张倩倩;还锡萍;尹跃平;王小亮;胡海洋;蒋宁;羊海涛;陈祥生;徐晓琴;傅更锋
目的 探讨白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及其联合检测在细菌性血流感染中的诊断价值.方法 采用化学发光方法检测144例细菌性血流感染患者和32例正常健康者的血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平.结果 革兰阴性菌和革兰阳性菌感染组的阳性率显著高于正常对照组(P<0.01);IL-6的敏感性和特异性均高于其他3项指标;4项指标的联合检测率高于单项指标的检测率.结论 IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α是参与细菌性血流感染的重要细胞因子;IL-6的诊断价值高于IL-1β、IL-8、TNF-α;联合检测有助于细菌性血流感染的检测.
作者:张洲;徐元宏;李涛;梁珺 刊期: 2012年第09期
选择肝硬化门静脉高压行断流术患者40例,随机均分为对照组和研究组.对照组术后1~7 d行常规肠外营养(PN),研究组在常规PN的基础上加用丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln).检测两组术前及术后第1、3、5、7天营养状况、肝功能、免疫指标及术后并发症.结果 显示两组患者体重、上臂围、蛋白质、T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、免疫球蛋白IgG、IgM和C反应蛋白差异有统计学意义(P<0.05).肝硬化门静脉高压断流术后行添加Ala-Gln的PN较常规PN更有利于提高机体免疫力,改善营养状况,减轻炎症反应,减少术后并发症,其临床应用是安全有效的.
作者:杨先芬;荚卫东;许戈良;李建生;马金良;葛勇胜;余继海 刊期: 2012年第09期
目的 寻找贲门癌肿瘤标记物并建立诊断模型.筛选提示发生淋巴转移的差异蛋白,为临床早期诊断贲门癌及判断预后提供新方法.方法 CM10蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测101例贲门癌患者及118例正常对照者血清蛋白,Biomarker Wizard 软件和Biomarker Patterns System(BPS)分析得差异蛋白并建立贲门癌诊断分类树,双盲法验证其准确性.进一步分析对比有、无淋巴转移的贲门癌患者血清蛋白指纹图谱,得到差异蛋白.结果 对照分析贲门癌患者和正常对照组的血清蛋白指纹图谱得56个差异蛋白(P<0.05),经BPS软件筛选,以质荷比为5 480.49(P<10-8)的蛋白为主根结点建立贲门癌诊断模型,其灵敏度为95.05%,特异度为95.76%.得到可提示淋巴转移的差异蛋白3 820.87(P<0.05),其灵敏度为84.4%,特异度为82.1%.结论 SELDI-TOF-MS技术可建立有较高灵敏度和特异度的贲门癌诊断模型,筛选出能够提示发生淋巴转移的差异蛋白,有助于贲门癌的早期筛查、诊断和预后判断.
作者:靳小可;杨瑞红;郭素堂;张旭东;胡春松 刊期: 2012年第09期
目的 探讨白细胞介素-10(IL-10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人肝星状细胞(HSC)激活的抑制作用.方法 使用10 ng/ml TNF-α刺激体外培养的HSC,建立HSC激活模型,给予HSC激活模型不同浓度IL-10(2、10、20 ng/ml)作用不同时间(1、2、24、48、72、96 h)后,油红O染色观察细胞脂肪含量,分别用Western blot和RT-PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平.结果 TNF-α刺激后,HSC脂肪含量显著减少,α-SMA和MCP-1表达量水平均随时间延长而升高(P<0.05).联合使用IL-10,α-SMA水平显著下降(P<0.05),且具有浓度依赖性(P<0.05),MCP-1水平亦下降(P<0.05).结论 IL-10可以抑制由TNF-α诱导的HSC激活,在肝脏早期炎症和肝纤维化进程中起保护作用.
作者:夏阳;戴夫;彭琼 刊期: 2012年第09期
目的 了解江苏省暗娼人群艾滋病毒(HIV)和梅毒(TP)新发感染及队列研究中失访人群的特征.方法 采用方便抽样建立暗娼队列,3个月后进行随访.在基线和随访时对每个调查对象进行匿名问卷调查,对随访和失访对象的人口学、行为学和实验室指标进行比较.抽取5 ml静脉血和2支宫颈拭子检测性病(STI)、HIV.结果 本次共调查1 806名暗娼,3个月后随访到737名,随访率为40.8%,HIV和TP血清阳转率分别为0.0/100人年和6.1/100人年;接受的教育程度高、来源的场所档次高、近一年在本地未接受过HIV宣传服务及TP感染者更容易失访.结论 虽然江苏省暗娼人群处于HIV低流行状态,但是TP新发感染率高,失访暗娼感染STI、HIV的危险性高,应更加关注高档场所暗娼的干预工作.
作者:张倩倩;还锡萍;尹跃平;王小亮;胡海洋;蒋宁;羊海涛;陈祥生;徐晓琴;傅更锋 刊期: 2012年第09期
目的 制备抗重组日本血吸虫信号转导蛋白14-3-3(Sj14-3-3)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),建立双抗体夹心ELISA诊断体系(IgY-ELISA),探讨用于日本血吸虫病的诊断价值.方法 利用Sj14-3-3制备并纯化卵黄抗体IgY和兔多克隆IgG抗体;以IgG为捕获抗体,IgY为检测抗体建立双抗体夹心ELISA诊断方法,检测72例急性血吸虫病患者、128例慢性血吸虫病患者、132例正常人、42例肺吸虫患者、60例华支睾吸虫患者和46例钩虫感染者血清.探讨基于IgY的循环抗原检测的应用价值.结果 成功制备并鉴定了抗Sj14-3-3特异性IgY和IgG抗体,建立了双抗体夹心ELISA检测体系;检测急性血吸虫病患者和慢性血吸虫病患者血清的阳性率分别为73.6 %和48.4 %,正常人血清的阴性率为94.7 %;与肺吸虫患者、华支睾吸虫患者、钩虫感染者血清的交叉反应分别为7.1%、6.7%、6.5%.结论 建立了基于IgY的双抗体夹心ELISA检测体系,用于日本血吸虫病患者血清的检测具有较高的敏感性和特异性,可用于日本血吸虫病的辅助诊断.
作者:罗庆礼;周银娣;沈继龙 刊期: 2012年第09期
目的 制备肠出血性大肠埃希菌 O157:H7细菌菌影,在细胞及动物水平对其生物学活性进行初步评价.方法 将包含噬菌体phiX174裂解基因E的重组质粒pLSE转化肠出血性大肠埃希菌O157:H7 EDL933及大肠埃希菌DH5α,42℃诱导制备菌影.利用间接免疫荧光实验观察菌影主要抗原结构,并利用电镜观察菌影对Hep-2细胞的黏附.将菌影免疫小鼠后,采用间接ELISA法检测小鼠特异性抗体,并通过小鼠攻毒实验考察菌影的保护效果.结果 成功构建了重组质粒pLSE,制备出O157:H7及DH5α菌影.O157:H7菌影保留了病原菌的主要外膜抗原,能紧密黏附细胞Hep-2但并不侵入细胞.O157:H7菌影免疫雄性BALB/c小鼠诱导特异性IgG抗体的产生.攻击试验结果显示小鼠对致死剂量O157:H7 EDL933强毒株的保护率达到80%.结论 O157:H7菌影的成功制备及生物学活性的初步析为研制O157:H7菌影疫苗奠定了基础.
作者:黄春艳;蔡昆;王兴;王博;丁晓;裴秀英 刊期: 2012年第09期
分别采用传统组织块法、传统酶消化法和优化组织块法进行新生SD大鼠原代成骨细胞体外分离和培养,并对培养出的细胞予以鉴定和比较.优化组织块法可短期内培养出大量纯度高的成骨细胞,具有典型的形态特征和成骨能力,碱性磷酸酶(ALP)染色、Ⅰ型胶原免疫荧光均呈阳性,ALP检测活性可达92%.该法优于其他两种方法,提供了一种切实可行、操作简单的体外原代成骨细胞培养方法.
作者:陈强;夏天;叶哲伟;宋谋珂 刊期: 2012年第09期
胸腔镜辅助下二尖瓣手术26例(胸腔镜组),同期常规正中开胸二尖瓣手术30例(常规组),两组均无死亡病例,两组术后呼吸机辅助时间、术前左房内径及左室射血分数差异无统计学意义,胸腔镜组主动脉阻断时间及体外循环时间较常规组长(P<0.05),而胸腔镜组术后24 h胸液量明显减少(P<0.05),术后ICU监护时间、住院时间明显缩短(P<0.05),且胸腔镜组术后左房内径及左室射血分数较常规组明显改善(P<0.05),术后肺动脉压力下降也较常规组明显(P<0.05).
作者:鄢琦;葛建军;林敏;周正春;孔祥;王海涛;赵智伟;樊扬名 刊期: 2012年第09期
分别以HC-Ⅱ法及荧光原位杂交(FISH) 法检测109例不同级别宫颈病变患者宫颈脱落细胞中高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及c-myc基因扩增情况,结果显示宫颈脱落细胞中c-myc基因的扩增率、高危型HPV的感染率与宫颈病变程度密切相关,高危型HPV感染和c-myc基因扩增在宫颈癌的发生发展中可能起着协同作用.
作者:丁玉兰;赵卫东;冯定庆;朱园园;金夏;宣恒华;周虎;桂云 刊期: 2012年第09期
目的 研究7,3′-二甲氧基橙皮素(DMHP)对佐剂性关节炎(AA)大鼠免疫功能的影响.方法 弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型,从造模第12天开始灌胃给予DMHP(22、44、88 mg/kg),连续12 d,MTT法检测刀豆蛋白A诱导的脾淋巴细胞增殖反应;酶联免疫吸附法测定脾淋巴细胞产生白介素-2(IL-2)的水平以及腹腔巨噬细胞(PMΦ)分泌的IL-1、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;RT-PCR检测PMΦ IL-1、IL-10、TNF-α mRNA的表达.结果 DMHP(44、88 mg/kg)能明显纠正AA大鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应和脾细胞IL-2的产生;各剂量DMHP能不同程度地从基因和蛋白水平降低AA大鼠PMΦ产生过高的IL-1、TNF-α水平,同时上调AA大鼠PMΦ产生过低的IL-10水平.结论 DMHP体内给药能改善AA大鼠异常免疫功能,恢复细胞因子网络平衡,这可能是其治疗AA大鼠的机制之一.
作者:李荣;李俊;石静波;吴婷妮 刊期: 2012年第09期
目的 探讨肿瘤相关基因RAN多态性与广西人群乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)遗传易感性的相关性.方法 选取位于RAN启动子区rs7132224 和3′非翻译区rs14035两个单核苷酸多态性(SNP)为遗传标记;采用SNPstream对340例HBV相关的HCC和361例对照个体进行基因分型;Logistic 回归分析计算OR和95%CI.结果 ①rs7132224、rs14035和HBV相关HCC遗传易感性相关性评价结果分别为OR=1.43,95%CI=1.04~1.98,P=0.02;OR=1.43,95%CI=0.57~4.11,P=0.40;②对人群进行性别、年龄、吸烟、饮酒状态、一级生物学亲属HCC家族史分层分析,发现rs7132224、rs14035和各亚人群HBV HCC发生均无明显相关性.结论 rs7132224和HBV相关HCC遗传易感性显著相关,而rs14035与HBV相关HCC遗传易感性无显著相关性.rs7132224、rs14035与性别、年龄、饮酒状态、吸烟状态、一级生物学亲属HCC家族史在HBV相关HCC发生风险中无交互作用.
作者:孟金凤;李佩尧;张红星;虞立霞;蔡觅;王志富;夏夏;崔英;谢伟敏;周钢桥 刊期: 2012年第09期
采用气相色谱法(火焰光度检测器)检测血浆中有机磷农药的含硫代谢产物.经过相关的前处理及检测方法的优化后,血浆中有机磷的含硫代谢产物二乙基硫代磷酸酯和二乙基二硫代磷酸酯线性良好,杂质干扰少,回收率分别为92.46%和98.10%,日内精密度分别为0.37%和0.23%.检出限分别为5.0 μg/L和1.0 μg/L.经实际样品分析,证明该分析方法操作简便、准确可靠、灵敏度较高.
作者:金忠秀;许媛媛;储成顶 刊期: 2012年第09期
目的 观察白介素-15(IL-15)对人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖的影响及其可能机制.方法 培养HaCaT细胞,不同剂量IL-15刺激不同时间后,MTT法分析IL-15对HaCaT细胞增殖的影响.Western blot分析IL-15在HaCaT细胞中激活的信号通路:丝裂原蛋白活化激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)和磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT).在IL-15刺激HaCaT细胞前1 h,分别加入MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT信号传导特异性抑制剂(PD98059和LY294002)以阻断IL-15激活的相关信号通路,分析阻断剂对IL-15调控HaCaT细胞增殖的影响.结果 MTT分析结果显示:IL-15显著促进HaCaT细胞增殖,且具有时间及剂量依赖性;信号通路分析揭示IL-15能够增加pERK1/2及pAKT的水平;使用阻断剂的研究显示IL-15部分依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径发挥其促进增殖作用.结论 IL-15部分依赖MAPKs-ERK1/2 和PI3K-AKT信号途径促进HaCaT细胞增殖.
作者:吴德全;罗欣;贾波;程丰伟;张胜权;邓松华 刊期: 2012年第09期
回顾性分析我院行心脏再同步化治疗(CRT)前后心力衰竭患者血清N端脑钠肽(NT-pro-BNP)、基质金属蛋白酶2、9 (MMP- 2、9)水平变化对评价CRT疗效的可行性.采用酶联免疫法(ELISA)检测血清MMP-2、9和NT-pro-BNP水平.结果 表明,CRT组术后3、6个月血清MMP-2、9和NT-pro-BNP水平显著低于术前及对照组(P<0.05).血清MMP-2、9和NT-pro-BNP可以作为评价CRT疗效的生化指标.
作者:李镇;徐健;苏浩;程久佩;邵名亮;方存明 刊期: 2012年第09期
过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α(PGC-1α)是一种介导多种细胞能量代谢和核激素受体的重要因子.PGC-1α可能影响葡萄糖转运体4(GLUT-4)的表达,调节骨骼肌葡萄糖的代谢;PGC-1α调节糖异生关键酶的表达,可导致葡萄糖输出的增加以及维持空腹血糖的稳定;肝糖的输出与胰岛素抵抗的发生、发展过程中也与PGC-1α的表达密不可分;PGC-1α可调节脂质代谢,诱导脂肪细胞分化.通过对PGC-1α与葡萄糖代谢、脂代谢及脂肪细胞分化关系的描述,揭示PGC-1α在代谢性疾病研究和药物研制中的重要意义.
作者:唐芸 刊期: 2012年第09期
目的 观察膝骨关节炎(KOA)患者血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)变化并进行相关性研究.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA) 对60例KOA患者(KOA组)及30例正常对照组血清MMP-3、TIMP-1、白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β(TGF-β)进行检测;采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(Treg)比例;依据KOA严重程度指数(LequesneMG)评分标准将60例KOA患者分为轻、中、重3组,并以60岁为界限将KOA患者分为<60岁组(26例)、≥60岁组(34例),分析KOA患者血清MMP-3、TIMP-1变化及与LequesneMG积分、症状量化积分、国际普适生活质量量表(SF-36)积分、焦虑自评量表(SAS)积分、抑郁自评量表(SDS)积分、红细胞沉降率(ESR)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、IL-1β、TGF-β、CD4+CD25+CD127low/-Treg的相关性.结果 ①与正常对照组比较,KOA组血清MMP-3水平显著升高,TIMP-1水平显著降低(P<0.05).② 重度组血清MMP-3、TIMP-1水平显著高于轻度组及中度组,中度组显著高于轻度组(P<0.05).③ 与<60岁组比较,≥60岁组血清MMP-3、TIMP-1显著升高(P<0.05).④ 相关性分析显示KOA患者血清MMP-3、TIMP-1与LequesneMG积分、SAS积分、ESR、hs-CRP、IL-1β、TGF-β呈正相关,与SF-36各维度积分呈负相关,MMP-3与CD4+CD25+CD127low/-Treg呈负相关(P<0.05).结论 KOA患者血清MMP-3显著升高,TIMP-1显著降低,其表达失调可能参与KOA发病过程.
作者:张金山;程园园;刘健 刊期: 2012年第09期
目的 观察单用胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)抑制剂鬼臼苦素(PPP)或联合表皮生长因子受体抑制剂厄洛替尼对卵巢上皮性癌HO-8910细胞的影响.方法 使用PPP处理HO-8910细胞后,采用SRB法检测细胞的增殖情况;PI染色法检测细胞周期;Annexin-V和PI双染检测细胞凋亡;依据中效原理,使用CombiDrug 软件分析PPP与厄洛替尼的协同作用.结果 PPP可抑制HO-8910细胞增殖,呈现时间剂量依赖性,其抑制作用与诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡相关;PPP联合厄洛替尼较单用PPP或厄洛替尼能显著抑制HO-8910细胞增殖,两者联合具有协同作用.结论 特异性抑制IGF-1R可以抑制卵巢癌细胞生长,诱导其凋亡;在卵巢癌的治疗中,IGF-1R和EGFR可能具有联合靶向治疗价值.
作者:卫爱宁;许荣华;庄雅丽;高萍;任梅;王晓华 刊期: 2012年第09期
目的 探讨肿瘤神经侵犯(PNI)在Ⅱ期直肠癌中预后指导意义.方法 调取194例行直肠癌根治术的Ⅱ期直肠癌患者病理HE染色切片,重新读片,根据HE染色判断PNI情况,并分析其在临床5年无瘤生存率及总生存率的意义.结果 PNI 36(18.5%)例,PNI仅与肿瘤分化程度(P<0.01)及脉管浸润(P=0.02)相关,与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、浸润深度、活检淋巴结数无关.单因素分析显示,浸润深度(P=0.149)、活检淋巴结数(P=0.052)、脉管浸润(P=0.013)、PNI(P<0.001)是5年无瘤生存率的危险预后因素,年龄(P=0.029)、性别(P=0.063)、肿瘤部位(P=0.063)、活检淋巴结数(P=0.028)是5年总生存率的危险预后因素;多因素分析发现活检淋巴结数(P=0.001)是5年总生存率的独立预后因素,PNI(P=0.001)是5年无瘤生存率的独立预后因素.结论 PNI是Ⅱ期直肠癌的无瘤生存时间独立预后因素,PNI可作为Ⅱ期直肠癌预后判断的重要参考.
作者:付大鹏;龚旭晨;孔长青 刊期: 2012年第09期
目的 观察亚硒酸钠对贫铀(DU)气管灌注大鼠免疫损伤的防护作用.方法 225只Wistar大鼠随机分为正常对照组、DU染毒组、DU+低硒组、DU+中硒组、DU+高硒组,每组45只.采用单次气管灌注贫铀悬液500 μg/只染毒,DU+低硒组、DU+中硒组、DU+高硒组自DU染毒前3天灌喂分别给予50、200、500 μg/kg的硒溶液,每天一次直至活杀.分别在气管灌注后第7、14、28天活杀大鼠,分别测定体重、肺铀含量、外周血细胞参数、T淋巴细胞及其亚群、血清免疫球蛋白IgG.结果 DU染毒组大鼠早期体重下降、白细胞数升高、红细胞数、T淋巴细胞总数及免疫球蛋白IgG显著降低;DU+低硒组、DU+中硒组、DU+高硒组各项指标与DU染毒组比较有明显改善.结论 亚硒酸钠对DU气管灌注大鼠免疫损伤有防护作用.
作者:苏翠文;杨陟华;潘秀颉;徐龙;刘坤璐;李若曦;朱茂祥 刊期: 2012年第09期