王光兰；崔俊生；王心蕊；石博；高静；倪劲松
目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)NS5A基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞株(HL-7702细胞)中进行表达,为今后研究HCV NS5A蛋白功能奠定基础.方法:从含HCV NS345序列的重组质粒pCDNA3.1(+)/NS345中扩增出HCV NS5A基因片段,构建pCI-neo/NS5A重组表达质粒.用脂质体将其转染HL-7702细胞,通过Western blotting印迹法鉴定NS5A蛋白.结果:用PCR方法扩增的HCV NS5A基因全长1 344 bp,与PGEM-T重组,测序证实所克隆的NSSA基因片段大小正确;成功地构建pCI-neo/NS5A重组表达质粒,瞬时转染HL-7702细胞表达NS5A蛋白,Western blotting印迹法显示其相对分子质量约为56 000.结论:HCV NS5A的真核表达载体pCI-neo/NS5A在HL-7702细胞中能有效表达NS5A蛋白,NS5A蛋白可导致病毒复制、肝细胞癌发生,且NS5A区为IFN敏感性决定区.
作者：苏秀芬；姜艳芳；王峰；牛俊奇 刊期： 2008年第06期
目的:研究RhoC和MMP-2蛋白在卵巢上皮性癌组织中表达及其临床意义,为判定卵巢上皮性癌的生物学行为及预后提供依据.方法:采用免疫组织化学方法检测10例正常卵巢组织、12例卵巢上皮性良性肿瘤及91例卵巢上皮性癌组织中RhoC与MMP-2蛋白的表达,并与临床特征进行相关性分析.结果;RhoC及MMP-2蛋白在卵巢良性肿瘤和卵巢正常组织中的阳性表达率均为0,在卵巢上皮性癌组织中阳性表达率分别为37.3%和68.1%,RhoC和MMP-2蛋白在卵巢癌组织中的表达明显高于卵巢良性肿瘤和卵巢正常组织.中、低分化卵巢癌的阳性表达率明显高于高分化卵巢癌(P<0.05,P<0.005),Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌的阳性率明显高于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌(P<0.005),有转移的卵巢癌RhoC和MMP-2蛋白的阳性表达率明显高于无转移卵巢癌(P<0.005,P<0.05),卵巢癌组织中RhoC与MMP-2阳性表达呈正相关(r=0.492,P<0.05).结论:RhoC与MMP-2蛋白的表达与卵巢癌的细胞分化程度、临床分期及有无转移密切相关,且两者呈正相关.临床检测卵巢癌RhoC与MMP-2蛋白的表达,可以作为判断卵巢癌生物学行为及患者预后的参考指标.
作者：潘颖；朱丹；司乃文；张文颖 刊期： 2008年第06期
目的:观察眯唑安定对大鼠海马脑片突触长时程增强(LTP)效应的影响,并探讨其影响记忆的机制.方法:126只雄性SD大鼠,断头后取出海马组织,制备400μm海马脑片.取42张脑片,随机分为6组(n=7):对照组及咪唑安定0.1、0.5、1.0,2.0和5.0μmol?L-1组.各组脑片分别灌流人工脑脊液(ACSF)及咪唑安定0.1、0.5、1.0、2.0和5.0μmol·L-1.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外群体峰电位(PS)的变化.另取84张脑片,随机分为12组(n=7):LTP组,眯唑安定LTP 0.1、0.5、1.0、2.0和5.0μmol·L-1组,印防己毒素组,荷包牡丹碱组,CGP35348组,印防己毒素+咪唑安定组,荷包牡丹碱+眯唑安定组,CGP35348+咪唑安定组.各组脑片分别灌流ACSF及其他各组相对应药物.海马脑片记录PS30 min后,施以100Hz的高频强直刺激(HFS),诱发LTP,观察各组脑片HFS后PS幅值的变化.结果:与对照组比较,咪唑安定1.0、2.0和5.0μmol·L-1组给药后PS幅值明显降低(P<0.05或P<0.01).LTP组HFS后PS幅值增高,较刺激前增加了52%±12%(P<0.01).与LTF组比较,咪唑安定LTP 0.1μmol·L-1组HFS后其Ps幅值无明显改变(P>0.05),眯唑安定LTP 0.5、1.0、2.0及5.0 μmol·L-1组HFS后其PS幅值均明显降低(P<0.01).印防己毒素+咪唑安定组、荷包牡丹碱+咪唑安定组HFS后PS幅值与HFS前和咪唑安定LTP 2.0μmol·L-1组比较均明显增加(P<0.01),与LTP组比较差异无显著性(P>0.05).CGP35348+眯唑安定组HFS后PS幅值与HFS前和咪唑安定LTP 2.0 μmol·L-1组比较均无明显改变(P>0.05),与LTP组比较明显降低(P<0.01).结论:咪唑安定能够抑制海马LTP的形成而影响记忆功能,其作用机制与活化海马γ-氨基丁酸(GABA)A受体有关.
作者：冯春生；王艳姝；仇金鹏；岳云；麻海春 刊期： 2008年第06期
本文作者对103例心绞痛患者采用选择性口受体阻滞剂美托洛尔治疗,取得满意的疗效,现报道如下.1 资料与方法本组心绞痛患者203例,男性111例,女性92例,年龄30～84岁,随机分为治疗组103例和对照组100例.对照组采用常规治疗方法,给予硝酸酯类、复方丹参、阿司匹林及降脂药等.治疗组在常规治疗基础上加用美托洛尔,从小剂量开始,6.25 mg,1日3次口服,5～7 d加量1次;高血压患者开始12.5 mg,逐渐加量,大剂量为50 mg/次,1日3次口服.疗效评定参照1974年修订的心绞痛疗效评定标准分为显效(I临床症状消失或基本消失,心电图恢复正常或基本正常)、有效(症状改善或心电图异常明显改善)及无效(临床症状和心电图均无改善).
作者：王蓉；白丽华；张秀芹；丛义 刊期： 2008年第06期
目的:探讨顽固性癫痫患者外科手术治疗方法并评价治疗效果.方法:通过临床症状学、神经影像学及神经电生理学对13例顽固性癫痫患者进行术前评估,确定手术定位方法和手术方案.术前评估和术中脑电图监测显示为局灶性改变者行致痫灶切除术,检查提示一侧半球萎缩或多灶性改变者,术中行半球切除或胼胝体部分切开.结果:13例患者术后Engel分级均为Ⅰ～Ⅱ级,其中lO例患者达到Engel Ⅰ级.1例术后出现一过性失语,其余12例未出现任何手术并发症及后遗症.结论:采用外科手术治疗顽固性癫痫效果理想,尤其是有局灶性结构异常、发作形式表现为部分性发作或部分性发作继发全面性发作的患者手术效果较好.
作者：邱吉庆；宋红梅；别黎；许海洋；崔国振；赵刚 刊期： 2008年第06期
目的:初步探讨半导体激光诱导耐药MCr63细胞凋亡的分子机制,为其临床应用提供理论依据.方法:MG-63耐药细胞(密度为1.0 × 109?L-1)经激光照射分为对照组及半导体激光30、60、90和120 J·cm-2组.MTT法检测耐药MG-63细胞活性;流式细胞仪检测细胞活性氧含量;Western blotting方法检测caspase-8、caspase-9和caspase-3蛋白表达.结果:与对照组比较,半导体激光60、90和120 J·cm-2组MG-63耐药细胞活性降低(P<0.05或P<0.01),细胞增殖抑制率随激光剂量增加而升高;与对照组比较,以上各半导体激光组激光照射后细胞内活性氧水平升高(P<0.05或P<0.01),同时细胞中caspase-9和caspase-3蛋白的表达量随激光剂量增加而增强(P<0.05或P<0.01),而caspase-8蛋白的表达量差异无显著性(P>0.05).半导体激光30 J·cm-2组细胞活性、活性氧含量、caspase-9和caspase-3蛋白的表达与对照组比较差异均无显著性(P>0.05).结论:60～120 J·cm-2组的半导体激光可通过线粒体凋亡通路诱导耐药MG-63细胞凋亡,从而抑制细胞增殖,这一过程与活性氧的产生密切相关.
作者：李贵斌；刘军；谷贵山 刊期： 2008年第06期
目的:检测海洛因对大鼠神经胶质瘤C6细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达的影响,为探索海洛因成瘾的分子生物学机制提供依据.方法:大鼠神经胶质瘤C6细胞加入浓度为0～100 mg?L-1的海洛因进行细胞培养,24 h后用MTT法检测海洛因对C6细胞存活率的影响.RT-PCR法检测海洛因作用下C6细胞PCNA mRNA的表达.结果:MTT结果显示海洛因浓度为10、20和100 mg·L-1时c6细胞存活率分别为90.62%、80.97%和62.73%,与对照组比较明显下降(P<0.05).在转录物水平,浓度为20 mg?L-1的海洛因作用于C6细胞48 h时,PCNA基因的转录产物PCNA mRNA明显减少,与对照组比值为0.297(P<0.01).结论:海洛因浓度为20 mg·L-1时对C6细胞的增殖抑制作用接近30%,可能与海洛因成瘾形成有关.
作者：迟秀梅；张纪周；阚幕洁；洪敏 刊期： 2008年第06期
目的:探讨牙髓炎患者牙髓组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达,揭示MCP-1在牙髓炎性疾病发生、发展中的作用机理.方法:应用免疫组织化学方法检测MCP-1在正常人健康牙髓(正畸或烤瓷牙需要拔髓者)、急性及慢性牙髓炎患者牙髓组织(各30例)中的分布.结果:在健康牙髓组织中未发现MCP-1表达阳性细胞.在急性牙髓炎症组织中,可见大量的中性粒细胞游出血管并向炎症中心趋化,MCP-1阳性细胞主要分布于中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞,阳性细胞平均灰度值119.73±17.12.在慢性牙髓炎症组织中,可见血管内皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、成纤维细胞、新生的毛细血管上MCP-1有不同程度的阳性表达,阳性细胞平均灰度值121.26±2.04,与急性牙髓炎症组织阳性细胞平均灰度值比较差异无显著性(P>0.05).结论:MCP-1在牙髓炎牙髓组织中有表达,在牙髓炎发生、发展过程中可能促进炎症组织的愈合.
作者：张志民；高心；王成坤；张筠英 刊期： 2008年第06期
目的:分析老年2型糖尿病患者骨密度的变化及其与血糖水平的相关性,探讨血糖水平高低对其骨密度的影响.方法:采用定量CT对160例老年2型糖尿病患者(血糖及糖化血红蛋白控制正常组80例,血糖及糖化血红蛋白异常增高组80例)及健康老年人80例进行腰椎骨密度测定,检测血糖水平并分析其相关性;比较糖尿病高血糖组、糖尿病血糖控制正常组和健康老年对照组的骨质疏松的发生率.结果:糖尿病高血糖组骨密度低于对照组及糖尿病血糖控制正常组(P<0.05);糖尿病高血糖组骨质疏松症发生率明显高于对照组及糖尿病血糖控制正常组(P<0.05);老年2型糖尿病患者的骨密度与血糖水平呈负相关关系(老年男性组:r=-0.738 2,P=0.001 3;老年女性组:r=-0.834 3,p=0.000 7).结论:老年2型糖尿病患者的血糖水平影响骨密度,血糖水平越高,骨密度越低;血糖控制不佳的老年2型糖尿病患者更易患骨质疏松症.
作者：王桂芝；乔俊华；梁萍；刘纯岩 刊期： 2008年第06期
宫颈糜烂是妇科常见疾病,其患病人数占妇科门诊总人数的40%～60%,目前主要用物理方法进行治疗.本院2005年4月-2007年12月采用微米光和高频电波刀治疗重度宫颈糜烂297例,现报道如下.
作者：梁海；王鸿艳 刊期： 2008年第06期
目的:建立分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,探讨损伤肝组织匀浆对MSCs的诱导分化作用.方法:采用密度梯度离心、贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,以含10%损伤肝组织匀浆、10%FBS的L-DMEM培养基诱导培养,并在不同时间点采用免疫组织化学方法(SP)检测甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(Alb)的表达.结果:MSCs在含10%损伤肝组织匀浆的10%FBS L-DMEM培养基中培养,呈类上皮样细胞.诱导组在培养7 d时,大部分细胞呈AFP阳性表达(75.2%),与对照组比较差异有显著性(P<0.05);诱导培养14、21和28 d AFP表达阳性率分别为35.2%、12.3%和2.0 0A,组间比较差异有显著性(P<0.05);诱导组在培养7 d仅少数细胞Alb呈阳性表达(14.6%),诱导培养14、21和28 d Alb表达阳性率分别为67.6 oA、88.9%和95.6%,诱导组与对照组比较及不同时间点比较差异均有显著性(P<0.05).结论:此方法可获得纯度较高MSCS,损伤肝组织匀浆可诱导MSCs表达AFP和Alb.
作者：赵文静；方艳秋；齐亚灵；刘婷；牛凤兰；谭岩 刊期： 2008年第06期
1 临床资料本组所选择呼吸道感染病例为门诊可随访者,少数为住院患者,共141例,随机分为治疗组和对照组.治疗组74例,男性39例,女性35例,年龄17～53岁,平均年龄45.3岁;其中急性咽炎12例,急性扁桃体炎10例,急性支气管炎20例,社区获得性肺炎15例,支气管扩张8例,哮喘继发感染9例.对照组67例,男性35例.女性32例,年龄17～55岁,平均年龄45.5岁;其中急性咽炎11例,急性扁桃体炎9例,急性支气管炎18例,社区获得性肺炎14例,支气管扩张7例,哮喘继发感染8例.
作者：乔国伟；张野光 刊期： 2008年第06期
膝关节损伤是篮球运动员常见的运动损伤,严重影响运动成绩的发挥.本研究拟从膝关节的解剖特点和运动特点探讨篮球专业大学生运动中造成膝关节损伤的原因,为其在训练和比赛中预防膝关节损伤提供参考.
作者：赵立君；魏朝晖；付凯 刊期： 2008年第06期
目的:探讨体外循环期间经肺动脉灌注肺保护液及氧合机器血对犬肺形态及功能的保护效果.方法:将18只杂种犬随机分为对照组、氧合血组(B组)及保护液组(P组)(每组6只).体外循环(CPB)期间氧合血组及保护液组分别经肺动脉灌注氧合机器血和肺保护液,CPB前及停止后15及60 min,监测气道峰压、肺血管阻力和肺静脉血氧分压,留取血标本做生化分析.对肺组织进行光、电镜观察.结果:氧合血组CPB后15和60 min气道阻力均明显高于CPB前(P<0.05),且低于对照组相应时间点(P<0.05).各组CPB后15和60 min肺血管阻力均明显高于CPB前(P<0.01),肺保护液组CPB后15和60 min肺血管阻力明显低于氧合血组及对照组(P<0.05).各组CPB后15和60 min氧指数均明显高于CPB前(P<0.01),肺保护液组CPB后15和60 min氧指数明显高于氧合血组及对照组(P<0.05).肺保护液组CPB后60 min肺泡-动脉氧压力差(P[A-a]O2)明显低于氧合血组及对照组(P<0.001).肺保护液组肺组织MDA含量及支气管肺泡灌洗液(PAL)中性粒细胞计数明显低于氧合血组(P<0.05)及对照组(P<0.001,P<0.05),且氧合血组低于对照组(P<0.01,P<0.05).肺保护液组组织学改变明显轻于氧合血组(P<0.05)及对照组(P<0.001),且氧合血组明显轻于对照组(P<0.001).结论:CPB后肺脏形态和功能有明显变化,肺动脉灌注低温肺保护液对犬肺形态和功能有良好保护作用.
作者：林柏松；李玉林；张秀和；张柏民；姜亦忠 刊期： 2008年第06期
目的:利用Meta分析方法比较髓内针固定与钢板固定治疗成人肱骨干骨折的疗效.方法:计算机检索Pubmed、OVID医学期刊全文数据库、中国知网(CNKI)和中国生物医学文献数据库(CBM)1990-2007年关于髓内针固定与钢板固定比较治疗成人肱骨干骨折的随机对照试验性论文,并评价纳入研究的方法学质量.统计软件采用Cochrane协作网提供的RevMan 4.2.8.结果:共纳入Jadad量表评分3分以上文章6篇,共430例患者.Meta分析结果表明,髓内针固定组与钢板固定组比较治疗成人肱骨干骨折术后骨折不愈合率低,其差异有显著性[OR=0.44,95%CI(0.20,0.97),P=0.043,在术后疼痛、感染率及医源性桡神经损伤率上,两者比较差异无显著性(P>0.05).Lin等和彭海洲等的研究结果显示,髓内针组与钢板组术后出现肩肘关节活动受限比较差异无显著性(P=0.97,I2=0);而Chapman等研究结果显示髓内针组术后出现肩肘部活动受限高于钢板组(P=0.05),黄贤政等研究结果显示钢板组术后出现肩肘部活动受限高于钢板组(P=0.06).结论:髓内针固定组与钢板固定组比较,治疗成人肱骨干骨折术后骨折不愈合率低,其余指标无明显差异.
作者：张大鹏；孙大辉；谷贵山 刊期： 2008年第06期
目的:研究肝细胞生长因子受体(c-met)在宫颈癌中的表达,探讨其与增殖细胞核抗原(PCNA)的关系.方法:运用免疫组化(SP)方法检测14例慢性宫颈炎和50例宫颈癌组织中c-met及PCNA的表达率.结果:在慢性宫颈炎组织,c-met表达阳性率为14.3%(2/14),而在宫颈癌组织,其表达阳性率为62.0%(31/50),两者比较差异有显著性(P<0.05).组织分化程度低组c-met表达率高于分化程度高组(P<0.05),淋巴结转移组的c-me t表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05),鳞癌组与腺癌组c-met表达率比较差异无显著性(P>0.05),临床Ⅰ期和Ⅱ期组c-met表达量比较差异无显著性(P>0.05).在慢性宫颈炎组织中,PCNA指数为24.79%±5.1%,在宫颈癌组织中,PCNA指数为39.9%±15.46%,两者比较差异有显著性(P<0.05).组织分化程度越低、临床分期越晚PCNA的表达量越高(P<0.05),鳞癌组与腺癌组的PCNA表达量比较差异无显著性(P>0.05).c-met阳性表达组的PCNA指数明显高于c-met阴性表达组(P<0.01).结论:c-met的表达与PCNA密切关联,可作为评估宫颈癌预后的一个指标.
作者：舒畅；方艳秋；齐亚灵；刘婷；谭岩；张晓霞 刊期： 2008年第06期
目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础.方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆人表达载体pRSET B中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting鉴定.结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43 000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2～5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;后一次样品3个稀释度(1:1 000、1:3 000、1:5 000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带.结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体.
作者：张煜；于湘辉；查晓；王安荣；孔维 刊期： 2008年第06期
目的:研究卵巢癌组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的表达,探讨PI3K在卵巢癌发生及发展中的作用.方法:应用RT-PCR检测10例卵巢癌组织、10例卵巢良性肿瘤组织及10例正常卵巢组织中PI3K mRNA表达.应用免疫组化方法检测PI3K蛋白在60例卵巢癌、24例卵巢良性肿瘤及24例正常卵巢组织中的表达.结果:PI3K mRNA在卵巢癌组织中表达量高于正常卵巢及卵巢良性肿瘤(P<0.01),在卵巢良性肿瘤组织中表达量与正常卵巢组织表达量比较差异无显著性(P>0.05).PI3K蛋白表达主要定位于细胞质和(或)胞核.PI3K蛋白在卵巢癌组的阳性表达率明显高于正常卵巢组和卵巢良性肿瘤组(P<0.01);PI3K蛋白的表达强度与病理分级及临床分期有关,卵巢癌分化越差PI3K蛋白表达越强(P<0.05),临床分期越晚,其PI3K蛋白阳性表达率也越高(P<0.05).结论:PI3K mRNA和蛋白在卵巢癌组织表达明显增强,PI3K基因在卵巢癌发生及发展中起促进作用.
作者：张晓霞；费军伟；于晓伟；倪劲松；王芯蕊；李荷莲 刊期： 2008年第06期
目的:研究蒺藜皂苷(GSTT)对成年豚鼠心室肌细胞动作电位和钾通道的影响,初步探讨其抗心律失常的作用及机制.方法:分离豚鼠心肌细胞,建立缺氧模型,分为正常对照组、模型组及GSTT10和30 mg·L-1组,采用全细胞膜片钳记录各组成年豚鼠单个心肌细胞的电位变化及测定钾通道电流.结果:与模型组比较,GSTT 30 mg·L-1组缺氧细胞动作电位平台期即动作电位复极时程(50%和90%)延长(P<0.01).将保持电位控制在-40 mV,测试电位从-100 mV到+100 mV,阶跃命令为+10 mV,时程300 ms.正常对照组豚鼠心室肌细胞钾通道处于关闭状态,GSTT 10和30 mg·L-1剂量组在+80 mV时其峰值电流分别为(1.19±0.20)和(1.15±0.10)nA,与模型组[(1.50±0.20)nA]比较差异有显著性(P<0.05和P<0.01).结论:GSTT可阻碍缺氧导致的钾电流增加,即减少缺氧引起的钾离子外流,改善胞内钾离子丢失状态,显著延长缺氧细胞动作电位复极时程,延长有效不应期,从而改善缺氧及钾丢失导致的心肌细胞电生理异常,减少心律失常的发生,保护心肌细胞.
作者：李红；张爽；石卓；杨世杰 刊期： 2008年第06期
为探讨脂肪肝与胆囊结石发病的关系,本文作者对近3年来本院体检及就诊的40岁以上376例患者彩色多普勒超声检查结果进行对比分析,发现脂肪肝患者胆囊结石发病率明显高于无脂肪肝者,现报道如下.
作者：丁怡敏；马志辉；门洪君 刊期： 2008年第06期
吉林大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：吉林大学
