杨会志；朱小玉；汪健；孙自敏
目的：研究补体成分 C3及其缺失突变体 C3（1-840）、C3（824-1663）在真核细胞内的表达及与氯离子通道蛋白（CLIC1）的共定位。方法构建 pcDNA3．1-C3-FLAG、pcDNA3．1-C3（1-840）-FLAG、pcDNA3．1-C3（824-1663）-FLAG 三个真核表达质粒（缺失突变体根据 C3的结构域及其裂解断裂位置设计），并分别转染至 HEK 293T 细胞中， Western blot 检测表达情况；上述质粒分别瞬时单转至 COS7细胞和分别与 GFP-CLIC1共转至 COS7细胞内，观察共定位情况。结果成功构建带 FLAG 标签的 C3基因及其两个缺失突变体[C3（1-840）、C3（824-1663）]的真核表达载体， Western blot 结果显示它们在 HEK 293T 细胞中均能成功表达；免疫荧光显示它们在 COS7细胞中均主要分布于细胞质，且三个真核表达载体中只有 C3（824-1663）与 CLIC1有共定位。结论补体 C3及其缺失突变体 C3（1-840）和 C3（824-1663）在 HEK 293T、COS7细胞中均能高效表达，且主要分布在细胞质内，C3（824-1663）与 CLIC1蛋白有共定位。
作者：王二宁；陈丹丹；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2015年第11期
目的：测定急性心肌梗死（AMI）患者行经皮冠状动脉介入（PCI）治疗前后相关炎性细胞因子的血清水平，了解其变化规律及临床意义。方法成功接受 PCI 的初发 AMI患者118例（治疗组，血样采集于 PCI 术前、术后12、24、48 h及随访期90 d）和仅接受诊断性冠脉造影（CAG）急性心肌梗死患者52例（对照组，血样采集于造影前、造影后12、24、48 h 及随访期90 d），检测血清白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素18（IL-18）、高敏 C 反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）以及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平，并随访 PCI组主要心脏不良事件（MACE）发生率。结果对照组和治疗组之间的 IL-6、IL-18、hs-CRP、TNF-α、MMP-9基础水平差异无统计学意义（P ＞0．05）；对照组冠脉造影前后血清 IL-6、IL-18、hs-CRP、TNF-α、MMP-9变化差异无统计学意义（P＞0．05）；治疗组术后 IL-6、IL-18、hs-CRP、TNF-α均较治疗前有显著升高（P ＜0．01）；治疗组术后血清 MMP-9较治疗前变化差异无统计学意义（P ＞0．05）；治疗组中，MACE 组与无MACE 组比较，IL-6、IL-18、hs-CRP 及 TNF-α水平差异均有统计学意义。结论 AMI 患者 PCI 术后血清 IL-6、IL-18、hs-CRP 和 TNF-α水平短期内显著增高，PCI 操作可能诱发炎性反应；外周血炎症因子 IL-6、IL-18、hs-CRP、TNF-α高水平可能对初发 AMI 患者 PCI 术后可能发生的 MACE 及近期预后有重要的参考价值。
作者：邹治国；刘和俊；周碧蓉 刊期： 2015年第11期
51例经产前检查长骨符合孕龄的胎儿，宫内测量长骨骨干及其干骺端结构的长度，计算总长度，引产后做尸体X 线摄片测量长骨长度，并测量其裸骨长度（包括干骺端结构），所有裸骨均做 X 线摄片并测量裸骨 X 线长度，将几种测量结果做统计学分析。部分引产儿及部分新鲜裸骨分别置于水中观察长骨形态结构特征。超声测量长骨骨干值及裸骨长度分别与尸体长骨 X 线测值比较，差异均有统计学意义（P ＜0．05），尸体长骨 X 线测值大于超声测量长骨骨干值，小于裸骨长度；将超声测量长骨总长度与裸骨长度比较，差异无统计学意义（P ＞0．05）。超声测量胎儿长骨骨干长度及干骺端结构之和相当于裸骨长度，尸体 X 线长度不能完全反映长骨总长度，而超声测量骨干及其干骺端结构的总长度接近于裸骨长度，可更真实地反映胎儿长骨发育情况，从而有助于更准确地评价胎儿宫内发育迟缓及短长骨。
作者：高传芬；王玲；丛林；郑慧 刊期： 2015年第11期
目的：针对非小细胞肺癌（NSCLC）患者组织标本鼠类肉瘤病毒癌基因同源基因（KRAS）和鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体 B1（BRAF）驱动基因突变使用特异引物双扩增实时蝎形探针扩增阻滞突变系统（sARMS-PCR）检测的可行性；了解 KRAS 和 BRAF 基因突变患者临床病理特征，为NSCLC 患者个体化治疗提供理论依据。方法收集89例NSCLC 患者肿瘤组织甲醛固定石蜡包埋标本（FFPE），采用FFPE 样品 DNA 分离试剂盒（离心柱型）提取 DNA，使用sARMS-PCR 同时进行 KRAS 及 BRAF 基因突变检测。结果① KRAS 基因突变21例（21／89）；其中KRAS 基因7种热点突变中，检出6种热点突变，均位于第12、13位密码子，1例同时检出存在G12D 及G12V 位点突变，1例同时检出存在G12C 及G12V 位点突变；未发现G12S 突变型；② BRAF 基因突变1例（1／89），突变位点为V600E，为女性，黏液腺癌；③未见KRAS 和BRAF 基因同时突变现象。结论临床使用sARMS-PCR 技术检测NSCLC 患者KRAS 和BRAF 基因突变有较强敏感性，且石蜡组织标本取材方便，可以作为两种基因的临床检测方法；KRAS 和BRAF 基因突变与年龄、吸烟史、病理分型等均无明显相关性，KRAS 基因突变与性别相关，男性高于女性；KRAS 与BRAF 基因是独立存在的。
作者：邵璐；侯丹阳；冷再君；徐修才；伍权；操乐杰 刊期： 2015年第11期
目的：了解仙游县居民肿瘤知识知晓度情况，在此基础上提出健康教育相关可行性建议。方法通过自行设计问卷进行调查，对问卷进行量化统计、分析并用 EpiData、SPSS 等软件进行数据的录入与统计分析。结果不同年龄组居民的健康行为、健康态度以及健康知识知晓度存在差异，生活水平也是影响居民健康行为的重要因素之一。居民获取癌症知识途径较单一，但获取意愿强烈。结论仙游县居民对肿瘤知识知晓程度参差不齐，且对癌症的早期表现知晓度较低，因此有必要针对不同人群进行不同程度、不同形式的健康教育，教育当地居民树立正确的健康观念，提高生命健康质量。
作者：梁栋；黄丹丹；郑慧楠；何李梅；陈江源；李雅欣 刊期： 2015年第11期
回顾性分析采用 Titmus、Randot 图谱对99例成人共同性外斜视患者进行术前术后近立体视功能检测，对可能影响术后近立体视功能重建相关因素（是否间歇、斜视开始年龄、术前斜视持续时间、术前斜视度）与术后近立体视功能进行协方差分析。结果显示是否间歇对其影响差异有统计学意义（P ＝0．001），持续时间（P ＝0．002）和开始年龄（P ＝0．048）对其影响差异也有统计学意义；术前斜视度数对其影响差异无统计学意义（P ＝0．133）。成人共同性外斜视患者术后近立体视功能可获得不同程度重建。
作者：陈丽；封利霞 刊期： 2015年第11期
目的：探讨糖尿病（DM）大鼠和正常大鼠角膜上皮修复过程中紧密连接蛋白 occludin 重塑的特点。方法90只 SD 大鼠随机分为 DM组和正常对照组（NC）各45只（DM组均高脂喂养），通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导形成Ⅱ型 DM大鼠模型，于损伤后0 h（未损伤），16、48、72、120 h （每组5只）处死大鼠取角膜。间接免疫荧光染色和 Western blot 法观察 occludin 蛋白在损伤修复过程中的变化。结果DM大鼠角膜上皮损伤愈合率较 NC 组大鼠明显延迟，DM组和 NC 组大鼠角膜上皮 occludin 蛋白在损伤后16、48 h 表达差异有统计学意义（P ＜0．05），在损伤后0、72、120 h 表达差异无统计学意义。结论糖尿病可影响大鼠角膜上皮创伤修复过程中紧密连接蛋白 occludin 蛋白的表达。
作者：黄晨晨；廖荣丰；汪枫；唐松涛 刊期： 2015年第11期
目的：探讨低剂量 CT 结合自适应统计迭代重建技术在泌尿系结石诊断中的价值。方法使用自动管电流调节技术，对临床怀疑泌尿系结石的41例患者同时进行常规剂量及低剂量 CT 扫描，其中常规组噪声指数（NI）设定为13，低剂量组 NI 设定为25，运用滤过反投影技术（FBP）及自适应统计迭代重建技术（ASIR）对图像进行1．25 mm 层厚重建，由两名放射科医师分别对结石（大小、位置、数目）、图像质量（1～5分）、图像噪声（1～3分）及诊断可信度（1～3分）等几个方面进行评估，记录两组扫描的容积 CT 剂量指数（CTDIvol）、剂量长度乘积（DLP）并计算有效剂量（ED）。采用 Wilcoxon 符号秩和检验及配对 t 检验进行统计学分析。结果低剂量组的平均 ED 为1．76 mSv，常规组的平均 ED为5．98 mSv（P ＜0．05）。低剂量组使用80％ASIR 法处理的图像质量明显高于 FBP 法处理的图像质量（P ＜0．05），而与常规组 FBP 法处理的图像质量大致相仿，差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论结合使用自动管电流调节技术及ASIR，可在保证图像质量的前提下，明显降低 CT 扫描辐射剂量，具有较好的临床可行性。
作者：束宏敏；李小虎；宋建；杜俊华；刘斌；余长亮；钱银锋；李晓舒；张辉；余永强 刊期： 2015年第11期
选择行桩核修复后再行烤瓷冠修复残根残冠103例，患者充分知情同意后随机分为两组，其中51例用牙用根管钉光固化树脂进行桩核修复，52例行牙行玻璃纤维桩核修复，经过6～12个月的随访观察，牙用根管钉桩核组出现了2例冠根折断，4例脱落，成功率为88．24％（45／51），纤维桩核组出现了1例冠根折，1例脱落，成功率为96．15％（50／52）。纤维桩核烤瓷全冠修复是目前修复残根残冠的佳选择，但牙用根管钉光固化树脂核经济、简单，易操作，适合基层使用。
作者：洪礼琳；叶茂昌 刊期： 2015年第11期
对12例双胎生长不一致同时伴有较小胎儿羊水过少的患儿的超声检查结果进行分析，得出鉴别诊断结论，通过随访部分患者病程进展对诊断结果进行验证。12例病例中超声诊断选择性一胎宫内生长受限（sIUGR）8例，双胎输血综合征（TTTS）3例，1例未做出鉴别诊断。通过对脐带插入点、羊水量、另一胎心血管系统的超声评估和病程随访可以对 TTTS 与 sIUGR 进行鉴别。超声检查对于 TTTS 与 sIUGR的鉴别诊断具有较大的应用价值。
作者：李亮；丛林 刊期： 2015年第11期
目的：研究黄芪甲苷（As-IV）对高胰岛素诱导人肾小球系膜细胞（HMCs）损伤的保护作用及其机制。方法以HMCs 为研究对象，用 MTT 法检测不同浓度胰岛素作用不同时间后对 HMCs 增殖的影响，筛选胰岛素的量效与时效关系；实验设正常组、高胰岛素（64 nmol／L）组、二碘苯（DPI 10μmol／L）组、抗氧化剂 Tempol（100μmol／L）组、PI3K／Akt 信号通路抑制剂 LY294002（10μmol／L）组与黄芪甲苷（As-Ⅳ25、50、100μmol／L）组。培养48 h 后，MTT 法检测 HMCs 的细胞增殖状况，DCFH-DA 法测定细胞内活性氧（ROS）含量， Western blot 法检测 NADPH 氧化酶4（NOX4）、磷酸化蛋白激酶 B（p-PKB）（又称 p-Akt）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达的变化。结果随着浓度增加与作用时间延长，胰岛素对 HMCs 增殖有促进作用且有量效与时效关系；与高胰岛素组比较，DPI 组、Tempol 组、LY294002组与 As-IV 25、50、100μmol／L 组均能有效抑制高胰岛素诱导的细胞增殖，减少细胞内 ROS 含量，降低 NOX4、p-Akt、p-mTOR 蛋白的高表达（P ＜0．05，P ＜0．01）。结论胰岛素呈时间和浓度依赖性促 HMCs 细胞增殖；As-IV 对高胰岛素诱导的 HMCs 有保护作用，其作用机制可能与抑制 HMCs 的过度增殖，减少细胞内 ROS 生成，降低 NOX4、p-Akt、p-mTOR蛋白高表达有关。
作者：李贵平；李维祖；段文婷；李卫平 刊期： 2015年第11期
目的：探讨 miRNA-4465的过表达对乳腺癌 MDA-MB-231细胞迁移侵袭能力的影响及机制。方法将 miR-NA-4465的模拟物（minics）转染入 MDA-MB-231细胞，通过实时定量 PCR 检测 miRNA-4465的表达变化；运用 Transwell实验检测转染后细胞迁移和侵袭能力的改变。采用生物信息学技术预测 miRNA-4465的潜在靶基因，并通过荧光报告载体实验及 Western blot 加以证实。结果与阴性对照组相比，转染 miRNA-4465 minics 组 miRNA-4465表达水平明显升高（P ＝0．001）。Transwell 迁移实验结果显示转染 miR-NA-4465 minics 组细胞迁移能力减弱（P ＝0．001）；Transwell侵袭实验结果显示转染 miRNA-4465 minics 组细胞侵袭能力降低（P ＝0．010）。通过生物信息学技术预测了 EZH2为miRNA-4465的潜在靶基因；荧光报告载体实验结果显示转染 miRNA-4465 minics ＋psiCHECK2-EZH23’UTR（野生型）后荧光素酶活性较转染阴性对照序列（NC）＋psiCHECK2-EZH23’UTR（野生型）降低66％（P ＝0．001）。此外将 miR-NA-4465转染入 MDA-MB-231细胞后 EZH2蛋白表达降低。结论 miRNA-4465能降低 MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力，这个过程可能是通过调控 EZH2基因的表达实现的。
作者：骆广涛；王本忠 刊期： 2015年第11期
回顾性分析97例在白光内镜下疑诊为早期食管鳞癌或癌前病变的患者，进行窄带谱成像放大内镜（NBI-ME）检查，行靶向活检，终经内镜下切除或者手术切除确定病灶性质。分析病变的 NBI-ME 的形态特点，并与活检病理、内镜切除或手术切除标本病理进行对照。在97例患者中终确诊为鳞癌35例，高级别上皮内瘤变62例。NBI-ME 诊断为鳞癌或高级别上皮内瘤变的有95例，诊断准确性达97．9％。经过靶向活检，有10例原诊断为低级别上皮内瘤变或炎症的患者被诊断为鳞癌或高级别上皮内瘤变，准确性提高52．6％。而根据乳头内毛细血管袢的形态，对肿瘤浸润深度判断的准确性达到81．4％。
作者：王亚雷；冯慧；孙斌；许建明 刊期： 2015年第11期
目的：检测 Cripto-1蛋白在不同转移潜能的人肝癌细胞株、肝癌及相应癌旁组织中的表达水平，探讨 Cripto-1蛋白的表达与肝癌侵袭转移能力之间的关系。方法采用Western blot 方法检测不同转移潜能的人肝癌细胞株、肝癌及相应癌旁组织中 Cripto-1的蛋白表达水平；采用免疫组织化学染色方法检测肝癌组织中 Cripto-1蛋白的表达并探讨与临床病理参数之间的关系。结果与癌旁肝组织相比，肝癌组织中 Cripto-1的蛋白表达水平明显升高。Cripto-1蛋白在肝癌细胞株中的表达水平与细胞株的侵袭潜能呈正比。与正常肝组织（0％）比较，Cripto-1在肝癌组织（64．6％）中高表达，且与肿瘤分化程度、血管侵犯和转移状态有相关性（P ＜0．05）。结论 Cripto-1蛋白在肝癌中高表达，并且其表达量与肝癌的侵袭转移能力密切相关。
作者：戴帅；李建生；许戈良；荚卫东；马金良；刘文斌 刊期： 2015年第11期
目的：通过探究羟基磷灰石（HAp）壳聚糖（CS）复合微球支架对骨髓间充质干细胞体外生物学行为的影响，评估其作为骨组织工程支架的可行性。方法纳米 HAp 和CS 复合物通过微流体技术自组装成微球支架，显微镜下形态学观察。将 P2代骨髓间充质干细胞（BMSCs）与微球行体外共培养，计算前6 h 黏附率。培养1、3、6、9 d，计算增殖率并用 GraphPad Prism 6软件对数据进行处理；行扫描电镜及共聚焦扫描式显微镜检测，观察细胞黏附及分布。将细胞微球复合物填入自制模具中培养14～21 d，进行形态观察。结果显微镜镜下微球为完整的圆形，大小一致。BMSCs 与微球体外培养6 h，黏附率达90％以上。6 d 时，BMSCs 的增殖率达到高。扫描电镜结果显示微球上有大量 BMSCs 黏附定植并分泌大量胞外基质将微球连接成整体；共聚焦扫描式显微镜结果可见明显的细胞骨架微丝蛋白。细胞微球体外模具培养18 d 后，形成了结构完整的组织块。结论HAp-CS 微球是一种良好的促BMSCs 种子细胞黏附定植的支架材料，是促进细胞生长的有效支撑载体，与共培养细胞形成的复合组织块有望应用于体内动物实验修复标准缺损。
作者：沈丽丽；何家才 刊期： 2015年第11期
目的：探讨鼠白介素6受体融合蛋白（mIL-6RFP）在BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型中对肝细胞的保护作用。方法通过亲和层析方法获得可阻断白介素-6（IL-6）的mIL-6RFP，经人类肝癌细胞（HepG2）IL-6刺激及阻断实验检测纤维蛋白原（fibrinogen，FGG）和结合珠蛋白（haptoglobin， HP）的 mRNA 表达变化，体外验证重组蛋白 mIL-6RFP 的生物活性。建立 BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型，于感染第24天起经尾静脉注射 mIL-6RFP，隔天注射每次100μg／只，感染第42天剖杀小鼠。HE 染色法检测小鼠肝脏肉芽肿面积，荧光定量 PCR 法检测小鼠肝组织 IL-1β、IL-13、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和趋化因子1（CXCL1）的 mRNA 表达，连续监测法检测小鼠肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）。结果 HepG2细胞实验显示 mIL-6RFP 可降低IL-6对该细胞的刺激作用，显著下调 FGG 和 HP 的表达（P＜0．05）。在小鼠感染模型中阻断 IL-6后，肝功能指标 ALT和 AST 与溶剂对照组相比均显著下降（P ＜0．05），肉芽肿病变无显著性差异。结论在 BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型中 mIL-6RFP 可明显改善肝细胞功能，但对肉芽肿形成未见明显作用。
作者：平春光；程海燕；高闻达；计永胜；刘淼；任翠平；邵延靖；华梦晴；沈际佳 刊期： 2015年第11期
自体子宫内膜移植法建立子宫内膜异位症（EMS）模型大鼠，比较给药前后移植物体积、大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、异位内膜中血管内皮生长因子（VEGF）的表达。经定坤丹治疗后移植物体积、血清 TNF-α水平、异位内膜中 VEGF 的表达与疾病模型组相比均明显下降，差异有统计学意义（P ＜0．05）。定坤丹对 EMS 模型大鼠的异位内膜生长有一定的抑制作用，其作用机制可能与血清 TNF-α水平降低和 VEGF 的表达减少有关。
作者：何闰华；王文艳；卫兵 刊期： 2015年第11期
目的：研究观察新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（ATPR）作用于胃癌 SGC-7901细胞后蛋白质的磷酸化情况来了解 ATPR 诱导分化作用的可能机制和作用靶点。方法 ATPR 作用于胃癌 SGC7901细胞48 h 后，收集并提取总蛋白，通过胰蛋白酶酶解，TiO2磁珠法富集磷酸肽，高分辨率液质联用仪器检测磷酸肽，使用 Proteome Discoverer1．2软件寻找差异的蛋白质和磷酸化位点，利用生物信息学网站和 DAVID、KEGG、IPA 软件，分析这些磷酸化蛋白质的功能及亚细胞定位等信息。结果终鉴定出109个蛋白质，其中45个磷酸化蛋白质，共有121个磷酸化位点，差异蛋白中有15个仅出现在 ATPR 组，20个仅出现在正常组。DAVID 分析结果显示差异磷酸化的蛋白质参与调控细胞进程、生物进程、基因表达、细胞的代谢过程等；KEGG分析结果显示差异磷酸化蛋白质主要有参与 ERBB 信号通路、RNA 的转运、内质网蛋白加工过程、p53信号通路等。IPA 软件分析一些差异蛋白质之间的关联蛋白是泛素连接酶（UBC）。结论 ATPR 对胃癌细胞 SGC-7901细胞诱导分化的机制可能是通过作用于多种蛋白质或基因，如肝癌衍生生长因子（HDGF）、钙蛋白酶抑制蛋白（CAST）、ATP 结合盒G 亚族蛋白4（ABCG4）和腺苷酸环化酶关联蛋白1（CAP1）而发挥作用，并通过影响这些蛋白质的磷酸化从而实现 AT-PR 对胃癌细胞的诱导分化作用。
作者：王佳丽；夏泉；陈飞虎；乔文豪；张冬玲 刊期： 2015年第11期
目的：研究蛋白激酶 C 结合蛋白1（PICK1）在小鼠肝纤维及活化的肝星状细胞中的表达变化，并探讨其对人肝星状细胞株（LX-2）活化的影响。方法建立四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化模型，观察 PICK1在肝纤维化过程中的表达变化；转化生长因子β1（TGF-β1）刺激 LX-2活化，West-ern blot 测定 PICK1的蛋白表达情况；转染 PICK1过表达质粒至 LX-2中，再以 TGF-β1诱导活化，Western blot 检测PICK1、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I 型胶原（Col1a1）和Smad2、3及其磷酸化水平的蛋白表达情况。结果正常组小鼠肝脏中 PICK1表达较高，随着肝纤维化的加重，PICK1的表达逐渐递减。TGF-β1诱导活化的 LX-2细胞中 PICK1表达降低。转染 PICK1过表达质粒后，TGF-β1诱导的α-SMA、Colla1的表达明显减少，且 Smad2、3磷酸化水平显著下降。结论 PICK1在纤维化肝组织及活化的 HSC 中表达下调。过表达 PICK1可抑制 TGF-β1诱导的 LX-2活化，可能是通过抑制 TGF-β／Smad 通路而发挥作用，为肝纤维化的防治研究提供了新的思路和靶点。
作者：陈培杰；李俊；黄成；孟晓明；蔡双朋 刊期： 2015年第11期
将局部晚期鼻咽癌患者分为动脉灌注化疗联合放疗（IAC）组和静脉诱导化疗联合放疗（IVC）组。治疗后4周， IAC 组与 IVC 组的完全缓解（CR）率分别为94．0％、70．0％，差异有统计学意义（P ＜0．05）；治疗后12周，IAC 组与 IVC组的 CR 率分别为98．0％、72．0％，差异有统计学意义（P ＜0．05）。两组治疗有效率均为100％，均未发现远处转移病例。两组之间3、4级急性毒副反应发生率比较，差异无统计学意义（P ＞0．05）。因此动脉灌注诱导化疗联合后期同步放化疗疗效可靠、安全。
作者：陈建武；张幸平；刘德鑫；肖丽华；吴敏；苏菁菁；郑建清 刊期： 2015年第11期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
