学术投稿

损伤肝组织匀浆诱导间充质干细胞甲胎蛋白和白蛋白的表达

赵文静;方艳秋;齐亚灵;刘婷;牛凤兰;谭岩

关键词:骨髓祖代细胞, 甲胎蛋白, 白蛋白
摘要:目的:建立分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,探讨损伤肝组织匀浆对MSCs的诱导分化作用.方法:采用密度梯度离心、贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,以含10%损伤肝组织匀浆、10%FBS的L-DMEM培养基诱导培养,并在不同时间点采用免疫组织化学方法(SP)检测甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(Alb)的表达.结果:MSCs在含10%损伤肝组织匀浆的10%FBS L-DMEM培养基中培养,呈类上皮样细胞.诱导组在培养7 d时,大部分细胞呈AFP阳性表达(75.2%),与对照组比较差异有显著性(P<0.05);诱导培养14、21和28 d AFP表达阳性率分别为35.2%、12.3%和2.0 0A,组间比较差异有显著性(P<0.05);诱导组在培养7 d仅少数细胞Alb呈阳性表达(14.6%),诱导培养14、21和28 d Alb表达阳性率分别为67.6 oA、88.9%和95.6%,诱导组与对照组比较及不同时间点比较差异均有显著性(P<0.05).结论:此方法可获得纯度较高MSCS,损伤肝组织匀浆可诱导MSCs表达AFP和Alb.
吉林大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 卵巢上皮性癌组织RhoC和MMP-2蛋白的表达及其临床意义

    目的:研究RhoC和MMP-2蛋白在卵巢上皮性癌组织中表达及其临床意义,为判定卵巢上皮性癌的生物学行为及预后提供依据.方法:采用免疫组织化学方法检测10例正常卵巢组织、12例卵巢上皮性良性肿瘤及91例卵巢上皮性癌组织中RhoC与MMP-2蛋白的表达,并与临床特征进行相关性分析.结果;RhoC及MMP-2蛋白在卵巢良性肿瘤和卵巢正常组织中的阳性表达率均为0,在卵巢上皮性癌组织中阳性表达率分别为37.3%和68.1%,RhoC和MMP-2蛋白在卵巢癌组织中的表达明显高于卵巢良性肿瘤和卵巢正常组织.中、低分化卵巢癌的阳性表达率明显高于高分化卵巢癌(P<0.05,P<0.005),Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌的阳性率明显高于Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌(P<0.005),有转移的卵巢癌RhoC和MMP-2蛋白的阳性表达率明显高于无转移卵巢癌(P<0.005,P<0.05),卵巢癌组织中RhoC与MMP-2阳性表达呈正相关(r=0.492,P<0.05).结论:RhoC与MMP-2蛋白的表达与卵巢癌的细胞分化程度、临床分期及有无转移密切相关,且两者呈正相关.临床检测卵巢癌RhoC与MMP-2蛋白的表达,可以作为判断卵巢癌生物学行为及患者预后的参考指标.

    作者:潘颖;朱丹;司乃文;张文颖 刊期: 2008年第06期

  • 半导体激光诱导耐药MG-63细胞凋亡的机制

    目的:初步探讨半导体激光诱导耐药MCr63细胞凋亡的分子机制,为其临床应用提供理论依据.方法:MG-63耐药细胞(密度为1.0 × 109?L-1)经激光照射分为对照组及半导体激光30、60、90和120 J·cm-2组.MTT法检测耐药MG-63细胞活性;流式细胞仪检测细胞活性氧含量;Western blotting方法检测caspase-8、caspase-9和caspase-3蛋白表达.结果:与对照组比较,半导体激光60、90和120 J·cm-2组MG-63耐药细胞活性降低(P<0.05或P<0.01),细胞增殖抑制率随激光剂量增加而升高;与对照组比较,以上各半导体激光组激光照射后细胞内活性氧水平升高(P<0.05或P<0.01),同时细胞中caspase-9和caspase-3蛋白的表达量随激光剂量增加而增强(P<0.05或P<0.01),而caspase-8蛋白的表达量差异无显著性(P>0.05).半导体激光30 J·cm-2组细胞活性、活性氧含量、caspase-9和caspase-3蛋白的表达与对照组比较差异均无显著性(P>0.05).结论:60~120 J·cm-2组的半导体激光可通过线粒体凋亡通路诱导耐药MG-63细胞凋亡,从而抑制细胞增殖,这一过程与活性氧的产生密切相关.

    作者:李贵斌;刘军;谷贵山 刊期: 2008年第06期

  • 人工股骨头置换手术治疗老年股骨颈骨折(附36例报告)

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    作者:林士钊;魏霖;陈世明;邹志新 刊期: 2008年第06期

  • 蛋白质酪氨酸磷酸酶及相关疾病

    蛋白质酪氨酸磷酸酶家族是细胞信号转导中的重要调节因子,参与多种细胞功能的调控.本文作者概述了几种重要的蛋白质酪氨酸磷酸酶PTPIB、TC-PTP、SHP-1、SHP-2、MEG2及PRL3等的功能,并介绍了其在许多人类疾病(癌症、心血管疾病、神经及代谢失调及自身免疫系统疾病等)的发生和发展中所起的重要作用.

    作者:李婉南;姜轶群;范晓迪;董洪钵 刊期: 2008年第06期

  • 牙髓炎患者牙髓组织中单核细胞趋化蛋白1的表达及意义

    目的:探讨牙髓炎患者牙髓组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达,揭示MCP-1在牙髓炎性疾病发生、发展中的作用机理.方法:应用免疫组织化学方法检测MCP-1在正常人健康牙髓(正畸或烤瓷牙需要拔髓者)、急性及慢性牙髓炎患者牙髓组织(各30例)中的分布.结果:在健康牙髓组织中未发现MCP-1表达阳性细胞.在急性牙髓炎症组织中,可见大量的中性粒细胞游出血管并向炎症中心趋化,MCP-1阳性细胞主要分布于中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞,阳性细胞平均灰度值119.73±17.12.在慢性牙髓炎症组织中,可见血管内皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、成纤维细胞、新生的毛细血管上MCP-1有不同程度的阳性表达,阳性细胞平均灰度值121.26±2.04,与急性牙髓炎症组织阳性细胞平均灰度值比较差异无显著性(P>0.05).结论:MCP-1在牙髓炎牙髓组织中有表达,在牙髓炎发生、发展过程中可能促进炎症组织的愈合.

    作者:张志民;高心;王成坤;张筠英 刊期: 2008年第06期

  • 美托洛尔治疗心绞痛103例临床观察

    本文作者对103例心绞痛患者采用选择性口受体阻滞剂美托洛尔治疗,取得满意的疗效,现报道如下.1 资料与方法本组心绞痛患者203例,男性111例,女性92例,年龄30~84岁,随机分为治疗组103例和对照组100例.对照组采用常规治疗方法,给予硝酸酯类、复方丹参、阿司匹林及降脂药等.治疗组在常规治疗基础上加用美托洛尔,从小剂量开始,6.25 mg,1日3次口服,5~7 d加量1次;高血压患者开始12.5 mg,逐渐加量,大剂量为50 mg/次,1日3次口服.疗效评定参照1974年修订的心绞痛疗效评定标准分为显效(I临床症状消失或基本消失,心电图恢复正常或基本正常)、有效(症状改善或心电图异常明显改善)及无效(临床症状和心电图均无改善).

    作者:王蓉;白丽华;张秀芹;丛义 刊期: 2008年第06期

  • 芦荟膏对大鼠拔牙创愈合的促进作用

    目的:观察芦荟膏在大鼠拔牙创愈合过程中的促进作用.方法:60只Wistar大鼠拔除左右上颌第一磨牙,建立拔牙创动物模型,随机分为实验1和2组(30%和50%芦荟膏组,每组30只),右侧拔牙创内放入芦荟青作为实验组,左侧常规处理(不放任何药物)作为对照组.于处理后2、4、6、8、11及15 d肉眼观察拔牙创软组织愈合情况,测量创口面积,并进行组织学观察.结果:拔牙第4天以后,实验1组和实验2组拔牙创面积与对照组比较明显缩小,差异有显著性(P<0.05),且实验1组拔牙创面积小于实验2组(P<0.05).组织学观察可见,实验组拔牙创内新骨形成比对照组早,实验1组拔牙后15 d骨样组织填充满拔牙创,较对照组及实验2组愈合快.结论:芦荟膏具有促进拔牙创成纤维细胞增殖及肉芽组织和上皮细胞生长的作用,有利于牙槽新骨形成,促进拔牙创的早期愈合,且30%芦荟膏的作用优于50%芦荟膏.

    作者:孟培松;刘馥菲;毕良佳;胡成己;王娜 刊期: 2008年第06期

  • 损伤肝组织匀浆诱导间充质干细胞甲胎蛋白和白蛋白的表达

    目的:建立分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,探讨损伤肝组织匀浆对MSCs的诱导分化作用.方法:采用密度梯度离心、贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,以含10%损伤肝组织匀浆、10%FBS的L-DMEM培养基诱导培养,并在不同时间点采用免疫组织化学方法(SP)检测甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(Alb)的表达.结果:MSCs在含10%损伤肝组织匀浆的10%FBS L-DMEM培养基中培养,呈类上皮样细胞.诱导组在培养7 d时,大部分细胞呈AFP阳性表达(75.2%),与对照组比较差异有显著性(P<0.05);诱导培养14、21和28 d AFP表达阳性率分别为35.2%、12.3%和2.0 0A,组间比较差异有显著性(P<0.05);诱导组在培养7 d仅少数细胞Alb呈阳性表达(14.6%),诱导培养14、21和28 d Alb表达阳性率分别为67.6 oA、88.9%和95.6%,诱导组与对照组比较及不同时间点比较差异均有显著性(P<0.05).结论:此方法可获得纯度较高MSCS,损伤肝组织匀浆可诱导MSCs表达AFP和Alb.

    作者:赵文静;方艳秋;齐亚灵;刘婷;牛凤兰;谭岩 刊期: 2008年第06期

  • taurolidine对小鼠黑色素瘤细胞辐射敏感性的作用及机制

    目的:研究taurolidine通过增强Bax和Bad蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,提高小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的辐射敏感性的作用及机制.方法:流式细胞仪检测0、10、25、50,100和150μmol·L-1taurolidine诱导B16-F10细胞凋亡的百分比;细胞克隆实验检测放射增敏性;Western blotting分析检测蛋白的表达.结果:50μmol·L-1taurolidine作用于B16-F10细胞48 h,可诱导5%的细胞凋亡,随作用时间的延长及taurolidine浓度的增加,细胞凋亡的百分率增加(P<0.05),呈显著的时效和量效关系;细胞克隆存活实验显示,当25μol·L-1 taurolidine与2 Gy X射线照射联合作用B16-F10细胞时,与单纯给药组和单纯照射组比较,给药联合放疗组的细胞存活率显著降低(P<0.05),并随着药物浓度及照射剂量的增加细胞存活率进一步下降,随着taurolidine的浓度逐渐提高,小鼠黑色素瘤细胞放射增敏比(SER Do和SER Dq)增高,50μmol·L-1 taurolidine组与10μmol·L-1组比较差异有显著性(P<0.05);同时促凋亡蛋白Bax和Bad的表达增强,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下降.结论:taurolidine联合X射线照射通过调节Bcl-2家族蛋白协同诱导小鼠黑色素瘤细胞凋亡,从而提高了放射敏感性.

    作者:孙宝胜;刘士新;王铁君;黄国民;龚守良;刘林林 刊期: 2008年第06期

  • 复方中药体外抗霉菌及抑菌实验研究

    本实验选用苦参、黄柏、龙胆草及百部4味中药,运用正交实验筛选中药组方,为后续研究提供理论依据.1 材料与方法 白色念珠菌由霉菌性阴道炎患者白带标本中临床分离.培养基为沙氏葡萄糖琼脂及液体培养基.药物为苦参、黄柏、龙胆草及百部.选用三水平四因素L9(34)正交表进行正交设计.四因素三水平分别为苦参A、黄柏B(3、6、10)、百部C(5、10、15)、龙胆草D(3、4.5、6).

    作者:王莘;王彬彬;陈薇;王维 刊期: 2008年第06期

  • 脉冲电离子治疗机治疗宫颈腺囊肿78例疗效观察

    1 临床资料近3年来本院门诊就诊诊断为宫颈腺囊肿患者108例.随机分为治疗组(78例)和对照组(30例).治疗时间均选在月经干净3~7 d内进行.治疗组行外阴、阴道消毒后,用MDZ-Ⅲ脉冲电离子治疗机笔式治疗头将囊肿烧灼-炭化-气化.

    作者:王艳秋;武常亮;常丽虹 刊期: 2008年第06期

  • 在校大学生神经衰弱病因调查分析

    为了解大学生神经衰弱的病因,对2001-2006年本院在校学生神经衰弱病因进行调查分析,现报道如下.1 临床资料2001-2006年,采取填表与门诊结合的方法对北华大学18个系的学生进行问卷调查,发放问卷10 000份,收回7 325份,门诊接诊1 818人次,共计对9 143名在校不同年级的大学生进行调查,并根据<实用内科学>中规定的神经衰弱的诊断原则及诊断标准确诊,排除精神分裂症、抑郁症和各种慢性病所导致的神经综合征.

    作者:郭莉娟;祝雁;郝曙光 刊期: 2008年第06期

  • 应用复方麝香注射液成功抢救阿普唑仑致昏迷1例报告

    关于阿普唑仑中毒的西药救治方法已有很多报道,但单独应用复方麝香注射液救治阿普唑仑中毒性昏迷成功的病例尚未见报道,现将此病例报道如下.1 临床资料患者,男性,35岁.患有甲状腺功能亢进1年,曾接受正规治疗,近期病情稳定.患者2 h前因生气口服阿普唑仑(具体用量不详)后呕吐1次,继而昏迷,被家人急送本院.在急诊室诊断为急性药物中毒,给予清水洗胃后收入内科.查体:血压120/90 mmHg,脉搏60次?min-1,体温36.0℃,呼吸浅,慢意识丧失,浅昏迷,双侧瞳孔缩小,对光反射减弱,病理反射未引出.

    作者:何红丽;朱冬元 刊期: 2008年第06期

  • 非Q波及ST段抬高性心肌梗塞1例报告

    1 临床资料患者,女性,87岁.因阵发性心悸气短3年,加重1周入院.3年来每于劳累、情绪激动出现心悸气短、胸闷,休息及应用扩冠药物可缓解症状.近1周因劳累、睡眠欠佳,上述症状加重.既往6年前因患乳腺癌,行左侧乳腺切除术.查体:一般状态良好,神志清晰,胸廓不对称,左侧胸壁可见长约15 cm之手术瘢痕.双肺叩之清音,右下肺闻及干罗音及小水泡音.

    作者:赵羽;胡中桥;赵灵芝 刊期: 2008年第06期

  • 甲基化硒酸对人前列腺癌DUl45细胞增殖与凋亡的影响

    目的:观察甲基化硒酸(MSA)对DUl45前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法:采用MTT比色法观察1.25、2.50和5.00 μmol·L-1MSA对DU145细胞增殖活力的抑制作用;吖啶橙染色观察MSA诱导细胞凋亡情况;流式细胞术分析细胞周期及凋亡,并计算细胞平均凋亡指数;免疫细胞化学技术观察细胞内激活的caspase-3的表达情况.结果:经1.25、2.50和5.00μmol·L-1MSA处理48 h后,DU145细胞生长抑制率分别为16.35%、38.10%和73.54%,3组间比较差异有显著性(P<0.01),随MSA浓度升高细胞生长抑制率增加,呈明显的剂量依赖性.吖啶橙荧光染色可见,经1.25、2.50和5.00μmol·L-1MSA处理后的细胞呈明显凋亡形态,并随药物剂量增加凋亡细胞数增多;流式细胞术结果显示,经1.25、2.50和5.00 μmol·L-1MSA处理48 h后,细胞凋亡率分别为,5.34%、8.71%和13.60%,3组间比较差异有显著性(P<0.05),随MSA浓度升高细胞凋亡率升高,呈剂量依赖关系;免疫细胞化学染色结果显示,随着MSA剂量增加,细胞内激活的caspase-3表达上调.结论:MSA对DU145细胞具有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与激活的caspase途径诱导细胞凋亡有关.

    作者:刘艳波;赵丹;郭亚雄;赵丽晶;张海涛;董妍;赵丽娟;赵雪俭 刊期: 2008年第06期

  • 乳腺癌根治术后皮下积液的预防与处理(附340例报道)

    乳腺癌的治疗是以根治性手术为基础的综合治疗,皮下积液是乳腺癌术后常见的并发症.本文作者对在本科行乳腺癌根治术340例患者的临床资料进行分析,探讨术后皮下积液的预防及处理.

    作者:王斌;朱丽萍;倪多;宣立学 刊期: 2008年第06期

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  • 原发性肺淋巴瘤的影像学诊断

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    作者:成钢;黄森 刊期: 2008年第06期

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    目的:研究蒺藜皂苷(GSTT)对成年豚鼠心室肌细胞动作电位和钾通道的影响,初步探讨其抗心律失常的作用及机制.方法:分离豚鼠心肌细胞,建立缺氧模型,分为正常对照组、模型组及GSTT10和30 mg·L-1组,采用全细胞膜片钳记录各组成年豚鼠单个心肌细胞的电位变化及测定钾通道电流.结果:与模型组比较,GSTT 30 mg·L-1组缺氧细胞动作电位平台期即动作电位复极时程(50%和90%)延长(P<0.01).将保持电位控制在-40 mV,测试电位从-100 mV到+100 mV,阶跃命令为+10 mV,时程300 ms.正常对照组豚鼠心室肌细胞钾通道处于关闭状态,GSTT 10和30 mg·L-1剂量组在+80 mV时其峰值电流分别为(1.19±0.20)和(1.15±0.10)nA,与模型组[(1.50±0.20)nA]比较差异有显著性(P<0.05和P<0.01).结论:GSTT可阻碍缺氧导致的钾电流增加,即减少缺氧引起的钾离子外流,改善胞内钾离子丢失状态,显著延长缺氧细胞动作电位复极时程,延长有效不应期,从而改善缺氧及钾丢失导致的心肌细胞电生理异常,减少心律失常的发生,保护心肌细胞.

    作者:李红;张爽;石卓;杨世杰 刊期: 2008年第06期

  • 妇科肿瘤术后并发下肢深静脉血栓6例报告

    下肢深静脉血栓(DVT)是妇科肿瘤患者严重并发症之一,特别是术后患者.本文作者对6例妇科肿瘤术后并发DVT的发生原因、治疗及预防情况进行总结,现报道如下.

    作者:蒋芸;赵灵芝 刊期: 2008年第06期

吉林大学学报(医学版)杂志

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