柳莉丹;刘红芳;吉苏云;李锦意;张娇;王晓华;陈永锋
目的 探讨不同年龄子宫内膜异位症不孕患者行解冻胚胎移植( F-ET)术前使用阿托西班对其妊娠结局的影响.方法 回顾性分析行F-ET的子宫内膜异症不孕患者,共684例.根据F-ET日是否使用阿托西班分为观察组和对照组,观察组(329例)于移植前0.5 h 静脉推注小剂量阿托西班(6.75 mg/0.9 ml),对照组(355 例)未使用阿托西班.因年龄是影响妊娠结局的重要因素,因此将观察组与对照组以35岁为界再次分组,分析比较不同年龄组中观察组与对照组间的胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率、流产率及活产率之间的差异.结果 不同年龄组中观察组的胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率及活产率均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);≤35岁年龄组中观察组流产率明显低于对照组,差异有统计学意义(P=0.02).多因素分析结果显示,使用阿托西班、患者年龄和移植胚胎数对妊娠结局有影响.使用阿托西班(OR=4.04,P<0.01)、移植胚胎数(OR=1.87,P<0.01)是临床妊娠率的提高因素,患者年龄(OR=0.62,P=0.04)是临床妊娠率的降低因素.结论 不同年龄子宫内膜异位症不孕患者在F-ET日移植前给予小剂量阿托西班预处理可明显改善其临床妊娠结局.
作者:王影;胡晶晶;吴荣;王超;李君;魏兆莲 刊期: 2018年第12期
目的 研究Polo样激酶1(PLK1)基因沉默对肺鳞癌SK-MES-1细胞肿瘤生物学行为的影响并探讨其相关的分子机制.方法 将 PLK1 siRNA 和空白对照 siRNA 转染 SK-MES-1细胞48 h,实时荧光定量PCR法检测SK-MES-1细胞PLK1 mRNA表达水平;采用 Western blot法检测 SK-MES-1细胞中PLK1、E-cadherin、Vimentin 和 C-myc 蛋白的表达水平;流式细胞术检测 SK-MES-1 细胞周期分布;Transwell 实验检测SK-MES-1细胞侵袭能力的改变.结果 采用PLK1 siRNA抑制PLK1 mRNA和蛋白表达后可以下调C-myc蛋白表达,将细胞周期阻滞在G2 /M期;同时可以通过减少Vim-entin蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达降低细胞的侵袭能力,与空白对照 siRNA组比较,差异均有统计学意义( P <0.05).结论 PLK1在肺鳞癌的生长转移中具有重要作用, PLK1可能通过下调E-cadherin蛋白表达,增加 Vimentin蛋白表达促进肿瘤细胞上皮-间质细胞转化进程.
作者:陈阁;张耀中;米源;廖海江;王雷 刊期: 2018年第12期
目的 考察西黄丸对肝癌细胞的增殖、侵袭及信号转导与转录激活因子3 ( STAT3)异常激活的抑制效果.方法 选取人肝癌细胞株HepG2,给予不同浓度梯度的西黄丸血清,考察西黄丸对HepG2细胞株增殖、侵袭作用的影响及对STAT3异常激活的抑制效果.结果 MTT结果显示,西黄丸对肝癌细胞的增殖具有显著的抑制作用,呈时间和剂量依赖性(P<0.05);与对照组比较,西黄丸低、中及高剂量组肝癌细胞的侵袭作用均显著减弱,MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA及p-STAT3蛋白表达均显著降低( P<0.05).结论 西黄丸可显著抑制HepG2 肝癌细胞的增殖及侵袭作用,机制可能与抑制STAT3异常激活有关.
作者:朱正春;姚梦群;严芳莉;仲飞 刊期: 2018年第12期
目的 探究褪黑素(Mel)对血小板衍生生长因子-BB (PDGF-BB) 诱导的肝星状细胞-T6 (HSC-T6)增殖的影响及机制.方法 将HSC-T6 细胞分为对照组、模型组、实验组(Mel 1 nmol/L、1 μmol/L、0.1 mmol/L),MTT实验检测Mel对PDGF-BB激活的HSC-T6细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR(qPCR)实验检测PDGF-BB、PDGFR-β mRNA的表达;免疫组化及Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)、细胞外调节蛋白激酶1/2( ERK1/2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达.结果 与对照组比较, PDGF-BB能显著诱导 HSC-T6 细胞增殖,明显上调 HSC-T6细胞 PDGF-BB、 PDGFR-β mRNA 及 α-SMA、 ERK1/2、 p-ERK1/2蛋白的表达;与模型组比较,Mel能够抑制PDGF-BB激活的 HSC-T6 细胞增殖,同时抑制 PDGF-BB、 PDGFR-β mRNA表达,并下调 α-SMA、 ERK1/2、 p-ERK1/2 蛋白的表达.结论 Mel可显著抑制PDGF-BB诱导的HSC-T6 细胞的增殖与活化,其作用机制可能与抑制PDGF-BB、PDGFR-β表达,进而抑制ERK1/2信号通路相关.
作者:张玉洁;洪汝涛;揭磊 刊期: 2018年第12期
采用免疫组化法检测54例口腔鳞癌及其癌旁组织中Yes相关蛋白( YAP)与上皮间质转化( EMT)相关蛋白 E-cadherin、Vimentin的表达情况,探讨其临床意义. YAP、Vim-entin在口腔鳞癌中的阳性表达高于癌旁组织(P<0.01),E-cadherin的阳性表达低于癌旁组织( P<0.01);YAP的阳性率与病理分级、淋巴结转移相关(P<0.05);E-cadherin、Vim-entin的阳性率与临床分期、病理分级、淋巴结转移相关( P<0.05);YAP与E-cadherin的表达呈负相关性(r= -0.424,P<0.01),与 Vimentin 的表达呈正相关性(r =0.519,P <0.01). YAP可能通过调控EMT过程促进口腔鳞癌的侵袭转移.
作者:程如玉;韩瑞;王尚华;丁翔;丁丹丹;冯振中;徐锦程 刊期: 2018年第12期
目的 探讨全长脂联素( f-APN)在高糖环境下对人结肠癌SW480细胞株增殖和凋亡的影响及其可能的机制.方法 在葡萄糖含量为4.5 g/L的DEME培养基(高糖培养基)中,应用不同浓度的 f-APN 分别干预人结肠癌细胞株SW480 24 h、48 h,同时应用葡萄糖含量为1.0 g/L的DEME培养基(低糖培养基)作为低糖对照组.实验分为6 组:高糖对照组(0 μg/ml f-APN+高糖,即用葡萄糖含量为4.5 g/L的 DEME 培养基)、 APN1 组(10 μg/ml f-APN + 高糖)、APN2组( 20 μg/ml f-APN + 高糖)、 APN3 组( 30 μg/ml f-APN+高糖)、 APN + SB 组( 30 μg/ml f-APN + 高糖 +10 μmol/L p38MAPK阻滞剂SB203580)、低糖对照组(低糖,葡萄糖含量为1.0 g/L的DEME培养基). MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测磷酸化p38丝裂酶原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达.结果 与低糖对照组比较,24 h、48 h 后高糖对照组吸光度( OD)值均显著升高( P <0.05),凋亡率差异无统计学意义;干预24 h后,与高糖对照组比较,APN3组OD值显著降低( P<0.05),细胞凋亡率显著增加( P<0.05);干预48 h后,与高糖对照组比较,APN1组、APN2、APN3组OD值均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率均显著增加(P<0.05).与APN1组比较,APN2、APN3组OD值更低(P<0.05),细胞凋亡率更高(P<0.05);与高糖对照组比较,APN2组、APN3组的p-p38MAPK蛋白表达量、Caspase-3蛋白表达量均明显增高(P<0.05),APN3组的p-p38MAPK蛋白表达量、Caspase-3 蛋白表达量较APN2 组均更高(P<0.05),APN+SB组2种蛋白表达量相比APN3组明显减少(P<0.05).结论 在全长脂联素在高糖环境下可诱导结肠癌细胞株SW480细胞的凋亡、抑制其增殖;其作用机制可能与p38MAPK通路的激活和Caspase-3 的活化有关.
作者:叶帅;季华;赵晓彤;许慕蓉;陈明卫 刊期: 2018年第12期
目的 构建携带FRET体系( YFP-CFP对)的一组原核表达工程质粒,在大肠杆菌( E. coli)中高效表达后,验证该体系FRET信号作为细胞内监测蛋白相互作用指标的可行性.方法 分别构建 N端、C端以及两端分别编码 YFP和(或) CFP 的 6 个原核表达工程质粒: pNYFP、 pCYFP、pNCFP、 pCCFP、 pYFP-CFP、 pCFP-YFP.设计 YFP-CFP 和CFP-YFP作为阳性对照,而等量的YFP与CFP混合的体系(YFP + CFP)作为阴性对照.将过表达的工程蛋白通过镍柱、分子筛层析柱进行初步纯化后使用酶标仪检测相同摩尔浓度纯化蛋白的FRET信号.在此基础上,进一步用酶标仪检测表达工程蛋白的菌液中的FRET信号.结果 通过测序验证,成功构建了6个原核表达的工程质粒.酶标仪检测的结果显示在体外纯化蛋白条件和菌液条件下均可产生明确的FRET信号.结论 成功构建了FRET体系的原核表达工程质粒,不仅验证了蛋白条件下的可行性,而且验证了菌液条件下的可行性,为在活细胞条件下对蛋白-蛋白相互作用进行实时的动态研究,提供一个非常便利的实验方法.
作者:钱月娇;冯钰斌;钱学文;朱传君;李鸽;卢多;陈飞虎 刊期: 2018年第12期
目的 了解云南部分边境地区新报告人类免疫缺陷病毒( HIV)感染者性行为相关特征,为制定艾滋病防控策略提供依据.方法 采用方便抽样的方法纳入新报告的HIV感染者100名,收集和分析其性行为频率、性伴数量、与性伴的关系和安全套使用等特征.结果 研究对象以农民(57.0% ,57/100)和个体工商户(16.0% ,16/100)为主,年龄18~68 (38.3 ± 11.9)岁,文化程度初中及以下占 85.0% (85/100),月收入2 000元以下占61.0% (61/100).每7 d以上有一次性行为的占49.0% (49/100),有两个及以上性伴的比例为25.0% (25/100).异性性传播和静脉吸毒传播感染者第一性伴以配偶为主,分别占 74.0% ( 54/73 )和69.2% (9/13),同性性传播感染者则以一夜情伴侣(55.6% , 5/9)为主(P<0.001).第一性伴为缅籍的占6.1% (6/98),越籍者占3.1% (3/98);因异性性传播的HIV感染者,其外籍比例为35.3% (6/17).与第一性伴的性行为过程中全程使用安全套的比例为38.9% (37/95).有2 个及以上性伴的25名研究对象与第二性伴的性行为中安全套的使用比例为28.0% (7/25).结论 云南边境部分地区新报告HIV感染者文化程度低,存在多性伴及外籍性伴,性活动较频繁,安 全套使用比例低,HIV传播风险突出,需要进一步加强边境地区艾滋病防治工作.
作者:韦焘;陈敏;罗红兵;贾曼红;马艳玲;李洲林;王继宝;朱志斌;张维义;康钧;杨朝军;陈会超;牛瑾;宋丽军;李雪华;郭敏;李彩霞;陆林 刊期: 2018年第12期
目的 对比非肌层浸润性膀胱肿瘤( NMIBC)行经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)与经尿道膀胱肿瘤二次电切术(Re-TURBT)的术后复发率及进展率,研究NMIBC复发及进展的相关危险因素及二次电切不同手术时机对患者预后的影响.方法 采用前瞻性临床随机对照研究,分析进行手术治疗的NMIBC患者95例.按照术前制定的筛选标准,将患者分为TURBT组55例及Re-TURBT组40例.采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线、计算平均生存时间及生存率.单因素分析采用Log-rank检验,多因素分析采用Cox比例风险模型.结果 ① Re-TURBT组在术后复发率及进展率方面均优于TURBT组,TURBT组及Re-TURBT组术后平均无复发生存时间分别为16.94个月vs 21.86个月( P<0.05),术后12个月无复发生存率( RFS)分别为:65.8% vs 86.9% ,平均无进展生存时间分别为 20.56 个月 vs 23.73 个月( P <0.05),术后18 个月无进展生存率(PFS)分别为73.7% vs 86.3% (P<0.05);② 单因素分析结果提示:组别、肿瘤大小、临床分期及病理分级是肿瘤复发及进展的影响因素;多因素分析结果显示:组别、肿瘤大小、病理分级为肿瘤复发的独立影响因素;组别、肿瘤大小、临床分期为肿瘤进展的独立影响因素;③ Re-TURBT组患者根据两次手术间隔时间长短分为两组:≤6周和>6周,两组患者之间的平均无复发生存时间分别为24.00个月vs 16.93个月( P<0.05),差异具有统计学意义.两组患者间无进展生存时间分别为24.00 个月vs 21.00个月(P>0.05),差异无统计学意义.结论 二次电切可以显著降低术后膀胱癌复发及进展的风险.对于体积较大(≥30 mm),分期较高(≥T1期),病理级别为高级 别的肿瘤应行Re-TURBT以降低肿瘤复发率及进展率.行二次电切手术的患者,第二次手术应在第一次手术后的6周内进行.
作者:陈伟;杨诚;梁朝朝 刊期: 2018年第12期
目的 研究吗啡后处理(PC)对离体大鼠缺血再灌注心肌自噬的影响及其可能机制.方法 成年雄性SD大鼠48只,随机分为3组:空白对照组(C组),缺血再灌注组(I/R组),吗啡PC组( M组),每组16 只.采用Langendorff心脏灌流装置构建大鼠离体心肌缺血再灌注模型.C组持续灌注110 min,另两组平衡灌注20 min后实行30 min缺血、60 min再灌注;M组于再灌注开始前即刻给予1 μmol/L吗啡灌流15 s、洗脱15 s,共重复4次.再灌注末,检测冠脉流出液肌酸激酶(CK)活性,分析心肌梗死面积,观察心肌病理学变化,Western blot测定心肌组织微管相关蛋白1 轻链3-Ⅱ/Ⅰ(LC3-Ⅱ/Ⅰ)以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)的表达.结果 与 I/R组比较,M组CK活性显著降低(P<0.01),心肌梗死面积显著减小(P<0.01),心肌病理学改变较轻,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值明显降低(P<0.01)、p-mTOR表达增高(P<0.01).结论 吗啡PC通过激活mTOR抑制缺血再灌注诱导的心肌自噬,并进一步减轻心肌缺血再灌注损伤.
作者:赵其宏;张颖;沙磊 刊期: 2018年第12期
目的 分析曾行宫腔镜下子宫内膜息肉切除术患者行冻融周期囊胚移植的临床结局,并比较不同内膜准备方案对临床结局的影响.方法 回顾性分析行复苏周期囊胚移植共898个周期的临床资料.具有宫腔镜息肉切除病史者(息肉组)共405个周期,无此病史者(对照组)共493 个周期.息肉组根据内膜准备方案分为自然周期亚组( n=201)及激素替代周期亚组(n=204).分析各组一般资料及临床结局.结果 息肉组与对照组比较,息肉组中自然周期亚组与激素替代周期亚组比较,其年龄、不孕年限、基础 FSH、BMI、移植胚胎数及生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎种植率、流产率、活产率、异位妊娠率差异均无统计学意义.息肉组患者移植日内膜显著厚于对照组,息肉组中自然周期亚组内膜显著厚于激素替代周期亚组.结论 不孕症患者行冻融周期囊胚移植,有息肉切除病史者移植日内膜可能会厚于正常者,但并不影响其移植结局,且息肉切除病史的存在亦不影响对内膜准备方案的选择.
作者:王超;邢琼;向卉芬;徐祖滢;曹云霞 刊期: 2018年第12期
目的 探讨创伤后应激障碍(PTSD)样大鼠行为学改变与海马组织中丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1 ( MKP-1)表达的关系.方法 将30只清洁级SD大鼠随机分为Control组、PTSD 1 d组、PTSD 3 d组、PTSD 7 d 组、PTSD 14 d组,每组各6只,使用国际认定的单次延长应激( SPS)方法制作大鼠PTSD模型.通过旷场试验、Morris水迷宫观察大鼠的行为学变化.采用实时荧光定量 PCR ( qRT-PCR)和 Western blot法分别检测大鼠海马组织中MKP-1 mRNA和蛋白水平的变化.结果 PTSD 7 d组、PTSD 14 d组与Control组相比直立次数、进格次数以及穿台次数减少,潜伏期延长,差异有统计学意义(P<0.05). PTSD 7 d组、PTSD 14 d组与Con-trol组相比,海马组织中MKP-1 mRNA及蛋白表达水平明显升高,差异均具有统计学意义( P<0.05).结论 PTSD样大鼠行为改变、记忆下降考虑与海马组织中MKP-1 基因及蛋白表达增高有关,MKP-1 可能参与了PTSD的发病机制,有望作为PTSD发生发展的参考指标.
作者:邢文龙;刘超猛;王梅子;朱志慧;张桂青 刊期: 2018年第12期
目的 探讨基础促甲状腺素( TSH)水平对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕患者治疗结局的影响.方法 回顾性分析3 039例IVF-ET助孕治疗患者资料,为排除年龄因素干扰将患者分为低龄组(≤35 岁)和高龄组( >35 岁)两组,每组再根据TSH水平分为两个亚组:TSH≤2.5 mIU/L组(对照组)、2.50.05).结论 TSH 2.5~4.0 mIU/L对IVF-ET结局影响不明显,是否需要行IVF-ET助孕前预治疗仍需进一步探讨.
作者:娄华;马倩;付喜玲;王宝金 刊期: 2018年第12期
目的 探讨乳腺病灶与腺体的VTQ比值在乳腺肿块BI-RADS分类校正中的应用价值.方法 对155 例患者共160个病灶进行常规超声检查,对病灶进行BI-RADS分类,分别进行病灶VTQ值测量和腺体VTQ值测量.以病理结果为诊断金标准,构建受试者工作特征( ROC)曲线,评价乳腺病灶与腺体的VTQ比值的诊断价值,并对BI-RADS分类进行校正.结果 乳腺病灶与腺体的VTQ比值的ROC曲线下面积( AUC)为0.92,95% CI:0.87 ~0.97,诊断界值为2.68. BI-RADS校正前、后的敏感度为100% 、97.5% ,特异度为51.9% 、77.2% ,准确性为76.3% 、87.5% ,阳性预测值为68.1% 、81.4% ,阴性预测值为100% 、96.8% .结论 乳腺病灶与腺体的VTQ比值可以明显提高BI-RADS的诊断效能,减少不必要的穿刺活检.
作者:裴蓓;隋秀芳;张杰;张行;叶显俊;章生龙;王磊 刊期: 2018年第12期
目的 探讨胚胎植入前遗传学筛查( PGS)在高龄和复发性流产(RSA)患者中的应用价值.方法 选择91例行PGS治疗的高龄和RSA患者作为研究对象,用单细胞全基因组扩增( WGA)结合二代测序技术( NGS)对胚胎23对染色体进行筛查,选择染色体正常的胚胎进行移植,观察其临床结局.结果 行PGS检测的526枚胚胎,染色体异常率为67.49% (355/526),其中RSA患者染色体异常率为65.96% (217/329),临床妊娠率(CPR)为56.00% (28/50);高龄患者染色体异常率为72.84% (177/243),CPR为57.14% (16/28).结论 高龄和RSA患者胚胎异常率较高,通过PGS可改善其妊娠结局.
作者:韩慧敏;舒明明;揣云海;陈梦楠;郝镁娟;商微;封志纯 刊期: 2018年第12期
目的 评价脊髓神经元钾通道在鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 将体质量250~350 g并且鞘内置管成功的70只健康成年雄性SD大鼠,随机分为7组( n=10):假手术组( Sham组)、心肌缺血再灌注组(IRI组)、IRI+非选择性钾通道开放剂尼可地尔组(NICO+IRI组)、鞘内吗啡预处理组( ITMP组)、ITMP+非选择性钾通道阻断剂格列苯脲组( ITMP+GLI组)、IRI+尼可地尔组的对照组(Sham+NICO组)、ITMP+格列苯脲组的对照组(IRI+GLI组).建立SD大鼠心肌缺血再灌注模型,结扎冠状动脉左前降支,缺血30 min 后,再恢复灌注120 min. ITMP组在心肌缺血前40 min鞘内输注0.9% NaCl溶液10 μl,缺血前30 min鞘内输注吗啡3 μg/kg 10 μl,持续5 min,再停止5 min,循环3次. IRI+NICO组在缺血前40 min鞘内输注100 μg NICO 10 μl. ITMP+GLI组在吗啡预处理前10 min鞘内输注GLI.记录各组再灌注30 min内室性心律失常发生次数(包括PVCs、VT/VF).再灌注结束后留取心肌标本,使用 TTC 染色,检测梗死区( IS)和缺血危险区(AAR)的体积,计算IS/AAR比值.结果 IRI组室性早搏及室速/室颤的发生次数和IS/AAR比值,较Sham组均增加(P<0.05). IRI+NICO组、ITMP组室性早搏及室速/室颤和发生次数和 IS/AAR 比值,较 IRI 组均减少( P <0.05).ITMP+GLI组室性早搏及室速/室颤的发生次数和IS/AAR比值,较ITMP组均增加( P<0.05).结论 脊髓神经元钾通道开放能减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤;脊髓神经元钾通道参与了鞘内吗啡预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的过程.
作者:刘润宇;张野 刊期: 2018年第12期
目的 探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在透出液中的表达及其在诊断腹膜透析相关性腹膜炎(PDRP)中的作用.方法 选取60例PDRP患者( G+菌组24例、G-菌组16例、培养阴性组20例)为腹膜炎组,同时选择30例腹透患者作为对照组.收集患者临床资料、透出液培养结果并检测透出液中 NGAL、白细胞计数(WBC)、多核细胞百分比和白细胞介素-6(IL-6)水平及全血中的C反应蛋白浓度(CRP)、WBC,分析NGAL与腹膜炎发生的相关性.结果 与对照组比较,腹膜炎组患者透出液中的NGAL、WBC、多核细胞百分比、IL-6 及全血中的CRP、WBC、中性粒细胞百分比显著升高,而血白蛋白、血肌酐、转铁蛋白、转铁蛋白饱和度明显降低(P<0.05);G+菌组、 G-菌组、培养阴性组透出液中的 NGAL、WBC、多核细胞百分比、IL-6均明显高于对照组( P <0.05).与培养阴性组比较,G+菌组与G-菌组透出液中的NGAL、多核细胞百分比显著升高(P<0.05),但G+菌组与G-菌组之间差异无统计 学意义.腹膜炎组透出液中的NGAL与WBC呈正相关性( r=0.492,P<0.05);而IL-6 与WBC无相关性(r=0.034,P>0.05).应用二分类logistic回归分析发现透出液中NGAL与腹膜炎发生( OR =1.028, P <0.05 )及培养阳性( OR =0.998,P<0.05)显著相关,但在鉴别G+菌与G-菌性腹膜炎中的作用无相关性.结论 腹透透出液中NGAL可作为诊断PDRP及区分培养阳性腹膜炎及菌阴性腹膜炎的指标.
作者:王娟;姚运娇;吴永贵 刊期: 2018年第12期
利用 PCR 技术扩增目的基因 FGF13VY 亚型,经酶切、连接等反应将目的基因插入穿梭载体pShuttle-CMV中,进而转化至含有AdEasy质粒的大肠杆菌中,进行重组.将所产生的腺病毒载体转染在HEK-293 细胞中,进行腺病毒的包装、分泌和扩增,将所获得的腺病毒在背根神经节中进行过表达,可检测到腺病毒携带的绿色荧光蛋白表达在背根神经节神经元,qPCR检测到FGF13VY mRNA的表达明显升高. FGF13VY腺病毒过表达载体的成功构建,为研究其在DRG神经元中作用奠定了基础.
作者:董梅;陈宇峰;孙如梦;华乐;杨甫;孟丹琳;杨晶;王川 刊期: 2018年第12期
目的 探究精子相关抗原9( SPAG9)在膀胱癌细胞中的表达量以及与细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的关系和作用机制.方法 以人膀胱上皮细胞SV-HUC-1为对照,实时荧光定量PCR( qRT-PCR)和Western blot法检测SPAG9 在膀胱癌T24、J28、RT4细胞系的表达量;转染siRNA沉默膀胱癌T24细胞中SPAG9基因的表达,细胞分为对照组、转染无义组、siRNA-SPAG9组,MTT实验检测干扰SPAG9基因表达对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Transwell法检测细胞的迁移、侵袭能力;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核相关抗原 Ki-67(Ki-67)、B 细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白水平.结果 与正常上皮细胞 SV-HUC-1 比较,SPAG9 在膀胱癌T24、J28、RT4细胞中的表达量显著上调,其中以T24细胞为明显;与对照组比较,siRNA-SPAG9组细胞中SPAG9的表 达量显著降低( P<0.05).沉默SPAG9表达显著抑制细胞的增殖(P<0.05),促进其凋亡(P<0.05),抑制细胞的侵袭、迁移能力(P <0.05),显著下调 PCNA、Ki-67、Bcl-2、MMP-2、MMP-9的蛋白水平(P<0.05),显著上调Bax蛋白表达量(P<0.05).结论 SPAG9在膀胱癌细胞中高表达;沉默SPAG9可能通过调控细胞恶性表型相关蛋白的表达,参与膀胱癌细胞生物学特性的调节过程,为膀胱癌的治疗提供新的靶点.
作者:邢家伟;许长宝;赵兴华;赵永立;吕远;王红丹 刊期: 2018年第12期
目的 观察人正常肝细胞L-02上清液对转化生长因子(TGF)-β1刺激的体外培养人肝星状细胞株(HSC)-LX-2 α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA) mRNA和蛋白表达的影响.方法 体外培养HSC-LX-2、L-02,设立HSC-LX-2正常组、模型组、L-02细胞上清原液组、1/2上清液组、1/4上清液组,分别孵育72 h,噻唑蓝染色法( MTT)检测HSC-LX-2细胞的抑制率,Western blot法检测各组α-SMA的表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组α-SMA mRNA的表达.结果 L-02细胞上清原液组、1/2 上清液组 α-SMA mRNA 及 α-SMA蛋白的表达有显著的抑制作用(P<0.01, P<0.05).结论 L-02上清液能抑制HSC-LX-2细胞的活化和增殖.
作者:钟毓娟;吴丹;黄光玲;何义;蒋莲秀 刊期: 2018年第12期