孙阿雨；赵智伟；葛建军
目的：通过建立大鼠骨性关节炎( OA)模型探讨补体复合物( MAC)在软骨及滑膜中的表达。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、4周组、8周组、12周组，每组10只。手术组取大鼠后肢一侧膝关节行前交叉韧带切断加内侧半月板切除术制造OA模型，手术后4周、8周及12周取两侧膝关节软骨行大体观察、HE染色、番红O-固绿染色、甲苯胺蓝染色估计软骨退变程度以及进行组织病理学的Mankin评分，免疫组化及Western blot法检测MAC在软骨中沉积及表达情况。结果与对照组比较，手术组大鼠膝关节软骨4周、8周及12周后呈现软骨粗糙、糜烂、裂隙形成、缺损及骨赘形成等早中晚期OA表现。各组间Mankin计分差异均有统计学意义(P<0．01)，损伤逐渐加重。各组间滑膜评分差异有统计学意义(P<0．01)，炎症逐渐降低。免疫组化结果显示软骨细胞膜周围出现环形 MAC 沉积，滑膜中没有MAC。 Western blot检测显示实验组有MAC条带，对照组没有。结论 MAC在OA大鼠软骨中表达增多，补体系统可能作为诊治OA的新方向。
作者：张可可；毕意辉；陈学周；董洲；张明凯；尤涛 刊期： 2016年第12期
回顾性分析12例冠心病支架介入( PCI)失败后行急诊不停跳冠脉搭桥术( OPCABG)患者的临床资料并随访。无院内死亡,术后平均住院(14±5) d。随访(25±9)个月,11例无心绞痛或心肌梗死发作；1例术后16个月心绞痛发作,经药物治疗后缓解。急诊OPCABG是PCI出现并发症时挽救患者生命的有效手段,患者预后良好。
作者：孙阿雨；赵智伟；葛建军 刊期： 2016年第12期
目的：评价不同冲洗剂对桩道壁玷污层的清除能力。方法经筛选，选择符合条件的单根管前磨牙20颗，于釉牙骨质界上方2 mm水平去除冠方牙体组织。根管预备，根管充填。3M钻逐级进行桩道预备3号。随机均分为4组，即生理盐水组、双氧水组、次氯酸钠组+MTAN组、MTAN组，分别用以下溶液冲洗：5 ml生理盐水、5 ml 3% H2 O2、2．5 ml 3%次氯酸钠+2．5 ml MTAN、5 ml MTAN。每样本冲洗结束后，均用5 ml生理盐水溶液终末冲洗。于颊舌侧沿牙体长轴纵向劈开。每试样展示较好的一半在场发射扫描电镜下观察。根据Peters′标准计分，对数据行统计学处理。结果生理盐水冲洗桩道后，玷污层覆盖整个牙本质壁。双氧水冲洗桩道后，大量的玷污层残留，绝大多数牙本质小管被阻塞。次氯酸钠+MTAN和MTAN均可以去除大部分的玷污层，大量的牙本质小管口开放。4组样本的统计结果差异有统计学意义(P<0．05)。结论 MTAN及次氯酸钠+MTAN均可有效去除桩道预备后产生的玷污层。
作者：童雪梅；张秋霞；储曼茹；周琳 刊期： 2016年第12期
目的：探讨怀旧疗法对老年脑外伤患者康复期抑郁情绪的疗效。方法方便选取存在抑郁情绪的60例老年脑外伤患者,随机分为对照组、干预组,每组各30例。两组均接受常规的康复训练,干预组在干预早期介入怀旧治疗；分别在6周的干预前后实施汉密尔顿抑郁量表( HAMD)测评与分析。结果组间比较,两组在干预前HAMD得分的差异无统计学意义(t=0．133,P=0．895),6周后干预组患者HAMD得分显著低于对照组(t=3．517,P=0．001)；组内配对比较,6周后两组患者的HAMD得分均明显降低,干预组(t=5．966,P<0．001)、对照组(t=2．389,P=0．021)；干预组抑郁检出率为33．33%(9/27),对照组为64．29%(18/28),差异有统计学意义(χ2=4．134,P=0．042)。结论常规康复治疗联合怀旧疗法能更有效地改善老年康复期脑外伤患者的抑郁状况。
作者：董香丽；孙伟铭；袁也丰 刊期： 2016年第12期
目的：研究β-榄香烯对胃癌细胞SGC7901的增殖、凋亡、迁移及赖氨酰氧化酶( LOX)的影响。方法体外培养人胃癌SGC7901细胞, MTS法及流式细胞术检测不同浓度β-榄香烯对SGC7901细胞增殖与凋亡的影响,划痕实验、Tr-answell小室迁移实验检测β-榄香烯对细胞迁移的影响,酶标仪法检测β-榄香烯对LOX酶活性的影响,Western blot法检测 LOX 蛋白表达的变化。结果β-榄香烯(50~800μmol/L)对SGC7901细胞的抑制作用呈时间依赖和浓度依赖性。β-榄香烯(100、200、400、800μmol/L)处理 SGC7901细胞24 h后,凋亡率分别为8．1%、8．2%、18．7%、41．9%,与对照组(4．9%)比较,凋亡率明显升高( P<0．05)。划痕实验、Transwell 实验结果显示β-榄香烯对 SGC7901细胞的迁移有明显抑制作用( P<0．05)。β-榄香烯浓度依赖性地降低SGC7901细胞LOX酶活性(P<0．05)。 Western blot结果显示β-榄香烯可下调SGC7901细胞LOX的蛋白表达。结论β-榄香烯对胃癌细胞 SGC7901有明显抑制增殖、迁移及促进凋亡作用,抑制LOX酶活性和蛋白表达可能是其发挥作用的机制之一。
作者：赵晓晓；张蕾；史天陆；邓明影；汪国玉；姜玲；魏伟 刊期： 2016年第12期
目的：探讨重组人促红细胞生成素( rhEPO)对支气管肺发育不良( BPD )模型肺组织中酪氨酸激酶-2( JAK2)、信号转导和转录活化因子-5( STAT5)蛋白和mRNA表达的影响。方法将48只孕15 d的健康SD大鼠分别孕囊内注射脂多糖( LPS)或生理盐水,待其自然分娩后将新生大鼠随机分为对照组、高氧组、rhEPO组。采用Western blot和RT-PCR法检测肺组织中 JAK2、STAT5蛋白和 mRNA 的表达。结果高氧组JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达减少,rhEPO组JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达增加,高氧暴露第1、7、14天末,各组间JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达的差异有统计学意义( P<0．05)。结论高氧组肺组织凋亡显著增加, rhEPO组肺组织凋亡减少,rhEPO对BPD模型肺组织的保护机制可能与活化JAK2/STAT5通路,减轻肺组织凋亡相关。
作者：晏兰；张华 刊期： 2016年第12期
目的：探讨新生儿腹部术后并发念珠菌血症的临床特征及危险因素。方法回顾性分析44例有腹部手术史继发念珠菌血症的新生儿的临床资料，分析其临床特征、病原学特征、高危因素及转归情况，并应用Logistic回归分析相关危险因素。结果患儿感染病原菌多见于白色念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌，念珠菌对氟康唑耐药率为50%。死亡组与存活组相比在氟康唑耐药方面差异无统计学意义。两组相比较，死亡组入住ICU时间较长，多并发低蛋白血症、贫血、血小板减少、肝功能损伤，使用抗生素时间及全肠外喂养时间均较长。患儿病死率高达36．4%。多因素 Logistic回归分析显示，脓毒血症、全胃肠外喂养是患儿死亡的独立危险因素，预防性及经验性抗真菌治疗是患儿死亡的唯一保护性因素。结论新生儿腹部术后并发念珠菌血症的患儿病情危重，死亡率高，结合血清学检测结果及临床危险因素可早期识别及诊断，预防性及经验性抗真菌治疗是患儿死亡的唯一保护性因素。
作者：孙静敏；邓芳；朱玉林；金丹群 刊期： 2016年第12期
目的：在人胚胎干细胞( hESCs)定向心肌分化过程中,以中胚层阶段(d2)、心肌细胞起始分化阶段(d3)、心肌细胞后分化阶段( d7)为时间节点,探索 APJ 的表达特征。方法 hESCs经单层培养后,应用化学成分明确的诱导分化培养基定向诱导hESCs向心肌细胞分化,再于d2、d3、d7阶段分别进行细胞免疫荧光检测,共聚焦显微镜观察Brachyu-ry T、mesp1、Nkx2．5与APJ的蛋白表达情况,实时荧光定量PCR法检测4种标志物mRNA的表达水平。结果诱导d7开始出现跳动的细胞,跳动细胞数量d7~d16逐渐增加,d16达高峰。细胞免疫荧光结果显示跳动的细胞心肌特异性标志物a-Actinin、cTNNT2表达阳性,并可见到明显的肌节及润盘结构；APJ 在 d2、d3、d7阶段分别与阶段特异性标志物Brachyury T、mesp1、Nkx2．5共表达。3个阶段中APJ mRNA呈持续性表达,在中胚层起始时表达高,中胚层后表达逐渐降低。结论 APJ与代表hESCs心肌分化过程中的阶段特异性标志物Brachyury T、mesp1、Nkx2.5共表达,证实APJ在人心肌细胞发育的整个过程中持续性表达。
作者：童珊珊；陈宇；张宁坤；高连如；程涛；王泽；雷洪涛；李春花 刊期： 2016年第12期
目的：探讨心肌内注射脐带间充质干细胞对心肌梗死的影响及作用机制。方法采用开胸结扎冠状动脉前降支的方法建立心梗模型，将实验大鼠随机分为移植组和对照组，移植组每只大鼠局部注射约5×106个细胞悬液，对照组注射等量磷酸缓冲液。采用心脏彩色多普勒超声进行心功能测定。采用免疫荧光鉴定细胞存活、细胞因子分泌以及微血管密度的变化。结果移植后4周，移植组大鼠的心脏功能较对照组明显改善。组织学检查显示移植的脐带间充质干细胞在梗死心肌内存活并迁移，免疫荧光染色显示移植的脐带间充质干细胞能够分泌血管内皮生长因子，而且移植组的微血管密度较对照组明显增加。结论脐带间充质干细胞移植后能够通过分泌细胞因子促进血管新生，改善心脏功能。
作者：武开宏；徐飞；孙剑；莫绪明 刊期： 2016年第12期
目的：探讨肠道病毒71型( EV71)、柯萨奇病毒A16型(CA16)、其他肠道病毒引起的手足口病(HFMD)患儿细胞免疫功能的不同。方法收集HFMD患儿咽拭子或肛拭子标本,进行EV71、CA16、EV核酸检测,根据荧光 RT-PCR法检测结果,分为EV71阳性组、CA16阳性组、通用EV阳性组。应用流式细胞仪检测患儿外周血淋巴细胞亚群CD3+T、CD4+T、CD8+T、NK、B细胞百分率。结果 EV71阳性组患儿CD3+T、CD4+T细胞百分率明显低于CA16阳性组和EV阳性组患儿( P<0．05), CA16阳性组和EV阳性组患儿CD3+T、CD4+T 细胞百分率差异无统计学意义；3组患儿CD4+T/CD8+T、CD8+ T 细胞百分率差异无统计学意义；EV71阳性组患儿NK细胞、B细胞百分率明显高于CA16阳性组和EV阳性组患儿(P<0．05),CA16阳性组和EV阳性组患儿NK细胞、B细胞百分率差异无统计学意义。结论EV71较CA16以及其他肠道病毒引起的HFMD患儿机体细胞免疫功能紊乱加重。
作者：王宇婧；程邦宁 刊期： 2016年第12期
目的：构建胞内氯离子通道蛋白1(CLIC1)点突变体的真核表达质粒，进行CLIC1突变体的表达、定位及其与迟发性脊椎骨骺发育不良病蛋白( Sedlin)的共定位研究，为进一步揭示其功能奠定基础。方法以CLIC1全长cDNA序列为模板，构建3个真核表达质粒即 pcDNA3．1-CLIC1(C24A)-FLAG、pcDNA3．1-CLIC1(C59A)-FLAG、pcDNA3．1-CLIC1( C24A-C59A)-FLAG；Western blot法检测CLIC1及其点突变体在 HEK 293T 细胞中的表达；免疫荧光技术了解CLIC1及其点突变体蛋白在COS7细胞中的定位及与Sedlin的共定位情况。结果成功构建了CLIC1点突变体的真核表达质粒；Western blot 结果显示3个点突变体蛋白在HEK293T细胞中均能表达，突变体的分子量低于野生型的；免疫荧光实验表明CLIC1蛋白在细胞质和细胞核都有表达，但主要在细胞核。 CLIC1点突变体蛋白定位在胞质中，细胞核中无分布，与 Sedlin 蛋白在胞质存在共定位。结论CLIC1的3种点突变体均能在哺乳动物细胞中有效表达；CLIC1及其点突变体与Sedlin蛋白均存在共定位，提示两种蛋白之间可能存在相互作用。
作者：沙启飞；潘林鑫；耿慧武；王梦媛；印叶盛；李子剑；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2016年第12期
目的：评估组织结构声学定量技术( ASQ)对于肝纤维化病理分期的诊断效能,对比分析ASQ与瞬时弹性成像( Fibroscan)诊断肝纤维化病理分期的价值。方法收集慢乙肝患者111例,同时行ASQ、Fibroscan及肝脏病理穿刺活组织检查。对比ASQ定量参数红蓝曲线下面积比( FD Rati-o)、Fibroscan 肝弹性模量与肝纤维化病理分期的相关系数,绘制并分析肝纤维化病理分期的ROC曲线。结果 FD Ra-tio与肝纤维化病理分期的相关性(rs =0．659)低于Fibroscan弹性模量( rs =0．777),差异有统计学意义。 ASQ 与Fibroscan诊断肝纤维化病理分期S≥2、S=4的ROC曲线下面积分别为0．705(95%CI：0．611~0．788)与0．817(95%CI：0．733~0．884)、0．709(95%CI：0．615~0．791)与0．920(95%CI：0．853~0．963),差异无统计学意义。组织结构声学定量技术诊断肝纤维化(S≥2)、肝硬化(S=4)的佳截断值分别为0．21(敏感度76%,特异度74%)、0．38(敏感度77%,特异度88%)。结论 ASQ作为一种新兴的超声新技术,对肝纤维化病理分期有一定的诊断价值,FD Ratio可作为无创性ASQ的有效参数,对慢性乙型肝炎患者的病情进行随访及评估。 ASQ对肝纤维化病理分期的评估效能与Fi-broscan相当,而ASQ能够与常规超声系统相结合,具有较好的临床应用前景。
作者：姚莉；郑慧；万颖；陈娜；周旺 刊期： 2016年第12期
应用多聚酶链反应( PCR)和荧光原位杂交( FISH)方法对3例X-连锁隐性鱼鳞病( XLRI)患者进行分子诊断。对2个X-连锁隐性鱼鳞病家系3例患者及家族成员采集外周血标本后,先采用PCR扩增STS基因的两末端序列及侧翼的微卫星标记；再应用cDNA STS基因特异性探针对间期白细胞核进行 FISH 检测。选取 X 染色体上自 DXS1139至DXF22S1区域内7个微卫星标记进行PCR扩增以确定DNA缺失大小。 PCR检测STS基因两端序列结果没有扩增产物。FISH方法也证实了患者STS基因DNA序列存在缺失。应用多态性微卫星序列进行PCR扩增,结果表明患者存在X染色体上STS基因及其侧翼序列,自DXS1139至 DXF22S1区域内,DNA缺失达1．97 Mb。 PCR和FISH方法证实XLRI患者STS基因及其两侧翼序列DNA缺失,具有重要的遗传咨询意义。
作者：张学奇；刘晶晶；林孝华；邵笑红；蔡剑峰；徐云升；李智铭 刊期： 2016年第12期
健康成年雌性新西兰大白兔24只，随机选择一侧膝关节以异体半腱肌腱和自体半腱肌腱混编后重建前交叉韧带作为实验组，另一侧膝关节以异体半腱肌腱折叠双股重建前交叉韧带作为对照组。术后3、6、10周观察两组兔重建的前交叉韧带组织学改变(n=3)，并行生物力学检测(n=5)。结果显示，与兔同种异体肌腱重建前交叉韧带比较，自体同种异体肌腱联合应用可加快移植物成熟速度，增加移植物强度，缩短腱骨成骨时间，提高愈合强度。
作者：吴星；赵其纯；尚希福；邓小文；李久源；李丹 刊期： 2016年第12期
作者： 刊期： 2016年第12期
目的：观察淫羊藿次苷Ⅱ( ICA Ⅱ)对大鼠成骨细胞( OBs )护骨素( OPG )和 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平的影响,探讨ICA Ⅱ治疗骨质疏松症的相关机制。方法原代培养OBs,分为对照组、ICA II组、混合组(ICA Ⅱ+p38MAPK特异性抑制剂SB203580)、抑制剂组( SB203580)组。 PNPP 法检测各组 OBs 碱性磷酸酶(ALP)活性,Western blot 法检测 p38MAPK 蛋白、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、OPG蛋白水平,RT-PCR法检测各组OPG mRNA水平。结果与对照组比较, ICA Ⅱ组 ALP活性显著上调(P<0．01),混合组ALP活性较ICAⅡ组下降(P<0．05)；ICA Ⅱ组 p-p38MAPK水平较对照组显著升高(P<0．01),混合组p-p38MAPK水平较ICA Ⅱ组明显降低(P<0．01)；各组间总p38MAPK表达量无明显差异；ICA Ⅱ组OPG分泌水平较对照组明显上调( P <0．01),混合组OPG蛋白分泌与ICA Ⅱ组相比明显受抑制( P<0．01)；ICAⅡ组OPG mRNA水平较对照组明显升高(P<0．01),混合组OPG mRNA水平较 ICA Ⅱ组下降( P<0．05)。结论 ICAⅡ可促进成骨细胞分化和上调成骨细胞 OPG 表达, p38MAPK信号通路可能参与这一过程。
作者：龚一昕；刘尚全；袁媛；张维娜 刊期： 2016年第12期
目的：研究白细胞介素17A( IL-17A)对小鼠肝部分切除后肝脏再生的调控作用。方法对小鼠进行肝切除手术，在手术后的不同时间点取肝脏组织匀浆检测肝脏中IL-17A的表达水平。给予小鼠anti-IL-17A中和抗体后进行肝切除手术，检测手术后小鼠肝脏重量和肝重体重比，分离血清检测并比较在有无anti-IL-17A中和抗体的条件下白细胞介素6(IL-6)的水平，分离肝实质细胞检测并比较在有无an-ti-IL-17A中和抗体的条件下肝实质细胞中信号传导与转录激活因子3(STAT3)的磷酸化水平和细胞周期蛋白D1(cy-clinD1)的表达水平。结果小鼠肝切除后肝脏中的IL-17A水平显著升高(P<0．01)，给予anti-IL-17A中和抗体可以显著抑制肝脏再生、减少IL-6水平和阻止肝细胞增殖信号活化。结论肝切除后肝脏中升高的IL-17A促进IL-6表达和肝脏再生，该研究对肝切除后肝脏再生的治疗具有重要意义。
作者：梁希；张秀红；李静 刊期： 2016年第12期
目的：探讨胎儿皮肤与成人皮肤的形态结构及表皮干细胞分子标志物的差异,为后续皮肤功能的研究及皮肤移植提供理论依据。方法取胎儿背部与成人腿部皮肤,标本取材后立即用10%中性甲醛固定,石蜡包埋。所有标本经石蜡切片,HE染色,观察皮肤表皮、真皮和皮肤附属器的形态结构；应用免疫组织化学法检测皮肤组织中表皮干细胞标志物p63、β1整合素和角蛋白19(K19)的表达。结果胎儿皮肤与成人皮肤表皮、真皮和皮肤附属器结构不同,胎儿表皮由2~3层上皮细胞组成,基底层细胞呈立方形,核圆,染色深,未发现颗粒层细胞,真皮乳头状突起不明显；成人全层皮肤明显厚于胎儿皮肤,尤其是成人皮肤的真皮层明显较胎儿真皮发达,成人皮肤真皮乳头状突起明显,成人表皮由6~7层上皮细胞组成,基底层细胞呈立方形或柱形,细胞核染色较深,呈卵圆形,居中,有明显的颗粒层,但细胞轮廓不清晰,胞质内可见蓝色颗粒。经测定胎儿皮肤表达的p63、β1整合素及K19的平均光密度值高于成人( P<0．01)。结论胎儿皮肤和成人皮肤表皮、真皮和皮肤附属器形态结构存在差异,表皮干细胞分子标志物表达也存在差异。
作者：吴永胜；陈晓蓉 刊期： 2016年第12期
目的：研究CHIR99021在小鼠胚胎干细胞( mESCs)分化为心肌细胞的作用。方法运用经典的悬滴培养法促进 mESCs 形成拟胚体( EBs)。在不同分化时间段加入糖原合成激酶-3β(GSK-3β)抑制剂CHIR99021,诱导mESCs向心肌细胞分化,相差显微镜在不同时间点观察不同组EBs搏动百分率。 RT-PCR法检测心肌特异性转录因子Nkx2．5、α-肌球蛋白重链(α-MHC)基因表达水平的变化。 Western blot法和免疫荧光染色法检测心肌特异性蛋白cTnT的表达。实验时将不加入CHIR99021命名为对照组,分化第2~5天和第6~10天加入CHIR99021分别命名为2~5 d组和6~10 d组。结果通过悬滴培养法能够形成 EBs,且形成的EBs能够出现自发性搏动并有cTnT表达。在诱导分化的过程中,第2~5天加入CHIR99021的2~5 d组的搏动 EBs百分率比对照组更高,Nkx2．5、α-MHC基因表达的水平也比对照组高；6~10 d组的结果跟2~5 d组相反。各组中都可通过Western blot和免疫荧光染色法检测到cTnT的表达,但2~5 d组的cTnT的表达量高于对照组,6~10 d组的cTnT的表达量低于对照组。结论 GSK-3β抑制剂 CHIR99021对mESCs心肌细胞分化具有双重作用,即分化前期(2~5 d)促进分化,可获得更高的分化率,分化后期(6~10 d)结果相反。
作者：杨谋广；邹传德；王爱玲 刊期： 2016年第12期
目的：利用脂多糖( LPS)刺激大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞株RLE-6TN建立内毒素性急性肺损伤( ALI)体外细胞模型,观察RLE-6TN是否发生内质网应激( ERS)及相关凋亡,为进一步研究内毒素性ALI提供依据,同时为临床ALI新药研发提供新的思路。方法以LPS刺激大鼠肺泡上皮细胞株 RLE-6TN, Western blot 法检测 ERS 相关蛋白 GRP78、CHOP、c-Caspase-12以及 c-Caspase-3的表达, DAPI 染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 LPS刺激大鼠肺泡上皮细胞株RLE-6TN 24 h,GRP78蛋白表达增多,并且ERS特异性凋亡蛋白CHOP及c-Caspase-12的表达均增多,DAPI染色及流式细胞术结果均表明RLE-6TN凋亡增强。结论LPS可诱导大鼠肺泡上皮细胞RLE-6TN发生ERS,并发ERS相关凋亡,这可能是LPS致ALI的重要病理生理机制。
作者：孟凡亮；汪应红；左龙泉；赵大海；黄艳 刊期： 2016年第12期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
