王佳丽；夏泉；陈飞虎；乔文豪；张冬玲
目的：证明 miR-483-5p 及其靶基因 ERK1参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。方法①体外培养人正常颗粒细胞，调控其 miR-483-5p 超表达，聚合酶链反应（PCR）及Western blot 法检测 ERK1的 mRNA 及蛋白表达情况；将包含野生型或突变型的 ERK1 mRNA 3′UTR 的 DNA 片段克隆在荧光素酶标记的质粒，共转染 miR-483-5p mimics、control-miR mimics 和野生型、突变型重组质粒，检测其颗粒细胞相对荧光素酶活性；②将 miR-483-5p mimics 及 ERK1 siRNAs单独及共同转染颗粒细胞，MTT 法及 TUNEL 法分别检测三种情况下卵巢颗粒细胞的增殖、凋亡情况。结果① miR-483-5p 超表达后，ERK1基因及蛋白表达均下降；与 control-Wt（野生型）转染组相比，miR-483-Wt 组的荧光素酶活性显著降低；miR-483-Mut（突变型）与 control-Mut 转染组间荧光素酶活性的比较差异无统计学意义；② miR-483-5p mimics与 ERK1 siRNAs 单独及共同转染颗粒细胞，三种转染条件下颗粒细胞增殖均显著受抑制、凋亡率显著升高，且三种作用效果差异无统计学意义。结论 miR-483-5p 通过直接与靶基因 ERK1结合，参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。
作者：蒋秀敏；刘雨生；许波 刊期： 2015年第11期
目的：检测 Cripto-1蛋白在不同转移潜能的人肝癌细胞株、肝癌及相应癌旁组织中的表达水平，探讨 Cripto-1蛋白的表达与肝癌侵袭转移能力之间的关系。方法采用Western blot 方法检测不同转移潜能的人肝癌细胞株、肝癌及相应癌旁组织中 Cripto-1的蛋白表达水平；采用免疫组织化学染色方法检测肝癌组织中 Cripto-1蛋白的表达并探讨与临床病理参数之间的关系。结果与癌旁肝组织相比，肝癌组织中 Cripto-1的蛋白表达水平明显升高。Cripto-1蛋白在肝癌细胞株中的表达水平与细胞株的侵袭潜能呈正比。与正常肝组织（0％）比较，Cripto-1在肝癌组织（64．6％）中高表达，且与肿瘤分化程度、血管侵犯和转移状态有相关性（P ＜0．05）。结论 Cripto-1蛋白在肝癌中高表达，并且其表达量与肝癌的侵袭转移能力密切相关。
作者：戴帅；李建生；许戈良；荚卫东；马金良；刘文斌 刊期： 2015年第11期
目的：构建人 RunX2真核表达载体，观察 RunX2对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法运用逆转录 PCR （RT-PCR）扩增、酶切、连接等基因重组技术将人 RunX2基因插入 pcDNA3．1真核表达载体中；并经酶切、PCR、测序鉴定；将构建的 RunX2真核表达载体瞬时转染 MCF-7细胞，利用 Western blot 法检测 RunX2蛋白表达，用 MTT 实验和细胞划痕实验检测其对乳腺癌细胞的生物学影响。结果构建的 RunX2真核表达载体在 MCF-7细胞中高表达 RunX2蛋白；发现高表达 RunX2的 MCF-7细胞活力增加，移动能力增强。结论构建的 RunX2真核表达载体能促进乳腺癌细胞的增殖和迁移。
作者：赵明；范楚玲；郭强；汪思应；李菲菲 刊期： 2015年第11期
目的：探讨青年大学生高血压患者中心动脉收缩压（CSBP）水平及其影响因素。方法分别测量青年大学生高血压患者（148例）及正常对照者（152例）CSBP、外周血压（收缩压、舒张压、平均动脉压），进行一般情况及心理因素等问卷调查，并测定三酰甘油、胆固醇水平等各项指标。结果①青年大学生高血压组及对照组 CSBP 均大于外周收缩压（P ＜0．05），高血压组 CSBP 水平（16．5±0．98）kPa 显著高于对照组（13．9±1．17）kPa（P ＜0．05）。②高血压组和对照组心率、臂围、体重指数（BMI）、运动习惯、高血压家族史、高脂血症家族史、血红细胞、血红蛋白、血糖、三酰甘油差异有统计学意义（P ＜0．05），两组抑郁、焦虑和自尊评分差异无统计学意义。③多因素二分类 Logistic 逐步向前回归分析表明运动、高血压家族史、三酰甘油、血糖和 BMI 与青年大学生外周血压升高密切相关；三酰甘油、血糖、BMI 和高血压家族史与青年大学生 CSBP 升高相关。结论 CSBP水平的升高提示青年高血压患者动脉弹性功能下降。青年大学生高血压主要危险因素是高血压家族史、三酰甘油增高、高血糖、BMI 增高和运动减少，应尽早针对相关危险因素采取预防措施。
作者：唐群；田建伟；王安琪；王新宴；许波；黄丛春 刊期： 2015年第11期
取27只健康成年雌性新西兰大白兔于近前交叉韧带股骨止点处完全离断建立双侧急性前交叉韧带完全损伤模型，随机选择一侧膝关节采用自体半腱肌腱增强缝合残端并牵张技术修复前交叉韧带（L 组），对侧行常规前交叉韧带重建（R 组）。结果显示：术后第3、6、10周，L 组移植物在组织学表现如腱骨界面愈合、细胞增殖、血管再生等方面上均优于 R 组；R 组骨－移植物－骨复合体（骨－移植物－残端复合体）的大载负荷要稍强于 L 组（P ＜0．05）。
作者：邓小文；赵其纯；尚希福；李久源；吴星；李丹；王毅 刊期： 2015年第11期
目的：研究黄芪甲苷（As-IV）对高胰岛素诱导人肾小球系膜细胞（HMCs）损伤的保护作用及其机制。方法以HMCs 为研究对象，用 MTT 法检测不同浓度胰岛素作用不同时间后对 HMCs 增殖的影响，筛选胰岛素的量效与时效关系；实验设正常组、高胰岛素（64 nmol／L）组、二碘苯（DPI 10μmol／L）组、抗氧化剂 Tempol（100μmol／L）组、PI3K／Akt 信号通路抑制剂 LY294002（10μmol／L）组与黄芪甲苷（As-Ⅳ25、50、100μmol／L）组。培养48 h 后，MTT 法检测 HMCs 的细胞增殖状况，DCFH-DA 法测定细胞内活性氧（ROS）含量， Western blot 法检测 NADPH 氧化酶4（NOX4）、磷酸化蛋白激酶 B（p-PKB）（又称 p-Akt）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达的变化。结果随着浓度增加与作用时间延长，胰岛素对 HMCs 增殖有促进作用且有量效与时效关系；与高胰岛素组比较，DPI 组、Tempol 组、LY294002组与 As-IV 25、50、100μmol／L 组均能有效抑制高胰岛素诱导的细胞增殖，减少细胞内 ROS 含量，降低 NOX4、p-Akt、p-mTOR 蛋白的高表达（P ＜0．05，P ＜0．01）。结论胰岛素呈时间和浓度依赖性促 HMCs 细胞增殖；As-IV 对高胰岛素诱导的 HMCs 有保护作用，其作用机制可能与抑制 HMCs 的过度增殖，减少细胞内 ROS 生成，降低 NOX4、p-Akt、p-mTOR蛋白高表达有关。
作者：李贵平；李维祖；段文婷；李卫平 刊期： 2015年第11期
目的：探讨鼠白介素6受体融合蛋白（mIL-6RFP）在BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型中对肝细胞的保护作用。方法通过亲和层析方法获得可阻断白介素-6（IL-6）的mIL-6RFP，经人类肝癌细胞（HepG2）IL-6刺激及阻断实验检测纤维蛋白原（fibrinogen，FGG）和结合珠蛋白（haptoglobin， HP）的 mRNA 表达变化，体外验证重组蛋白 mIL-6RFP 的生物活性。建立 BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型，于感染第24天起经尾静脉注射 mIL-6RFP，隔天注射每次100μg／只，感染第42天剖杀小鼠。HE 染色法检测小鼠肝脏肉芽肿面积，荧光定量 PCR 法检测小鼠肝组织 IL-1β、IL-13、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和趋化因子1（CXCL1）的 mRNA 表达，连续监测法检测小鼠肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）。结果 HepG2细胞实验显示 mIL-6RFP 可降低IL-6对该细胞的刺激作用，显著下调 FGG 和 HP 的表达（P＜0．05）。在小鼠感染模型中阻断 IL-6后，肝功能指标 ALT和 AST 与溶剂对照组相比均显著下降（P ＜0．05），肉芽肿病变无显著性差异。结论在 BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型中 mIL-6RFP 可明显改善肝细胞功能，但对肉芽肿形成未见明显作用。
作者：平春光；程海燕；高闻达；计永胜；刘淼；任翠平；邵延靖；华梦晴；沈际佳 刊期： 2015年第11期
目的：研究观察新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（ATPR）作用于胃癌 SGC-7901细胞后蛋白质的磷酸化情况来了解 ATPR 诱导分化作用的可能机制和作用靶点。方法 ATPR 作用于胃癌 SGC7901细胞48 h 后，收集并提取总蛋白，通过胰蛋白酶酶解，TiO2磁珠法富集磷酸肽，高分辨率液质联用仪器检测磷酸肽，使用 Proteome Discoverer1．2软件寻找差异的蛋白质和磷酸化位点，利用生物信息学网站和 DAVID、KEGG、IPA 软件，分析这些磷酸化蛋白质的功能及亚细胞定位等信息。结果终鉴定出109个蛋白质，其中45个磷酸化蛋白质，共有121个磷酸化位点，差异蛋白中有15个仅出现在 ATPR 组，20个仅出现在正常组。DAVID 分析结果显示差异磷酸化的蛋白质参与调控细胞进程、生物进程、基因表达、细胞的代谢过程等；KEGG分析结果显示差异磷酸化蛋白质主要有参与 ERBB 信号通路、RNA 的转运、内质网蛋白加工过程、p53信号通路等。IPA 软件分析一些差异蛋白质之间的关联蛋白是泛素连接酶（UBC）。结论 ATPR 对胃癌细胞 SGC-7901细胞诱导分化的机制可能是通过作用于多种蛋白质或基因，如肝癌衍生生长因子（HDGF）、钙蛋白酶抑制蛋白（CAST）、ATP 结合盒G 亚族蛋白4（ABCG4）和腺苷酸环化酶关联蛋白1（CAP1）而发挥作用，并通过影响这些蛋白质的磷酸化从而实现 AT-PR 对胃癌细胞的诱导分化作用。
作者：王佳丽；夏泉；陈飞虎；乔文豪；张冬玲 刊期： 2015年第11期
目的：探讨香烟暴露诱导的肺气肿小鼠肺组织中白介素-17A（IL-17A）以及白介素-22（IL-22）的变化以及戒烟、N-乙酰半胱氨酸（NAC）对 IL-17A 和 IL-22的影响。方法采用香烟暴露法建立小鼠肺气肿模型，给予戒烟及 NAC 灌胃干预。采用 ELISA 法检测肺匀浆及肺泡灌洗液（BALF）中IL-17A 和 IL-22浓度。HE 染色观察肺组织病理学变化。结果香烟暴露可使小鼠肺组织发生肺气肿样变化。与正常对照组相比，肺匀浆及 BALF 中，香烟暴露后 IL-17A 及 IL-22水平升高（P ＜0．05）。与香烟暴露组比较，戒烟及 NAC 灌胃后 IL-17A 及 IL-22水平下降（P ＜0．05）。肺匀浆及 BALF中 IL-22与 IL-17A 的比值逐渐降低。结论 IL-17A 及 IL-22与香烟暴露导致的小鼠肺组织中慢性炎症的发生有关。戒烟及 NAC 处理对吸烟导致的 IL-17A 及 IL-22变化有一定干预作用。
作者：冯迪；郭欣；梅晓冬 刊期： 2015年第11期
目的：针对非小细胞肺癌（NSCLC）患者组织标本鼠类肉瘤病毒癌基因同源基因（KRAS）和鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体 B1（BRAF）驱动基因突变使用特异引物双扩增实时蝎形探针扩增阻滞突变系统（sARMS-PCR）检测的可行性；了解 KRAS 和 BRAF 基因突变患者临床病理特征，为NSCLC 患者个体化治疗提供理论依据。方法收集89例NSCLC 患者肿瘤组织甲醛固定石蜡包埋标本（FFPE），采用FFPE 样品 DNA 分离试剂盒（离心柱型）提取 DNA，使用sARMS-PCR 同时进行 KRAS 及 BRAF 基因突变检测。结果① KRAS 基因突变21例（21／89）；其中KRAS 基因7种热点突变中，检出6种热点突变，均位于第12、13位密码子，1例同时检出存在G12D 及G12V 位点突变，1例同时检出存在G12C 及G12V 位点突变；未发现G12S 突变型；② BRAF 基因突变1例（1／89），突变位点为V600E，为女性，黏液腺癌；③未见KRAS 和BRAF 基因同时突变现象。结论临床使用sARMS-PCR 技术检测NSCLC 患者KRAS 和BRAF 基因突变有较强敏感性，且石蜡组织标本取材方便，可以作为两种基因的临床检测方法；KRAS 和BRAF 基因突变与年龄、吸烟史、病理分型等均无明显相关性，KRAS 基因突变与性别相关，男性高于女性；KRAS 与BRAF 基因是独立存在的。
作者：邵璐；侯丹阳；冷再君；徐修才；伍权；操乐杰 刊期： 2015年第11期
目的：研究补体成分 C3及其缺失突变体 C3（1-840）、C3（824-1663）在真核细胞内的表达及与氯离子通道蛋白（CLIC1）的共定位。方法构建 pcDNA3．1-C3-FLAG、pcDNA3．1-C3（1-840）-FLAG、pcDNA3．1-C3（824-1663）-FLAG 三个真核表达质粒（缺失突变体根据 C3的结构域及其裂解断裂位置设计），并分别转染至 HEK 293T 细胞中， Western blot 检测表达情况；上述质粒分别瞬时单转至 COS7细胞和分别与 GFP-CLIC1共转至 COS7细胞内，观察共定位情况。结果成功构建带 FLAG 标签的 C3基因及其两个缺失突变体[C3（1-840）、C3（824-1663）]的真核表达载体， Western blot 结果显示它们在 HEK 293T 细胞中均能成功表达；免疫荧光显示它们在 COS7细胞中均主要分布于细胞质，且三个真核表达载体中只有 C3（824-1663）与 CLIC1有共定位。结论补体 C3及其缺失突变体 C3（1-840）和 C3（824-1663）在 HEK 293T、COS7细胞中均能高效表达，且主要分布在细胞质内，C3（824-1663）与 CLIC1蛋白有共定位。
作者：王二宁；陈丹丹；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2015年第11期
对12例双胎生长不一致同时伴有较小胎儿羊水过少的患儿的超声检查结果进行分析，得出鉴别诊断结论，通过随访部分患者病程进展对诊断结果进行验证。12例病例中超声诊断选择性一胎宫内生长受限（sIUGR）8例，双胎输血综合征（TTTS）3例，1例未做出鉴别诊断。通过对脐带插入点、羊水量、另一胎心血管系统的超声评估和病程随访可以对 TTTS 与 sIUGR 进行鉴别。超声检查对于 TTTS 与 sIUGR的鉴别诊断具有较大的应用价值。
作者：李亮；丛林 刊期： 2015年第11期
回顾性分析97例在白光内镜下疑诊为早期食管鳞癌或癌前病变的患者，进行窄带谱成像放大内镜（NBI-ME）检查，行靶向活检，终经内镜下切除或者手术切除确定病灶性质。分析病变的 NBI-ME 的形态特点，并与活检病理、内镜切除或手术切除标本病理进行对照。在97例患者中终确诊为鳞癌35例，高级别上皮内瘤变62例。NBI-ME 诊断为鳞癌或高级别上皮内瘤变的有95例，诊断准确性达97．9％。经过靶向活检，有10例原诊断为低级别上皮内瘤变或炎症的患者被诊断为鳞癌或高级别上皮内瘤变，准确性提高52．6％。而根据乳头内毛细血管袢的形态，对肿瘤浸润深度判断的准确性达到81．4％。
作者：王亚雷；冯慧；孙斌；许建明 刊期： 2015年第11期
目的：探讨抗霉素 A（AMA）诱导血小板凋亡及其分子机制。方法取健康志愿者单采血小板，离心洗涤得到洗涤血小板，将洗涤血小板与不同浓度的 AMA 孵育后，流式细胞术检测线粒体跨膜电位（ΔΨm）去极化、磷脂酰丝氨酸（PS）暴露、细胞内活性氧（ROS）、线粒体 ROS、P-选择素表达和整合素αⅡbβ3活化；Western blot 法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）的活化。在抑制试验中，先将洗涤血小板与线粒体靶向的 ROS 拮抗剂 Mito-TEMPO 预孵育，然后再与 AMA 孵育，流式细胞术检测相关凋亡指标。结果AMA 剂量依赖性诱导血小板ΔΨm 去极化、PS 暴露、细胞内ROS 和线粒体 ROS 升高以及 Caspase-3活化；但是 AMA 不能诱导血小板活化。线粒体靶向的 ROS 拮抗剂抑制 AMA诱导的血小板ΔΨm 去极化、PS 暴露、Caspase-3活化以及线粒体 ROS 的生成。结论 AMA 能够诱导血小板发生凋亡，线粒体 ROS 可能在 AMA 诱导的血小板凋亡过程中起重要作用。
作者：胡萍；朱永明；谢如锋；王志成 刊期： 2015年第11期
目的：分析试管婴儿的孕妇发生先兆流产的相关影响因素，为预防试管婴儿孕妇发生先兆流产提供科学依据。方法病例组选取因患先兆流产而住院的孕妇87例；对照组均来自于同期做试管婴儿且无先兆流产的孕妇，共92例，调查试管婴儿孕妇先兆流产的影响因素。应用 EpiData3．1数据库及 SPSS 17．0软件进行数据录入及统计分析，分析方法主要包括秩和检验、χ2检验、单因素和多因素条件 Logistic回归分析；并计算各影响因素与先兆流产的关联强度（OR值）及其95％CI。结果单因素分析结果表明：两组研究对象的职业、文化程度、身高、体重、体质指数差异无统计学意义（P ＞0．05）。但年龄差异有统计学意义（P ＜0．05），两组研究对象在不良妊娠史、既往疾病史、不孕类型、不孕年限方面差异无统计学意义（P ＞0．05）；而两组在移植时子宫内膜厚度、移植的胚胎数目、移植胚胎的周期类型、孕妇的焦虑评分显示有统计学意义。多因素条件 Logistic 回归分析结果显示，胚胎移植时子宫内膜的厚度、移植胚胎的周期类型、妊娠期心理压力是先兆流产发生的独立危险因素（OR ＝1．169、0．304、0．898，95％CI 分别为1．005～1．361、0．135～0．683、0854～0．944）。结论移植时子宫内膜厚度、移植胚胎的周期类型、妊娠期心理压力可能是先兆流产发生的独立危险因素。
作者：罗桂英；王蒙蒙；王春艳；强昌华；郑金鑫；潘发明；曹云霞 刊期： 2015年第11期
目的：探讨低剂量 CT 结合自适应统计迭代重建技术在泌尿系结石诊断中的价值。方法使用自动管电流调节技术，对临床怀疑泌尿系结石的41例患者同时进行常规剂量及低剂量 CT 扫描，其中常规组噪声指数（NI）设定为13，低剂量组 NI 设定为25，运用滤过反投影技术（FBP）及自适应统计迭代重建技术（ASIR）对图像进行1．25 mm 层厚重建，由两名放射科医师分别对结石（大小、位置、数目）、图像质量（1～5分）、图像噪声（1～3分）及诊断可信度（1～3分）等几个方面进行评估，记录两组扫描的容积 CT 剂量指数（CTDIvol）、剂量长度乘积（DLP）并计算有效剂量（ED）。采用 Wilcoxon 符号秩和检验及配对 t 检验进行统计学分析。结果低剂量组的平均 ED 为1．76 mSv，常规组的平均 ED为5．98 mSv（P ＜0．05）。低剂量组使用80％ASIR 法处理的图像质量明显高于 FBP 法处理的图像质量（P ＜0．05），而与常规组 FBP 法处理的图像质量大致相仿，差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论结合使用自动管电流调节技术及ASIR，可在保证图像质量的前提下，明显降低 CT 扫描辐射剂量，具有较好的临床可行性。
作者：束宏敏；李小虎；宋建；杜俊华；刘斌；余长亮；钱银锋；李晓舒；张辉；余永强 刊期： 2015年第11期
目的：分析日本血吸虫感染以及虫源性糖蛋白果糖二磷酸醛缩酶（SjFBPA）刺激后小鼠脾脏细胞中白介素4（IL-4）、白细胞分化抗原 CD8a 因子表达量的动态变化，并探讨 SjFBPA 与辅助型 T 细胞（Th2）免疫应答的关系。方法血吸虫尾蚴感染 C57小鼠10只，设正常对照组。感染8周后处死小鼠，取脾脏制备淋巴细胞悬液；用藻红蛋白（PE）标记 CD8a 抗体，藻青蛋白（APC）标记 IL-4抗体进行细胞染色；流式细胞仪检测细胞因子表达量的变化。10只正常 C57小鼠处死后取脾脏制成淋巴细胞悬液，加 SjFBPA 蛋白体外刺激，按上述流程刺激方法检测细胞。结果小鼠感染血吸虫8周后脾细胞中 IL-4、CD8a 的表达量分别为（22．39±5．93）％、（11．34±2．15）％，正常对照组脾细胞中 IL-4、CD8a 的表达量分别为（1．39±0．52）％、（1．98±0．84）％，差异有统计学意义（P ＜0．01）。SjFBPA 体外刺激小鼠脾细胞的 IL-4、CD8a 的表达量分别为（14．14±1．16）％、（8．99±0．81）％，正常对照组脾细胞中 IL-4、CD8a 的表达量分别为（1．86±0．93）％、（1．69±0．56）％，差异有统计学意义（P ＜0．01）。结论 SjFBPA 在血吸虫感染中具有诱导 Th2免疫偏移的作用，树突状细胞作为提呈细胞参与该免疫反应。
作者：胡媛媛；徐元宏；沈继龙；陈鹤 刊期： 2015年第11期
目的：运用基因克隆技术构建人源β1，4-半乳糖转移酶Ⅱ（β4GalTⅡ）真核表达质粒，并将其转染到 COS7细胞中，观察蛋白在细胞内的定位，同时转染到 HEK 293T 细胞中检测其表达。方法分别设计带 FLAG 标签和 GFP 标签的β4GalTⅡ基因的特异性引物，以含人β4GalTⅡ全长 cDNA序列为模板，定向构建到 pcDNA3．1（＋）及 pCDGFP 真核表达载体中，构建重组表达质粒。通过酶切和测序鉴定阳性重组质粒，利用 Lipofectamine 2000分别转染 COS7、HEK 293T细胞，免疫荧光显微镜观察重组蛋白在细胞内的定位，West-ern blot 法鉴定重组蛋白的表达。结果成功构建 pcD-NA3．1-β4GalTⅡ-FLAG 和 pCDGFP-β4GalTⅡ重组表达载体，定位实验表明：β4GalT Ⅱ-FLAG 和 GFP-β4GalT Ⅱ二者在COS7细胞中均主要定位在细胞核周围，并有明显的块状染色，胞核中未见明显分布；Western blot 法检测显示重组β4GalTⅡ蛋白在 HEK 293T 细胞中稳定表达。结论获得了人β4GalTⅡ的真核表达质粒，并能在 COS7和 HEK 293T 细胞中表达，为进一步研究β4GalTⅡ的功能及其与其他蛋白的相互作用奠定了一定基础。
作者：徐雪琴；潘林鑫；耿慧武；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2015年第11期
目的：运用分子克隆技术构建活化蛋白激酶 C 受体1（RACK1）突变体的真核表达质粒，进行 RACK1突变体的表达、定位及其与胞内氯离子通道蛋白1（CLIC1）蛋白的共定位研究，为其进一步的功能研究奠定基础。方法以RACK1全长 cDNA 序列为模板，构建真核表达质粒 pcD-NA3．1-RACK1-N （1-138）-FLAG、pcDNA3．1-RACK1-C （130-317）-FLAG；Western blot 法检测突变体在哺乳动物细胞中的表达；用免疫荧光技术了解突变体蛋白在哺乳动物细胞中的共定位情况。结果成功构建了 RACK1突变体的真核表达质粒；Western blot 法检测到蛋白主要在胞质中表达，核内有部分表达；免疫荧光实验表明，RACK1及突变体蛋白主要定位在胞质与核膜，细胞核中也有少量表达，与 CLIC1蛋白存在共定位。结论成功构建了 RACK1缺失突变体，并在真核细胞中成功表达；RACK1及突变体与 CLIC1蛋白在哺乳动物细胞中均存在不同程度的共定位，蛋白之间可能存在相互作用，为 RACK1蛋白的功能研究奠定了基础。
作者：王蓓华；朱亮亮；刘晓颖；范礼斌 刊期： 2015年第11期
目的：观察超声联合神经刺激仪引导窝坐骨神经、股神经及追加隐神经阻滞后在膝关节以下手术的临床效果，探讨其临床应用的优缺点。方法择期行膝部以下手术患者60例，ASA 分级Ⅰ～Ⅲ级，年龄20～75岁。采用随机数字表法将其分为两组（n ＝30）：A 组超声联合神经刺激仪引导窝坐骨神经、股神经和隐神经阻滞，B 组则仅阻滞窝坐骨神经、股神经。记录阻滞前（T0）、阻滞后10 min（T1）、30 min（T2）、术毕（T3）的收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、心率（HR）；记录神经阻滞完成时间、阻滞起效时间、术中舒芬太尼使用率及术后第1次使用镇痛药时间和患者满意度。结果两组患者年龄、性别、体重、ASA 分级及手术时间比较差异无统计学意义。A 组起效时间较 B 组明显缩短（P ＜0．05）；B 组术中舒芬太尼使用率要明显高于 A 组；且 A 组患者术后第1次使用镇痛药时间较 B 组明显延长（P ＜0．05）；A 组满意度比 B 组显著提高（P ＜0．05）。结论超声联合神经刺激仪引导窝坐骨神经、股神经阻滞应用于膝关节以下手术，定位准确，操作简单，血流动力学稳定且并发症少；若追加隐神经阻滞，则能缩短起效时间，镇痛更加完善，延长术后镇痛时间，患者满意度高，是一种更好的麻醉选择。
作者：谢言虎；周玲；章敏；柴小青 刊期： 2015年第11期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
