丁腾云;邱文倩;王亚丹;张嘉靖;郑驰超;张超学
目的 探讨布地奈德干预对哮喘小鼠核转录因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、相关炎症因子表达及早期气道重塑的影响,进一步完善布地奈德治疗哮喘的理论支持.方法 随机将30只BALB/C雌性小鼠分为对照组、布地奈德组和哮喘组,每组10只.布地奈德组、哮喘组均采用鸡卵白蛋白(OVA)诱导建立哮喘模型,对照组则采取生理盐水替代.HE染色观察小鼠肺组织炎症变化;ELISA法测定小鼠肺泡灌洗液(BALF)中白介素-13 (IL-13)、白介素4 (IL-4)、白介素-5(IL-5)的表达水平;Western blot及Real-time PCR法分别定量分析肺组织中NF-κB p65、TGF-β1的蛋白表达及mRNA的表达;用医学图像采集系统及医学图像分析软件测定支气管管腔的周长(Pbm)、支气管管壁面积(WAt)、支气管管壁平滑肌面积(WAm)及平滑肌细胞计数(N),将上述指标均用Pbm标准化.结果 HE染色表明哮喘组与对照组相比,哮喘组小鼠有显著的气道周围炎症细胞浸润、黏膜下水肿、气管腔壁狭窄增厚等情况;各组小鼠BALF中IL-13、IL-4、IL-5检测结果提示,布地奈德组分别与对照组和哮喘组相比,上述指标较对照组高,而明显低于哮喘组(P<0.05).各组小鼠肺组织Western blot结果显示,布地奈德组NF-κB p65、TGF-β1含量明显高于对照组,哮喘组则明显高于布地奈德组(P<0.05);Real-time PCR结果显示NF-κB p65及TGF-β1的mRNA在哮喘组中的表达均高于布地奈德组和对照组(P<0.05);图像软件分析显示,布地奈德组Wat/Pbm、WAm/Pbm、N/Pbm较哮喘组有明显改善,较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NF-κB/TGF-β1信号通路可能是哮喘发病机制中的重要环节,并可能参与哮喘早期气道重塑,布地奈德治疗哮喘的机制之一可能通过抑制哮喘NF-κB、TGF-β1的表达,从而改善哮喘症状,干预哮喘气道重塑.
作者:邓鹏辉;马常亭;张健;高明霞;李鸿佳;张才擎 刊期: 2018年第09期
采用ELISA法检测63例疑似非典型脊柱结核患者和30例健康体检者血清中结核杆菌热休克蛋白10(MTB Hsp10)、结核杆菌热休克蛋白60(MTB Hsp 60)、热休克蛋白16.3(Hsp 16.3)和热休克蛋白70(Hsp 70)吸光度(OD)值,探讨这4种抗原在非典型脊柱结核辅助诊断中的作用.非典型脊柱结核组血清中4种抗原OD值高于脊柱其他疾病组和健康体检组(P<0.05);MTB Hsp 10、MTB Hsp 60、Hsp16.3、Hsp 70的诊断灵敏度和特异度分别是87%、89%、70%、51%和73%、75%、84%、91%,4种抗原联合诊断灵敏度和特异度是89%、98%;通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线显示4种抗原中MTB Hsp 10和MTB Hsp 60的曲线下面积(AUC)大(分别为0.85、0.88),4种抗原联合诊断时AUC =0.97(P<0.001).4种抗原对非典型脊柱结核的辅助诊断具有一定意义,联合诊断价值更高.
作者:吴仁森;孟晓源;李坤;车立新;郭瑞 刊期: 2018年第09期
目的 探讨血清癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(Fer)和糖基抗原199(CA199)在非小细胞肺癌诊断中的临床应用价值.方法 分析62例初诊非小细胞肺癌患者的病例资料,采用德国罗氏Cobase411化学发光免疫分析仪联合罗氏CEA,Fer及CA199检测试剂盒检测样品血清中的相应指标,同时分析62例健康人群体检资料.结果 非小细胞肺癌患者血清CEA、Fer和CA199含量显著高于健康人群(t=18.95、11.34、10.53,P<0.05).非小细胞肺癌转移患者血清CEA、Fer和CA199含量显著高于非转移患者(t=11.75、9.26、6.83,P<0.05).非小细胞肺癌腺癌患者血清CEA含量显著高于鳞癌患者(t =9.35,P<0.05).受试者工作特征曲线分析表明,血清CEA、Fer和CA199鉴别诊断非小细胞肺癌的曲线下面积分别为0.784、0.721和0.68.结论 血清CEA、Fer和CA199在鉴别诊断非小细胞肺癌中,CEA的临床诊断价值较大.
作者:汪硕敏;顾康生 刊期: 2018年第09期
目的 探讨输尿管结石对管壁及尿液生物力学特性的影响.方法 基于ANSYS Workbench 15.0,通过建立输尿管、尿液及结石相互作用的有限元模型,并引入流体控制方程、动力学方程和运动方程等来描述一个生物蠕动周期内输尿管结石对尿液的流动特性、管壁的生物力学特性的影响.结果 输尿管一个蠕动周期内尿液流动特性随着结石尺寸的不同而不断变化,而尿液流的质量流率和压力梯度峰值监测随着结石尺寸增大呈现增加的趋势.输尿管蠕动过程中尿液的流速很小,大值仅为0.04 m/s,尿液的压力变化对输尿管影响较小.结论 在一个蠕动周期内输尿管中尿液生物力学参数随着结石尺寸不同而不断变化,较大尺寸的结石易于产生更高的流速和压力梯度,且在一个蠕动周期结束时有尿液回流产生,回流质量流率随着结石尺寸增加而增大.然而,蠕动过程中输尿管管壁的大应力、应变数值没有明显变化.
作者:吴绍山;谈宜傲;陶陶;周林玉 刊期: 2018年第09期
目的 探究由c-Myc调控的长链非编码RNA7(lncRNA7)对舌鳞癌细胞增殖的作用.方法 Western blot检测pLKO.1-shc-Myc和Flag-c-Myc分别转染至舌鳞癌SCC3细胞中原癌基因c-Myc的表达情况,qRT-PCR检测下调或上调c-Myc对lncRNA7表达水平的影响.将构建的pLKO.1-shlncRNA7表达载体转染入SCC3,获取低表达lncRNA7的细胞.MTT法和细胞克隆实验分别检测敲低lncRNA7后对SCC3细胞生长和增殖的影响.荧光原位杂交实验检测lncRNA7在细胞中的定位.结果 成功下调或上调SCC3细胞中c-Myc表达,lncRNA7水平也随之降低或升高.成功敲低SCC3细胞中lncRNA7表达,SCC3细胞生长减慢,克隆数量减少.荧光原位杂交实验结果证明lncRNA7定位于舌鳞癌细胞SCC3的胞质中.结论 敲低受c-Myc正调控的lncRNA7表达能抑制舌鳞癌细胞增殖,表明lncRNA7可能成为舌鳞癌潜在的治疗靶点.
作者:徐艳雪;韩瞳瞳;朱友明;陈乔尔 刊期: 2018年第09期
入选100例接受支气管镜检查的患者,随机分为镇静组(术前利多卡因雾化局麻联合舒芬太尼+咪达唑仑)和对照组(仅利多卡因雾化局麻),每组各50例,对比两组患者对支气管镜检查的耐受性、舒适度及安全性.结果显示镇静组患者操作时长缩短(P<0.01),术中咳嗽、窒息感及疼痛视觉模拟(VAS)评分均明显减低(P <0.001),术后遗忘程度高,愿意接受再次检查的人数增多(P <0.001).镇静组出现心率显著升高的例数明显减少(P<0.01),但出现收缩压(SBP)明显下降的例数和血氧饱和度(SpO2)显著下降的例数多于对照组(P<0.05),但均为一过性表现,可迅速自行缓解.说明该方法可明显提高支气管镜检查的舒适度,安全性亦较高.
作者:刘红艳;高磊;刘云峰;赵卉 刊期: 2018年第09期
目的 制备鼠抗人CD137抗体,并对该抗体进行人源化改造.方法 构建hCD137-pCDNA3.4真核表达质粒,经293F细胞表达纯化及鉴定后,获得CD137蛋白.制备pHAGE-CMV-MCS-IRES-ZsGreen-hCD137的慢病毒,感染HEK-293FT细胞,获得用来筛选杂交瘤的CD137转基因细胞株.将CD137蛋白免疫小鼠,检测小鼠血清抗体效价,将免疫小鼠的脾脏和骨髓瘤细胞SP2/0融合,采用ELISA方法及流式细胞术对小鼠杂交瘤进行筛选.将筛选后的杂交瘤细胞接种小鼠,获得腹水.对抗体亚型和抗体效价进行测定,并通过竞争结合抑制实验等方法对所获的CD137单抗的生物学特性进行分析鉴定.提取该mAb杂交瘤细胞株的总RNA逆转录成cDNA,进行鼠抗人CD137抗体可变区序列克隆,构建人源化抗体重链和轻链表达载体,瞬时转染HEK-293FT,检测分析各重组人源化抗体与抗原的亲和力.结果 获得1株CD137单抗(6F5),该抗体与CD137L有竞争作用.蛋白结合表位在A.A 30-100.6F5能够激活NF-κB信号通路,对外周血单个核细胞增殖具有显著促进作用,且人源化后抗体的亲和力不变.结论 成功制备1株CD137人源化抗体,该人源化抗体为下一步开展体内肿瘤治疗奠定了基础.
作者:何妍;王华菁;陆婷;徐依云;黄勇;杨焕凤 刊期: 2018年第09期
回顾性分析住院治疗的妊娠期高血压疾病患者215例(观察组)和同期正常妊娠孕妇166例(对照组)的血清叶酸、同型半胱氨酸(HCY)的水平,分析血清叶酸、HCY与妊娠高血压疾病的关系;采用问卷方式调查两组孕妇孕期叶酸的补充情况,观察规范化补充叶酸(观察组1、对照组1)和未规范化补充叶酸(观察组2、对照组2)对血清叶酸、HCY水平的影响.结果显示观察组中血清叶酸低于对照组(P<0.05);观察组血清HCY水平高于对照组(P<0.05);两组血清HCY水平与血清叶酸水平(观察组r=-0.389,P<0.05,对照组r=-0.356,P<0.05)均呈负相关;观察组规范化补充叶酸的比例(19.53%)低于对照组(66.27%),差异有统计学意义(P<0.05);观察组规范化补充叶酸血清叶酸高于未规范化补充组(P<0.05),血清HCY低于未规范化补充组(P<0.05).HCY升高在妊娠期高血压疾病发病中起重要作用,孕期规范化补充叶酸可降低妊娠期高血压疾病的发生.
作者:许雅娟;洪腾;翟闪闪;柳蕊;任利单;余艳茹;班彦杰;冉丽敏;胡璐璐 刊期: 2018年第09期
目的 采用德尔菲专家咨询法,构建流感与新型流感暴发早期预警指标体系.方法 通过两轮专家问卷调查法,咨询专家对各指标的评分,根据界值筛选法确定流感与新型流感暴发早期预警指标体系.结果 第一轮,流感的专家权威系数为0.79±0.09;第二轮,流感的专家权威系数为0.81±0.08,新型流感为0.80±0.08.总体指标专家协调系数,第一轮专家协调系数为0.30(P <0.001);第二轮,流感的专家协调系数为0.25 (P< 0.001),新型流感为0.35 (P<0.001).终确定流感暴发早期预警指标体系,共9个一级指标,40个二级指标;新型流感早期预警指标体系共8个一级指标,40个二级指标.结论 专家权威性和专家协调程度较好,构建的流感与新型流感暴发早期预警指标体系得到了专家普遍认可,较为科学.
作者:朱梦;龚磊;宋丹丹;马婉婉;陈芳;侯赛;吴家兵 刊期: 2018年第09期
目的 探讨过表达吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)通过分泌外泌体(exosome)改善大鼠腹腔异位移植心脏存活机制.方法 构建过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞,而后提取分泌的exosome.同时建立大鼠腹腔异位移植心脏模型,经尾静脉给予相应细胞分泌的exosome后检测如下指标:移植心脏心功能变化;移植心脏局部荧光强度;受体大鼠脾脏细胞表面CD40、CD86、CD80、主要组织相容性抗原-Ⅱ(MHCⅡ)、CD274(PDL-1)、CD45RA、CD45RA+ CD45RB表达及Treg细胞数量.并采用苏木精-伊红(HE)染色评估移植心脏局部炎性细胞浸润情况.结果 ①大鼠异位心脏移植模型建立后,给予相应细胞分泌exosome,过表达IDO-BMSCs-exosome组移植心脏的射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)较其余各组有提高;②过表达IDO-BMSCs-exosome组移植心脏局部Dir荧光强;③采用流式细胞技术证实过表达IDO-BMSCs-exosome组受体脾细胞CD86、CD40、CD80、主要组织相容性抗原-Ⅱ(MHCⅡ)、CD45RA+CD45RB、CD45RA、OX62表达量下降,而CD274(PDL-1)表达增高同时Treg细胞数量较其他组增多;④HE染色证实过表达IDO-BMSCs-exosome组移植心脏局部有较少炎性细胞浸润.结论 大鼠BMSCs分泌的exosome可以有效调节DC细胞表面抗原分子表达、促进Treg细胞增生,从而在多个免疫层面改善心脏移植排斥.
作者:贺继刚;韩金秀;撒亚莲;严丹;李贝贝 刊期: 2018年第09期
评估铁代谢指标对缺铁性贫血(IDA)的诊断性能.收集血常规检查后,怀疑IDA并行骨髓穿刺铁染色,后被诊断为IDA,且行铁代谢检查者,共102例,其中男36例,女66例,年龄15~ 85岁,中位年龄47岁;健康对照为健康体检者,共57例,其中男30例,女27例,年龄22 ~ 69岁,中位年龄43岁,均无贫血史,且血红蛋白>120 g/L.采用独立样本Mann-Whitney U检验比较两组间各指标差异;受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析指标对IDA的诊断性能.ROC曲线分析,血清铁(SI)的ROC曲线下面积(AUC)大为0.980(0.956~1.000),其次为转铁蛋白饱和度(TS)0.972(0.945~0.999)、可溶性转铁蛋白受体(sTfR)0.967(0.937~0.997),而总铁结合力(TIBC)及转铁蛋白(STF)小,分别为0.560(0.473~0.648)、0.554(0.466~0.642),铁蛋白(SF)、不饱和铁结合力(UIBC)分别为0.909(0.865 ~0.954)、0.878(0.824~0.932).当SI临界值为9.95 μmol/L时,敏感性及特异性大,分别为0.961、0.982.阳性预测值上,TS高为0.989,其次SI及sTfR分别为0.980、0.979;阴性预测值上,SI高为0.932,其次为TS及sTfR分别为0.918、0.872.阳性拟然比来看,SI高为53.389,且SI的阴性拟然比低,为0.0397.SI、TS、sTfR可为IDA的诊断指标,结合血常规参数可很好地诊断IDA;SI可较灵敏地反映IDA储存铁含量,SF及UIBC可为IDA的辅助诊断指标,TIBC及STF可为IDA疗效监测指标.
作者:夏红灯;胡天钰;史德宝;吕礼应;李涛 刊期: 2018年第09期
目的 探讨肺微浸润性腺癌表皮生长因子受体(EG-FR)基因突变特征及意义,比较不同EGFR基因突变状态患者之间的临床病理特征差异,为肺微浸润性腺癌分子分型的必要性提供依据.方法 扩增阻滞突变系统多聚酶链式反应(ARMS-PCR)检测79例手术切除肺微浸润性腺癌组织中EGFR基因突变情况;分析比较EGFR野生型与突变型、外显子19与21突变型患者之间的临床病理特征.结果 肺微浸润性腺癌EGFR基因突变率为75.95%,常见突变类型为19Del(35.44%)及L858R(37.97%).肺微浸润性腺癌中EGFR突变与微浸润成分组织学亚型、肿瘤内纤维化及免疫细胞浸润显著相关(P<0.01).亚组分析显示19Del或L858R突变均与肿瘤大小、浸润灶大径、肿瘤内纤维化及免疫细胞浸润情况显著相关(P<0.01,P<0.05).19Del多好发于病灶≤1 cm、浸润灶大径≤0.2 cm、肿瘤内缺乏纤维化及免疫细胞浸润的患者(P<0.01);L858R则相反(P<0.01).结论 不同EGFR基因状态的肺微浸润性腺癌具有显著不同的临床病理特征.根据EGFR基因突变特征对肺微浸润性腺癌进行分子分型,对于肿瘤预后评估及临床处理具有潜在意义.
作者:李明;柯立;李传应;詹玛琍;程民 刊期: 2018年第09期
目的 构建携带D896N突变型EGFR基因的重组质粒,转染Ba/F3细胞后对其的表达及对吉非替尼的敏感性进行研究.方法 PCR构建重组质粒MSCV-Tel-EGFR D896N,与2种辅助质粒MLV和VSVG共转染293T细胞包装产生慢病毒,对Ba/F3细胞进行转染.Puromycin筛选后,Western blot检测EGFR及p-EGFR的表达;撤除IL-3培养观察细胞是否正常增殖;Western blot检测并比较Ba/F3-Tel-EGFR L858R、Ba/F3-Tel-EGFR D896N对于吉非替尼的敏感性.结果 酶切及测序验证重组质粒构建无误,Western blot检测转染后的Ba/F3细胞中EGFR及p-EGFR有表达,撤除IL-3后细胞无法正常增殖,吉非替尼作用后p-EGFR明显下降.结论 成功构建了表达D896N突变型EGFR的Ba/F3细胞株,初步判断该位点并非驱动基因,但是对吉非替尼有一定敏感性.
作者:潘婧;彭佳;潘跃银 刊期: 2018年第09期
目的 探讨抑郁症患者自我怜悯和其共情能力之间的关系.方法 采用中文版自我怜悯量表(SCS-C)、中文版人际反应指针量表(IRI-C)和汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)对54例住院抑郁症患者和59例正常对照者进行评估,分析抑郁症患者自我怜悯水平与其共情缺陷之间的关系.结果 抑郁症患者组SCS-C总分及其自我友善、普遍人性和正念各因子分均低于对照组(P <0.001);患者组观点采择分低于对照组(P<0.01),个人痛苦分高于对照组(P<0.001);患者组SCS-C总分及其各因子分与抑郁程度呈负相关性(P<0.01,P<0.05),与观点采择分呈正相关性(P<0.01,P<0.05),与个人痛苦分呈负相关性(P<0.01);正念与观点采择、普遍人性与个人痛苦之间有线性回归关系(P<0.01).结论 抑郁症患者自我怜悯水平较低、与其共情缺陷存在相关和线性回归关系.
作者:王本红;李晓驷;谢雯;夏海森;穆菁菁;耿峰 刊期: 2018年第09期
目的 以杂交一代(BDF1)小鼠为模型,探索小鼠第一极体基因组移植(PB1T)的佳时间窗,提高第一极体基因组移植重构胚存活率和体外发育能力,为临床研究和应用提供前期动物实验基础.方法 获取注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后12.5、13.5、14.5、15.5 h4个时间点的MII卵子作为实验组.分别取第一极体作为核供体,取hCG后14h的MII卵子,去除纺锤体染色体复合物后作为胞质供体,构建四组第一极体基因组移植重构胚.获取MII卵子进行体外受精并培养作为对照组(IVF组).体外培养并观察实验组4组重构胚以及对照组卵子存活情况、体外受精、卵裂和囊胚发育情况.结果 在4组实验组中,13.5 h组的PB 1T重构卵子的存活率、体外受精率、2-细胞形成率、4-细胞形成率和囊胚率均高,与IVF对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).14.5 h组的重构卵子的存活率、体外受精率和后续发育率稍低于13.5 h组,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).15.5 h组的重构胚体外受精率和囊胚形成率均低(76%、41.7%),与对照组相比差异有统计学意义(P =0.020 0,P=0.005 7).结论 BDF1小鼠hCG后13.5 h和14.5 h的卵子的第一极体基因组在新的供体胞质中能够更好地重建发育潜能,行PB1T可能的佳时间窗为hCG后13.5~14.5h.
作者:袁锦;纪冬梅;邹薇薇;武龙梅;章志国;曹云霞 刊期: 2018年第09期
目的 应用Logistic回归模型和分类树模型进行对比分析,探讨空腹血糖受损(IFG)患者的危险因素.方法 采用整体抽样的方法,对5 952例体检者进行调查,分别应用Logistic回归模型和分类树模型对IFG的影响因素进行探讨,并采用受试者工作特征曲线(ROC)对两模型分类效能进行检验.结果 ①Logistic回归模型显示:高龄、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、高血压、高三酰甘油、高体重指数是IFG患者的危险因素,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)是IFG患者的保护因素(P<0.05);②分类树模型共筛选出5个危险因素,包括NAFLD、高龄、高血压、高TG和高LDL-C;③Logistic回归模型的ROC曲线Youden指数为41.90%,敏感性为75.00%,特异性为66.90%,曲线下面积(AUC)值为0.775.分类树模型的ROC曲线的Youden指数为43.96%,敏感性为73.27%,特异性为70.69%,AUC值为0.775,两种模型AUC比较差异无统计学意义.结论 Logistic回归模型和分类树模型均具有中等准确性,两模型曲线下面积没有明显差异性,在实际应用中可结合具体情况选择.
作者:姚爽;谢梦婷;邹迪莎;黄芳;马小珺;江仁美;于健 刊期: 2018年第09期
心肌缺血再灌注损伤是缺血性心脏病中的治疗难点.在其诸多机制中,近年来自噬引起了研究者的关注.自噬是细胞内一种通过溶酶体降解长寿命蛋白和受损细胞器的代谢途径,在细胞应激过程中起到了重要作用.microRNA作为近年来广为研究的转录后调控者,其在自噬调控过程中的具体作用和分子机制仍然有待于更多深入研究,该文综述近年来关于microRNA通过调控自噬的具体环节从而干预心肌缺血再灌注损伤的研究,为基础与临床研究提供参考.
作者:杨红星;李绍旦 刊期: 2018年第09期
目的 评价沙格列汀治疗不同病程阶段超重2型糖尿病(T2DM)的临床疗效及安全性.方法 选取70例二甲双胍治疗血糖不达标的超重T2DM患者,根据病程分为短病程组(病程≤3年)和长病程组(病程>3年).两组均加用沙格列汀持续治疗24周,观察并比较两组的临床疗效及安全性.结果 治疗后,两组空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖基化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HO-MA-IR)、体重指数(BMI)、血三酰甘油(TG)、收缩压(SBP)均较治疗前明显下降,胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)升高,差异有统计学意义(均P <0.05).与长病程组相比,短病程组FBG、2hPG、HbA1c降低更明显,HOMA-3升高更为显著(P<0.01).短病程组低血糖发生率高于长病程组(P<0.05),但两组均无严重低血糖及胃肠道不良反应发生.结论 沙格列汀联合二甲双胍治疗不同病程超重T2DM患者均可明显降低血糖、改善胰岛β细胞功能,并能减轻体重;早期联合使用沙格列汀,血糖下降及胰岛β细胞功能的改善更为显著.
作者:张萍;潘天荣;杜益君;钟兴 刊期: 2018年第09期
目的 探索内源性γ-干扰素(IFN-γ)对斑马鱼血管发育的影响.方法 利用反义吗啉环寡聚核苷酸(MO)技术下调斑马鱼IFN-γ受体crfb17的表达,并通过激光共聚焦成像分别观察胚胎受精后3d和5d的脑血管发育情况与胚胎受精后28 h和31 h的躯干血管发育情况;进一步利用软件分析胚胎受精后3d时crfb17 MO组和对照MO组中脑网络特征的差异.结果 下调斑马鱼IFN-γ受体crfb17后,斑马鱼脑血管和躯干血管的发育受到明显抑制,胚胎受精后3d时crfb17 MO组的中脑血管总长度、血管节段数、血管密度都较对照MO组显著降低(P <0.001).结论 内源性IFN-γ在斑马鱼血管发育阶段具有促血管生成的作用.
作者:蒋伟青;袁欣;刘晨;任潇;王永刚 刊期: 2018年第09期
目的 研究PKH26荧光素染料对脂肪间充质干细胞(ADSCs)生物学特性的影响.方法 分离培养新生SD大鼠的ADSCs,通过流式细胞仪、成脂、成骨、成软骨诱导鉴定ADSCs的免疫表型和多向分化的能力.用细胞膜荧光素染料PKH26对第二代脂肪干细胞进行标记,通过倒置相差显微镜、荧光显微镜以及CCK-8法评估标记后细胞的形态、荧光强度以及增殖活性的变化.结果 成功分离和培养AD-SCs,其纯度达95%以上,并成功将ADSCs诱导成脂肪、骨、软骨;PKH26标记24 h后,在荧光显微镜下可见细胞膜上均匀分布的强红色荧光,细胞的形态以及增殖活性与未标记的细胞无明显差异.结论 PKH26荧光素染料标记后对AD-SCs的形态及增殖活性无明显影响,是一种理想的细胞标志物,能够很好的应用于示踪间充质干细胞的迁移转归及干细胞标记等方面的研究.
作者:黄绍代;王玉;鲁长风;陈鹏;王冲;刘雪剑;孙百川;张凯红;荆晓光;胡丹;彭江;田建伟 刊期: 2018年第09期