冯春生；王艳姝；仇金鹏；岳云；麻海春
目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)NS5A基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞株(HL-7702细胞)中进行表达,为今后研究HCV NS5A蛋白功能奠定基础.方法:从含HCV NS345序列的重组质粒pCDNA3.1(+)/NS345中扩增出HCV NS5A基因片段,构建pCI-neo/NS5A重组表达质粒.用脂质体将其转染HL-7702细胞,通过Western blotting印迹法鉴定NS5A蛋白.结果:用PCR方法扩增的HCV NS5A基因全长1 344 bp,与PGEM-T重组,测序证实所克隆的NSSA基因片段大小正确;成功地构建pCI-neo/NS5A重组表达质粒,瞬时转染HL-7702细胞表达NS5A蛋白,Western blotting印迹法显示其相对分子质量约为56 000.结论:HCV NS5A的真核表达载体pCI-neo/NS5A在HL-7702细胞中能有效表达NS5A蛋白,NS5A蛋白可导致病毒复制、肝细胞癌发生,且NS5A区为IFN敏感性决定区.
作者：苏秀芬；姜艳芳；王峰；牛俊奇 刊期： 2008年第06期
1 临床资料患者,女,47岁.因发热、乏力6个月,加重伴右上腹胀痛1个月入院.既往曾于当地医院在超声引导下行肝脏穿刺活检,病理提示：肝细胞浊肿坏死,肝细胞间毛细血管网形成,慢性炎细胞浸润;PET检查提示：肝脏恶性病变,伴肝内多发转移,肝右叶2个放射性缺失区考虑为血管瘤.
作者：王岩；黄建新；封淑文；刘爱琴；杜巧 刊期： 2008年第06期
1 资料与方法选择2005年1月-2008年1月来本院门诊就诊的182例牙龈萎缩根面暴露的老年人作为研究对象,其中男性101例,女性81例,年龄60～72岁,随机分为实验组和对照组各91例.实验组和对照组均按常规方法记录牙龈退缩数和根面龋坏数,实验组每日使用1次0.05%氟化钠溶液(本院制剂室制剂)作为漱口水含漱,对照组使用0.09%氯化钠溶液(长春豪邦药业有限公司生产,国药准字20023482)作为漱口水含漱,每次用量均为10 mL,每次含漱1 min,漱口后半小时内不进食、不饮水.
作者：武常亮；王晓薇；王艳秋 刊期： 2008年第06期
为探讨脂肪肝与胆囊结石发病的关系,本文作者对近3年来本院体检及就诊的40岁以上376例患者彩色多普勒超声检查结果进行对比分析,发现脂肪肝患者胆囊结石发病率明显高于无脂肪肝者,现报道如下.
作者：丁怡敏；马志辉；门洪君 刊期： 2008年第06期
目的:探讨20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)诱导人大细胞肺癌细胞NCI-H460凋亡及其机制.方法:MTT法测定NCI-H460细胞的增殖,依据其半数抑制浓度(IC50)将SPG-Rg3实验组分为25、50及100 mg·L-1组,并设空白对照组.采用AO/EB荧光双染、免疫细胞化学染色、Rhodamine 123摄取法及Fluo-3/AM染色分别观察NCI-H460细胞的凋亡、Bcl-2及Bax蛋白的表达量、线粒体跨膜电位及细胞内游离钙离子浓度.结果:SPG-Rg3能抑制NCI-H460的生长,抑制率与浓度呈正相关(r=0.764,P<0.05),其IC50值为47.97 mg?L-1;SPG-Rg3组NCI-H460细胞呈现明显凋亡改变;SPG-Rg3 100 mg?L-1组细胞内Bcl-2蛋白的表达量明显低于空白对照组(P<0.01)f SPG-Rg3各浓度组细胞Bax蛋白的表达量均明显高于对照组(P<0.001),并随浓度的增大而增加(P<0.01);各浓度组细胞内Bax/Bcl-2比值均高于对照组,细胞内线粒体跨膜电位则均低于对照组(P<0.01),并随药物作用浓度的增加而减少,组间比较差异有显著性(P<0.01);各组细胞内游离钙离子浓度明显高于对照组(P<0.01).结论:SPG-Rg3能够明显抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡.其作用机制可能是SPG-Rg3促进细胞内Bax蛋白的表达并增加Bax/Bcl-2比值,降低线粒体跨膜电位,提高细胞内游离钙离子浓度,终经线粒体通路诱导细胞凋亡.
作者：王光兰；崔俊生；王心蕊；石博；高静；倪劲松 刊期： 2008年第06期
目的:初步探讨半导体激光诱导耐药MCr63细胞凋亡的分子机制,为其临床应用提供理论依据.方法:MG-63耐药细胞(密度为1.0 × 109?L-1)经激光照射分为对照组及半导体激光30、60、90和120 J·cm-2组.MTT法检测耐药MG-63细胞活性;流式细胞仪检测细胞活性氧含量;Western blotting方法检测caspase-8、caspase-9和caspase-3蛋白表达.结果:与对照组比较,半导体激光60、90和120 J·cm-2组MG-63耐药细胞活性降低(P<0.05或P<0.01),细胞增殖抑制率随激光剂量增加而升高;与对照组比较,以上各半导体激光组激光照射后细胞内活性氧水平升高(P<0.05或P<0.01),同时细胞中caspase-9和caspase-3蛋白的表达量随激光剂量增加而增强(P<0.05或P<0.01),而caspase-8蛋白的表达量差异无显著性(P>0.05).半导体激光30 J·cm-2组细胞活性、活性氧含量、caspase-9和caspase-3蛋白的表达与对照组比较差异均无显著性(P>0.05).结论:60～120 J·cm-2组的半导体激光可通过线粒体凋亡通路诱导耐药MG-63细胞凋亡,从而抑制细胞增殖,这一过程与活性氧的产生密切相关.
作者：李贵斌；刘军；谷贵山 刊期： 2008年第06期
目的:探讨釉原蛋白对牙髓硬组织形成的诱导作用,为釉原蛋白诱导硬组织形成功能的研究提供实验依据.方法:Wistar雄性大鼠16只,随机分为正常对照组和实验组[连续注射环磷酰胺(CP)14 d],采用组织学和免疫组织化学的方法,观察切牙成牙本质细胞及牙髓组织发生的各种变化及与釉原蛋白的关系.结果:实验组注射CP后切牙形成端处于细胞增殖期和分化期的成牙本质细胞和牙髓细胞发生了广泛的水肿、变性甚至部分坏死、消失.牙髓损害区唇侧成釉器对应的牙髓侧,可见骨样牙本质样的硬组织形成;成釉器的增殖端附近可见成釉细胞分化,而且在新生硬组织表面分泌很厚的釉基质,经免疫组织化学染色釉原蛋白呈阳性表达.正常对照组无变化.结论:CP抑制成牙本质细胞形成后,釉原蛋白具有诱导牙髓形成硬组织的作用.
作者：倪雪岩；姜秋；吕亚林；高野吉郎 刊期： 2008年第06期
目的:检测海洛因对大鼠神经胶质瘤C6细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达的影响,为探索海洛因成瘾的分子生物学机制提供依据.方法:大鼠神经胶质瘤C6细胞加入浓度为0～100 mg?L-1的海洛因进行细胞培养,24 h后用MTT法检测海洛因对C6细胞存活率的影响.RT-PCR法检测海洛因作用下C6细胞PCNA mRNA的表达.结果:MTT结果显示海洛因浓度为10、20和100 mg·L-1时c6细胞存活率分别为90.62%、80.97%和62.73%,与对照组比较明显下降(P<0.05).在转录物水平,浓度为20 mg?L-1的海洛因作用于C6细胞48 h时,PCNA基因的转录产物PCNA mRNA明显减少,与对照组比值为0.297(P<0.01).结论:海洛因浓度为20 mg·L-1时对C6细胞的增殖抑制作用接近30%,可能与海洛因成瘾形成有关.
作者：迟秀梅；张纪周；阚幕洁；洪敏 刊期： 2008年第06期
目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础.方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆人表达载体pRSET B中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting鉴定.结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43 000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2～5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;后一次样品3个稀释度(1:1 000、1:3 000、1:5 000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带.结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体.
作者：张煜；于湘辉；查晓；王安荣；孔维 刊期： 2008年第06期
1 临床资料患者,男性,46岁.无明显诱因出现双眼痛、视力突然下降,伴头痛、头昏及耳鸣9 d入院.入院后查体：心肺检查未见异常.眼科情况：右眼视力0.05(不能矫正),眼压17 mmHg,角膜后灰白色KP(+),前房深度正常,房水闪辉(+),虹膜纹理清,瞳孔圆形居中,直径约4 mm,对光反射迟钝,玻璃体点状混浊;眼底视盘界不清,色淡红,后极部视网膜水肿,2：00-4：00位周边部视网膜青灰色隆起,其上血管迂曲,高处+3D视清,血管走行大致正常,黄斑中心凹反射消失.
作者：李林；吕华毅 刊期： 2008年第06期
目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)99Tcm-MIBI显像与手术131Ⅰ清甲后复发的关系.方法:经手术病理确诊为DTC清甲治疗后患者173例,行99Tcm-MIBI双时相甲状腺局部静态显像,利用感兴趣区技术,分别计算99Tcm-M1BI早期、延迟T/N比值及洗脱率;依据Tg、TgAb、B超、X线及全身131Ⅰ显像的复发判定标准,分析DTC手术131Ⅰ清甲治疗成功后复发率;比较复发与无复发组99Tcm-MIBI早期、延迟T/N比值及洗脱率.结果:DTC手术131Ⅰ清甲治疗成功后3年内复发率为5.20%(9/173).其中乳头状癌复发率为4.90%(5/102),滤泡状癌复发率为5.63%(4/71),两组问比较差异无显著性(P>0.05).无论何种病理类型,分化型甲状腺癌复发组早期、延迟T/N比值均明显低于无复发组(P<0.05),洗脱率明显高于无复发组(P<0.05).结论:'99
作者：张浩然；赵劼；孙辉；温强；赵国庆；马庆杰 刊期： 2008年第06期
1 资料与方法符合冠心病诊断参考标准、具有典型的心绞痛发作及心电图改变的患者120例,随机分为3组：①刺五加注射液治疗组45例(男性30例,女性15例,年龄55～69岁),刺五加注射液(黑龙江省乌苏里江制药厂)60 mL加入5%葡萄糖注射液250 mL,每日1次静点,2周为1个疗程.
作者：李向辉；刘洋 刊期： 2008年第06期
目的:利用Meta分析方法比较髓内针固定与钢板固定治疗成人肱骨干骨折的疗效.方法:计算机检索Pubmed、OVID医学期刊全文数据库、中国知网(CNKI)和中国生物医学文献数据库(CBM)1990-2007年关于髓内针固定与钢板固定比较治疗成人肱骨干骨折的随机对照试验性论文,并评价纳入研究的方法学质量.统计软件采用Cochrane协作网提供的RevMan 4.2.8.结果:共纳入Jadad量表评分3分以上文章6篇,共430例患者.Meta分析结果表明,髓内针固定组与钢板固定组比较治疗成人肱骨干骨折术后骨折不愈合率低,其差异有显著性[OR=0.44,95%CI(0.20,0.97),P=0.043,在术后疼痛、感染率及医源性桡神经损伤率上,两者比较差异无显著性(P>0.05).Lin等和彭海洲等的研究结果显示,髓内针组与钢板组术后出现肩肘关节活动受限比较差异无显著性(P=0.97,I2=0);而Chapman等研究结果显示髓内针组术后出现肩肘部活动受限高于钢板组(P=0.05),黄贤政等研究结果显示钢板组术后出现肩肘部活动受限高于钢板组(P=0.06).结论:髓内针固定组与钢板固定组比较,治疗成人肱骨干骨折术后骨折不愈合率低,其余指标无明显差异.
作者：张大鹏；孙大辉；谷贵山 刊期： 2008年第06期
目的:探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者不同外周血细胞GPI锚定蛋白的表达情况,为PNH的诊断和鉴别诊断提供依据.方法:采用流式细胞术检测32例PNH患者外周血各类细胞膜上CD55、CD59、CDl6及CD14的表达百分率.结果:PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜上CD55、CD59表达均明显减少,与正常对照组比较差异有显著性(P<0.001),且粒细胞上CD55、CD59表达率低于红细胞(P<0.05);血小板CD55、CD59表达率也较对照组减少(P<0.05);有27例PNH患者的淋巴细胞CD55、CD59表达降低,其缺失率达30%,低于粒细胞和红细胞;CDl6在粒细胞上表达量差异很大(34%～83%),与对照组比较差异有显著性(P<0.001);在单核细胞上可见CDl4表达缺失的PNH克隆,CD14表达比例明显低于正常对照组(P<0.001).结论:检测外周各系血细胞CD55和CD59可以使典型PNH的诊断更加可靠,使部分缺乏典型临床表现的PNH明确诊断.检测CD16和CD14对排除PNH具有重要意义.
作者：段秀梅；车媛媛；谭岩；方艳秋；许淑芬；刘磊；孙牧男 刊期： 2008年第06期
目的:分析老年2型糖尿病患者骨密度的变化及其与血糖水平的相关性,探讨血糖水平高低对其骨密度的影响.方法:采用定量CT对160例老年2型糖尿病患者(血糖及糖化血红蛋白控制正常组80例,血糖及糖化血红蛋白异常增高组80例)及健康老年人80例进行腰椎骨密度测定,检测血糖水平并分析其相关性;比较糖尿病高血糖组、糖尿病血糖控制正常组和健康老年对照组的骨质疏松的发生率.结果:糖尿病高血糖组骨密度低于对照组及糖尿病血糖控制正常组(P<0.05);糖尿病高血糖组骨质疏松症发生率明显高于对照组及糖尿病血糖控制正常组(P<0.05);老年2型糖尿病患者的骨密度与血糖水平呈负相关关系(老年男性组:r=-0.738 2,P=0.001 3;老年女性组:r=-0.834 3,p=0.000 7).结论:老年2型糖尿病患者的血糖水平影响骨密度,血糖水平越高,骨密度越低;血糖控制不佳的老年2型糖尿病患者更易患骨质疏松症.
作者：王桂芝；乔俊华；梁萍；刘纯岩 刊期： 2008年第06期
目的:研究去氢表雄酮(DHEA)及其代谢物去氢表雄酮硫酸酯(DHEAs)对HepG2和HT-29细胞增殖的抑制作用及其机制.方法:HepG2和HT-29细胞分别分为对照组、不同浓度(1、10、50、100及200 μmol·L-1)DHEA组和DHEAs组,孵育8、24、48及72 h后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和BrdU测定法检测DHEA对肿瘤细胞的生长抑制率,同时测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰A还原酶(HMGR)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)及乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:①MTT法结果显示,与对照组比较,不同浓度DHEA组HepG2和HT-29细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05).作用24 h时,100 μmol·L-1 DHEA组细胞增殖抑制率降低显著(P<0.05),而DHEAs组差异无显著性(P>0.05).②BrdU法结果显示,当DHEA浓度在50、100和200 μmol·L-1时细胞的生长均显著受到抑制,尤其以HepG2细胞的生长抑制率高(P<0.05).③DHEA对HepG2细胞HMGR活性抑制率为62%,对HT-29细胞HMGR活性抑制率为51%,而DHEAs则无明显作用.④100 μmol·L-1 DHEA抑制G6PD的效力为85%,而DHEAs的抑制效力仅为6%.⑤DHEA和DHEAs对细胞LDH的活性影响组间比较差异无显著性(P>0.05).结论:DHEA对HepG2和HT-29两种肿瘤细胞系均具有较强的抗增殖作用,能明显降低细胞的G6PD或HMGR活性,DHEAs则无明显作用.
作者：姜艳芳；赵平伟；谭岩；方艳秋；松崎静司 刊期： 2008年第06期
目的:观察甲基化硒酸(MSA)对DUl45前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法:采用MTT比色法观察1.25、2.50和5.00 μmol·L-1MSA对DU145细胞增殖活力的抑制作用;吖啶橙染色观察MSA诱导细胞凋亡情况;流式细胞术分析细胞周期及凋亡,并计算细胞平均凋亡指数;免疫细胞化学技术观察细胞内激活的caspase-3的表达情况.结果:经1.25、2.50和5.00μmol·L-1MSA处理48 h后,DU145细胞生长抑制率分别为16.35%、38.10%和73.54%,3组间比较差异有显著性(P<0.01),随MSA浓度升高细胞生长抑制率增加,呈明显的剂量依赖性.吖啶橙荧光染色可见,经1.25、2.50和5.00μmol·L-1MSA处理后的细胞呈明显凋亡形态,并随药物剂量增加凋亡细胞数增多;流式细胞术结果显示,经1.25、2.50和5.00 μmol·L-1MSA处理48 h后,细胞凋亡率分别为,5.34%、8.71%和13.60%,3组间比较差异有显著性(P<0.05),随MSA浓度升高细胞凋亡率升高,呈剂量依赖关系;免疫细胞化学染色结果显示,随着MSA剂量增加,细胞内激活的caspase-3表达上调.结论:MSA对DU145细胞具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与激活的caspase途径诱导细胞凋亡有关.
作者：刘艳波；赵丹；郭亚雄；赵丽晶；张海涛；董妍；赵丽娟；赵雪俭 刊期： 2008年第06期
1 临床资料本组所选择呼吸道感染病例为门诊可随访者,少数为住院患者,共141例,随机分为治疗组和对照组.治疗组74例,男性39例,女性35例,年龄17～53岁,平均年龄45.3岁;其中急性咽炎12例,急性扁桃体炎10例,急性支气管炎20例,社区获得性肺炎15例,支气管扩张8例,哮喘继发感染9例.对照组67例,男性35例.女性32例,年龄17～55岁,平均年龄45.5岁;其中急性咽炎11例,急性扁桃体炎9例,急性支气管炎18例,社区获得性肺炎14例,支气管扩张7例,哮喘继发感染8例.
作者：乔国伟；张野光 刊期： 2008年第06期
目的:研究不同浓度酪蛋白磷酸多肽-非结晶型磷酸钙(CPP-ACP)及其与氟(F)联合应用对牙釉质表层下脱矿再矿化的影响,为正畸后的釉质脱矿提供一种治疗途径.方法:取正畸拔除的前磨牙70颗,乳酸凝胶法制备人工早期釉质表层下脱矿后,按随机数字表法分为7组:5.0%CPP-ACP、1.0%CPP-ACP、0.1%CPP-ACP、5.0%CPP-ACFP、磷酸钙饱和溶液、饱和溶液+F及去离子水组.对各组进行显微放射照相并测量脱矿深度与脱矿量.结果:除去离子水组外,各组再矿化后较再矿化前脱矿深度和脱矿量均显著降低(P<0.05);5.0%CPP-ACFP组显著低于其他各组(P<0.05,P<0.01),5.0%CPP-ACP组与1.0%和0.1%CPP-ACP组比较脱矿深度和脱矿量显著降低(P<0.05,P<0.01),0.1%CPP-ACP组与磷酸钙饱和溶液、饱和溶液+F组比较差异无显著性(P>0.05),但均低于去离子水组(P<0.05,P<0.01).结论:CPP-ACP溶液可于体外使脱矿牙釉质发生再矿化,且矿化作用可被氟加强;再矿化作用与CPP稳定的钙磷浓度呈剂量-效应关系.
作者：周春华；孙新华；黄洋；李博 刊期： 2008年第06期
目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对兔颈动脉粥样硬化斑块中基质金属蛋白酶(MMPs)水平的影响及其形态学改变.方法:体外用动脉导管球囊损伤家兔颈内动脉建立兔动脉粥样硬化模型,随机分为NAC组(给予NAC治疗6周)和对照组(不给予治疗).光镜下观察兔损伤动脉粥样斑块形成情况.应用SDS-Page-Zymograph法检测兔实验前后血清MMP-2及MMP-9水平.用免疫组化方法定性检测含MMPs泡沫细胞数量及含TIMP-2泡沫细胞数量.测量血管新生内膜面积、管腔面积及管壁厚度.结果:NAC组兔动脉损伤管腔新生内膜面积[(1.72±0.26)mm2]较对照组[(2.66±0.19)mm.]减少(P<0.05),内膜厚度[(0.132±0.031)mm]较对照组[(0.231±0.022)mm]减少(P<0.05),血管腔面积[(0.54±0.15)mm2]较对照组[(0.31±0.12)mm2]扩大(P<0.05).NAC组血管壁直线距离上含MMPs的泡沫细胞(8.0±1.8)较对照组(22.0±2.2)明显减少(P<0.05),含TIMP-2的泡沫细胞(10.0±1.2)较对照组(6.0±1.6)明显增多(P<0.05).NAC组血清MMP-2、pro-MMP-2及pro-MMP-9水平较对照组明显降低(P<0.05).结论:NAC能抑制泡沫细胞增生,防止血管硬化,抑制MMPs对动脉粥样斑快的降解,稳定斑块.
作者：孟晓萍；王永维；崔建华；韩敏；耿丽；于沛；潘迪 刊期： 2008年第06期
吉林大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：吉林大学
