侯敢；黄迪南；姜英华；梁爱玲
线虫抗凝血蛋白c2(NAPc2)是从犬钩虫中分离出来的一种蛋白,它通过结合于fXa的催化活性中心以外的部位而进一步特异性抑制fVⅡa/TF复合物.在国外,rNAPc2正作为一种新型抗凝药运用于临床试验中,它抗凝效果明显,半衰期长(>50 h),副作用小.此外,它还可能在治疗DIC、肿瘤等疾病方面具有潜在应用价值.本文就NAPc2的结构与功能、作用机制和临床应用研究进展做一综述并展望其应用前景.
作者：王会兰；彭礼飞 刊期： 2006年第02期
目的观察丙泊酚在vlPAG对大鼠伤害性感受的影响及GABAA受体在其中可能的作用.方法 Sprague-Dawley (SD)♀大鼠随机分组,丙泊酚(Propofol,Pro)和荷包牡丹碱(Bicuculline,Bic)采用中脑导水管周围灰质腹外侧区(ventrolateral portion of the PAG,vlPAG)注射.行为学实验采用热板法和福尔马林实验,分别以舔后爪潜伏时间(Hot-plate latency,HPL)和疼痛(累计)评分为指标.免疫组化方法观察丙泊酚在vlPAG对福尔马林单侧足底皮下注射诱发的脊髓背角Fos蛋白表达的影响.结果行为学部分:两种疼痛模型中丙泊酚(10 g·L-1)vlPAG注射引起痛敏(P<0.01).热板法实验中,丙泊酚vlPAG微量注射的痛敏作用可被相同部位预先注射25 mg·L-1 Bic在10和20 min时间点分别拮抗70%和71%(均P<0.01),在30和40 min完全拮抗.在福尔马林实验中,丙泊酚vlPAG微量注射使福尔马林疼痛评分增加,此作用可被Bic(25 mg·L-1)在60 min拮抗57%(P<0.05).免疫组化部分中,丙泊酚vlPAG微量注射使福尔马林引起的脊髓背角各层FLI阳性细胞数明显增多(P<0.01), Bic vlPAG微量注射(25 mg·L-1)可部分拮抗丙泊酚vlPAG微量注射的作用(P<0.01).结论在大鼠vlPAG微量注射丙泊酚能产生痛敏作用;GABAA受体部分介导了丙泊酚的以上作用.
作者：王擒云；杨建平；戴体俊；张慧娟 刊期： 2006年第02期
目的建立一种新的小鼠气道上皮杯状细胞增生和粘液高分泌模型.方法用卵白蛋白加氢氧化铝凝胶皮下注射致敏小鼠,d 10腹腔注射重复致敏1次,然后从第1次致敏后d 15～21每天用卵白蛋白雾化吸入攻击1次.检测AB-PAS染色的支气管上皮杯状细胞数目,HE染色的肺组织嗜酸性粒细胞浸润和支气管灌洗液中的炎症细胞数目,并用已知有效药物和未知受试药物验证此模型.结果卵白蛋白致敏和攻击的小鼠呈现明显的支气管上皮杯状细胞增生,管腔内黏液增多,肺组织嗜酸性粒细胞浸润和支气管灌洗液中的炎症细胞数目增加,这些病理改变可被地塞米松和小鼠IL-12质粒抑制.结论这一模型有助于筛选抗黏膜高分泌的新药和研究气道黏膜高分泌的病理机制.
作者：王莹；王华英；谢强敏；邵传森；陈季强 刊期： 2006年第02期
目的研究海马内M1和M2受体对学习记忆功能的影响及其可能机制.方法 SD大鼠分为3组,分别海马内注射等体积的M1-ASODN(M1-AS组)、M2-ASODN(M2-AS组)和生理盐水(对照组),以被动逃避反应的步入潜伏期作为衡量学习记忆功能的指标,以CZE-LIFD法检测杏仁核内游离谷氨酸的浓度.结果 M1-ASODN缩短步入潜伏期,为对照组的25%(P<0.01),M2-ASODN使步入潜伏期较对照组增加了75%(P<0.05).双侧海马内注射ASODN后与对照组相比,M2-AS组杏仁核内谷氨酸的含量增加164%(P<0.01),而M1-AS组无变化(P>0.05).结论海马内M受体参与恐惧性记忆的调节,M2受体抑制学习记忆,M1受体促进学习记忆.海马内M2受体可能通过调节杏仁核内谷氨酸含量的变化介导被动逃避反应的记忆过程.
作者：王向兵；ZENG Yinming；曾因明；段世明；杨国栋；顾钧；周文华；张亚海 刊期： 2006年第02期
目的探讨氨甲酰胆碱对完整动物心脏心室复极的影响.方法在4只绵羊冠状动脉回旋支内分别注入1.0 mol·L-1和 2.5 mol·L-1的氨甲酰胆碱,注射时间3min.记录回旋支支配区域心外膜心电图,测量心室的激动-恢复间期(ARI)以代表心室复极时间.静脉给予一氧化氮合成抑制剂(L-精氨酸20 mg·kg-1)后,再次冠脉内给予2.5 mol·L-1的氨甲酰胆碱.结果回旋支内灌注1.0 mol·L-1和 2.5 mol·L-1的氨甲酰胆碱导致其支配区域心外膜心电图心室激动-恢复间期分别延长(38±17) ms 和 (58±14) ms(P<0.05).氨甲酰胆碱所致的心室激动-恢复间期延长被L-精氨酸所阻断.结论冠脉内注射氨甲酰胆碱延长心室激动-恢复间期或心室复极时间,内源性一氧化氮很可能介导氨甲酰胆碱心室复极的影响.
作者：王乐信；孙同文 刊期： 2006年第02期
目的探讨心脏上的阿片受体是否介导了瑞芬太尼预适应对缺血后心脏保护作用.方法麻醉开胸大鼠心脏缺血再灌注模型.分为对照组(CON),缺血预适应组(IPC)和瑞芬太尼预适应组(RPC); 瑞芬太尼预适应的方法:在缺血再灌注前分别静注瑞芬太尼5 min,停止5 min共3个循环.三种阿片受体阻断剂Naltrindole (NTD,δ受体阻断剂,5 mg·kg-1)、nor-Binaltorphimine (nor-BNI,к受体阻断剂,5 mg·kg-1)、 CTOP (μ受体阻断剂,1 mg·kg-1),分别在RPC(NTD+RPC,BNI+RPC和CTOP+RPC组)和IPC(NTD+IPC,BNI+IPC和CTOP+IPC组)前静脉注射.观察指标包括:平均动脉压(MBP),心率(HR),记算收缩压心率乘积(RPP);缺血危险区(AAR),梗死区(IS)的体积,心肌梗死面积以 IS/AAR来表示.结果在IS/AAR方面:NTD+RPC与CTOP+RPC与CON组之间无差别,与RPC有差别;nor-BNI+RPC与RPC及CON组之间都有差别;NTD+IPC和no-BNI+IPC与IPC组之间有差别,并且nor-BNI与CON组之间也有差别.结论μ,δ和κ-阿片受体介导了RPC对大鼠缺血后心脏的保护作用,μ-阿片受体的作用可能来至心脏之外的组织或器官.
作者：张野；顾尔伟；张健；陈志武 刊期： 2006年第02期
作者：黄河胜 刊期： 2006年第02期
目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase-1、Caspase-3、Caspase-8)蛋白表达的变化,以及三七总皂苷(PNS)对其表达的影响.方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型.实验动物随机分为假手术组、模型组、三七总皂苷组和尼莫地平对照组,于缺血前5 min、缺血后12、24、36 h给药,共给药4次.缺血2 h再灌注46 h后,采用免疫组织化学方法检测脑组织中Caspase-1、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达的变化.结果缺血2 h再灌注46 h后,可诱导脑组织Caspase-1、Caspase-3表达增强,PNS能下调Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达;但对Caspase-8的表达无影响.结论 PNS能抑制脑缺血再灌注后Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达,这可能是其促进脑缺血后神经元存活及损伤后修复的机制之一.
作者：李花；邓常清；陈北阳；陈瑞芬；张淑萍；梁燕 刊期： 2006年第02期
目的研究双苯氟嗪(dipfluzine, Dip)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts, CFB)增殖和胶原合成的影响,并探讨其抑制心肌纤维化的机制.方法用消化法培养新生SD大鼠CFB,建立AngⅡ诱导新生大鼠CFB纤维化模型.采用MTT法检测Dip对CFB增殖的影响;羟脯氨酸测定检测CFB 胶原含量;流式细胞分析仪技术检测细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达;RT-PCR检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)的基因表达;免疫组织化学染色方法,观察心肌成纤维细胞经典型蛋白激酶C α亚型 (cPKCα) 和细胞外信号调节蛋白激酶 (ERK1) 蛋白的表达.结果①在一定浓度范围内,Dip能明显抑制AngⅡ诱导CFB的增殖和胶原合成(P<0.05或P<0.01).②CFB细胞 G0/G1期百分率随Dip浓度增加而增加,S期、G2/M期百分率和增殖指数随Dip浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01).③Dip能降低PCNA蛋白表达,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.01).④Dip能够明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原和TGF-β1 mRNA的表达(P<0.05或P<0.01).⑤免疫组化结果显示Dip (10、100 μ mol*L-1)组ERK1和cPKCα阳性表达低于AngⅡ组(P<0.05或P<0.01).结论 Dip通过抑制AngⅡ诱导的CFB增殖和胶原的增加而起到了抗心肌纤维化的作用,其抗纤维化作用与其降低TGF-β1基因表达以及抑制cPKCα、ERK1通路有关.
作者：张伟；杨涛；苏彦欣；苗庆峰；张永健；王永利 刊期： 2006年第02期
目的观察中华眼镜蛇毒活性组分(China cobra venom active factor,CCVAF)对内皮细胞增殖的选择性抑制作用.方法实验分对照组和不同浓度的CCVAF组,应用MTT法分析CCVAF对牛肺主动脉内皮细胞(bovine arteria pulmonalis vascular endothelial cells,BAVEC)、SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞(smooth muscle cells, SMC)、人胚肺成纤维细胞HLF以及人支气管上皮细胞HBE生长增殖的影响;并运用直线回归分析统计对比CCVAF在不同时间点对BAVEC的IC50及上述各细胞的24 h IC50分别为4.955、4.932、2.443、3.048、3.133 mg·L-1,24 h抑制作用强;观察此时浓度与抑制作用的关系,0.625、1.25、2.5、5、10、20 mg·L-1,抑制率分别是4.41%、30.94%、61.81%、86.17%、96.05%、98.68%,10 mg·L-1抑制率即达高峰,且各浓度组抑制作用与对照组相比差异有显著性(P<0.05). CCVAF抑制内皮细胞增殖具有一定的选择性,作用24 h后,抑制BAVEC生长的作用明显高于其它3种细胞,对BAVEC、HLF、HBE、SMC的24 h IC50分别为2.443、22.233、35.318、32.810 mg·L-1.结论 CCVAF能够选择性抑制内皮细胞增殖,这在抗血管生成及其靶向治疗研究中可能具有重要意义.
作者：刘新艳；余清声；余红娥；朱柳；王桂平；楼晓华；腾脉坤 刊期： 2006年第02期
细胞色素P450氧化还原酶(Cytochrome P450 Reductase,CPR)是细胞色素P450药物代谢酶系中为细胞色素P450提供电子的膜蛋白,本文从电子传递、底物作用及其基因调控三方面的特性对其进行了论述,并探讨了CPR领域一些待研究的问题.
作者：程婕；杨凌 刊期： 2006年第02期
目的人类β2肾上腺素受体通过内源性儿茶酚胺从而调控机体脂解作用、糖代谢以及心血管功能.本研究旨在分析β2肾上腺素受体Arg16Gly和Gln27Glu遗传多态性在高血压人群中的分布特征以及他们与肥胖发生的相关性.方法分别采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性和等位基因特异性聚合酶链式反应的方法对受试者进行基因型分析.应用单因素方差分析和卡方检验进行统计学分析.结果对225名中国汉族原发性高血压患者以及125名健康对照者进行了β2肾上腺素受体Arg16Gly和Gln27Glu基因分型,发现其等位基因的发生频率符合Hardy-Weinberg平衡.在高血压合并肥胖组中,27 Glu等位基因的频率为0.069,明显高于单纯性高血压组和健康对照组(P<0.05), 进一步分析发现Gln27Glu多态性与肥胖的这种相关性仅存在于男性高血压患者,而女性受试者缺乏这种联系.单倍型研究发现在男性受试者中,β2肾上腺素受体单倍型与肥胖无相关性.结论结果显示β2肾上腺素受体Gln27Glu遗传多态性可能是导致男性高血压人群对肥胖易感的主要因素之一.
作者：莫玮；刘洁；周宏灏；刘昭前 刊期： 2006年第02期
押通道Kv2.1负载的延迟整流钾电流（Ik）[1]主要在复极2期3期起作用。研究认为MI后钾通道Kv2.1的下调是MI后易心律失常分子机制之一[2]。MI时肾素-血管紧张素系统（RAS）显著激活。
作者：刘晓飞；曾秋棠；叶顺传 刊期： 2006年第02期
目的探讨腺苷A1受体阻断对大鼠海马BDNF蛋白表达及内质网功能的影响.方法采用免疫组化技术观察腺苷A1受体特异性阻断剂8-环戊-1,3-二丙基黄嘌呤(DPCPX)对大鼠海马颗粒细胞BDNF蛋白表达的影响;采用透射电镜技术观察DPCPX对大鼠海马神经元内质网数量的影响.结果 DPCPX(0.1 mg*kg-1,ip,15 d)可增加海马颗粒细胞BDNF蛋白表达阳性细胞的数目.DPCPX(0.5 mg*kg-1,ip,15 d)能增加BDNF蛋白在海马颗粒细胞的表达,使阳性细胞数目明显增加、染色加深;同时增加大鼠海马神经元中内质网的数量,使内质网密度增加.结论 DPCPX可促进大鼠海马颗粒细胞内BDNF蛋白表达和诱导海马神经元内质网功能增强.
作者：张丹参；任雷鸣；张力 刊期： 2006年第02期
目的 用大鼠在体心肌缺血再灌注（iscmemia/reperfusion, I/R）模型观察哌芳胺他（pivanampeta，Piv）抗体心肌I/R损伤的特点，并探讨其分子机制。方法 实验动物随机分为两组，一为再灌30 min,包括假手术组、模型组、溶剂对照组、吡格列酮 (pioglitazone, Piog) 3 mg·kg-1和Piv 9 mg·kg-1组，测定心功能指标和心肌梗死面积；另一为再灌注2 h组，再分为假手术组、模型组、溶剂对照组以及吡格列酮3 mg·kg-1、Piv 3、6和9 mg·kg-1组，进行免疫组化、原位杂交、TUNEL法和DNA凝胶电泳检测。结果 ①与对照组比较Piv组坏死面积(nec)与缺血面积(aar)之比减少21%（P<0.05），坏死面积与左室面积(lv)之比减少22%（P<0.05）；Piog组nec/aar减少28%（P<0.05），nec/lv减少32%（P<0.05）。Piv心率、反映心脏收缩功能的指标+dp/dtmax和Vmax以及反映心脏舒张功能的指标-dp/dtmax分别在再灌注30 min明显改善（P<0.05）。Piog组心率、+dp/dtmax以及-dp/dtmax改善明显（P<0.05～0.01）。②免疫组化检查，Piv 3、6和9 mg·kg-1呈剂量依赖性减少Bax、caspase-3、MMP-2（matrix metelloproteinase-2）蛋白质和MMP-2的mRNA表达，增加Bcl-2、PPAR(peroxisome proliferator-activated receptor)γ蛋白质和PPARγ mRNA表达，Piog的作用与Piv3相同；③TUNEL法检测，Piv各组和Piog组心肌细胞凋亡明显减少（P<0.05），但DNA凝胶电泳，模型组、Piv 3、6 mg·kg -1 组可见到DNA梯带，假手术组、Piog 3 mg·kg -1 组和Piv 9 mg·kg -1组则无DNA梯带。结论Piv预处理对心肌缺血再灌注损伤有保护作用，表现为减少心肌梗死面积、改善心功能，且是通过减少心肌细胞凋亡和激活PPARγ后抑制MMP-2而发挥作用。
作者：曹泽玲；陈凯；龙超良；叶平；汪海 刊期： 2006年第02期
目的人TRAIL基因胞外区片段(114-281氨基酸残基,sTRAIL)的克隆、表达、纯化及对人肺腺癌A549细胞的抗肿瘤活性研究.方法采用PCR技术从人胎盘和肺cDNA文库中扩增出全长人TRAIL基因,克隆到pUC19质粒载体上进行测序.然后再采用PCR技术,以全长人TRAIL基因为模板,扩增出sTRAIL基因片段并定向克隆到pET-11a表达载体中,转化大肠杆菌BL21进行表达.表达后的产物经变性、复性和分离纯化,纯化后的sTRAIL用结晶紫染色法和流式细胞仪法测定其对人肺癌细胞A549的细胞毒性作用.结果从人胎盘和肺cDNA文库中都能扩增出全长人TRAIL 基因,经测序表明与已发表的人TRAIL基因序列一致.扩增出的人sTRAIL基因克隆到表达质粒载体pET-11a,经IPTG诱导表达,表达量占细菌全菌蛋白的50%,纯化后的sTRAIL纯度大于98%,结晶紫法测定对人A549肺癌细胞的细胞毒性作用的IC50为(24±5.2) μg·L-1, 流式细胞仪法测定对人A549肺癌细胞的细胞毒性具有明显的效应-时间依赖关系.结论本实验成功地克隆了人sTRAIL基因并实现其高表达,摸索出包涵体sTRAIL的变性、复性及其纯化方法,纯化后的sTRAIL蛋白对人A549肺癌细胞具有明显的细胞毒性作用,为进一步研究其功能与临床应用奠定了基础.
作者：范清林；魏伟；邹文艺；宋礼华 刊期： 2006年第02期
高浓度同型半胱腹氨酸具有血管内皮细胞毒性。高血压病理过程中存在血管内皮细胞功能紊乱。盐酸埃他卡林（Iptakalim hydrochloride,Ipt)为新型降血压药物[3～5]。
作者：段智变；汪海 刊期： 2006年第02期
目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中信号转导和转录活化因子1、3的改变以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响.方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western印迹检测信号转导和转录活化因子1、3(STAT1、STAT3)及其磷酸化蛋白(p-STAT1、p-STAT3)的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)和放免法测定细胞上清液中TGF-β1、纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)和IV型胶原的含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-STAT1和p-STAT3表达明显上调,TGF-β1、FN和IV型胶原含量增加,TGF-β1 mRNA的表达增加.缬沙坦组p-STAT1和p-STAT3的表达明显下调, TGF-β1、FN和IV型胶原的含量减少,同时TGF-β1 mRNA的表达降低.结论高糖状态下p-STAT1和p-STAT3表达明显升高,缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响STAT1和STAT3的激活而实现.
作者：史永红；段惠军；王丽晖；任韫卓；高峰 刊期： 2006年第02期
目的研究人尿萃取物CDA-Ⅱ(cell differentiation agent-Ⅱ,又名尿多酸肽)对人胶质瘤细胞SWO-38抑制增殖及诱导分化作用.方法应用MTT法、集落形成试验检测CDA-Ⅱ对SWO-38细胞增殖的影响;通过光镜观察和免疫组化鉴定细胞分化;利用裸鼠抑瘤实验观察CDA-Ⅱ抗胶质瘤生长的作用.结果一定浓度的CDA-Ⅱ可使SWO-38细胞增殖与集落形成均明显受抑,并呈剂量依赖性.经1 g·L-1 CDA-Ⅱ处理后,光镜观察发现SWO-38细胞胞体变大,核浆比减小,突起增多,表现出向成熟的星形细胞分化现象.免疫组化显示胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达增强.体内抑瘤试验见高、低剂量CDA-Ⅱ均可抑制裸鼠移植瘤生长,抑瘤率为79.94%、42.77%(P<0.05,n=10).结论 CDA-Ⅱ不仅能够抑制人胶质瘤SWO-38细胞的生长,而且能诱导SWO-38细胞分化,是一种很有应用前景的诱导分化剂.
作者：王红艳；钟雪云；涂永生；刘致中 刊期： 2006年第02期
目的研究大鼠全脑缺血后,脑组织Na+, K+-ATPase活性及其α亚基的变化.方法采用大鼠双侧颈总动脉结扎全脑缺血模型,测定缺血后脑组织H2O,Na+和K+含量及Na+,K+-ATPase 的活性,采用免疫组织化学的方法观察Na+, K+-ATPase α亚基的改变.结果全脑缺血后,脑组织的H2O和Na+的含量明显增加,K+含量及Na+, K+-ATPase活性明显降低,正常大鼠海马和皮层神经元上主要分布α1和α3亚基,而α2表达较少,脑缺血后,α1和α3亚基的表达明显减少.结论 Na+, K+-ATPase α1和α3亚基参与了缺血性脑损伤.
作者：郭芳；齐亚娟；王永利 刊期： 2006年第02期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
