童珊珊；陈宇；张宁坤；高连如；程涛；王泽；雷洪涛；李春花
应用多聚酶链反应( PCR)和荧光原位杂交( FISH)方法对3例X-连锁隐性鱼鳞病( XLRI)患者进行分子诊断。对2个X-连锁隐性鱼鳞病家系3例患者及家族成员采集外周血标本后,先采用PCR扩增STS基因的两末端序列及侧翼的微卫星标记；再应用cDNA STS基因特异性探针对间期白细胞核进行 FISH 检测。选取 X 染色体上自 DXS1139至DXF22S1区域内7个微卫星标记进行PCR扩增以确定DNA缺失大小。 PCR检测STS基因两端序列结果没有扩增产物。FISH方法也证实了患者STS基因DNA序列存在缺失。应用多态性微卫星序列进行PCR扩增,结果表明患者存在X染色体上STS基因及其侧翼序列,自DXS1139至 DXF22S1区域内,DNA缺失达1．97 Mb。 PCR和FISH方法证实XLRI患者STS基因及其两侧翼序列DNA缺失,具有重要的遗传咨询意义。
作者：张学奇；刘晶晶；林孝华；邵笑红；蔡剑峰；徐云升；李智铭 刊期： 2016年第12期
对肘前外侧入路逆向反拉克氏针固定治疗儿童肱骨小头骨折的疗效进行分析。回顾性分析38例有移位的肱骨小头骨折手术疗效。手术均采取肘前外侧入路逆向反拉克氏针固定,术后随访时间7个月~2年,采用Mayo肘关节功能评分标准对其疗效进行评估并与健侧肘关节功能进行对比。 Mayo肘关节功能评分23例为优,13例为良,2例为中,与健侧肘关节屈伸和旋转活动度进行比较无明显差异,无内固定松动及肱骨小头坏死发生。故肘前外侧入路逆向反拉克氏针固定治疗肱骨小头骨折是一种简便可行、疗效确切的手术方式。
作者：雍明；郑朋飞；楼跃；唐凯；张志群；林刚；孙祥水 刊期： 2016年第12期
目的：构建胞内氯离子通道蛋白1(CLIC1)点突变体的真核表达质粒，进行CLIC1突变体的表达、定位及其与迟发性脊椎骨骺发育不良病蛋白( Sedlin)的共定位研究，为进一步揭示其功能奠定基础。方法以CLIC1全长cDNA序列为模板，构建3个真核表达质粒即 pcDNA3．1-CLIC1(C24A)-FLAG、pcDNA3．1-CLIC1(C59A)-FLAG、pcDNA3．1-CLIC1( C24A-C59A)-FLAG；Western blot法检测CLIC1及其点突变体在 HEK 293T 细胞中的表达；免疫荧光技术了解CLIC1及其点突变体蛋白在COS7细胞中的定位及与Sedlin的共定位情况。结果成功构建了CLIC1点突变体的真核表达质粒；Western blot 结果显示3个点突变体蛋白在HEK293T细胞中均能表达，突变体的分子量低于野生型的；免疫荧光实验表明CLIC1蛋白在细胞质和细胞核都有表达，但主要在细胞核。 CLIC1点突变体蛋白定位在胞质中，细胞核中无分布，与 Sedlin 蛋白在胞质存在共定位。结论CLIC1的3种点突变体均能在哺乳动物细胞中有效表达；CLIC1及其点突变体与Sedlin蛋白均存在共定位，提示两种蛋白之间可能存在相互作用。
作者：沙启飞；潘林鑫；耿慧武；王梦媛；印叶盛；李子剑；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2016年第12期
目的：探讨肠道病毒71型( EV71)、柯萨奇病毒A16型(CA16)、其他肠道病毒引起的手足口病(HFMD)患儿细胞免疫功能的不同。方法收集HFMD患儿咽拭子或肛拭子标本,进行EV71、CA16、EV核酸检测,根据荧光 RT-PCR法检测结果,分为EV71阳性组、CA16阳性组、通用EV阳性组。应用流式细胞仪检测患儿外周血淋巴细胞亚群CD3+T、CD4+T、CD8+T、NK、B细胞百分率。结果 EV71阳性组患儿CD3+T、CD4+T细胞百分率明显低于CA16阳性组和EV阳性组患儿( P<0．05), CA16阳性组和EV阳性组患儿CD3+T、CD4+T 细胞百分率差异无统计学意义；3组患儿CD4+T/CD8+T、CD8+ T 细胞百分率差异无统计学意义；EV71阳性组患儿NK细胞、B细胞百分率明显高于CA16阳性组和EV阳性组患儿(P<0．05),CA16阳性组和EV阳性组患儿NK细胞、B细胞百分率差异无统计学意义。结论EV71较CA16以及其他肠道病毒引起的HFMD患儿机体细胞免疫功能紊乱加重。
作者：王宇婧；程邦宁 刊期： 2016年第12期
目的：观察分析年轻成人使用种植钉辅助螺旋扩弓器上颌快速扩弓后的效果。方法选取32例扩弓的年轻成人患者，随机分为实验组(16例)，行种植钉辅助螺旋扩弓器扩弓；对照组(16例)，行传统螺旋扩弓器扩弓。两组患者分别测量扩弓前后上颌左右第一前磨牙、第一磨牙之间水平横向宽度，以及腭弓连线与腭中缝的交汇点以下5 mm水平横向宽度，双侧上颌第一磨牙牙体长轴间夹角。实验组患者扩弓前和扩弓后不同时期(0、3、6、12个月)上颌左右第一磨牙连线与腭中缝的交汇点以下5 mm水平横向宽度。分析扩弓前后宽度变化，牙齿牙槽突的倾斜移位情况和实验组腭中缝扩大后的稳定性。结果两组扩弓方式均能有效使上颌横向扩大，实验组以腭中缝的扩大为主，对照组以牙齿牙槽突的颊向倾斜移位为主。实验组扩弓1年内腭中缝的扩大有复发。结论年轻成人使用种植钉辅助螺旋扩弓器快速扩弓能够有效地使上颌横向宽度扩大，以腭中缝扩大为主。在1年内腭中缝的扩大有复发。
作者：乔义强；刘锋鸽；杨学广；贾晓瑞；范海丽；刘进忠 刊期： 2016年第12期
目的：在人胚胎干细胞( hESCs)定向心肌分化过程中,以中胚层阶段(d2)、心肌细胞起始分化阶段(d3)、心肌细胞后分化阶段( d7)为时间节点,探索 APJ 的表达特征。方法 hESCs经单层培养后,应用化学成分明确的诱导分化培养基定向诱导hESCs向心肌细胞分化,再于d2、d3、d7阶段分别进行细胞免疫荧光检测,共聚焦显微镜观察Brachyu-ry T、mesp1、Nkx2．5与APJ的蛋白表达情况,实时荧光定量PCR法检测4种标志物mRNA的表达水平。结果诱导d7开始出现跳动的细胞,跳动细胞数量d7~d16逐渐增加,d16达高峰。细胞免疫荧光结果显示跳动的细胞心肌特异性标志物a-Actinin、cTNNT2表达阳性,并可见到明显的肌节及润盘结构；APJ 在 d2、d3、d7阶段分别与阶段特异性标志物Brachyury T、mesp1、Nkx2．5共表达。3个阶段中APJ mRNA呈持续性表达,在中胚层起始时表达高,中胚层后表达逐渐降低。结论 APJ与代表hESCs心肌分化过程中的阶段特异性标志物Brachyury T、mesp1、Nkx2.5共表达,证实APJ在人心肌细胞发育的整个过程中持续性表达。
作者：童珊珊；陈宇；张宁坤；高连如；程涛；王泽；雷洪涛；李春花 刊期： 2016年第12期
目的：通过手术录像研究直肠系膜、Denonvilliers筋膜、直肠侧韧带、直肠系膜周围间隙与盆腔自主神经的解剖特点,进一步了解全直肠系膜切除( TME )以盆腔自主神经为解剖标志的解剖根据。方法回顾性分析腹腔镜男性中低位直肠癌手术录像257例,总结以盆腔自主神经为解剖标志行直肠系膜全切除的经验,并对比认识该解剖观点前后(2011年前组126例,2011年后组131例)的手术相关指标以及对患者术后泌尿和性功能的影响。结果认识以盆腔自主神经为解剖标志观点的2011年后组患者在术中出血量较2011年前组明显下降,手术质量明显提高,淋巴结清扫个数高于2011年前组,术后勃起功能障碍率低于2011年前组,尿潴留率低于2011年前组,差异有统计学意义( P <0．05)。结论以盆腔自主神经为解剖标志的直肠系膜全切除的解剖观点有助于腹腔镜下直肠前方系膜的完整切除和淋巴结清除率,减少术中出血,减轻对泌尿和性功能的损害。
作者：牛坚；王月；刘斌 刊期： 2016年第12期
目的：探讨血小板参数与肺癌患者化疗预后的关系。方法回顾性分析164例肺癌患者的临床及病理资料，比较81例血小板增多肺癌患者与83例血小板非增多肺癌患者血小板参数的变化，分析两组患者化疗预后的差异。结果COX多因素分析显示血小板计数、TNM分期、病理类型具有独立预后价值(P<0．05)。平均血小板体积(MPV)、血小板/淋巴细胞比值( PLR )、癌胚抗原( CEA )、细胞角蛋白19片段(CY211)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)与肺癌患者化疗预后无明显相关性。单因素分析显示血小板增多肺癌患者与血小板非增多肺癌患者接受化疗后长期生存期分布差异有统计学意义( P<0．05)。结论血小板参数中血小板计数增多是影响肺癌患者化疗后生存的独立危险因素，而MPV、PLR与肺癌化疗预后无明显相关性。血小板计数可能是评估肺癌患者化疗预后情况的可靠指标。
作者：方慢；罗以勤 刊期： 2016年第12期
目的：探讨怀旧疗法对老年脑外伤患者康复期抑郁情绪的疗效。方法方便选取存在抑郁情绪的60例老年脑外伤患者,随机分为对照组、干预组,每组各30例。两组均接受常规的康复训练,干预组在干预早期介入怀旧治疗；分别在6周的干预前后实施汉密尔顿抑郁量表( HAMD)测评与分析。结果组间比较,两组在干预前HAMD得分的差异无统计学意义(t=0．133,P=0．895),6周后干预组患者HAMD得分显著低于对照组(t=3．517,P=0．001)；组内配对比较,6周后两组患者的HAMD得分均明显降低,干预组(t=5．966,P<0．001)、对照组(t=2．389,P=0．021)；干预组抑郁检出率为33．33%(9/27),对照组为64．29%(18/28),差异有统计学意义(χ2=4．134,P=0．042)。结论常规康复治疗联合怀旧疗法能更有效地改善老年康复期脑外伤患者的抑郁状况。
作者：董香丽；孙伟铭；袁也丰 刊期： 2016年第12期
作者： 刊期： 2016年第12期
目的：观察肾移植受者术后3~6个月外周血单个核细胞( PBMC)中调节性 T细胞( CD4+CD25+FoxP3+T细胞或Treg细胞)、辅助性Th细胞17(Th17细胞)及T细胞亚群的表达百分比的变化情况。分析并探讨上述指标的变化特征及意义。方法收集56例研究对象，分为术前组(15例)，术后3~6个月组(20例)，对照组(21例)。运用流式细胞术检测PBMC中CD4+CD25+FoxP3+T细胞和Th17细胞的表达以及CD4+T细胞和CD8+T细胞的表达。结果与术前组比较，术后3~6个月组CD4+CD25+FoxP3+T细胞的表达低( P<0．01)、CD8+T细胞表达较低( P<0．05)；与对照组比较，术后3~6个月组CD4+CD25+FoxP3+T细胞的表达降低( P<0．001)。结论肾移植术后3~6个月受者外周血中CD4+CD25+FoxP3+T细胞、CD8+T细胞均明显降低。
作者：朱贞贞；殴欣；张茜；徐晓玲 刊期： 2016年第12期
取60只8周龄Wistar大鼠,随机分为TNF-α+凝胶实验组和空白凝胶对照组,于其舌背部黏膜处作一圆形缺损模型；每组大鼠分别于0、24、48、72、96 h处死,取标本冰冻切片。通过免疫组织荧光法检测与上皮间质转化( EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP1)和波形蛋白( Vimentin)在大鼠舌黏膜创伤愈合过程中的表达。结果显示两组大鼠创伤部位上皮细胞均有表达FSP1和Vimentin,实验组发生改变的细胞数目明显较对照组多,差异有统计学意义(P<0．05)。
作者：王飞虎；孙应明；孔苗苗；王飞；杨聪翀；刘来奎 刊期： 2016年第12期
目的：评估组织结构声学定量技术( ASQ)对于肝纤维化病理分期的诊断效能,对比分析ASQ与瞬时弹性成像( Fibroscan)诊断肝纤维化病理分期的价值。方法收集慢乙肝患者111例,同时行ASQ、Fibroscan及肝脏病理穿刺活组织检查。对比ASQ定量参数红蓝曲线下面积比( FD Rati-o)、Fibroscan 肝弹性模量与肝纤维化病理分期的相关系数,绘制并分析肝纤维化病理分期的ROC曲线。结果 FD Ra-tio与肝纤维化病理分期的相关性(rs =0．659)低于Fibroscan弹性模量( rs =0．777),差异有统计学意义。 ASQ 与Fibroscan诊断肝纤维化病理分期S≥2、S=4的ROC曲线下面积分别为0．705(95%CI：0．611~0．788)与0．817(95%CI：0．733~0．884)、0．709(95%CI：0．615~0．791)与0．920(95%CI：0．853~0．963),差异无统计学意义。组织结构声学定量技术诊断肝纤维化(S≥2)、肝硬化(S=4)的佳截断值分别为0．21(敏感度76%,特异度74%)、0．38(敏感度77%,特异度88%)。结论 ASQ作为一种新兴的超声新技术,对肝纤维化病理分期有一定的诊断价值,FD Ratio可作为无创性ASQ的有效参数,对慢性乙型肝炎患者的病情进行随访及评估。 ASQ对肝纤维化病理分期的评估效能与Fi-broscan相当,而ASQ能够与常规超声系统相结合,具有较好的临床应用前景。
作者：姚莉；郑慧；万颖；陈娜；周旺 刊期： 2016年第12期
目的：探讨重组人促红细胞生成素( rhEPO)对支气管肺发育不良( BPD )模型肺组织中酪氨酸激酶-2( JAK2)、信号转导和转录活化因子-5( STAT5)蛋白和mRNA表达的影响。方法将48只孕15 d的健康SD大鼠分别孕囊内注射脂多糖( LPS)或生理盐水,待其自然分娩后将新生大鼠随机分为对照组、高氧组、rhEPO组。采用Western blot和RT-PCR法检测肺组织中 JAK2、STAT5蛋白和 mRNA 的表达。结果高氧组JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达减少,rhEPO组JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达增加,高氧暴露第1、7、14天末,各组间JAK2、STAT5蛋白和mRNA表达的差异有统计学意义( P<0．05)。结论高氧组肺组织凋亡显著增加, rhEPO组肺组织凋亡减少,rhEPO对BPD模型肺组织的保护机制可能与活化JAK2/STAT5通路,减轻肺组织凋亡相关。
作者：晏兰；张华 刊期： 2016年第12期
探讨情绪调节策略对抑郁症患者共情的影响。对52例抑郁症患者(研究组)及53例健康对照者(对照组)采用人际反应指针量表( IRI-C)进行评估，比较两者共情特点；同时采用情绪调节策略问卷( ERQ )及汉密尔顿抑郁量表(HAMD-24)进行评估。结果显示研究组的IRI-C个人痛苦因子得分显著升高( P<0．001)，并且与其抑郁程度呈正相关性(P<0．001)；研究组的表达抑制得分与其个人痛苦因子得分呈正相关性(P<0．05)，认知重评得分与其观点采择因子得分呈正相关性(P<0．001)。
作者：赵帅；周晓琴；张蕾 刊期： 2016年第12期
目的：探讨Wnt信号通路中关键蛋白Wnt3a和TCF4在卵巢癌中的表达水平以及临床意义。方法 ELISA法检测10例卵巢癌患者手术前后和10例健康对照者血浆Wnt3a浓度,Western blot、qRT-PCR法检测卵巢癌患者与卵巢良性病变者的卵巢组织Wnt3a、TCF4水平。采用Western blot法检测卵巢癌细胞株 SKOV3与 HO8910中 TCF4的表达,采用dnTCF4质粒转染技术获得TCF4表达下降的 SK-OV3/dnTCF4细胞,使用细胞划痕实验比较卵巢癌细胞转移能力。结果卵巢癌患者血浆Wnt3a水平高于健康对照者(P<0．05),且术后血浆Wnt3a水平低于术前(P<0．05)；卵巢癌组织中 Wnt3a、TCF4水平高于卵巢良性病变者( P <0．05)；SKOV3的TCF4表达量高于HO8910且转移潜能也明显高于后者( P<0．05)；将SKOV3的TCF4敲低,其转移能力明显减弱( P<0．05)。结论 Wnt信号通路参与卵巢癌的发生发展,Wnt3a和TCF4有可能成为监测卵巢癌进展的临床指标之一。
作者：戴朦；沈国栋；程民；徐婷娟；翁海燕；胡世莲；沈干 刊期： 2016年第12期
目的：研究CHIR99021在小鼠胚胎干细胞( mESCs)分化为心肌细胞的作用。方法运用经典的悬滴培养法促进 mESCs 形成拟胚体( EBs)。在不同分化时间段加入糖原合成激酶-3β(GSK-3β)抑制剂CHIR99021,诱导mESCs向心肌细胞分化,相差显微镜在不同时间点观察不同组EBs搏动百分率。 RT-PCR法检测心肌特异性转录因子Nkx2．5、α-肌球蛋白重链(α-MHC)基因表达水平的变化。 Western blot法和免疫荧光染色法检测心肌特异性蛋白cTnT的表达。实验时将不加入CHIR99021命名为对照组,分化第2~5天和第6~10天加入CHIR99021分别命名为2~5 d组和6~10 d组。结果通过悬滴培养法能够形成 EBs,且形成的EBs能够出现自发性搏动并有cTnT表达。在诱导分化的过程中,第2~5天加入CHIR99021的2~5 d组的搏动 EBs百分率比对照组更高,Nkx2．5、α-MHC基因表达的水平也比对照组高；6~10 d组的结果跟2~5 d组相反。各组中都可通过Western blot和免疫荧光染色法检测到cTnT的表达,但2~5 d组的cTnT的表达量高于对照组,6~10 d组的cTnT的表达量低于对照组。结论 GSK-3β抑制剂 CHIR99021对mESCs心肌细胞分化具有双重作用,即分化前期(2~5 d)促进分化,可获得更高的分化率,分化后期(6~10 d)结果相反。
作者：杨谋广；邹传德；王爱玲 刊期： 2016年第12期
目的：通过建立大鼠骨性关节炎( OA)模型探讨补体复合物( MAC)在软骨及滑膜中的表达。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、4周组、8周组、12周组，每组10只。手术组取大鼠后肢一侧膝关节行前交叉韧带切断加内侧半月板切除术制造OA模型，手术后4周、8周及12周取两侧膝关节软骨行大体观察、HE染色、番红O-固绿染色、甲苯胺蓝染色估计软骨退变程度以及进行组织病理学的Mankin评分，免疫组化及Western blot法检测MAC在软骨中沉积及表达情况。结果与对照组比较，手术组大鼠膝关节软骨4周、8周及12周后呈现软骨粗糙、糜烂、裂隙形成、缺损及骨赘形成等早中晚期OA表现。各组间Mankin计分差异均有统计学意义(P<0．01)，损伤逐渐加重。各组间滑膜评分差异有统计学意义(P<0．01)，炎症逐渐降低。免疫组化结果显示软骨细胞膜周围出现环形 MAC 沉积，滑膜中没有MAC。 Western blot检测显示实验组有MAC条带，对照组没有。结论 MAC在OA大鼠软骨中表达增多，补体系统可能作为诊治OA的新方向。
作者：张可可；毕意辉；陈学周；董洲；张明凯；尤涛 刊期： 2016年第12期
目的：探讨心肌内注射脐带间充质干细胞对心肌梗死的影响及作用机制。方法采用开胸结扎冠状动脉前降支的方法建立心梗模型，将实验大鼠随机分为移植组和对照组，移植组每只大鼠局部注射约5×106个细胞悬液，对照组注射等量磷酸缓冲液。采用心脏彩色多普勒超声进行心功能测定。采用免疫荧光鉴定细胞存活、细胞因子分泌以及微血管密度的变化。结果移植后4周，移植组大鼠的心脏功能较对照组明显改善。组织学检查显示移植的脐带间充质干细胞在梗死心肌内存活并迁移，免疫荧光染色显示移植的脐带间充质干细胞能够分泌血管内皮生长因子，而且移植组的微血管密度较对照组明显增加。结论脐带间充质干细胞移植后能够通过分泌细胞因子促进血管新生，改善心脏功能。
作者：武开宏；徐飞；孙剑；莫绪明 刊期： 2016年第12期
目的：评价不同冲洗剂对桩道壁玷污层的清除能力。方法经筛选，选择符合条件的单根管前磨牙20颗，于釉牙骨质界上方2 mm水平去除冠方牙体组织。根管预备，根管充填。3M钻逐级进行桩道预备3号。随机均分为4组，即生理盐水组、双氧水组、次氯酸钠组+MTAN组、MTAN组，分别用以下溶液冲洗：5 ml生理盐水、5 ml 3% H2 O2、2．5 ml 3%次氯酸钠+2．5 ml MTAN、5 ml MTAN。每样本冲洗结束后，均用5 ml生理盐水溶液终末冲洗。于颊舌侧沿牙体长轴纵向劈开。每试样展示较好的一半在场发射扫描电镜下观察。根据Peters′标准计分，对数据行统计学处理。结果生理盐水冲洗桩道后，玷污层覆盖整个牙本质壁。双氧水冲洗桩道后，大量的玷污层残留，绝大多数牙本质小管被阻塞。次氯酸钠+MTAN和MTAN均可以去除大部分的玷污层，大量的牙本质小管口开放。4组样本的统计结果差异有统计学意义(P<0．05)。结论 MTAN及次氯酸钠+MTAN均可有效去除桩道预备后产生的玷污层。
作者：童雪梅；张秋霞；储曼茹；周琳 刊期： 2016年第12期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
