目的：利用脂多糖( LPS)刺激大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞株RLE-6TN建立内毒素性急性肺损伤( ALI)体外细胞模型,观察RLE-6TN是否发生内质网应激( ERS)及相关凋亡,为进一步研究内毒素性ALI提供依据,同时为临床ALI新药研发提供新的思路。方法以LPS刺激大鼠肺泡上皮细胞株 RLE-6TN, Western blot 法检测 ERS 相关蛋白 GRP78、CHOP、c-Caspase-12以及 c-Caspase-3的表达, DAPI 染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 LPS刺激大鼠肺泡上皮细胞株RLE-6TN 24 h,GRP78蛋白表达增多,并且ERS特异性凋亡蛋白CHOP及c-Caspase-12的表达均增多,DAPI染色及流式细胞术结果均表明RLE-6TN凋亡增强。结论LPS可诱导大鼠肺泡上皮细胞RLE-6TN发生ERS,并发ERS相关凋亡,这可能是LPS致ALI的重要病理生理机制。
作者：孟凡亮；汪应红；左龙泉；赵大海；黄艳 刊期： 2016年第12期
目的：探索影响强直性脊柱炎( AS)患者疾病活动度的相关影响因素及其临床意义。方法共收集风湿免疫门诊新确诊的AS患者723例。相关影响因素的收集采用自编式AS流行病学调查表,疾病活动度的评估采用巴斯强直性脊柱炎疾病活动度指数。运用有序多分类Logistic回归模型识别AS患者疾病活动度的相关影响因素。结果单因素分析结果显示,AS患者疾病活动度的高低与年龄、低等教育水平、较差的睡眠质量、ESR、BASFI及症状持续时间有关( P<0．05)。多因素分析表明,较差及一般的睡眠质量和较差的功能结局是影响AS患者疾病活动度高低的主要因素( P<0．05)。结论睡眠障碍及功能受限是影响AS患者疾病活动度的主要因素。临床医师应注重改善AS确诊患者的功能状态及睡眠质量,控制炎症进展,提高患者预后。
作者：夏青；李晓娜；杨晓；王丽；辛利红；蔡国旗；张旭；王蒙蒙；徐胜前；徐建华；帅宗文；潘发明 刊期： 2016年第12期
目的：研究甲状腺功能减退症(甲减)大鼠前额叶突触结合蛋白-1(syt-1)的表达及甲状腺素(T4)和多奈哌齐( DON)治疗效果。方法通过饮用0．05%丙基硫氧嘧啶( PTU)水建立甲减大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照( CON)组、甲减( Hypo)组、DON治疗组、T4治疗组、联合治疗( T4+DON)组。放射免疫法测定血清甲状腺激素水平, Western blot 和超敏免疫组化法分别分析各组大鼠前额叶syt-1表达及免疫反应产物分布情况。结果 Hypo组、DON组大鼠血清甲状腺激素较CON组明显降低( P<0．05), T4组、T4+DON组血清甲状腺激素恢复至正常水平；Western blot结果显示Hypo组、DON组及T4组大鼠前额叶syt-1表达均高于CON组(P<0．05),T4+DON组syt-1表达恢复正常；超敏免疫组化结果经光镜可见syt-1免疫反应产物呈棕黄色颗粒,广泛分布在大鼠前额叶分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层,Hypo组、DON及 T4组在各层分布均高于CON组(P<0．05),T4+DON组在各层分布均恢复至正常。结论 Hypo组大鼠较CON组大鼠前额叶syt-1表达升高,T4替代治疗未能使损伤蛋白完全恢复, T4+DON治疗后蛋白恢复至正常水平,提示联合治疗更有利于甲减脑区损伤蛋白的恢复。
作者：吴章碧；吴波；查小雪；朱敏；王取南；朱德发 刊期： 2016年第12期
对肘前外侧入路逆向反拉克氏针固定治疗儿童肱骨小头骨折的疗效进行分析。回顾性分析38例有移位的肱骨小头骨折手术疗效。手术均采取肘前外侧入路逆向反拉克氏针固定,术后随访时间7个月~2年,采用Mayo肘关节功能评分标准对其疗效进行评估并与健侧肘关节功能进行对比。 Mayo肘关节功能评分23例为优,13例为良,2例为中,与健侧肘关节屈伸和旋转活动度进行比较无明显差异,无内固定松动及肱骨小头坏死发生。故肘前外侧入路逆向反拉克氏针固定治疗肱骨小头骨折是一种简便可行、疗效确切的手术方式。
作者：雍明；郑朋飞；楼跃；唐凯；张志群；林刚；孙祥水 刊期： 2016年第12期
目的：构建胞内氯离子通道蛋白1(CLIC1)点突变体的真核表达质粒，进行CLIC1突变体的表达、定位及其与迟发性脊椎骨骺发育不良病蛋白( Sedlin)的共定位研究，为进一步揭示其功能奠定基础。方法以CLIC1全长cDNA序列为模板，构建3个真核表达质粒即 pcDNA3．1-CLIC1(C24A)-FLAG、pcDNA3．1-CLIC1(C59A)-FLAG、pcDNA3．1-CLIC1( C24A-C59A)-FLAG；Western blot法检测CLIC1及其点突变体在 HEK 293T 细胞中的表达；免疫荧光技术了解CLIC1及其点突变体蛋白在COS7细胞中的定位及与Sedlin的共定位情况。结果成功构建了CLIC1点突变体的真核表达质粒；Western blot 结果显示3个点突变体蛋白在HEK293T细胞中均能表达，突变体的分子量低于野生型的；免疫荧光实验表明CLIC1蛋白在细胞质和细胞核都有表达，但主要在细胞核。 CLIC1点突变体蛋白定位在胞质中，细胞核中无分布，与 Sedlin 蛋白在胞质存在共定位。结论CLIC1的3种点突变体均能在哺乳动物细胞中有效表达；CLIC1及其点突变体与Sedlin蛋白均存在共定位，提示两种蛋白之间可能存在相互作用。
作者：沙启飞；潘林鑫；耿慧武；王梦媛；印叶盛；李子剑；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2016年第12期
回顾性分析12例冠心病支架介入( PCI)失败后行急诊不停跳冠脉搭桥术( OPCABG)患者的临床资料并随访。无院内死亡,术后平均住院(14±5) d。随访(25±9)个月,11例无心绞痛或心肌梗死发作；1例术后16个月心绞痛发作,经药物治疗后缓解。急诊OPCABG是PCI出现并发症时挽救患者生命的有效手段,患者预后良好。
作者：孙阿雨；赵智伟；葛建军 刊期： 2016年第12期
目的：通过建立大鼠骨性关节炎( OA)模型探讨补体复合物( MAC)在软骨及滑膜中的表达。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、4周组、8周组、12周组，每组10只。手术组取大鼠后肢一侧膝关节行前交叉韧带切断加内侧半月板切除术制造OA模型，手术后4周、8周及12周取两侧膝关节软骨行大体观察、HE染色、番红O-固绿染色、甲苯胺蓝染色估计软骨退变程度以及进行组织病理学的Mankin评分，免疫组化及Western blot法检测MAC在软骨中沉积及表达情况。结果与对照组比较，手术组大鼠膝关节软骨4周、8周及12周后呈现软骨粗糙、糜烂、裂隙形成、缺损及骨赘形成等早中晚期OA表现。各组间Mankin计分差异均有统计学意义(P<0．01)，损伤逐渐加重。各组间滑膜评分差异有统计学意义(P<0．01)，炎症逐渐降低。免疫组化结果显示软骨细胞膜周围出现环形 MAC 沉积，滑膜中没有MAC。 Western blot检测显示实验组有MAC条带，对照组没有。结论 MAC在OA大鼠软骨中表达增多，补体系统可能作为诊治OA的新方向。
作者：张可可；毕意辉；陈学周；董洲；张明凯；尤涛 刊期： 2016年第12期
目的：探讨Wnt信号通路中关键蛋白Wnt3a和TCF4在卵巢癌中的表达水平以及临床意义。方法 ELISA法检测10例卵巢癌患者手术前后和10例健康对照者血浆Wnt3a浓度,Western blot、qRT-PCR法检测卵巢癌患者与卵巢良性病变者的卵巢组织Wnt3a、TCF4水平。采用Western blot法检测卵巢癌细胞株 SKOV3与 HO8910中 TCF4的表达,采用dnTCF4质粒转染技术获得TCF4表达下降的 SK-OV3/dnTCF4细胞,使用细胞划痕实验比较卵巢癌细胞转移能力。结果卵巢癌患者血浆Wnt3a水平高于健康对照者(P<0．05),且术后血浆Wnt3a水平低于术前(P<0．05)；卵巢癌组织中 Wnt3a、TCF4水平高于卵巢良性病变者( P <0．05)；SKOV3的TCF4表达量高于HO8910且转移潜能也明显高于后者( P<0．05)；将SKOV3的TCF4敲低,其转移能力明显减弱( P<0．05)。结论 Wnt信号通路参与卵巢癌的发生发展,Wnt3a和TCF4有可能成为监测卵巢癌进展的临床指标之一。
作者：戴朦；沈国栋；程民；徐婷娟；翁海燕；胡世莲；沈干 刊期： 2016年第12期
健康成年雌性新西兰大白兔24只，随机选择一侧膝关节以异体半腱肌腱和自体半腱肌腱混编后重建前交叉韧带作为实验组，另一侧膝关节以异体半腱肌腱折叠双股重建前交叉韧带作为对照组。术后3、6、10周观察两组兔重建的前交叉韧带组织学改变(n=3)，并行生物力学检测(n=5)。结果显示，与兔同种异体肌腱重建前交叉韧带比较，自体同种异体肌腱联合应用可加快移植物成熟速度，增加移植物强度，缩短腱骨成骨时间，提高愈合强度。
作者：吴星；赵其纯；尚希福；邓小文；李久源；李丹 刊期： 2016年第12期
目的：探讨人重组促红细胞生成素( rh-EPO)在大鼠脊髓损伤( SCI)后运动功能恢复中的作用。方法选取30只200~230 g成年雄性SD大鼠,随机分为假手术( Sham )组、脊髓损伤( SCI)组和EPO组,每组10只。 Sham组仅行椎板切除术,不伤及脊髓。 SCI组和EPO组行椎板切除及脊髓打击术。术后EPO组腹腔注射rh-EPO,SCI组和Sham组采用相同剂量的生理盐水。应用BBB评分评估大鼠术后第1、3、7、14天的后肢运动功能恢复情况。 HE染色观察术后第14天脊髓形态学变化；免疫荧光测定新生神经元的增殖情况。结果术后第1、3天SCI组和EPO组之间BBB评分差异无统计学意义；术后第7、14天EPO组BBB评分明显高于SCI组(P<0．05,P<0．01)。 SCI组可见大量胶质瘢痕、空洞形成和炎性细胞浸润；EPO组上述改变较SCI组减轻。Sham组、SCI组和EPO组新增殖神经元数目逐渐增多,各组间比较差异有统计学意义( P <0．01)。结论大剂量 rh-EPO的治疗可减轻脊髓内炎症反应、刺激脊髓新生神经元的增殖和促进大鼠SCI后后肢运动功能的恢复。
作者：王康康；张辉；方晓；王少滨；李小波；刘杰；尹宗生 刊期： 2016年第12期
目的：利用全基因组表达谱芯片对早期分泌靶向抗原6(ESAT-6)刺激结核患者外周血CD4+ T淋巴细胞前后释放γ-干扰素( IFN-γ) mRNA进行检测,并对mRNA在刺激过程中可能涉及到的信号通路变化进行分析。方法抽取3例初诊结核患者外周静脉血各10 ml,密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞( PBMC), ESAT-6刺激PBMC,6 h后磁珠法分选CD4+ T淋巴细胞,提取细胞总RNA,全基因组表达谱芯片检测刺激前后差异表达基因。利用GO分析对差异表达的基因进行功能分类, KEGG 进行信号通路分析。结果 ESAT-6刺激后差异表达的mRNA共有2297条,相对高表达的 mRNA 有1071条,相对低表达的 mRNA 有1226条(>2倍变化且P<0．05)。信号通路分析显示差异表达的mRNA参与了17条信号通路的调控,其中JAK-STAT信号通路、Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路等5条信号通路与结核释放IFN-γ关系密切。结论 ESAT-6刺激后的CD4+ T淋巴细胞有大量mRNA发生差异表达,其在多个与结核释放IFN-γ密切相关的信号通路中发挥着重要的调控作用。
作者：张焰；王晓玮；程筱雯；徐元宏 刊期： 2016年第12期
目的：评估组织结构声学定量技术( ASQ)对于肝纤维化病理分期的诊断效能,对比分析ASQ与瞬时弹性成像( Fibroscan)诊断肝纤维化病理分期的价值。方法收集慢乙肝患者111例,同时行ASQ、Fibroscan及肝脏病理穿刺活组织检查。对比ASQ定量参数红蓝曲线下面积比( FD Rati-o)、Fibroscan 肝弹性模量与肝纤维化病理分期的相关系数,绘制并分析肝纤维化病理分期的ROC曲线。结果 FD Ra-tio与肝纤维化病理分期的相关性(rs =0．659)低于Fibroscan弹性模量( rs =0．777),差异有统计学意义。 ASQ 与Fibroscan诊断肝纤维化病理分期S≥2、S=4的ROC曲线下面积分别为0．705(95%CI：0．611~0．788)与0．817(95%CI：0．733~0．884)、0．709(95%CI：0．615~0．791)与0．920(95%CI：0．853~0．963),差异无统计学意义。组织结构声学定量技术诊断肝纤维化(S≥2)、肝硬化(S=4)的佳截断值分别为0．21(敏感度76%,特异度74%)、0．38(敏感度77%,特异度88%)。结论 ASQ作为一种新兴的超声新技术,对肝纤维化病理分期有一定的诊断价值,FD Ratio可作为无创性ASQ的有效参数,对慢性乙型肝炎患者的病情进行随访及评估。 ASQ对肝纤维化病理分期的评估效能与Fi-broscan相当,而ASQ能够与常规超声系统相结合,具有较好的临床应用前景。
作者：姚莉；郑慧；万颖；陈娜；周旺 刊期： 2016年第12期
目的：研究β-榄香烯对胃癌细胞SGC7901的增殖、凋亡、迁移及赖氨酰氧化酶( LOX)的影响。方法体外培养人胃癌SGC7901细胞, MTS法及流式细胞术检测不同浓度β-榄香烯对SGC7901细胞增殖与凋亡的影响,划痕实验、Tr-answell小室迁移实验检测β-榄香烯对细胞迁移的影响,酶标仪法检测β-榄香烯对LOX酶活性的影响,Western blot法检测 LOX 蛋白表达的变化。结果β-榄香烯(50~800μmol/L)对SGC7901细胞的抑制作用呈时间依赖和浓度依赖性。β-榄香烯(100、200、400、800μmol/L)处理 SGC7901细胞24 h后,凋亡率分别为8．1%、8．2%、18．7%、41．9%,与对照组(4．9%)比较,凋亡率明显升高( P<0．05)。划痕实验、Transwell 实验结果显示β-榄香烯对 SGC7901细胞的迁移有明显抑制作用( P<0．05)。β-榄香烯浓度依赖性地降低SGC7901细胞LOX酶活性(P<0．05)。 Western blot结果显示β-榄香烯可下调SGC7901细胞LOX的蛋白表达。结论β-榄香烯对胃癌细胞 SGC7901有明显抑制增殖、迁移及促进凋亡作用,抑制LOX酶活性和蛋白表达可能是其发挥作用的机制之一。
作者：赵晓晓；张蕾；史天陆；邓明影；汪国玉；姜玲；魏伟 刊期： 2016年第12期
取60只8周龄Wistar大鼠,随机分为TNF-α+凝胶实验组和空白凝胶对照组,于其舌背部黏膜处作一圆形缺损模型；每组大鼠分别于0、24、48、72、96 h处死,取标本冰冻切片。通过免疫组织荧光法检测与上皮间质转化( EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP1)和波形蛋白( Vimentin)在大鼠舌黏膜创伤愈合过程中的表达。结果显示两组大鼠创伤部位上皮细胞均有表达FSP1和Vimentin,实验组发生改变的细胞数目明显较对照组多,差异有统计学意义(P<0．05)。
作者：王飞虎；孙应明；孔苗苗；王飞；杨聪翀；刘来奎 刊期： 2016年第12期
探讨情绪调节策略对抑郁症患者共情的影响。对52例抑郁症患者(研究组)及53例健康对照者(对照组)采用人际反应指针量表( IRI-C)进行评估，比较两者共情特点；同时采用情绪调节策略问卷( ERQ )及汉密尔顿抑郁量表(HAMD-24)进行评估。结果显示研究组的IRI-C个人痛苦因子得分显著升高( P<0．001)，并且与其抑郁程度呈正相关性(P<0．001)；研究组的表达抑制得分与其个人痛苦因子得分呈正相关性(P<0．05)，认知重评得分与其观点采择因子得分呈正相关性(P<0．001)。
作者：赵帅；周晓琴；张蕾 刊期： 2016年第12期
目的：探讨胎儿皮肤与成人皮肤的形态结构及表皮干细胞分子标志物的差异,为后续皮肤功能的研究及皮肤移植提供理论依据。方法取胎儿背部与成人腿部皮肤,标本取材后立即用10%中性甲醛固定,石蜡包埋。所有标本经石蜡切片,HE染色,观察皮肤表皮、真皮和皮肤附属器的形态结构；应用免疫组织化学法检测皮肤组织中表皮干细胞标志物p63、β1整合素和角蛋白19(K19)的表达。结果胎儿皮肤与成人皮肤表皮、真皮和皮肤附属器结构不同,胎儿表皮由2~3层上皮细胞组成,基底层细胞呈立方形,核圆,染色深,未发现颗粒层细胞,真皮乳头状突起不明显；成人全层皮肤明显厚于胎儿皮肤,尤其是成人皮肤的真皮层明显较胎儿真皮发达,成人皮肤真皮乳头状突起明显,成人表皮由6~7层上皮细胞组成,基底层细胞呈立方形或柱形,细胞核染色较深,呈卵圆形,居中,有明显的颗粒层,但细胞轮廓不清晰,胞质内可见蓝色颗粒。经测定胎儿皮肤表达的p63、β1整合素及K19的平均光密度值高于成人( P<0．01)。结论胎儿皮肤和成人皮肤表皮、真皮和皮肤附属器形态结构存在差异,表皮干细胞分子标志物表达也存在差异。
作者：吴永胜；陈晓蓉 刊期： 2016年第12期
目的：研究白细胞介素17A( IL-17A)对小鼠肝部分切除后肝脏再生的调控作用。方法对小鼠进行肝切除手术，在手术后的不同时间点取肝脏组织匀浆检测肝脏中IL-17A的表达水平。给予小鼠anti-IL-17A中和抗体后进行肝切除手术，检测手术后小鼠肝脏重量和肝重体重比，分离血清检测并比较在有无anti-IL-17A中和抗体的条件下白细胞介素6(IL-6)的水平，分离肝实质细胞检测并比较在有无an-ti-IL-17A中和抗体的条件下肝实质细胞中信号传导与转录激活因子3(STAT3)的磷酸化水平和细胞周期蛋白D1(cy-clinD1)的表达水平。结果小鼠肝切除后肝脏中的IL-17A水平显著升高(P<0．01)，给予anti-IL-17A中和抗体可以显著抑制肝脏再生、减少IL-6水平和阻止肝细胞增殖信号活化。结论肝切除后肝脏中升高的IL-17A促进IL-6表达和肝脏再生，该研究对肝切除后肝脏再生的治疗具有重要意义。
作者：梁希；张秀红；李静 刊期： 2016年第12期
目的：通过手术录像研究直肠系膜、Denonvilliers筋膜、直肠侧韧带、直肠系膜周围间隙与盆腔自主神经的解剖特点,进一步了解全直肠系膜切除( TME )以盆腔自主神经为解剖标志的解剖根据。方法回顾性分析腹腔镜男性中低位直肠癌手术录像257例,总结以盆腔自主神经为解剖标志行直肠系膜全切除的经验,并对比认识该解剖观点前后(2011年前组126例,2011年后组131例)的手术相关指标以及对患者术后泌尿和性功能的影响。结果认识以盆腔自主神经为解剖标志观点的2011年后组患者在术中出血量较2011年前组明显下降,手术质量明显提高,淋巴结清扫个数高于2011年前组,术后勃起功能障碍率低于2011年前组,尿潴留率低于2011年前组,差异有统计学意义( P <0．05)。结论以盆腔自主神经为解剖标志的直肠系膜全切除的解剖观点有助于腹腔镜下直肠前方系膜的完整切除和淋巴结清除率,减少术中出血,减轻对泌尿和性功能的损害。
作者：牛坚；王月；刘斌 刊期： 2016年第12期
选择60例中度或重度慢性牙周炎患者，用特异性抗P. g-IgY龈下冲洗液前后，观察牙周临床指标变化，通过BA-NA实验评价患者口腔各部位牙周致病菌含量的变化。用药后附着丧失、松动度、探诊出血百分比、菌斑占有率、深牙周袋比例均减小且以抗P. g-IgY龈下冲洗液组改善效果为显著。 BANA实验结果表明该龈下冲洗液可显著减少牙周袋和唾液中的牙周致病菌。特异性抗P. g-IgY龈下冲洗液临床疗效好，可作为中度或重度慢性牙周炎的辅助治疗手段，有较高的临床推广价值。
作者：孙晓瑜；徐燕；张雷；李为；洪彪；周永敏；孟明理；程婷；周乐春 刊期： 2016年第12期
目的：观察动脉粥样硬化( AS)大鼠血管内皮功能以及亲环素A(CyPA)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的表达变化。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为3组(每组10只)：对照组、AS 12周组,AS 16周组。对照组给予基础饲料喂养+腹腔注射等量生理盐水；AS组给予高脂饲料喂养+维生素D3注射液60万IU/kg一次性腹腔注射。对应不同造模时间处死大鼠,分离腹主动脉,观测离体腹主动脉环对乙酰胆碱的舒张反应；HE染色、免疫组化法检测动脉血管壁CyPA及p-ERK1/2的表达。结果与对照组比较,AS 12周、AS 16周组血管内皮功能下降,3组差异有统计学意义( P<0．05)；HE染色显示对照组大鼠血管壁呈正常结构,AS 12周组大鼠内皮细胞破坏、平滑肌细胞增生,AS 16周组粥样钙化斑块形成；免疫组化分析显示3组大鼠血管壁内CyPA及p-ERK1/2表达逐渐升高,差异有统计学意义( P<0．05)。结论随着AS程度加重,大鼠血管内皮依赖性舒张功能明显下降,动脉粥样钙化斑块严重, CyPA及p-ERK1/2表达显著增加。 CyPA、p-ERK1/2信号机制参与加重血管动脉粥样硬化进展,可能是促进AS进展的途径之一。
作者：李敏；黎红华；骆文静；易娟；吴晓飞 刊期： 2016年第12期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
