孙爱华；周碧蓉
目的：研究非诺贝特改善非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的胰岛素抵抗是否与内质网应激( ERS)有关。方法采用高热量高胆固醇饮食( HCD )建立 NAFLD小鼠模型,非诺贝特40 mg/( kg·d)灌胃治疗2周,葡萄糖耐量试验( GTT)和胰岛素耐量试验( ITT)分析胰岛素抵抗的改善作用,检测血清血脂和丙氨酸氨基转移酶( ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)指标,HE及油红O染色观察肝脏组织的病理学变化,Real-time PCR和Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体α( PPARα)、ERS标志物葡萄糖调节蛋白78( GRP78)和转录因子 GADD153( CHOP )的表达。结果与正常饮食( SCD)组相比,HCD组小鼠胰岛素抵抗明显,血清三酰甘油( TG)、总胆固醇( TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著升高(P<0.01,P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显降低(P<0．01),肝细胞内有大小不等的脂滴形成,可见气球样变的肝细胞及炎性细胞浸润；PPARα、GRP78 mRNA 及蛋白表达显著降低, CHOP mRNA及蛋白表达显著升高。与 HCD 组相比, HCD +非诺贝特( HCF)组小鼠血清TG明显降低( P<0．05),肝细胞脂滴含量、变性肝细胞及浸润的炎细胞明显减少, PPARα、GRP78 mRNA及蛋白表达明显升高,CHOP mRNA及蛋白表达显著降低(P<0．05)。结论非诺贝特有明显的改善NAFLD小鼠胰岛素抵抗、降低TG的作用,这可能与激活PPARα及减轻ERS有关。
作者：沈馨茹；鲁云霞；章秋 刊期： 2014年第06期
目的：探讨阿法替尼(BIBW2992)和吉非替尼分别与培美曲塞联合对肺腺癌细胞 PC-9(突变敏感型)、H1975(T790M耐药型)的增殖和凋亡的影响并阐述其可能机制。方法 MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化,Western blot法检测不同浓度BIBW2992和吉非替尼对细胞胸苷酸合成酶( TS)表达水平的影响。结果BIBW2992、吉非替尼以及培美曲塞单独作用后, PC-9和H1975细胞均明显凋亡,同时细胞增殖受到不同程度抑制。BIBW2992与培美曲塞联合在PC-9、H1975细胞中对细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用较单药组均有明显提高(P <0．05),而吉非替尼与培美曲塞联合仅在PC-9细胞中提高单药对细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用( P <0．05)。BIBW2992在PC-9、H1975细胞中均显著降低TS表达,而吉非替尼在 H1975细胞中无显著抑制作用。结论BIBW2992可以克服T790M突变耐药,并且与培美曲塞联合对PC-9、H1975细胞呈协同增效作用；吉非替尼与培美曲塞联合仅对PC-9细胞具有协同增效作用,可能主要与下调TS表达作用有关。
作者：边劲；王琳；寻琛；黄伟 刊期： 2014年第06期
目的：探讨白芍总苷( TGP)对糖尿病肾脏组织中内质网应激( ERS )的影响。方法50只大鼠随机分为对照组、模型组和TGP给药组[50、100、200 mg/(kg·d)灌胃]。用链脲佐菌素( STZ)诱导大鼠制备糖尿病模型,8周后留取适量肾组织用免疫组织化学法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶(p-PERK)及磷酸化的真核细胞翻译起始因子2α( p-eIF2α)蛋白的表达。结果各TGP给药组大鼠尿白蛋白排泄率( UAER)较模型组明显减少(P<0．01),模型组大鼠UAER水平明显高于对照组(P<0．01)。与对照组相比,模型组大鼠p-PERK在肾小管-间质中的表达以及GRP78、p-eIF2α在肾小球、肾小管-间质中的表达均显著增加( P<0．01)。与模型组相比, TGP各给药组大鼠GRP78、p-PERK在肾小管-间质中的表达以及p-eIF2α在肾小球、肾小管-间质中的表达明显降低(P<0．01)。结论糖尿病大鼠肾脏中ERS反应明显,TGP对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护可能与抑制ERS反应有关。
作者：武晓旭；章超群；许坤；徐兴欣；吴永贵 刊期： 2014年第06期
目的：选用人巨细胞病毒( HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒，诱导其表达，纯化目的蛋白；并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列，设计合理引物；各基因片段用Overlap方法连接，并引入BglⅡ、BamHⅠ酶切位点，使之可通过酶切与质粒pQE-80L连接。重组质粒转化入感受态BL21(DE3)菌株，经PCR、酶切鉴定目的基因后再诱导、表达、纯化，获得目的蛋白，采用Western blot法检测免疫反应性。结果诱导后的重组菌pQE80-L-UL32-UL44-UL83经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE )证实蛋白表达在包涵体。纯化后获得大小约为52 ku的目的蛋白，采用Western blot法检测证实重组嵌合抗原能与HC-MV阳性血清有反应。结论构建了重组嵌合抗原表达质粒，并诱导、表达、纯化获得目的蛋白。 Western blot法鉴定嵌合抗原是HCMV特异性抗原且有免疫反应性。
作者：曾宪聪；汪小五；陈伟；王林定 刊期： 2014年第06期
目的：应用前瞻性随机对照研究,比较R4(第4肋骨表面交感神经主干)交感神经链联合R3(第3肋骨表面交感神经主干)侧枝切断术与单纯R4切断术治疗原发性手汗症( PH)的疗效,以及术后代偿性多汗等并发症,探讨旁路纤维( Kuntz束支)在手汗支配中的作用。方法选择连续就诊的重度手汗症患者120例,依据患者就诊先后次序随机分为A组(施行R4联合R3侧枝切断术)60例、B组(施行单纯R4切断术)60例。术前和术后6个月分别评估患者情况。结果术后6个月随访到患者91例(75．8%),其中A组51例,B组40例。术后6个月,A、B两组双手出现中度出汗分别为1例(1．96%)、3例(7．5%),轻度出汗2例(3．9%)、5例(12．5%),差异有统计学意义(P<0．05)。 A、B两组代偿性出汗分别为30例(58．82%)、31例(77．5%),两组比较差异无统计学意义。结论胸腔镜下胸交感神经链切断术( VATS)治疗手汗症安全、有效,患者满意度较高。在单节段R4切断基础上增加R3侧枝的预防性切除,可增加患者术后手掌效果,更接近于生理状态,且不增加代偿性多汗的发生率。
作者：李彩伟；朱彦君；李玉华；伍青；吴科；张希东；王桂洪 刊期： 2014年第06期
目的：探讨冠状动脉三维可视化系统(V1.02)在冠心病介入诊疗中的应用效果。方法收集冠状动脉慢性完全闭塞病变( CTO)患者121例,根据是否使用三维可视化系统进行经皮冠状动脉介入治疗( PCI)分组,60例为对照组,单独采用冠状动脉介入影像定量分析系统辅助PCI。61例为观察组,结合三维可视化系统( V1．02)辅助PCI。分析比较两组患者介入术成功率,严重并发症发生情况和对医患X线辐射暴露时间的影响。结果观察组和对照组介入成功率分别为88．5%(54/61)和73．3%(44/60),差异有统计学意义(P<0．05)；介入并发症发生率分别为3．3%(2/61)和16．7%(10/60),差异有统计学意义(P<0．05)；手术时间分别为(75．9±9．2) min和(101．5±15．8) min,差异有统计学意义( P<0．01)。结论三维可视化系统( V1．02)应用于CTO介入诊疗中,可以明显提高手术成功率,减少冠状动脉痉挛、血管夹层及血管穿孔破裂等并发症,缩短医患X线辐射暴露时间,值得在临床上进一步推广。
作者：何云；晋军；成小凤；胡建波；何永铭 刊期： 2014年第06期
肾性继发性甲状旁腺功能亢进( SHPT)是慢性肾脏病常见并发症之一，也是影响慢性肾脏病患者预后的重要因素，近年来成为研究热点。目前认为抗衰老蛋白α-Klotho与SHPT关系密切。现综述近年来α-Klotho对钙、磷代谢以及甲状旁腺激素的合成与分泌的影响，旨在进一步阐明α-Klotho蛋白在肾性SHPT发生、发展中的作用，进而为临床诊治提供科学依据。
作者：闫军放(综述)；郝丽；张凌(审校) 刊期： 2014年第06期
选取神经外科住院患者147例为研究对象。利用Sysmex 4000全血细胞分析仪检测患者红细胞分布宽度( RDW)、血红蛋白( Hb)、白细胞计数( WBC)、红细胞平均体积( MCV)等指标,根据患者的各项生理参数和实验室检查结果的进行急性生理功能和慢性健康状况Ⅱ评分(A-PACHE-Ⅱ),同时运用受试者工作特征曲线( ROC曲线)评价RDW对重型颅脑损伤患者住院死亡率的预测价值。重型颅脑损伤患者RDW值随着APACHE Ⅱ评分和患者死亡率的增高而逐渐升高,且3组间RDW值差异有统计学意义(P<0．05)。 ROC曲线分析显示,当RDW和APACHE Ⅱ评分在预测重型颅脑损伤患者住院死亡率时的曲线下面积分别为0．68和0．61,两者联合曲线下面积为0.71。
作者：王宝凤；姚艳丽；杨凯；袁靖中 刊期： 2014年第06期
养,每天取1块培养板用CCK-8检测其吸光度值( OD)。结果 CD45阴性表达,CD29、CD90、CD44阳性表达,3种完全培养基培养的BMSCs的表面标志物在前2代时差别较大,但在P3,P4时差别已较少,P4时均可以获得较纯的BMSCs；细胞周期结果显示,在同一时间点,G0/G1期：A、B、C 3组随着FBS浓度的增加,G0/G1期降低且差异无统计学意义；G2/M期：在培养后的24 h,A、B、C 3组差异有统计学意义( P<0．05,F=12．412),但随着时间的延长,差异消失；S期,3组均无差别；S+G2/M期随FBS浓度的增加而增高。细胞活力结果显示,在24 h时A、B、C 3组的OD值依次增大,差异有统计学意义(P<0．05,F=5．002),随时间的延长3组之间无明显差异。结论这3种培养基在 P4能获得较纯的BMSCs；细胞周期及活力结果显示,3种完全培养基均能促进BMSCs的增长,3组之间不存在差异。体积分数为0．10的FBS已满足BMSCs的分离和扩增,要想在短期内获得较纯的BMSCs,原代培养使用体积分数为0．15,传代用0．10 FBS的完全培养基。
作者：陈小丹；何家才 刊期： 2014年第06期
目的：研究经枕外侧小脑绒球下入路对中血管神经复合体的暴露，为临床面肌痉挛血管减压术提供解剖学参考。方法湿尸头上模拟枕外侧小脑绒球下入路显微手术，选择乳突切迹后下方与后颅凹外下方交界区开窗，并沿乙状窦内下侧视野显微暴露并观察；术毕将骨窗及术野上移，行枕下乙状窦后入路下视野暴露并显微观察。结果①经枕外侧小脑绒球下入路可显露中后部桥小脑角区，充分暴露面听神经；经舌咽神经与小脑绒球间隙可直视中血管神经复合体相关结构，手术减压有效、安全、彻底；②枕下乙状窦后入路暴露中血管神经复合体手术创伤大，暴露角度受限，术中操作困难。结论经枕外侧小脑绒球下入路行面肌痉挛血管减压术视野暴露充分，手术操作安全，减压效果彻底，值得临床推广。
作者：程宏伟；单明；冯春国；李志范；肖瑾；罗靖；张科 刊期： 2014年第06期
目的：研究缬沙坦对人冠脉内皮细胞( HCAEC)氧化应激过程中gp91 Phox的影响。方法对照组：体外贴壁培养HCAEC,不进行其他干预；实验组：相同培养条件下加入缬沙坦(10μmol/L)培养24 h。应用Western blot法和细胞免疫荧光法测定两组细胞中gp91 Phox的水平,对两组结果进行统计分析并比较。结果实验组HCAEC中gp91 Phox的水平明显低于对照组,差异有统计学意义( P<0．01)。结论缬沙坦可以显著减少HCAEC中尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基gp91Phox的表达,从而降低氧化应激水平。
作者：王成；韩卫星；吴继军；刘超；刘晓颖 刊期： 2014年第06期
目的：探讨精神分裂症患者快感缺失与童年创伤经历的关系。方法采用中文版修订社会快感缺失量表(RSAS-C)、中文版修订躯体快感缺失量表(RPAS-C)和童年创伤问卷( CTQ)对198例精神分裂症患者和271例正常健康者进行评估,分析快感缺失与童年创伤间的关系。结果患者组RSAS-C评分(13．32±6．12)、RPAS-C评分(19．04±8．53)、CTQ总分(47．63±13．49)及其各因子分均显著高于正常组(分别为10．40±5．05,16．80±7．89,38．82±10．05),差异有统计学意义( P<0．05)；患者组RSAS-C评分、RPAS-C评分与阳性与阴性症状量表( PANSS)总分及阴性症状分均呈正相关(rs =0．266~0．439,P<0．01)；患者组RSAS-C评分(rs =0．419,P<0．01)和RPAS-C评分(rs =0．322,P<0．01)与CTQ总分呈正相关,控制PANSS总分后,快感缺失评分与童年创伤评分间的相关性仍存在。结论精神分裂症患者快感缺失程度较高,与童年创伤经历之间存在关联,提示早年的创伤经历可能会影响个体对躯体及社会交往快乐的体验能力。
作者：马玉婷；董毅；汪凯；赵菁；王龙；刘勇；张玉；李慧；耿峰；陈学全 刊期： 2014年第06期
目的：探讨血清高迁移率族蛋白B1( HMGB1)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期( AECOPD)、肺炎、肺癌患者中的表达水平及意义。方法按照入组标准纳入AECOPD患者40例,肺炎患者40例,非小细胞肺癌( NSCLC )患者30例,健康对照者30例；抽取AECOPD、肺炎、肺癌患者及健康对照者全血,检测 HMGB1( ELISA法)水平,外周血白细胞(WBC)计数、C-反应蛋白(CRP)水平以及肺癌标志物如癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角质蛋白19片段( CYFRA21-1)等。结果 AECOPD、肺炎、肺癌患者血清HMGB1浓度水平高于健康对照者( P<0．01),直线相关分析显示AECOPD及肺炎患者HMGB1水平与WBC( P=0．008,P=0．002)及CRP(P=0．001, P=0．001)均呈正相关,NSCLC患者血清HMGB1水平与CEA和CYFRA21-1( P=0．036, P=0．008)呈正相关。结论血清HMGB1水平在AECOPD、肺炎、肺癌患者明显升高,提示其可能在呼吸系统炎症性疾病及肺癌发病机制中起重要作用,并对疾病的严重程度有一定的提示。
作者：崔正森；李菡；姜宝珍；张志红 刊期： 2014年第06期
目的：研究乳源抗菌-免疫调节融合肽( AIFP)对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采用MTT法测定AIFP对卵巢癌细胞株SKOV3细胞和原代培养的卵巢癌细胞增殖的影响；流式细胞术测定AIFP对SKOV3细胞和原代卵巢癌细胞凋亡、周期的影响；并用RT-PCR检测 AIFP 对 SKOV3细胞及原代癌细胞凋亡和周期相关基因表达水平的影响,以探讨其可能机制。结果 MTT法显示,AIFP对卵巢癌细胞的增殖具有抑制作用,且具有时间和剂量依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0．05,P<0．01)。流式细胞术检测结果显示,AIFP诱导卵巢癌细胞的凋亡,具有剂量和时间依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0．05,P<0．01)。 RT-PCR结果表明,AIFP可以影响细胞凋亡和细胞周期相关基因(Akt、CDC25C 和cyclinB1)的表达。结论 AIFP 上调卵巢癌细胞凋亡和周期相关基因 Akt、CDC25C和cyclinB1的表达,对卵巢癌细胞株SKOV3具有抑制增殖和促进凋亡的作用。
作者：唐宜桂；李小勤；刘琛；雷婷；秦宜德 刊期： 2014年第06期
44例阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征( OSAHS)患者经可控式阻鼾器干预,分别于干预前、干预后3个月进行多导睡眠监测( PSG )、Epworth 睡眠量表( ESS )及魁北克睡眠问卷( QSQ)简体中文版的信息评价,比较分析干预前、后主客观指标及各评价指标的相关性。OSAHS患者干预前、后3个月比较分析,疗效差异有统计学意义(P<0．05),且主客观评价参数的相关系数绝对值在干预前、后第3个月分别为0．321~0．433和0．306~0．437, OSAHS患者的PSG指标与ESS、QSQ间相关性凸显,差异有统计学意义(P<0．05)。
作者：王岚；刘业海 刊期： 2014年第06期
目的：探讨高脂血症( HL)影响小鼠睾丸睾酮合成机制及辛伐他汀( SIMV)的干预作用。方法18只C57BL/6J雄性小鼠随机均分为3组：HL 组、SIMV 组和正常对照组( CTRL组)；4个月后测血脂、体重；3β-HSD免疫组化法检测睾丸间质细胞； RT-PCR法和Western blot法检测类固醇激素合成急性调节蛋白( StAR)与细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)的表达。结果① HL组和SIMV组体重、总胆固醇( TC )和低密度脂蛋白胆固醇( LDL-C )明显高于CTRL组( P<0．05)；SIMV组体重和TC比HL组显著下降(P<0．05),LDL-C无明显变化。② HL组StAR和P450scc的mRNA与蛋白表达较 CTRL 组显著下调(P <0．05,P <0．01)；SIMV组较HL组则两者表达均升高(P<0．01)。③3β-HSD免疫组化染色显示各组小鼠睾丸间质细胞数差异无统计学意义。结论 SIMV可以改善HL引起的睾丸间质细胞合成睾酮能力下调。
作者：王慧君；吕正梅；戎玉罗；王琦；叶宁宁；程媛媛；张凯 刊期： 2014年第06期
目的：探讨金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)对巨噬细胞自噬的影响,并研究其在巨噬细胞吞噬病原微生物中的作用。方法以小鼠单核巨噬细胞系RAW264．7为研究对象,以磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)为干预药物,空白处理作为对照组,金葡菌感染作为实验组,3-MA干预作为抑制组。金葡菌感染细胞后,Western blot检测自噬蛋白Beclin1、LC3以及吞噬相关蛋白Rac1的表达,激光共聚焦显微镜观察自噬、吞噬现象。结果金葡菌感染RAW264.71 h后,实验组LC3Ⅱ和PI3K蛋白表达强( P<0．05),抑制组Beclin1和LC3Ⅱ表达显著降低(P<0．05),自噬颗粒聚集显著减少( P<0．05), Rac1表达显著降低( P<0．05),同时,RAW264.7吞噬金葡菌数目显著减少(P<0．05)。结论金葡菌诱导的自噬增强了巨噬细胞吞噬能力,自噬抑制剂3-MA抑制PI3K活性的同时,减弱了巨噬细胞自噬吞噬金葡菌的能力。
作者：吕允相；吴惠梅；方磊；刘荣玉 刊期： 2014年第06期
目的：探讨非创伤性股骨头坏死局部组织中Ezrin表达的变化及其临床意义。方法采用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)对38例非创伤性股骨头坏死(实验组)和16例股骨颈骨折(对照组)组织中Ezrin的表达情况进行检测。结果实验组中Ezrin mRNA表达水平低于对照组，差异有统计学意义( P<0．01)。同时非创伤性股骨头坏死中Ezrin表达水平与性别、年龄、体重指数( BMI)、职业及病因无关，但与疾病分期有关。结论 Ezrin可能参与非创伤性股骨头坏死的发病过程，并可能起着重要调控作用。
作者：罗正亮；李旭；尚希福 刊期： 2014年第06期
目的：检测热休克蛋白75( Mortalin)在肝细胞癌中的表达,探讨其与血管生成和上皮间质转化( EMT)的关系。方法收集100例原发性肝癌( HCC)患者的癌组织和癌旁组织及10例正常肝组织,采用免疫组织化学染色、Western blot和qPCR检测Mortalin的表达,分析Mortalin表达与肝癌临床病理特征之间的关系。同时分析100例HCC患者癌组织中Mortalin、波形蛋白( Vimentin)和微血管密度( MVD)的表达情况,判断Mortalin的表达与EMT、肿瘤血管生成之间的关系。结果免疫组织化学显示Mortalin主要表达在细胞质中。肝癌组织中高表达Mortalin的比率是77%,显著高于癌旁组织的19%和正常组织的10%(χ2=67．388,16．669；P<0．01)。 Mortalin的高表达与肝癌Edmondson分级、TNM分期、血管侵犯和淋巴结转移有关(P<0．05)。 Western blot和qPCR检测结果显示肝癌组织中Mortalin相对含量明显高于癌旁和正常组织( P<0．05)。免疫组织化学染色检查显示,肝癌组织中Mortalin的表达与Vimentin的表达存在正相关(r=0．235, P<0．05),而高表达Mortalin的肝癌组织比低表达的有更高的MVD的趋势,但差异无统计学意义( t=1．630, P>0．05)。结论 Mortalin不能促进肝癌血管形成,但可能通过诱导肝癌组织的 EMT而参与肝癌的侵袭和转移。
作者：陈静；李建生；刘文斌；荚卫东；许戈良；马金良；余继海；葛勇胜 刊期： 2014年第06期
目的：探讨天麻素预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤( MIRI)作用的可能机制。方法健康SD大鼠60只,随机分为假手术组,MIRI组,天麻素低、中、高剂量组(0．1、0．2、0．4 g/kg),采用结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法制备MIRI模型,分别测定血清及心肌组织中肿瘤坏死因子-α( TNF-α)和白介素-6( IL-6)的变化以及心肌组织中肌浆网Ca2+-ATP酶( SERCA)的变化。结果0．2、0．4 g/kg 天麻素预处理后,血清及心肌组织中TNF-α和IL-6的含量均降低(P<0．05),心肌组织中SERCA的含量均升高( P<0．01)。结论天麻素预处理减轻大鼠MIRI的机制可能与减少炎症因子TNF-α和IL-6的释放以及增加SERCA含量有关。
作者：位凯；王飞；张瑾；李珍；沈兵；王烈成；孔德虎；胡金兰 刊期： 2014年第06期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
