孙静敏;邓芳;朱玉林;金丹群
目的:评估组织结构声学定量技术( ASQ)对于肝纤维化病理分期的诊断效能,对比分析ASQ与瞬时弹性成像( Fibroscan)诊断肝纤维化病理分期的价值。方法收集慢乙肝患者111例,同时行ASQ、Fibroscan及肝脏病理穿刺活组织检查。对比ASQ定量参数红蓝曲线下面积比( FD Rati-o)、Fibroscan 肝弹性模量与肝纤维化病理分期的相关系数,绘制并分析肝纤维化病理分期的ROC曲线。结果 FD Ra-tio与肝纤维化病理分期的相关性(rs =0.659)低于Fibroscan弹性模量( rs =0.777),差异有统计学意义。 ASQ 与Fibroscan诊断肝纤维化病理分期S≥2、S=4的ROC曲线下面积分别为0.705(95%CI:0.611~0.788)与0.817(95%CI:0.733~0.884)、0.709(95%CI:0.615~0.791)与0.920(95%CI:0.853~0.963),差异无统计学意义。组织结构声学定量技术诊断肝纤维化(S≥2)、肝硬化(S=4)的佳截断值分别为0.21(敏感度76%,特异度74%)、0.38(敏感度77%,特异度88%)。结论 ASQ作为一种新兴的超声新技术,对肝纤维化病理分期有一定的诊断价值,FD Ratio可作为无创性ASQ的有效参数,对慢性乙型肝炎患者的病情进行随访及评估。 ASQ对肝纤维化病理分期的评估效能与Fi-broscan相当,而ASQ能够与常规超声系统相结合,具有较好的临床应用前景。
作者:姚莉;郑慧;万颖;陈娜;周旺 刊期: 2016年第12期
目的:探索影响强直性脊柱炎( AS)患者疾病活动度的相关影响因素及其临床意义。方法共收集风湿免疫门诊新确诊的AS患者723例。相关影响因素的收集采用自编式AS流行病学调查表,疾病活动度的评估采用巴斯强直性脊柱炎疾病活动度指数。运用有序多分类Logistic回归模型识别AS患者疾病活动度的相关影响因素。结果单因素分析结果显示,AS患者疾病活动度的高低与年龄、低等教育水平、较差的睡眠质量、ESR、BASFI及症状持续时间有关( P<0.05)。多因素分析表明,较差及一般的睡眠质量和较差的功能结局是影响AS患者疾病活动度高低的主要因素( P<0.05)。结论睡眠障碍及功能受限是影响AS患者疾病活动度的主要因素。临床医师应注重改善AS确诊患者的功能状态及睡眠质量,控制炎症进展,提高患者预后。
作者:夏青;李晓娜;杨晓;王丽;辛利红;蔡国旗;张旭;王蒙蒙;徐胜前;徐建华;帅宗文;潘发明 刊期: 2016年第12期
目的:研究甲状腺功能减退症(甲减)大鼠前额叶突触结合蛋白-1(syt-1)的表达及甲状腺素(T4)和多奈哌齐( DON)治疗效果。方法通过饮用0.05%丙基硫氧嘧啶( PTU)水建立甲减大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照( CON)组、甲减( Hypo)组、DON治疗组、T4治疗组、联合治疗( T4+DON)组。放射免疫法测定血清甲状腺激素水平, Western blot 和超敏免疫组化法分别分析各组大鼠前额叶syt-1表达及免疫反应产物分布情况。结果 Hypo组、DON组大鼠血清甲状腺激素较CON组明显降低( P<0.05), T4组、T4+DON组血清甲状腺激素恢复至正常水平;Western blot结果显示Hypo组、DON组及T4组大鼠前额叶syt-1表达均高于CON组(P<0.05),T4+DON组syt-1表达恢复正常;超敏免疫组化结果经光镜可见syt-1免疫反应产物呈棕黄色颗粒,广泛分布在大鼠前额叶分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层,Hypo组、DON及 T4组在各层分布均高于CON组(P<0.05),T4+DON组在各层分布均恢复至正常。结论 Hypo组大鼠较CON组大鼠前额叶syt-1表达升高,T4替代治疗未能使损伤蛋白完全恢复, T4+DON治疗后蛋白恢复至正常水平,提示联合治疗更有利于甲减脑区损伤蛋白的恢复。
作者:吴章碧;吴波;查小雪;朱敏;王取南;朱德发 刊期: 2016年第12期
回顾性分析12例冠心病支架介入( PCI)失败后行急诊不停跳冠脉搭桥术( OPCABG)患者的临床资料并随访。无院内死亡,术后平均住院(14±5) d。随访(25±9)个月,11例无心绞痛或心肌梗死发作;1例术后16个月心绞痛发作,经药物治疗后缓解。急诊OPCABG是PCI出现并发症时挽救患者生命的有效手段,患者预后良好。
作者:孙阿雨;赵智伟;葛建军 刊期: 2016年第12期
目的:探讨人重组促红细胞生成素( rh-EPO)在大鼠脊髓损伤( SCI)后运动功能恢复中的作用。方法选取30只200~230 g成年雄性SD大鼠,随机分为假手术( Sham )组、脊髓损伤( SCI)组和EPO组,每组10只。 Sham组仅行椎板切除术,不伤及脊髓。 SCI组和EPO组行椎板切除及脊髓打击术。术后EPO组腹腔注射rh-EPO,SCI组和Sham组采用相同剂量的生理盐水。应用BBB评分评估大鼠术后第1、3、7、14天的后肢运动功能恢复情况。 HE染色观察术后第14天脊髓形态学变化;免疫荧光测定新生神经元的增殖情况。结果术后第1、3天SCI组和EPO组之间BBB评分差异无统计学意义;术后第7、14天EPO组BBB评分明显高于SCI组(P<0.05,P<0.01)。 SCI组可见大量胶质瘢痕、空洞形成和炎性细胞浸润;EPO组上述改变较SCI组减轻。Sham组、SCI组和EPO组新增殖神经元数目逐渐增多,各组间比较差异有统计学意义( P <0.01)。结论大剂量 rh-EPO的治疗可减轻脊髓内炎症反应、刺激脊髓新生神经元的增殖和促进大鼠SCI后后肢运动功能的恢复。
作者:王康康;张辉;方晓;王少滨;李小波;刘杰;尹宗生 刊期: 2016年第12期
目的:评价不同冲洗剂对桩道壁玷污层的清除能力。方法经筛选,选择符合条件的单根管前磨牙20颗,于釉牙骨质界上方2 mm水平去除冠方牙体组织。根管预备,根管充填。3M钻逐级进行桩道预备3号。随机均分为4组,即生理盐水组、双氧水组、次氯酸钠组+MTAN组、MTAN组,分别用以下溶液冲洗:5 ml生理盐水、5 ml 3% H2 O2、2.5 ml 3%次氯酸钠+2.5 ml MTAN、5 ml MTAN。每样本冲洗结束后,均用5 ml生理盐水溶液终末冲洗。于颊舌侧沿牙体长轴纵向劈开。每试样展示较好的一半在场发射扫描电镜下观察。根据Peters′标准计分,对数据行统计学处理。结果生理盐水冲洗桩道后,玷污层覆盖整个牙本质壁。双氧水冲洗桩道后,大量的玷污层残留,绝大多数牙本质小管被阻塞。次氯酸钠+MTAN和MTAN均可以去除大部分的玷污层,大量的牙本质小管口开放。4组样本的统计结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MTAN及次氯酸钠+MTAN均可有效去除桩道预备后产生的玷污层。
作者:童雪梅;张秋霞;储曼茹;周琳 刊期: 2016年第12期
目的:探讨Wnt信号通路中关键蛋白Wnt3a和TCF4在卵巢癌中的表达水平以及临床意义。方法 ELISA法检测10例卵巢癌患者手术前后和10例健康对照者血浆Wnt3a浓度,Western blot、qRT-PCR法检测卵巢癌患者与卵巢良性病变者的卵巢组织Wnt3a、TCF4水平。采用Western blot法检测卵巢癌细胞株 SKOV3与 HO8910中 TCF4的表达,采用dnTCF4质粒转染技术获得TCF4表达下降的 SK-OV3/dnTCF4细胞,使用细胞划痕实验比较卵巢癌细胞转移能力。结果卵巢癌患者血浆Wnt3a水平高于健康对照者(P<0.05),且术后血浆Wnt3a水平低于术前(P<0.05);卵巢癌组织中 Wnt3a、TCF4水平高于卵巢良性病变者( P <0.05);SKOV3的TCF4表达量高于HO8910且转移潜能也明显高于后者( P<0.05);将SKOV3的TCF4敲低,其转移能力明显减弱( P<0.05)。结论 Wnt信号通路参与卵巢癌的发生发展,Wnt3a和TCF4有可能成为监测卵巢癌进展的临床指标之一。
作者:戴朦;沈国栋;程民;徐婷娟;翁海燕;胡世莲;沈干 刊期: 2016年第12期
目的:探讨心肌内注射脐带间充质干细胞对心肌梗死的影响及作用机制。方法采用开胸结扎冠状动脉前降支的方法建立心梗模型,将实验大鼠随机分为移植组和对照组,移植组每只大鼠局部注射约5×106个细胞悬液,对照组注射等量磷酸缓冲液。采用心脏彩色多普勒超声进行心功能测定。采用免疫荧光鉴定细胞存活、细胞因子分泌以及微血管密度的变化。结果移植后4周,移植组大鼠的心脏功能较对照组明显改善。组织学检查显示移植的脐带间充质干细胞在梗死心肌内存活并迁移,免疫荧光染色显示移植的脐带间充质干细胞能够分泌血管内皮生长因子,而且移植组的微血管密度较对照组明显增加。结论脐带间充质干细胞移植后能够通过分泌细胞因子促进血管新生,改善心脏功能。
作者:武开宏;徐飞;孙剑;莫绪明 刊期: 2016年第12期
目的:观察分析年轻成人使用种植钉辅助螺旋扩弓器上颌快速扩弓后的效果。方法选取32例扩弓的年轻成人患者,随机分为实验组(16例),行种植钉辅助螺旋扩弓器扩弓;对照组(16例),行传统螺旋扩弓器扩弓。两组患者分别测量扩弓前后上颌左右第一前磨牙、第一磨牙之间水平横向宽度,以及腭弓连线与腭中缝的交汇点以下5 mm水平横向宽度,双侧上颌第一磨牙牙体长轴间夹角。实验组患者扩弓前和扩弓后不同时期(0、3、6、12个月)上颌左右第一磨牙连线与腭中缝的交汇点以下5 mm水平横向宽度。分析扩弓前后宽度变化,牙齿牙槽突的倾斜移位情况和实验组腭中缝扩大后的稳定性。结果两组扩弓方式均能有效使上颌横向扩大,实验组以腭中缝的扩大为主,对照组以牙齿牙槽突的颊向倾斜移位为主。实验组扩弓1年内腭中缝的扩大有复发。结论年轻成人使用种植钉辅助螺旋扩弓器快速扩弓能够有效地使上颌横向宽度扩大,以腭中缝扩大为主。在1年内腭中缝的扩大有复发。
作者:乔义强;刘锋鸽;杨学广;贾晓瑞;范海丽;刘进忠 刊期: 2016年第12期
目的:探讨怀旧疗法对老年脑外伤患者康复期抑郁情绪的疗效。方法方便选取存在抑郁情绪的60例老年脑外伤患者,随机分为对照组、干预组,每组各30例。两组均接受常规的康复训练,干预组在干预早期介入怀旧治疗;分别在6周的干预前后实施汉密尔顿抑郁量表( HAMD)测评与分析。结果组间比较,两组在干预前HAMD得分的差异无统计学意义(t=0.133,P=0.895),6周后干预组患者HAMD得分显著低于对照组(t=3.517,P=0.001);组内配对比较,6周后两组患者的HAMD得分均明显降低,干预组(t=5.966,P<0.001)、对照组(t=2.389,P=0.021);干预组抑郁检出率为33.33%(9/27),对照组为64.29%(18/28),差异有统计学意义(χ2=4.134,P=0.042)。结论常规康复治疗联合怀旧疗法能更有效地改善老年康复期脑外伤患者的抑郁状况。
作者:董香丽;孙伟铭;袁也丰 刊期: 2016年第12期
目的:利用脂多糖( LPS)刺激大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞株RLE-6TN建立内毒素性急性肺损伤( ALI)体外细胞模型,观察RLE-6TN是否发生内质网应激( ERS)及相关凋亡,为进一步研究内毒素性ALI提供依据,同时为临床ALI新药研发提供新的思路。方法以LPS刺激大鼠肺泡上皮细胞株 RLE-6TN, Western blot 法检测 ERS 相关蛋白 GRP78、CHOP、c-Caspase-12以及 c-Caspase-3的表达, DAPI 染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 LPS刺激大鼠肺泡上皮细胞株RLE-6TN 24 h,GRP78蛋白表达增多,并且ERS特异性凋亡蛋白CHOP及c-Caspase-12的表达均增多,DAPI染色及流式细胞术结果均表明RLE-6TN凋亡增强。结论LPS可诱导大鼠肺泡上皮细胞RLE-6TN发生ERS,并发ERS相关凋亡,这可能是LPS致ALI的重要病理生理机制。
作者:孟凡亮;汪应红;左龙泉;赵大海;黄艳 刊期: 2016年第12期
目的:利用全基因组表达谱芯片对早期分泌靶向抗原6(ESAT-6)刺激结核患者外周血CD4+ T淋巴细胞前后释放γ-干扰素( IFN-γ) mRNA进行检测,并对mRNA在刺激过程中可能涉及到的信号通路变化进行分析。方法抽取3例初诊结核患者外周静脉血各10 ml,密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞( PBMC), ESAT-6刺激PBMC,6 h后磁珠法分选CD4+ T淋巴细胞,提取细胞总RNA,全基因组表达谱芯片检测刺激前后差异表达基因。利用GO分析对差异表达的基因进行功能分类, KEGG 进行信号通路分析。结果 ESAT-6刺激后差异表达的mRNA共有2297条,相对高表达的 mRNA 有1071条,相对低表达的 mRNA 有1226条(>2倍变化且P<0.05)。信号通路分析显示差异表达的mRNA参与了17条信号通路的调控,其中JAK-STAT信号通路、Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路等5条信号通路与结核释放IFN-γ关系密切。结论 ESAT-6刺激后的CD4+ T淋巴细胞有大量mRNA发生差异表达,其在多个与结核释放IFN-γ密切相关的信号通路中发挥着重要的调控作用。
作者:张焰;王晓玮;程筱雯;徐元宏 刊期: 2016年第12期
目的:构建胞内氯离子通道蛋白1(CLIC1)点突变体的真核表达质粒,进行CLIC1突变体的表达、定位及其与迟发性脊椎骨骺发育不良病蛋白( Sedlin)的共定位研究,为进一步揭示其功能奠定基础。方法以CLIC1全长cDNA序列为模板,构建3个真核表达质粒即 pcDNA3.1-CLIC1(C24A)-FLAG、pcDNA3.1-CLIC1(C59A)-FLAG、pcDNA3.1-CLIC1( C24A-C59A)-FLAG;Western blot法检测CLIC1及其点突变体在 HEK 293T 细胞中的表达;免疫荧光技术了解CLIC1及其点突变体蛋白在COS7细胞中的定位及与Sedlin的共定位情况。结果成功构建了CLIC1点突变体的真核表达质粒;Western blot 结果显示3个点突变体蛋白在HEK293T细胞中均能表达,突变体的分子量低于野生型的;免疫荧光实验表明CLIC1蛋白在细胞质和细胞核都有表达,但主要在细胞核。 CLIC1点突变体蛋白定位在胞质中,细胞核中无分布,与 Sedlin 蛋白在胞质存在共定位。结论CLIC1的3种点突变体均能在哺乳动物细胞中有效表达;CLIC1及其点突变体与Sedlin蛋白均存在共定位,提示两种蛋白之间可能存在相互作用。
作者:沙启飞;潘林鑫;耿慧武;王梦媛;印叶盛;李子剑;刘晓颖;范礼斌 刊期: 2016年第12期
目的:在人胚胎干细胞( hESCs)定向心肌分化过程中,以中胚层阶段(d2)、心肌细胞起始分化阶段(d3)、心肌细胞后分化阶段( d7)为时间节点,探索 APJ 的表达特征。方法 hESCs经单层培养后,应用化学成分明确的诱导分化培养基定向诱导hESCs向心肌细胞分化,再于d2、d3、d7阶段分别进行细胞免疫荧光检测,共聚焦显微镜观察Brachyu-ry T、mesp1、Nkx2.5与APJ的蛋白表达情况,实时荧光定量PCR法检测4种标志物mRNA的表达水平。结果诱导d7开始出现跳动的细胞,跳动细胞数量d7~d16逐渐增加,d16达高峰。细胞免疫荧光结果显示跳动的细胞心肌特异性标志物a-Actinin、cTNNT2表达阳性,并可见到明显的肌节及润盘结构;APJ 在 d2、d3、d7阶段分别与阶段特异性标志物Brachyury T、mesp1、Nkx2.5共表达。3个阶段中APJ mRNA呈持续性表达,在中胚层起始时表达高,中胚层后表达逐渐降低。结论 APJ与代表hESCs心肌分化过程中的阶段特异性标志物Brachyury T、mesp1、Nkx2.5共表达,证实APJ在人心肌细胞发育的整个过程中持续性表达。
作者:童珊珊;陈宇;张宁坤;高连如;程涛;王泽;雷洪涛;李春花 刊期: 2016年第12期
目的:探讨重组人促红细胞生成素( rhEPO)对支气管肺发育不良( BPD )模型肺组织中酪氨酸激酶-2( JAK2)、信号转导和转录活化因子-5( STAT5)蛋白和mRNA表达的影响。方法将48只孕15 d的健康SD大鼠分别孕囊内注射脂多糖( LPS)或生理盐水,待其自然分娩后将新生大鼠随机分为对照组、高氧组、rhEPO组。采用Western blot和RT-PCR法检测肺组织中 JAK2、STAT5蛋白和 mRNA 的表达。结果高氧组JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达减少,rhEPO组JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达增加,高氧暴露第1、7、14天末,各组间JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达的差异有统计学意义( P<0.05)。结论高氧组肺组织凋亡显著增加, rhEPO组肺组织凋亡减少,rhEPO对BPD模型肺组织的保护机制可能与活化JAK2/STAT5通路,减轻肺组织凋亡相关。
作者:晏兰;张华 刊期: 2016年第12期
作者: 刊期: 2016年第12期
目的:研究β-榄香烯对胃癌细胞SGC7901的增殖、凋亡、迁移及赖氨酰氧化酶( LOX)的影响。方法体外培养人胃癌SGC7901细胞, MTS法及流式细胞术检测不同浓度β-榄香烯对SGC7901细胞增殖与凋亡的影响,划痕实验、Tr-answell小室迁移实验检测β-榄香烯对细胞迁移的影响,酶标仪法检测β-榄香烯对LOX酶活性的影响,Western blot法检测 LOX 蛋白表达的变化。结果β-榄香烯(50~800μmol/L)对SGC7901细胞的抑制作用呈时间依赖和浓度依赖性。β-榄香烯(100、200、400、800μmol/L)处理 SGC7901细胞24 h后,凋亡率分别为8.1%、8.2%、18.7%、41.9%,与对照组(4.9%)比较,凋亡率明显升高( P<0.05)。划痕实验、Transwell 实验结果显示β-榄香烯对 SGC7901细胞的迁移有明显抑制作用( P<0.05)。β-榄香烯浓度依赖性地降低SGC7901细胞LOX酶活性(P<0.05)。 Western blot结果显示β-榄香烯可下调SGC7901细胞LOX的蛋白表达。结论β-榄香烯对胃癌细胞 SGC7901有明显抑制增殖、迁移及促进凋亡作用,抑制LOX酶活性和蛋白表达可能是其发挥作用的机制之一。
作者:赵晓晓;张蕾;史天陆;邓明影;汪国玉;姜玲;魏伟 刊期: 2016年第12期
目的:探讨肠道病毒71型( EV71)、柯萨奇病毒A16型(CA16)、其他肠道病毒引起的手足口病(HFMD)患儿细胞免疫功能的不同。方法收集HFMD患儿咽拭子或肛拭子标本,进行EV71、CA16、EV核酸检测,根据荧光 RT-PCR法检测结果,分为EV71阳性组、CA16阳性组、通用EV阳性组。应用流式细胞仪检测患儿外周血淋巴细胞亚群CD3+T、CD4+T、CD8+T、NK、B细胞百分率。结果 EV71阳性组患儿CD3+T、CD4+T细胞百分率明显低于CA16阳性组和EV阳性组患儿( P<0.05), CA16阳性组和EV阳性组患儿CD3+T、CD4+T 细胞百分率差异无统计学意义;3组患儿CD4+T/CD8+T、CD8+ T 细胞百分率差异无统计学意义;EV71阳性组患儿NK细胞、B细胞百分率明显高于CA16阳性组和EV阳性组患儿(P<0.05),CA16阳性组和EV阳性组患儿NK细胞、B细胞百分率差异无统计学意义。结论EV71较CA16以及其他肠道病毒引起的HFMD患儿机体细胞免疫功能紊乱加重。
作者:王宇婧;程邦宁 刊期: 2016年第12期
目的:研究CHIR99021在小鼠胚胎干细胞( mESCs)分化为心肌细胞的作用。方法运用经典的悬滴培养法促进 mESCs 形成拟胚体( EBs)。在不同分化时间段加入糖原合成激酶-3β(GSK-3β)抑制剂CHIR99021,诱导mESCs向心肌细胞分化,相差显微镜在不同时间点观察不同组EBs搏动百分率。 RT-PCR法检测心肌特异性转录因子Nkx2.5、α-肌球蛋白重链(α-MHC)基因表达水平的变化。 Western blot法和免疫荧光染色法检测心肌特异性蛋白cTnT的表达。实验时将不加入CHIR99021命名为对照组,分化第2~5天和第6~10天加入CHIR99021分别命名为2~5 d组和6~10 d组。结果通过悬滴培养法能够形成 EBs,且形成的EBs能够出现自发性搏动并有cTnT表达。在诱导分化的过程中,第2~5天加入CHIR99021的2~5 d组的搏动 EBs百分率比对照组更高,Nkx2.5、α-MHC基因表达的水平也比对照组高;6~10 d组的结果跟2~5 d组相反。各组中都可通过Western blot和免疫荧光染色法检测到cTnT的表达,但2~5 d组的cTnT的表达量高于对照组,6~10 d组的cTnT的表达量低于对照组。结论 GSK-3β抑制剂 CHIR99021对mESCs心肌细胞分化具有双重作用,即分化前期(2~5 d)促进分化,可获得更高的分化率,分化后期(6~10 d)结果相反。
作者:杨谋广;邹传德;王爱玲 刊期: 2016年第12期
目的:研究白细胞介素17A( IL-17A)对小鼠肝部分切除后肝脏再生的调控作用。方法对小鼠进行肝切除手术,在手术后的不同时间点取肝脏组织匀浆检测肝脏中IL-17A的表达水平。给予小鼠anti-IL-17A中和抗体后进行肝切除手术,检测手术后小鼠肝脏重量和肝重体重比,分离血清检测并比较在有无anti-IL-17A中和抗体的条件下白细胞介素6(IL-6)的水平,分离肝实质细胞检测并比较在有无an-ti-IL-17A中和抗体的条件下肝实质细胞中信号传导与转录激活因子3(STAT3)的磷酸化水平和细胞周期蛋白D1(cy-clinD1)的表达水平。结果小鼠肝切除后肝脏中的IL-17A水平显著升高(P<0.01),给予anti-IL-17A中和抗体可以显著抑制肝脏再生、减少IL-6水平和阻止肝细胞增殖信号活化。结论肝切除后肝脏中升高的IL-17A促进IL-6表达和肝脏再生,该研究对肝切除后肝脏再生的治疗具有重要意义。
作者:梁希;张秀红;李静 刊期: 2016年第12期