学术投稿

稳定表达NLRC5基因肝癌细胞株的建立

何莺华;徐涛;倪明明;黄成;李娟;孟晓明;李俊

关键词:NLRC5, 肝癌, 稳定细胞株, HepG2
摘要:目的 建立起能够稳定表达 NLRC5 基因的肝癌HepG2细胞株. 方法 设计遗传霉素( G418 )的浓度梯度,通过对HepG2 细胞筛选终确定筛选药物浓度. 将构建好的人源pEGFP-C2-NLRC5重组质粒利用脂质体介导法转染至HepG2肝癌细胞株中,用G418筛选出耐药阳性克隆. 通过免疫荧光技术观察绿色荧光蛋白稳定表达情况, Western blot法验证NLRC5蛋白表达情况. 结果 G418 在14 d内使HepG2细胞全部死亡的小浓度是300 ng/ml. 用G418筛选瞬转pEGFP-C2-NLRC5 14 d在荧光显微镜下可见耐药克隆的形成. Western blot法检测显示,稳定过表达组 NL-RC5的蛋白水平比空质粒转染组高(t=15. 356,P<0. 05).结论 成功构建稳定表达NLRC5 基因的肝癌细胞株,为进一步研究NLRC5基因在肝癌的体内实验奠定了基础.
安徽医科大学学报杂志相关文献
  • 肿瘤环境下脂肪间充质干细胞旁分泌因子促进结肠癌细胞侵袭

    目的 确定肿瘤环境下人类脂肪间充质干细胞( hAMSCs)的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系. 方法体外分离培养AMSCs,收集培养上清液制备条件培养基,用于培养HCT116细胞. 利用Transwell培养板共培养AM-SCs与HCT116 细胞. 通过检测穿透人工基底胶( Matrigel胶)的能力比较两种培养条件下HCT116细胞侵袭能力的差异. 实时荧光定量 PCR 检测 HCT116 细胞上皮间质转化( EMT)相关基因的表达变化. ELISA法检测共培养后AM-SCs基因表达和旁分泌因子表达变化. 结果 结肠癌细胞系HCT116与AMSCs的Transwell共培养系统中,HCT116细胞的侵袭能力较AMSCs条件培养液培养显著增强. 同时结肠癌细胞系HCT116构成的肿瘤微环境也影响了AMSCs旁分泌因子表达的变化,其中成纤维生长因子10 ( FGF10 )、血管内皮生长因子C( VEGFC)、肿瘤坏死因子α( TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)的表达较正常培养条件下显著上调. 结论 肿瘤微环境影响下的AMSCs旁分泌因子表达改变,这些变化能够增强结肠肿瘤细胞的侵袭能力.

    作者:陈冬梅;刘淑丹;马会明;刘晓明;梁雪云;魏军 刊期: 2016年第01期

  • Bcl-2和Bax在ICR小鼠睾丸中的表达及与eNOS的关联性研究

    目的 探讨B淋巴细胞瘤/白血病-2 ( Bcl-2 )和Bcl-2相关X蛋白( Bax)在雄性ICR小鼠睾丸中的表达及与内皮型一氧化氮合酶( eNOS)的联系和意义. 方法 30只(分别为4、8、12周龄,各10只)健康雄性ICR小鼠,分为性成熟前(4周龄组)、性成熟(8周龄组)、性成熟后(12周龄组),取左侧睾丸经石蜡切片,免疫组化法检测小鼠睾丸中 eNOS、Bcl-2和Bax蛋白的表达分布情况;取右侧睾丸,Western blot法检测eNOS、Bcl-2 和 Bax的表达情况. 结果 Bcl-2 在睾丸间质细胞高表达,Bax在生精上皮有表达;8周龄小鼠睾丸间质细胞Bcl-2表达明显高于4、12周龄组,且8周龄组小鼠Bax表达明显低于4、12周龄组小鼠( P<0. 05 );4周龄组小鼠睾丸eNOS蛋白表达明显高于8、12 周龄组( P <0. 01 ).结论 Bcl-2、Bax与eNOS在睾丸间质细胞的表达并没有直接的相关性,提示NO或许未直接参与睾丸间质细胞的凋亡活动.

    作者:左俐俊;任亚萍;赵玮;宋婉玲 刊期: 2016年第01期

  • 双胎妊娠对子宫牵张力影响的研究

    目的 探讨双胎妊娠子宫牵张力变化对子宫收缩能力的影响. 方法 采集单胎妊娠及双胎妊娠孕妇中期妊娠(孕26 ± 6周)和晚期妊娠(孕37 ± 6 周)的子宫平滑肌组织,制作成肌条各30份,给予缩宫素浓度梯度刺激,观察单胎妊娠与双胎妊娠的子宫牵张力变化及对子宫收缩力的影响. 结果 在Krebs液中,单胎妊娠晚孕阶段子宫牵张力大于中孕阶段,双胎妊娠晚孕阶段子宫牵张力大于中孕阶段,中孕阶段的双胎妊娠子宫牵张力大于单胎妊娠,晚孕阶段的双胎妊娠子宫牵张力大于单胎妊娠,差异有统计学意义(P<0. 05);妊娠子宫牵张力随着孕周增加而增大;在缩宫素浓度梯度诱导下,晚孕单胎妊娠子宫牵张力变化引起的子宫收缩较晚孕双胎妊娠明显. 结论 双胎妊娠因子宫牵张力增大导致子宫平滑肌收缩力下降.

    作者:陶志云;张晓慧;张英;魏兆莲 刊期: 2016年第01期

  • ING5在对顺铂不同敏感性的卵巢癌细胞中的表达及其影响

    目的 探讨在对顺铂不同敏感性的卵巢癌细胞中生长抑制蛋白5 ( ING5 )的表达情况及其影响. 方法 应用MTT法分析卵巢癌细胞系A2780、SKOV-3、HO8910、ES-2对顺铂的敏感性差异并测定半数抑制浓度( IC50 )值;Western blot法检测 ING5 蛋白在卵巢癌细胞系 A2780、SKOV-3、HO8910、ES-2中的表达水平;并在A2780 细胞中应用ING5 siRNA沉默 ING5 基因, Western blot法检测沉默效率, MTT法检测转染后 A2780 细胞对顺铂敏感性的改变. 结果A2780细胞对顺铂的敏感性高,IC50值为(0. 423 ± 0. 020)μg/ml;而ES-2细胞对顺铂的敏感性低,IC50值为(5. 280 ± 0. 309)μg/ml(P<0. 01). 然而,ING5蛋白在A2780细胞中表达高,在 ES-2 细胞中表达低( P <0. 01 ). ING5 siRNA显著降低 A2780 细胞对顺铂的敏感性( P <0. 01 ).结论 ING5的高表达可能有利于提高卵巢癌细胞对顺铂的敏感性.

    作者:孙正伟;马蓉;万安;徐汉杰;王慧妍;周颖;赵卫东 刊期: 2016年第01期

  • 缬沙坦对糖尿病大鼠足细胞保护作用的研究

    目的 观察缬沙坦对糖尿病大鼠足细胞相关蛋白表达的影响,探讨肾素-血管紧张素系统( RAS)抑制剂保护糖尿病大鼠足细胞的机制. 方法 将36只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组和实验组. 实验组使用链脲佐菌素( STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,随机将其分为糖尿病模型组、缬沙坦干预组. 8周后分别检测各组大鼠糖化血红蛋白(HbA1C)、尿白蛋白(UALB)、尿肌酐(UCR)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)及肾脏肥大指数(KI)的变化,并计算尿白蛋白/肌酐(UACR)和尿视黄醇结合蛋白/肌酐(UBCR),每周监测各组血糖( BG);8 周后利用光镜及电镜观察大鼠肾脏病理及足细胞形态变化;采用免疫组化、RT-PCR法分别检测肾组织Podocin蛋白和 mRNA的表达. 结果 与正常对照组比较,糖尿病模型组和缬沙坦干预组糖尿病大鼠 BG、HbA1C、UACR、UBCR、KI均明显增高(P<0. 01),肾脏皮质Podocin mRNA及肾组织Podocin蛋白表达水平均显著降低(P<0. 01),肾脏肾小球体积增大,基底膜增厚,足细胞病变较重;与糖尿病模型组比较,缬沙坦干预组除BG及HbA1C外,UACR、UBCR、KI均明显降低(P<0. 01),肾脏皮质Podo-cin mRNA及肾组织Podocin蛋白表达水平增高( P<0. 01 ) ,肾小球、小管间质、基底膜及足细胞的病理损伤减轻. 结论缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏足细胞有明显的保护作用,其部分机制可能是通过上调肾组织Podocin mRNA和蛋白表达.

    作者:黄珍珍;任伟;王艳;陈玉米;叶山东;邢燕;胡闻 刊期: 2016年第01期

  • 精准肝脏外科理念在肝细胞肝癌治疗中的价值

    目的 探讨精准肝脏外科理念在肝细胞肝癌( HCC)治疗中的应用价值,总结影响HCC切除术后复发的危险因素. 方法 回顾性分析行肝切除术的207例HCC患者的临床资料. 结果 精准手术组在血流阻断比例、平均血流阻断时间、平均手术时间、平均术中失血量、围手术期输血量、围手术期输血率、术后并发症发生率、术后住院时间等方面较传统手术组显著下降. 传统手术组术后1、3、5 年总体生存率分别为69%、37%、19%,中位生存时间34 个月;精准手术组术后1、3年总体生存率分别为83%、54%,中位生存时间41 个月. 单因素分析显示:肿瘤直径>5 cm、血管侵犯、非R0切除、术中输血和肿瘤多发是肿瘤复发的危险因素.多因素分析显示:血管侵犯、非R0 切除和术中输血是肿瘤复发的独立危险因素. 结论 精准肝脏切除术治疗原发性HCC是安全有效的,可改善患者生存预后. 血管侵犯、切缘阳性和术中输血是影响HCC患者术后复发独立危险因素.

    作者:张松;潘树波;谢坤;黄帆;赵义军;刘付宝;赵红川;王国斌;耿小平 刊期: 2016年第01期

  • GOLPH3、VEGF在胃癌组织中的表达及其相互关系

    目的 通过检测胃癌组织中高尔基体磷酸化蛋白3 (GOLPH3)与血管内皮生长因子(VEGF)表达水平,探讨二者在胃癌进展中的相互关系. 方法 通过免疫组织化学SP法检测55 例经手术切除的胃癌组织及相应癌旁组织中GOLPH3和VEGF蛋白的表达情况. GOLPH3与VEGF在胃癌组织中表达相关性采用 Pearson 相关性分析. 结果 GOLPH3 及 VEGF 在胃癌组织中的阳性表达率分别为67. 27%、58. 18%,显著高于相应癌旁组织的 18. 18%、23. 64%,差异有统计学意义( P<0. 05 ). GOLPH3、VEGF在胃癌组织中的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小等均无显著相关性,与浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有显著相关性(P<0. 05). 免疫组织化学结果显示在GOLPH3 阳性表达组的胃癌组织中, VEGF 阳性表达率为75. 68%,明显高于GOLPH3阴性表达组的22. 22%,胃癌组织中GOLPH3 表达与VEGF的表达呈正相关性(r=0. 508,P<0. 01). 结论 GOLPH3过表达可能通过上调VEGF的表达调节胃癌血管生成,从而影响胃癌的浸润和转移.

    作者:产世鑫;孟翔凌;吴文涌 刊期: 2016年第01期

  • 大鼠牙髓神经胞体在三叉神经节内分布特点

    目的 了解正常及三叉神经痛( TN)模型大鼠的牙髓神经胞体在三叉神经节( TG)内分布情况及其投射关系,为临床通过TG治疗TN提供解剖学依据. 方法 本实验分为模型组和假手术组,在两组大鼠不同牙髓腔内注入逆行荧光探针,用荧光显微镜观察 TG 中荧光标记神经元的分布情况. 结果 两组大鼠分别在右下及左上中切牙髓腔内注入绿色荧光探针Fast DiO 72 h后,分别在右侧TG后外侧区、左侧TG中段区观察到数个、成簇分布带有绿色荧光标记神经元;将两组大鼠右下及左上中切牙髓腔内分别注入 Fast DiO、Fast DiI两种荧光探针,72 h后在其同侧TG的后外侧区和中间区分别观察到成簇分布的带有绿色和红色荧光的神经元;两组大鼠左侧上中切牙及下颌第一磨牙髓腔内分别注入荧光探针Fast DiI和Fast DiO,72 h后在同侧TG的后外侧区和中段区分别观察到成簇分布带有绿色和红色荧光的神经元. 经统计学比较,两组之间相应牙髓神经胞体在TG内分布区域、数量及荧光强度没有明显区别. 结论 三叉神经上、下颌支神经胞体投射于同侧TG,并有一定区域性;TN产生不改变TG内神经元数量及投射联系,其可能与三叉神经功能活动改变有关.

    作者:肖芳莉;李国超;马腾飞;黄姗姗;徐文华;王烈成;王元银 刊期: 2016年第01期

  • 黄芪皂苷Ⅱ增加5-氟尿嘧啶对人肝癌细胞株HepG2增殖抑制作用

    目的 探讨黄芪皂苷Ⅱ增加5-氟尿嘧啶对人肝癌细胞株( HepG2 )增殖抑制作用及其可能机制. 方法 采用MTT方法检测5-氟尿嘧啶单独或联合黄芪皂苷Ⅱ作用于细胞后,5-氟尿嘧啶对HepG2 的抑制率;Hoechst33342 染色检测细胞凋亡;Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶( ERK1/2)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶( p-ERK)以及凋亡蛋白多聚ADP-核糖聚合酶( PARP)、活化凋亡蛋白多聚 ADP-核糖聚合酶( Cleaved PARP)、活化半胱氨酸蛋白酶蛋白-3 ( Cleaved caspase 3)、活化半胱氨酸蛋白酶蛋白-9(Cleaved caspase 9)的表达. 结果 MTT法结果显示,5-氟尿嘧啶呈浓度和时间依赖性抑制肝癌HepG2 细胞增殖,联用黄芪皂苷Ⅱ可以显著增加5-氟尿嘧啶对HepG2细胞增殖抑制作用(P<0. 05);Western blot法结果显示,联合使用黄芪皂苷Ⅱ和5-氟尿嘧啶能增加Cleaved PARP表达( P<0. 05 );Hoechst33342验证联合用药组较5-氟尿嘧啶组细胞凋亡水平升高;此外,West-ern blot结果还显示,黄芪皂苷Ⅱ抑制p-ERK1/2 蛋白表达;联用ERK1/2特异性抑制剂PD98059 明显增加5-氟尿嘧啶诱导的细胞凋亡率以及凋亡蛋白 Cleaved caspase3、Cleaved caspase9表达( P<0. 05 ). 阻断ERK1/2 后,黄芪皂苷Ⅱ促进5-氟尿嘧啶诱导的凋亡蛋白 Cleaved caspase3、Cleaved caspase9表达以及细胞凋亡水平并未明显增加. 结论 黄芪皂苷Ⅱ增加5-氟尿嘧啶对人肝癌细胞株HepG2增殖抑制作用,其机制可能与抑制p-ERK1/2的表达有关.

    作者:武超;许杜娟;杨翠;夏泉;张医浩 刊期: 2016年第01期

  • KSHV K15蛋白多克隆抗体的制备及其初步鉴定

    目的 制备卡波氏肉瘤相关疱疹病毒( KSHV) K15蛋白多克隆抗体,并将其应用于细胞内K15蛋白的检测. 方法选择K15基因第8 个外显子( K15Pex8 )序列做为模板,构建 K15Pex8的表达载体 pQE-80L-K15Pex8. 诱导重组菌蛋白表达,免疫新西兰兔,制备抗K15Pex8多克隆抗体,并用间接ELISA法测定抗体效价. 将pFJ和pFJ-K15P两种重组质粒分别转入HEK 293T细胞,用Western blot法检测抗K15Pex8多克隆抗体对K15P-Flag蛋白的识别. 结果 由K15Pex8制备的抗K15Pex8多克隆抗体效价大于1 : 6 400,能特异性识别重组质粒pFJ-K15P转染293T细胞产生的K15P-Flag融合蛋白. 结论 初步证明K15Pex8蛋白有免疫反应性,该多克隆抗体可用于重组的K15P-Flag融合蛋白的检测.

    作者:陈伟;方圆;汪小五;许常青;朱晨辰;杨宇;张龙龙;王林定 刊期: 2016年第01期

  • 抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎与病毒性脑炎临床及脑脊液细胞学特点比较

    收集10例抗N-甲基-D-天冬氨酸受体( NMDAR)脑炎及38例病毒性脑炎患者临床资料,分析其临床表现、实验室检查、影像学、脑电图及脑脊液细胞学异同. 抗NMDAR脑炎患者的性别比、年龄、病程以及发热、头痛、病理征、意识障碍的发生率与病毒性脑炎组无明显差异;不自主运动、癫痫发作、精神行为异常的发生率及脑电图异常率高于病毒性脑炎组,脑膜刺激征阳性率低于病毒性脑炎组;抗NMDAR脑炎脑脊液白细胞数及多个核细胞比值低于病毒性脑炎组,而脑脊液细胞学浆细胞出现率高于病毒性脑炎组.

    作者:黄磊;梁波;李雪莲;王尚培;徐仿成;陈先文 刊期: 2016年第01期

  • 甲羟戊酸激酶基因真核及shRNA表达载体构建及其对BxPC-3细胞周期蛋白表达的影响

    目的 构建甲羟戊酸激酶( MVK)基因真核及shRNA表达载体并转染至BxPC-3细胞中,观察其对细胞周期蛋白的影响.方法 从BxPC-3细胞中提取总RNA, 逆转录PCR ( RT-PCR)法获得目的基因 MVK 以及通过化学合成 MVK (751~779)和 MVK(1 089~1 117)位点寡核苷酸片段,构建真核表达及shRNA表达载体并转染至BxPC-3细胞,筛选稳定表达细胞系.Western blot法分析转染后对BxPC-3细胞周期蛋白的影响.结果 成功获得MVK基因真核表达( pcD-NA3. 1-mvk)及两个针对 MVK shRNA 表达载体( piLenti-RNAi-shRNA1/2). 通过抗生素筛选及Western blot分析获得了稳定的MVK过表达及低表达细胞株. Western blot分析显示:过表达MVK的细胞株及MVK knockdown的细胞株中细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E表达量与正常及对照细胞相比均显著降低. 结论 MVK过表达及低表达均抑制Bx-PC-3细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E的表达.

    作者:金锐;王芳;栾康;罗欣;张胜权 刊期: 2016年第01期

  • 趾臂指数与体脂在糖尿病下肢血管病变的研究

    目的 通过分析2 型糖尿病患者趾臂指数( TBI )与体脂之间的关系,了解体脂对2 型糖尿病患者TBI的影响,探讨TBI及体脂在糖尿病下肢血管病风险评估中的意义.方法 选择收集踝肱指数( ABI)及TBI均在正常范围内的2型糖尿病患者123例,收集患者一般资料、临床生化指标,应用人体成分分析仪定量测量身体不同部分的主要成分. 将TBI按百分位数 P50 分为2 组, TBI 较高组:0. 82≤TBI <1. 12;TBI较低组:0. 60

    作者:石静琳;史琳涛;张美;刘彦君;范明 刊期: 2016年第01期

  • 生长分化因子-9下调对小鼠卵巢颗粒细胞增殖能力的影响

    目的 探讨生长分化因子-9 ( GDF9 )对小鼠卵巢颗粒细胞增殖能力基因周期蛋白 A(cyclin A)、周期蛋白 D1 (cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶抑制因子27(p27kip1)表达的影响. 方法 利用 CCK-8 检测法检测细胞的增殖能力;使用流式细胞术、Real-time PCR和 Western blot法验证GDF9 siRNA的干扰效率;采用Real-time PCR和Western blot法检测细胞增殖cyclin A、cyclin D1 和p27kip1 mRNA和蛋白表达情况. 结果 GDF9 siRNA显著抑制颗粒细胞增殖活力,其中 72 h 抑制明显( P <0. 05 );Real-time PCR 和Western blot法检测结果显示GDF9 siRNA显著下调小鼠卵巢颗粒细胞中GDF9 mRNA及蛋白的表达( P<0. 01 );Real-time PCR法检测结果显示,细胞cyclin A、cyclin D1 mRNA表达降低,p27kip1 mRNA表达增强;Western blot法结果显示, GDF9 siRNA 可促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1的表达,同时下调G2/M期调控蛋白cyclin A、cyclin D1的表达. 结论 靶向抑制小鼠卵巢颗粒细胞中GDF9的表达,下调细胞cyclin A、cyclin D1的表达,上调P27 kip1的表达,显著抑制细胞的增殖.

    作者:马会明;张永芳;王蒙蒙;李昀伽;蒲静;于佳;王燕蓉;裴秀英;徐仙 刊期: 2016年第01期

  • 栀子柏皮汤不同配伍对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的治疗作用

    目的 研究栀子柏皮汤不同配伍组合的抗肝纤维化药理作用. 方法 采用四氯化碳( CCl4 )引起的肝纤维化小鼠模型观察栀子柏皮汤各配伍组的抗肝纤维化作用,同时给予不同配伍的栀子柏皮汤进行灌胃治疗. 生化检测相关肝纤维化及炎症指标,运用Masson染色和HE染色检测肝纤维化的变化,Western blot 法检测Ⅰ型胶原及α-横纹肌肌节肌动蛋白(α-SMA)的表达水平. 结果 栀子柏皮汤及各配伍组均可不同程度的降低小鼠血清谷丙转氨酶( ALT)、谷草转氨酶 ( AST)、羟脯氨酸( Hyp)及透明质酸( HA)水平,改善肝脏的病理变化,其中栀子黄柏甘草配伍组抑制 CCl4 诱导的小鼠肝纤维化效果佳(P<0. 01),并能显著抑制肝组织中Ⅰ型胶原和α-SMA的蛋白表达( P<0. 01 ). 实验结果表明栀子柏皮汤亦可明显降低血清中转化生长因子 β( TGF-β)的表达水平. 结论 栀子柏皮汤不同配伍组能不同程度改善小鼠肝纤维化,但栀子黄柏甘草配伍,即全汤组抗肝纤维化作用明显,并且栀子柏皮汤的抗肝纤维化作用可能与降低TGF-β水平有关.

    作者:钱正月;李俊;黄成;孟晓明;马陶陶;陈昭琳 刊期: 2016年第01期

  • 稳定表达NLRC5基因肝癌细胞株的建立

    目的 建立起能够稳定表达 NLRC5 基因的肝癌HepG2细胞株. 方法 设计遗传霉素( G418 )的浓度梯度,通过对HepG2 细胞筛选终确定筛选药物浓度. 将构建好的人源pEGFP-C2-NLRC5重组质粒利用脂质体介导法转染至HepG2肝癌细胞株中,用G418筛选出耐药阳性克隆. 通过免疫荧光技术观察绿色荧光蛋白稳定表达情况, Western blot法验证NLRC5蛋白表达情况. 结果 G418 在14 d内使HepG2细胞全部死亡的小浓度是300 ng/ml. 用G418筛选瞬转pEGFP-C2-NLRC5 14 d在荧光显微镜下可见耐药克隆的形成. Western blot法检测显示,稳定过表达组 NL-RC5的蛋白水平比空质粒转染组高(t=15. 356,P<0. 05).结论 成功构建稳定表达NLRC5 基因的肝癌细胞株,为进一步研究NLRC5基因在肝癌的体内实验奠定了基础.

    作者:何莺华;徐涛;倪明明;黄成;李娟;孟晓明;李俊 刊期: 2016年第01期

  • 慢性HBV感染HBsAg含量与T、B淋巴细胞亚群及NK细胞相关性

    目的 探讨慢性乙型肝炎病毒( HBV)感染免疫不全状态(非活动期)乙型肝炎表面抗原( HBsAg)含量与外周血T、B淋巴细胞亚群及NK细胞的相关性. 方法 收集慢性HBV感染免疫不全状态(非活动期)者34例、健康者20例,采用流式细胞仪检测其外周血T、B淋巴细胞亚群及NK细胞百分比,实时荧光探针定量-聚合酶链反应( FQ-PCR)方法检测HBsAg的含量. 结果 HBsAg的含量与B淋巴细胞百分比呈正相关性(P<0. 05),高HBsAg含量组的B淋巴细胞高于健康组与低HBsAg含量组,差异有统计学意义( P<0. 05),与T淋巴细胞及NK细胞无相关性. 结论 在慢性HBV感染免疫不全状态(非活动期)的人群中, HBsAg含量在一定程度上能反映患者的免疫状态,外周血淋巴细胞亚群和NK细胞检测对于了解患者免疫状态有一定的临床价值.

    作者:聂琳;杨丽莎;彭德珍;张敏;王君宜 刊期: 2016年第01期

  • 促红细胞生成素对脊髓源性神经干细胞分化能力的影响

    目的 探讨成体大鼠脊髓源性神经干细胞( NSCs)在促红细胞生成素( EPO)的作用下体外分化的形态学表现,为成体脊髓源性NSCs移植治疗脊髓损伤提供理论基础. 方法利用无血清悬浮培养,体外分离培养 SD 大鼠脊髓源性NSCs,随后以含血清培养基贴壁诱导分化培养7 d,行免疫细胞化学染色,以抗巢蛋白( Nestin)鉴定NSCs,以抗微管相关蛋白2(MAP2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色检测NSCs的分化情况. 选取第3代NSCs,向培养基中添加EPO,使EPO的终浓度为10 IU/ml,并设不添加EPO的对照组,免疫荧光共聚焦显微镜下分别观察并计数各组神经元/细胞总数得出百分率. 结果 SD大鼠脊髓组织体外悬浮培养可获得大量神经球,所获得的神经球均表达Nestin蛋白,以含血清培养基贴壁诱导分化培养,可检测出MAP2 和GFAP阳性细胞;EPO组诱导分化后,表达 MAP2 阳性细胞较对照组显著提高( P<0. 05 ). 结论 SD大鼠脊髓体外培养可获得NSCs,EPO可促进成体脊髓源性NSCs向神经元方向分化.

    作者:李小波;张辉;王少滨;刘杰;余涛;杜怡斌;尹宗生 刊期: 2016年第01期

  • 铁卟啉与O2、N2、NO结合后的金属自旋状态分析

    通过半经验量子化学计算软件 MOPAC2012 研究血红蛋白中铁卟啉与3种气体分子O2、NO和N2 在低、中、高3种自旋状态下的结合作用,计算体系中的基本机构参数和总能量变化,分析自旋状态在血红蛋白中结合气体分子的作用. 铁卟啉结合O2 分子时,在高自旋状态时结合能低,为-96. 19 kJ/mol;结合N2 分子时,在低自旋状态时结合能低,为-48. 87 kJ/mol;结合NO分子时,在低自旋状态时结合能低,为-85. 60 kJ/mol.

    作者:马磊;刘述;徐金勇;李光武 刊期: 2016年第01期

  • 内镜黏膜下剥离术治疗食管早癌及癌前期病变

    采用内镜黏膜下剥离术( ESD)治疗食管早癌及癌前期病变的患者65例,其中64例成功切除,1例发生穿孔,60例整块切除,58 例完整切除. 术中发现卫星灶16 例,术后病理较术前病理明显进展20例,其中发现早癌8例,术后狭窄4例.ESD是治疗食管早癌及癌前期病变的微创、较安全、有效的治疗方法,而且能获得准确的病理资料,可更好地评估病情.

    作者:王业涛;张明黎;张开光;宋继中;叶飞;王巧民 刊期: 2016年第01期

安徽医科大学学报杂志

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