黄晨晨；廖荣丰；汪枫；唐松涛
目的：探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、凋亡相关蛋白 Survivin 在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与临床病理特征的关系，以及两种蛋白的相关性。方法采用免疫组化法检测52例 NSCLC 组织及20例癌旁组织中 HIF-1α和 Survivin 的表达。结果 NSCLC 组织中 Survivin、HIF-1α的阳性表达率分别为69％（36／52）和59％（31／52）均高于癌旁组织。HIF-1α、Survivin 的表达与肿瘤临床分期及淋巴结转移病理分级相关（P ＜0．05）。HIF-1α的表达与 Survivin表达（r ＝0．406，P ＜0．05）呈正相关。结论在非小细胞肺癌癌组织中 HIF-1α、生存素表达明显高于癌旁组织；HIF-1α和 Survivin 在肿瘤发生、发展过程中存在相互作用并与非小细胞肺癌发展及预后密切相关。
作者：聂弘；高从荣；赵敏；王瑾；邹强；万军 刊期： 2015年第11期
目的：探讨抗霉素 A（AMA）诱导血小板凋亡及其分子机制。方法取健康志愿者单采血小板，离心洗涤得到洗涤血小板，将洗涤血小板与不同浓度的 AMA 孵育后，流式细胞术检测线粒体跨膜电位（ΔΨm）去极化、磷脂酰丝氨酸（PS）暴露、细胞内活性氧（ROS）、线粒体 ROS、P-选择素表达和整合素αⅡbβ3活化；Western blot 法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）的活化。在抑制试验中，先将洗涤血小板与线粒体靶向的 ROS 拮抗剂 Mito-TEMPO 预孵育，然后再与 AMA 孵育，流式细胞术检测相关凋亡指标。结果AMA 剂量依赖性诱导血小板ΔΨm 去极化、PS 暴露、细胞内ROS 和线粒体 ROS 升高以及 Caspase-3活化；但是 AMA 不能诱导血小板活化。线粒体靶向的 ROS 拮抗剂抑制 AMA诱导的血小板ΔΨm 去极化、PS 暴露、Caspase-3活化以及线粒体 ROS 的生成。结论 AMA 能够诱导血小板发生凋亡，线粒体 ROS 可能在 AMA 诱导的血小板凋亡过程中起重要作用。
作者：胡萍；朱永明；谢如锋；王志成 刊期： 2015年第11期
目的：检测 Cripto-1蛋白在不同转移潜能的人肝癌细胞株、肝癌及相应癌旁组织中的表达水平，探讨 Cripto-1蛋白的表达与肝癌侵袭转移能力之间的关系。方法采用Western blot 方法检测不同转移潜能的人肝癌细胞株、肝癌及相应癌旁组织中 Cripto-1的蛋白表达水平；采用免疫组织化学染色方法检测肝癌组织中 Cripto-1蛋白的表达并探讨与临床病理参数之间的关系。结果与癌旁肝组织相比，肝癌组织中 Cripto-1的蛋白表达水平明显升高。Cripto-1蛋白在肝癌细胞株中的表达水平与细胞株的侵袭潜能呈正比。与正常肝组织（0％）比较，Cripto-1在肝癌组织（64．6％）中高表达，且与肿瘤分化程度、血管侵犯和转移状态有相关性（P ＜0．05）。结论 Cripto-1蛋白在肝癌中高表达，并且其表达量与肝癌的侵袭转移能力密切相关。
作者：戴帅；李建生；许戈良；荚卫东；马金良；刘文斌 刊期： 2015年第11期
目的：评价应用超声 MicroPure 成像技术对 BI-RADS分级为4级的乳腺肿块中微钙化的检测价值。方法对56例发现乳腺肿块并且 BI-RADS 分级为4级的患者分别应用X 线钼靶、传统灰阶超声及 MicroPure 成像技术进行肿块微钙化的检测，以钼靶为金标准，对传统灰阶超声和 MicroPure检测结果进行比较。同时结合术后病理结果进行分析。结果56例乳腺肿块中，钼靶发现43个病灶有微钙化，传统灰阶超声发现其中22个病灶有微钙化，MicroPure 成像技术发现40个病灶有微钙化。传统灰阶超声检测病灶内部及周边微钙化的敏感性为51．2％，特异性为92．3％，ROC 曲线下面积为0．717；MicroPure 成像技术检测病灶内部及周边微钙化的敏感性为93．0％，特异性为100．0％，ROC 曲线下面积为0．965。结论在 BI-RADS 分级为4级的乳腺肿块微钙化的检测中，超声 MicroPure 成像技术明显优于传统灰阶超声，有助于乳腺癌的临床诊断。
作者：吴媛媛；黄猛；周怡；杨金燕；赵晟；潘跃银；沈园园 刊期： 2015年第11期
回顾性分析采用 Titmus、Randot 图谱对99例成人共同性外斜视患者进行术前术后近立体视功能检测，对可能影响术后近立体视功能重建相关因素（是否间歇、斜视开始年龄、术前斜视持续时间、术前斜视度）与术后近立体视功能进行协方差分析。结果显示是否间歇对其影响差异有统计学意义（P ＝0．001），持续时间（P ＝0．002）和开始年龄（P ＝0．048）对其影响差异也有统计学意义；术前斜视度数对其影响差异无统计学意义（P ＝0．133）。成人共同性外斜视患者术后近立体视功能可获得不同程度重建。
作者：陈丽；封利霞 刊期： 2015年第11期
自体子宫内膜移植法建立子宫内膜异位症（EMS）模型大鼠，比较给药前后移植物体积、大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、异位内膜中血管内皮生长因子（VEGF）的表达。经定坤丹治疗后移植物体积、血清 TNF-α水平、异位内膜中 VEGF 的表达与疾病模型组相比均明显下降，差异有统计学意义（P ＜0．05）。定坤丹对 EMS 模型大鼠的异位内膜生长有一定的抑制作用，其作用机制可能与血清 TNF-α水平降低和 VEGF 的表达减少有关。
作者：何闰华；王文艳；卫兵 刊期： 2015年第11期
目的：研究黄芪甲苷（As-IV）对高胰岛素诱导人肾小球系膜细胞（HMCs）损伤的保护作用及其机制。方法以HMCs 为研究对象，用 MTT 法检测不同浓度胰岛素作用不同时间后对 HMCs 增殖的影响，筛选胰岛素的量效与时效关系；实验设正常组、高胰岛素（64 nmol／L）组、二碘苯（DPI 10μmol／L）组、抗氧化剂 Tempol（100μmol／L）组、PI3K／Akt 信号通路抑制剂 LY294002（10μmol／L）组与黄芪甲苷（As-Ⅳ25、50、100μmol／L）组。培养48 h 后，MTT 法检测 HMCs 的细胞增殖状况，DCFH-DA 法测定细胞内活性氧（ROS）含量， Western blot 法检测 NADPH 氧化酶4（NOX4）、磷酸化蛋白激酶 B（p-PKB）（又称 p-Akt）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达的变化。结果随着浓度增加与作用时间延长，胰岛素对 HMCs 增殖有促进作用且有量效与时效关系；与高胰岛素组比较，DPI 组、Tempol 组、LY294002组与 As-IV 25、50、100μmol／L 组均能有效抑制高胰岛素诱导的细胞增殖，减少细胞内 ROS 含量，降低 NOX4、p-Akt、p-mTOR 蛋白的高表达（P ＜0．05，P ＜0．01）。结论胰岛素呈时间和浓度依赖性促 HMCs 细胞增殖；As-IV 对高胰岛素诱导的 HMCs 有保护作用，其作用机制可能与抑制 HMCs 的过度增殖，减少细胞内 ROS 生成，降低 NOX4、p-Akt、p-mTOR蛋白高表达有关。
作者：李贵平；李维祖；段文婷；李卫平 刊期： 2015年第11期
目的：证明 miR-483-5p 及其靶基因 ERK1参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。方法①体外培养人正常颗粒细胞，调控其 miR-483-5p 超表达，聚合酶链反应（PCR）及Western blot 法检测 ERK1的 mRNA 及蛋白表达情况；将包含野生型或突变型的 ERK1 mRNA 3′UTR 的 DNA 片段克隆在荧光素酶标记的质粒，共转染 miR-483-5p mimics、control-miR mimics 和野生型、突变型重组质粒，检测其颗粒细胞相对荧光素酶活性；②将 miR-483-5p mimics 及 ERK1 siRNAs单独及共同转染颗粒细胞，MTT 法及 TUNEL 法分别检测三种情况下卵巢颗粒细胞的增殖、凋亡情况。结果① miR-483-5p 超表达后，ERK1基因及蛋白表达均下降；与 control-Wt（野生型）转染组相比，miR-483-Wt 组的荧光素酶活性显著降低；miR-483-Mut（突变型）与 control-Mut 转染组间荧光素酶活性的比较差异无统计学意义；② miR-483-5p mimics与 ERK1 siRNAs 单独及共同转染颗粒细胞，三种转染条件下颗粒细胞增殖均显著受抑制、凋亡率显著升高，且三种作用效果差异无统计学意义。结论 miR-483-5p 通过直接与靶基因 ERK1结合，参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。
作者：蒋秀敏；刘雨生；许波 刊期： 2015年第11期
目的：分析日本血吸虫感染以及虫源性糖蛋白果糖二磷酸醛缩酶（SjFBPA）刺激后小鼠脾脏细胞中白介素4（IL-4）、白细胞分化抗原 CD8a 因子表达量的动态变化，并探讨 SjFBPA 与辅助型 T 细胞（Th2）免疫应答的关系。方法血吸虫尾蚴感染 C57小鼠10只，设正常对照组。感染8周后处死小鼠，取脾脏制备淋巴细胞悬液；用藻红蛋白（PE）标记 CD8a 抗体，藻青蛋白（APC）标记 IL-4抗体进行细胞染色；流式细胞仪检测细胞因子表达量的变化。10只正常 C57小鼠处死后取脾脏制成淋巴细胞悬液，加 SjFBPA 蛋白体外刺激，按上述流程刺激方法检测细胞。结果小鼠感染血吸虫8周后脾细胞中 IL-4、CD8a 的表达量分别为（22．39±5．93）％、（11．34±2．15）％，正常对照组脾细胞中 IL-4、CD8a 的表达量分别为（1．39±0．52）％、（1．98±0．84）％，差异有统计学意义（P ＜0．01）。SjFBPA 体外刺激小鼠脾细胞的 IL-4、CD8a 的表达量分别为（14．14±1．16）％、（8．99±0．81）％，正常对照组脾细胞中 IL-4、CD8a 的表达量分别为（1．86±0．93）％、（1．69±0．56）％，差异有统计学意义（P ＜0．01）。结论 SjFBPA 在血吸虫感染中具有诱导 Th2免疫偏移的作用，树突状细胞作为提呈细胞参与该免疫反应。
作者：胡媛媛；徐元宏；沈继龙；陈鹤 刊期： 2015年第11期
将局部晚期鼻咽癌患者分为动脉灌注化疗联合放疗（IAC）组和静脉诱导化疗联合放疗（IVC）组。治疗后4周， IAC 组与 IVC 组的完全缓解（CR）率分别为94．0％、70．0％，差异有统计学意义（P ＜0．05）；治疗后12周，IAC 组与 IVC组的 CR 率分别为98．0％、72．0％，差异有统计学意义（P ＜0．05）。两组治疗有效率均为100％，均未发现远处转移病例。两组之间3、4级急性毒副反应发生率比较，差异无统计学意义（P ＞0．05）。因此动脉灌注诱导化疗联合后期同步放化疗疗效可靠、安全。
作者：陈建武；张幸平；刘德鑫；肖丽华；吴敏；苏菁菁；郑建清 刊期： 2015年第11期
目的：了解仙游县居民肿瘤知识知晓度情况，在此基础上提出健康教育相关可行性建议。方法通过自行设计问卷进行调查，对问卷进行量化统计、分析并用 EpiData、SPSS 等软件进行数据的录入与统计分析。结果不同年龄组居民的健康行为、健康态度以及健康知识知晓度存在差异，生活水平也是影响居民健康行为的重要因素之一。居民获取癌症知识途径较单一，但获取意愿强烈。结论仙游县居民对肿瘤知识知晓程度参差不齐，且对癌症的早期表现知晓度较低，因此有必要针对不同人群进行不同程度、不同形式的健康教育，教育当地居民树立正确的健康观念，提高生命健康质量。
作者：梁栋；黄丹丹；郑慧楠；何李梅；陈江源；李雅欣 刊期： 2015年第11期
目的：探讨抗抑郁剂盐酸帕罗西汀对卵巢切除大鼠学习记忆能力、血清雌激素水平及大鼠海马雌激素受体表达的影响。方法采用 SD 雌鼠双侧卵巢切除（OVX）作为雌激素波动引起的抑郁与认知障碍模型，用 Morris 水迷宫实验来测试大鼠的学习记忆功能。实验共分为正常对照组、OVX对照组、OVX 药物组。予5-羟色胺重摄取抑制剂类药物：盐酸帕罗西汀10 mg／（kg·d）干预4周。采用 ELISA 法测量SD 大鼠血清黄体生成素、卵泡刺激素、雌激素。免疫组化法检测大鼠海马雌激素受体α（ERα）和雌激素受体β（ERβ）的阳性细胞表达数。结果① Morris 水迷宫实验中，OVX对照组和 OVX 药物组的逃避潜伏期明显缩短，停留在平台时间百分比明显增加。② OVX 药物组的血清雌激素较OVX 对照组明显增加（P ＜0．05）。③药物组与非药物组的ERα、ERβ表达无明显差异。结论帕罗西汀增加OVX 大鼠血清雌激素水平和改善学习记忆能力，而对海马ERα、ERβ表达无明显影响。
作者：谢双燕；胡佳佳；周伯荣；刘远波 刊期： 2015年第11期
选择行桩核修复后再行烤瓷冠修复残根残冠103例，患者充分知情同意后随机分为两组，其中51例用牙用根管钉光固化树脂进行桩核修复，52例行牙行玻璃纤维桩核修复，经过6～12个月的随访观察，牙用根管钉桩核组出现了2例冠根折断，4例脱落，成功率为88．24％（45／51），纤维桩核组出现了1例冠根折，1例脱落，成功率为96．15％（50／52）。纤维桩核烤瓷全冠修复是目前修复残根残冠的佳选择，但牙用根管钉光固化树脂核经济、简单，易操作，适合基层使用。
作者：洪礼琳；叶茂昌 刊期： 2015年第11期
回顾性分析97例在白光内镜下疑诊为早期食管鳞癌或癌前病变的患者，进行窄带谱成像放大内镜（NBI-ME）检查，行靶向活检，终经内镜下切除或者手术切除确定病灶性质。分析病变的 NBI-ME 的形态特点，并与活检病理、内镜切除或手术切除标本病理进行对照。在97例患者中终确诊为鳞癌35例，高级别上皮内瘤变62例。NBI-ME 诊断为鳞癌或高级别上皮内瘤变的有95例，诊断准确性达97．9％。经过靶向活检，有10例原诊断为低级别上皮内瘤变或炎症的患者被诊断为鳞癌或高级别上皮内瘤变，准确性提高52．6％。而根据乳头内毛细血管袢的形态，对肿瘤浸润深度判断的准确性达到81．4％。
作者：王亚雷；冯慧；孙斌；许建明 刊期： 2015年第11期
目的：探讨 Toll 样受体7（TLR7）在呼吸道合胞病毒（RSV）感染 A549细胞诱导产生 I 型干扰素（IFN）抗病毒免疫反应中的作用。方法实验分正常对照组、RSV 感染组、TLR7 siRNA 沉默组，分别于感染的4、8、12、24 h 后收集各组细胞以及培养上清液。TLR7 siRNA 通过瞬时转染 A549细胞，半定量 RT-PCR 法检测 TLR7基因沉默效果；TRIzol 试剂提取细胞总 RNA，检测 TLR7、干扰素调节因子7（IRF7）、IFN-α、IFN-β的 mRNA 表达量变化；通过 Western blot 法检测 TLR7蛋白表达量；ELISA 法检测感染不同时间点 A549细胞培养上清液中 IFNα／β含量的变化。结果①转染24 h 后 TLR7 siRNA-2有效抑制 TLR7 mRNA 表达；② RSV 感染A549细胞后，TLR7、IRF7、IFN-α／β的 mRNA 以及 TLR7蛋白的表达量均升高，并与 RSV 感染之间存在时间依赖性关系；沉默 TLR7后，TLR7、IRF7、IFN-α／β的 mRNA 以及 TLR7蛋白的表达量较感染组均有明显下降；③ RSV 感染 A549细胞后，明显上调细胞培养上清液中 IFN-α／β的水平，TLR7 siRNA 沉默组 IFN-α／β的表达水平较 RSV 感染组均下降，差异有统计学意义，且 IFN-α的表达量下调更为显著。结论RSV 感染A549细胞后，TLR7被活化能够诱导产生I 型IFN，发挥抗病毒作用，且TLR7诱导产生的I 型IFN 以IFN-α为主。
作者：何汉文；王葱；杜博易；吴璇；于莉；汪；黄升海 刊期： 2015年第11期
目的：探讨异基因脐血移植后外周血 T 淋巴细胞免疫功能的特点及规律。方法11例异基因脐血移植患者分别在移植前、移植后30、60和90 d 取外周血，将其中 T 淋巴细胞在莫能霉素存在的情况下，体外经十四烷酰拂波醇乙脂和离子霉素刺激后，分别进行 CD4-FITC、CD8-FITC 荧光单抗染色和γ-IFN-PE、IL-4-PE 荧光单抗胞内染色，后进行流式细胞仪分析。结果脐血移植后60 d 的 T 淋巴细胞分泌γ-IFN 和 IL-4的比率开始增加，90 d 后 T 淋巴细胞分泌γ-IFN 和 IL-4的比率增加明显（P ＜0．001）。结论脐血移植60 d 后患者的免疫功能开始恢复，90 d 后免疫功能达到顶峰，脐血移植是治疗急性白血病的一种有效方法。
作者：杨会志；朱小玉；汪健；孙自敏 刊期： 2015年第11期
目的：研究蛋白激酶 C 结合蛋白1（PICK1）在小鼠肝纤维及活化的肝星状细胞中的表达变化，并探讨其对人肝星状细胞株（LX-2）活化的影响。方法建立四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化模型，观察 PICK1在肝纤维化过程中的表达变化；转化生长因子β1（TGF-β1）刺激 LX-2活化，West-ern blot 测定 PICK1的蛋白表达情况；转染 PICK1过表达质粒至 LX-2中，再以 TGF-β1诱导活化，Western blot 检测PICK1、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I 型胶原（Col1a1）和Smad2、3及其磷酸化水平的蛋白表达情况。结果正常组小鼠肝脏中 PICK1表达较高，随着肝纤维化的加重，PICK1的表达逐渐递减。TGF-β1诱导活化的 LX-2细胞中 PICK1表达降低。转染 PICK1过表达质粒后，TGF-β1诱导的α-SMA、Colla1的表达明显减少，且 Smad2、3磷酸化水平显著下降。结论 PICK1在纤维化肝组织及活化的 HSC 中表达下调。过表达 PICK1可抑制 TGF-β1诱导的 LX-2活化，可能是通过抑制 TGF-β／Smad 通路而发挥作用，为肝纤维化的防治研究提供了新的思路和靶点。
作者：陈培杰；李俊；黄成；孟晓明；蔡双朋 刊期： 2015年第11期
目的：针对非小细胞肺癌（NSCLC）患者组织标本鼠类肉瘤病毒癌基因同源基因（KRAS）和鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体 B1（BRAF）驱动基因突变使用特异引物双扩增实时蝎形探针扩增阻滞突变系统（sARMS-PCR）检测的可行性；了解 KRAS 和 BRAF 基因突变患者临床病理特征，为NSCLC 患者个体化治疗提供理论依据。方法收集89例NSCLC 患者肿瘤组织甲醛固定石蜡包埋标本（FFPE），采用FFPE 样品 DNA 分离试剂盒（离心柱型）提取 DNA，使用sARMS-PCR 同时进行 KRAS 及 BRAF 基因突变检测。结果① KRAS 基因突变21例（21／89）；其中KRAS 基因7种热点突变中，检出6种热点突变，均位于第12、13位密码子，1例同时检出存在G12D 及G12V 位点突变，1例同时检出存在G12C 及G12V 位点突变；未发现G12S 突变型；② BRAF 基因突变1例（1／89），突变位点为V600E，为女性，黏液腺癌；③未见KRAS 和BRAF 基因同时突变现象。结论临床使用sARMS-PCR 技术检测NSCLC 患者KRAS 和BRAF 基因突变有较强敏感性，且石蜡组织标本取材方便，可以作为两种基因的临床检测方法；KRAS 和BRAF 基因突变与年龄、吸烟史、病理分型等均无明显相关性，KRAS 基因突变与性别相关，男性高于女性；KRAS 与BRAF 基因是独立存在的。
作者：邵璐；侯丹阳；冷再君；徐修才；伍权；操乐杰 刊期： 2015年第11期
目的：探讨香烟暴露诱导的肺气肿小鼠肺组织中白介素-17A（IL-17A）以及白介素-22（IL-22）的变化以及戒烟、N-乙酰半胱氨酸（NAC）对 IL-17A 和 IL-22的影响。方法采用香烟暴露法建立小鼠肺气肿模型，给予戒烟及 NAC 灌胃干预。采用 ELISA 法检测肺匀浆及肺泡灌洗液（BALF）中IL-17A 和 IL-22浓度。HE 染色观察肺组织病理学变化。结果香烟暴露可使小鼠肺组织发生肺气肿样变化。与正常对照组相比，肺匀浆及 BALF 中，香烟暴露后 IL-17A 及 IL-22水平升高（P ＜0．05）。与香烟暴露组比较，戒烟及 NAC 灌胃后 IL-17A 及 IL-22水平下降（P ＜0．05）。肺匀浆及 BALF中 IL-22与 IL-17A 的比值逐渐降低。结论 IL-17A 及 IL-22与香烟暴露导致的小鼠肺组织中慢性炎症的发生有关。戒烟及 NAC 处理对吸烟导致的 IL-17A 及 IL-22变化有一定干预作用。
作者：冯迪；郭欣；梅晓冬 刊期： 2015年第11期
目的：运用基因克隆技术构建人源β1，4-半乳糖转移酶Ⅱ（β4GalTⅡ）真核表达质粒，并将其转染到 COS7细胞中，观察蛋白在细胞内的定位，同时转染到 HEK 293T 细胞中检测其表达。方法分别设计带 FLAG 标签和 GFP 标签的β4GalTⅡ基因的特异性引物，以含人β4GalTⅡ全长 cDNA序列为模板，定向构建到 pcDNA3．1（＋）及 pCDGFP 真核表达载体中，构建重组表达质粒。通过酶切和测序鉴定阳性重组质粒，利用 Lipofectamine 2000分别转染 COS7、HEK 293T细胞，免疫荧光显微镜观察重组蛋白在细胞内的定位，West-ern blot 法鉴定重组蛋白的表达。结果成功构建 pcD-NA3．1-β4GalTⅡ-FLAG 和 pCDGFP-β4GalTⅡ重组表达载体，定位实验表明：β4GalT Ⅱ-FLAG 和 GFP-β4GalT Ⅱ二者在COS7细胞中均主要定位在细胞核周围，并有明显的块状染色，胞核中未见明显分布；Western blot 法检测显示重组β4GalTⅡ蛋白在 HEK 293T 细胞中稳定表达。结论获得了人β4GalTⅡ的真核表达质粒，并能在 COS7和 HEK 293T 细胞中表达，为进一步研究β4GalTⅡ的功能及其与其他蛋白的相互作用奠定了一定基础。
作者：徐雪琴；潘林鑫；耿慧武；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2015年第11期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
