交换层析纯化,蛋白纯度可达约75%;Sepharose 6B行凝胶过滤层析获得了纯度可达90%的重组蛋白LTB-FAP.结论:阴离子交换和凝胶过滤柱层析的方法可提取、纯化重组蛋白LTB-FAP,获得的LTB-FAP可以用于免疫机体.
作者：李毅；郭学军；杨涛；冯书章；孙宏晨 刊期： 2011年第02期
目的:探讨全凭静脉麻醉下应用脑电双频谱指数(BIS)监测术中知晓的发生情况,评价BIS监测对术中知晓的预防作用.方法:丙泊酚全凭静脉麻醉下行择期手术患者300例,随机分成A、B两组(n=150).两组患者均进行BIS监测,A组根据BIS值调控麻醉深度,确保麻醉期间BIS值<60;B组术中遮蔽BIS值,根据经验调控麻醉深度.记录两组患者麻醉诱导、手术开始、麻醉停药、手术结束、麻醉苏醒、拔管时BIS值及术中知晓的发生情况.结果:两组患者基础BIS值、诱导结束时、清醒时及拔管时BIS值比较差异无统计学意义(P>0.05),手术开始时、麻醉维持和麻醉结束时BIS值比较差异有统计学意义(P<0.05).A组无知晓病例及怀疑知晓病例.B组无知晓病例,但存在2例怀疑知晓病例,2组怀疑知晓率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:全凭静脉麻醉时采用BIS监测能够维持合适的麻醉深度,预防术中知晓的发生.
作者：曲晓霞；麻海春；苑野；冯春生 刊期： 2011年第02期
目的:通过对新鲜肱骨干骨折患者分别采用顺行交锁髓内钉和锁定加压钢板治疗,比较两种方法的疗效及安全性.方法:42例新鲜肱骨干骨折患者随机分为髓内钉固定组和钢板固定组,分别采用两种方法治疗,术后随访时间10~25个月,平均13个月.随访期间失访患者7例,得到随访患者35例(髓内钉组21例,钢板组14例),比较两组患者的术后功能恢复情况、愈合时间及并发症发生率.结果:钢板固定组的优良率(92.8%)高于髓内钉固定组(71.5%)(P<0.05);髓内钉组延迟愈合(>16周)患者10例(47.6%),钢板组延迟愈合患者3例(21.4%),延迟愈合率组间差异有统计学意义(P<0.05).髓内钉组无桡神经损伤、无感染;钢板组桡神经一过性损伤1例(7.1%),发生感染1例(7.1%).结论:新鲜肱骨干骨折患者采用交锁髓内钉固定和钢板固定均可达到治疗目的,钢板固定后功能恢复优于髓内钉固定,钢板固定后延迟愈合患者比例低于髓内钉固定患者,临床可根据骨折的部位和类型选择内固定;在适应证相同的情况下,建议使用钢板内固定治疗新鲜肱骨干骨折.
作者：李丹；王刚；谷贵山；王铁军；孙大辉 刊期： 2011年第02期
1 临床资料患者,男性,42岁.因阴茎持续勃起伴疼痛30 h急诊入院.患者14年前诊断为精神分裂症,一直服用氯丙嗪治疗,大量450 mg·d-1,6年前开始持续服药,300 mg·d-1,否认镰状细胞病及肿瘤,无会阴部外伤,无服用违禁药品史.
作者：万洪泉；庞治兴；刘畅 刊期： 2011年第02期
目的:探讨日本刺沙蚕纤溶酶(NJF)的适反应温度和适反应pH 值以及金属阳离子和蛋白酶抑制剂对酶活性的影响,确定NJF的酶学分类.方法:采用偶氮酪蛋白(azocasein)水解法测定NJF的适温度及适pH 值;利用10种金属阳离子(Na+、K+、Cu2+、Ca2+、Zn2+、Co2+、Fe2+、Fe3+、Al3+和Hg2+)确定金属离子对NJF酶活性的影响;采用9种蛋白酶抑制剂(PMSF、EDTA、EGTA、β-巯基乙醇、苯甲脒、碘乙酸、抑肽酶、胃酶抑素A和大豆胰蛋白酶抑制剂)确定NJF的蛋白酶分类.结果:NJF具有较宽的热稳定性及pH稳定性范围,在40～80℃及pH7～11范围内有较好的稳定性,NJF酶适温度为60℃,适pH值为9;Hg2+能够强烈地抑制NJF的酶活性,Cu2+具有较弱的抑制作用,而其他金属阳离子对酶活性无明显抑制作用;NJF的酶活性能被典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF完全抑制.结论:NJF是一种典型的丝氨酸蛋白酶.
作者：张连芝；王少华；邓志会；薄其青；葛鑫；洪敏 刊期： 2011年第02期
目的:分离人表皮干细胞(hKSCs),并评价其生物学特性.方法:取包皮环切术的正常皮肤,采用酶消化、快速贴壁筛选法分离hKSCs,采用倒置相差显微镜及透射电镜观察细胞形态,采用细胞免疫组织化学法和间接免疫荧光法检测细胞的分子标志物,利用流式细胞术检测细胞周期.结果:倒置相差显微镜下显示,细胞为多角形,体积小、核大,呈铺路石样排列,形态一致;透射电镜显示,胞质内细胞器稀少,细胞核大,核内具有丰富的异染色质;免疫细胞化学、间接免疫荧光和流式细胞术结果显示,KSCs相对特异性标志物CK15、CK19、P63和CD29呈阳性表达,成纤维特异性标志物Vimentin和表皮终末分化标志物CK10呈阴性表达,RT-PCR结果与上述结果一致;细胞周期检测结果显示,大多数细胞处于G0/G1期,符合hKSCs的慢周期特性.结论:快速贴壁筛选法可分离出纯度较高的hKSCs,可为后续的实验研究提供细胞来源.
作者：马英智；高航；邓方阁；张丽红；李玉林 刊期： 2011年第02期
2007年1月-2008年2月本文作者采用神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)治疗周围神经损伤患者120例,疗效满意,现报道如下.
作者：张涵亮；陈俊 刊期： 2011年第02期
周期性面神经麻痹是理疗科的常见病和多发病,在冬春两季多见,本文作者采用超短波配合浅刺多穴法治疗38例周围性面神经麻痹患者,疗效满意,现报道如下.
作者：曲有莲；刘淑娟；孙丽娟 刊期： 2011年第02期
短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack,TIA)是脑血管病的一种,发病急、恢复快,一般不留任何后遗症,但有少部分TIA短期内可发展至脑梗死.本文作者通过对100例TIA发展至脑梗死患者的临床资料进行了分析,探讨由TIA发展至脑梗死的相关因素.
作者：闫俊杰；韩珂；姚永华 刊期： 2011年第02期
目的:比较乳腔镜与传统手术方法治疗乳腺疾病的效果,探讨两种方法的优缺点.方法:选取本科经乳腔镜治疗的各类有代表性乳腺疾病手术患者20例,并随机选取本科同期行传统手术治疗的患者100例作为对照,对两组患者美容效果、手术时间、并发症及疗程等进行回顾性研究.结果:与传统手术比较,乳腔镜手术美容效果明显,乳腔镜患者美容满意率(95%)高于而传统手术(34%)(P<0.01);与传统手术比较,乳腔镜手术出血、积液和感染等并发症发生情况差异无统计学意义(P>0.05);但术后疼痛及组织损伤发生率低于传统手术(P<0.01),手术切口明显缩小(P<0.01),疗程缩短(P<0.05);在观察期间恶性肿瘤复发率两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:乳腔镜在乳腺疾病治疗中,美容效果突出,是一种先进的乳腺疾病外科治疗方法.
作者：石爱平；李嗣杰；路璐；宋东；韩冰；李星亮；李万峰；范志民 刊期： 2011年第02期
目的:探讨精神障碍住院患者病种构成及精神分裂症、心境障碍和癔症3种主要精神疾病的流行病学特征,并分析其相关危险因素.方法:采用自行设计的调查问卷,以中国精神障碍分类诊断标准第2版修订本为标准,对2008-2010年烟台地区住院精神障碍患者的2 453份病历进行统计分析.结果:住院患者女性多于男性,男女比为0.74∶1,住院患者平均年龄(38.74±15.45)岁,平均发病年龄(35.98±16.08)岁,女性发病年龄高于男性(P＜0.001).病种构成中居于前3位的依次是精神分裂症(45.1%)、心境障碍(26.3%)和癔症(7.8%).三者比较,精神分裂症的发病年龄早(P＜0.001).与精神分裂症比较,癔症患者文化程度较低、多无吸烟及饮酒史,而常具有疾病既往史和因诱因起病(P＜0.05);与精神分裂症比较,心境障碍患者以城市人群居多,由诱因引起,且有疾病既往史和饮酒史(P＜0.05).结论:不同种类精神疾病患者具有不同的发病特征,应采取有针对性的预防和治疗措施来降低和减缓疾病的发生及发展.
作者：闫莉；谢冰；姚燕；马琳；王诗镔；李卓林；王崇；牛克珍；李涛；于雅琴 刊期： 2011年第02期
目的:观察适时适量补充硒(Se)和维生素E(VE)对心肌纤维化和心肌重构的影响,探讨克山病病区的低Se和低VE膳食是否在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用.方法:30只Wistar 大鼠随机分为:正常对照组(Control,混合饲料喂养)、病区粮饲料组(EG,病区粮喂养)、病区粮饲料加Se组(EG+Se)、病区粮饲料加VE组(EG+VE)和病区粮饲料加Se加VE组(EG+Se+VE).喂养21 d后,取大鼠心脏,比色法测定大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;硫代巴比妥法测定血清丙二醛(MDA)含量;马松三色染色测定大鼠细胞外基质沉积情况;免疫组织化学法和Western blotting法测大鼠心肌组织中转化生长因子β(TGF- β)和结缔组织生长因子(CTGF)表达.结果:与正常对照组比较,EG组心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力下降(P<0.01),MDA含量升高(P<0.05),心肌组织胶原蛋白大量沉积,并伴有TGF-β和CTGF表达上调(P<0.01).与EG组比较,EG+Se组和EG+Se+VE组病区粮心肌纤维化大鼠血清中GSH-Px活力均提高(P<0.01 和P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);大鼠心肌细胞外基质沉积缓解;克山病大鼠心肌TGF- β和CTGF表达下调(P<0.01).结论:低Se和低VE在心肌损伤后的修复过程中持续发挥作用,适时适量补充Se和VE有利于减轻和逆转过度的心肌纤维化和心肌重构.
作者：贾春澍；陈爱军；李敏；李相军；苗春生；李希宁；任立群 刊期： 2011年第02期
目的:对比研究免疫组织化学方法(IHC)检测乳腺癌HER2蛋白表达和荧光原位杂交技术(FISH)检测HER2基因状态的一致性,并评价其临床意义.方法:采用IHC法及FISH法分别检测77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本的HER2蛋白表达和HER2基因状态,并进行对比分析.结果:77例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本用IHC检测HER2蛋白表达阳性者37例,占总数的48.05%(37/77);表达阴性者40例,占51.95%(40/77).FISH检测HER2基因扩增32例,占41.56%(32/77);基因非扩增45例,占58.44%(45/77).37例HER2蛋白为阳性的患者中,HER2基因扩增30例,符合率为81.08%(30/37);40例HER2蛋白为阴性的患者中,HER2基因非扩增38例,符合率为95.00%(38/40).两种方法检测结果比较差异无统计学意义(χ2=1.78,P=0.1824).Kappa检验结果,κ=0.7647,表明一致性较好.结论:IHC检测乳腺癌HER2蛋白与FISH检测HER2基因结果一致性较高.
作者：邵飞飞；康丽花；刘敏；白晶；宋艳秋 刊期： 2011年第02期
目的:检测纳米SiO2颗粒作用于HepG2细胞后纳米颗粒的细胞摄取、分布情况及颗粒对细胞的毒性作用,初步探讨纳米颗粒的摄取、分布与细胞毒性的关系.方法:采用透射电镜(TEM)及动态光散射法检测纳米SiO2颗粒的表征;纳米SiO2颗粒作用HepG2细胞后,用荧光显微镜及TEM观察纳米SiO2颗粒的细胞摄取及细胞内分布情况;不同浓度纳米SiO2颗粒(0、25、50、100 及200 mg·L-1)作用于HepG2细胞24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,用Rhodamine123标记流式细胞术检测线粒体膜电位变化.结果:TEM结果显示,纳米SiO2颗粒呈球形,分散性好,大小均一.动态光散射法结果显示,纳米SiO2颗粒在无血清DMEM中粒径约为94 nm,分散性较好.纳米SiO2颗粒作用于HepG2细胞3 h即可进入细胞;作用24 h后,可以单一颗粒或成簇的形态分散在胞质内,并在线粒体等细胞器内沉积;不同浓度纳米SiO2颗粒作用于细胞24 h后,各组细胞存活率及线粒体膜电位较对照组均有显著下降(P＜0.05),且随着剂量增加细胞存活率和线粒体膜电位降低.结论:纳米SiO2颗粒进入细胞并在细胞器中沉积,可导致线粒体等细胞器的损伤,进而产生细胞毒性作用,抑制细胞增殖.
作者：孙磊；李阳；刘晓梅；杜忠君；金明华；孙志伟 刊期： 2011年第02期
目的:研究中国东北地区汉族人群抵抗素(RETN)-420C/G基因单核苷酸多态性(SNPs)的等位基因、基因型频率分布及其与2型糖尿病(T2DM)大血管病变之间的关系.方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对180例样本[T2DM并发大血管病变组60例,单纯T2DM组60例,正常对照(ND)组60例],进行基因分型及频率测定.结果:T2DM并发大血管病变组及单纯T2DM组等位基因频率及CC/GC+GG基因型分布与ND组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);T2DM并发大血管病变组等位基因频率及CC/GC+GG基因型分布与单纯T2DM组比较差异亦有统计学意义(P<0.05),T2DM并发大血管病变组GC+GG基因型频率明显高于单纯T2DM组.结论:RETN-420C/G基因多态性与中国东北地区汉族人群T2DM及其大血管病变的发生有相关性.
作者：孙亚东；马彦 刊期： 2011年第02期
妊娠并发子宫肌瘤的发病率约占子宫肌瘤患者的0.5%~1.0%,占妊娠者的0.3%~1.2%.剖宫产同时进行肌瘤剔除一直存有争议.近年来已有研究证实剖宫产同时剔除子宫肌瘤的可行性.现对本院92例剖宫产同时剔除子宫肌瘤的患者进行回顾性分析,报道如下.
作者：陈清冉；邹海琼；孟龙 刊期： 2011年第02期
1 临床资料1.1 一般资料 2008年1月-2010年6月在本院行腹腔镜辅助子宫切除术(LAVH)患者203例,其中常规方法手术98例(常规组),行改良式手术105例(改良组),同时随机选择同时期的子宫全切开腹手术110例作为对照组(开腹组).常规组患者年龄38～57岁,平均47岁;生育2胎以上者31例,1胎者67例;有剖宫产史者15例,子宫肌瘤者48例(48.98%),子宫腺肌症26例(26.53%),子宫内膜异位症12例(12.24%),子宫内膜异常增生5例(5.11%),其他7例(7.14%).
作者：刘恩令；糜若然 刊期： 2011年第02期
目的:研究人脐带间充质干细胞(UCMSCs)多向分化潜能,了解UCMSCs移植治疗脑缺血缺氧损伤(HIBD)大鼠的神经修复功能.方法:采用组织消化原代贴壁法分离培养人UCMSCs;取第4和10代UCMSCs进行流式细胞术检测间充质干细胞(MSCs)表面特异标志物表达;染色体分型检测染色体是否畸变;进行成神经、骨、脂诱导,了解其多向分化潜能;制备HIBD大鼠模型,穿梭箱测试对照组、HIBD细胞移植组和HIBD组大鼠的主动逃避率(AARR)和未逃避率(NARR).结果:流式细胞术结果显示,类似MSCs样细胞强表达CD29、CD44和CD105,极低表达CD34和CD45,符合UCMSCs的特征.多向分化诱导后的细胞染色和免疫荧光结果显示,UCMSCs可诱导分化为神经样细胞、脂肪细胞和成骨细胞,多次传代后仍可多向诱导,且未发生染色体畸变.穿梭箱测试提示,UCMSCs移植组大鼠在测试的第3、4和5天的AARR高于HIBD组(P<0.05).结论:UCMSCs易获取及纯化,具有多向分化潜能,多次传代功能稳定,可改善脑损伤动物的神经功能.
作者：江伟；沈洁；史源；龚敏；瞿平；张赟；魏小平；刘友学；陈洁；李廷玉 刊期： 2011年第02期
目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)和组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义,为进一步明确UⅡ致纤维化的机制提供实验依据.方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=8),采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型.术后第2周末处死各组大鼠.采用HE和Masson染色观察肾组织病理学改变;采用免疫组化法检测肾间质中UⅡ、tTG和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用RT-PCR技术检测UⅡ和tTG mRNA的表达水平.结果:HE和Masson染色可见,模型组大鼠肾间质增宽,胶原纤维明显增生.免疫组化显示,假手术组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管、肾间质区有少量表达,肾小球内除UⅡ有微量表达外,tTG和FN无阳性表达;模型组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管和肾间质区的表达信号较假手术组明显增强(P<0.01),模型组大鼠UⅡ的蛋白表达与FN的蛋白表达呈正相关关系(r=0.724,P<0.05).模型组UⅡ和tTG的基因表达明显高于假手术组(P<0.05),模型组大鼠肾内UⅡ基因和蛋白表达与tTG基因和蛋白表达均呈正相关关系(r=0.647,P<0.05;r=0.787,P<0.01).结论:UⅡ和tTG可能共同参与肾间质纤维化,UⅡ的致纤维化作用可能部分是通过tTG的活化而实现的.
作者：曲萌；王丹；李才；李相军；苗春生；李蕴潜 刊期： 2011年第02期
吉林大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：吉林大学
