吕红莉;黄一锦;周东;杜玉凤;赵小燕;梁燕华;权晟;刘琴;吴要群;常小丽;周伏圣;方巧云;沈玉君;高敏;杨森;张学军
目的 探讨转入B7-H3基因鳞癌细胞株的建立及其检测.方法 采用脂质体介导法将已建好的真核表达质粒pEGFP-C1-B7-H3导入人鳞癌细胞Tca8113中(Tca8113/B7-H3), RT-PCR检测B7-H3在该细胞中的表达,Western blot检测其蛋白的表达.经G418筛选后,用有限稀释法建立稳定高表达的带有B7-H3基因的Tca8113鳞癌细胞株.结果 RT-PCR方法检测到目的基因B7-H3的一个215 bp大小的cDNA扩增产物;DAB显色,裂解的Tca8113/B7-H3基因转染细胞膜蛋白中相对分子质量约65~86 ku大小的特异性条带.转染B7-H3的Tca8113细胞,经过细胞传代培养后仍然能够检测到高表达的B7-H3基因,经过有限稀释法建立了Tca8113/B7-H3细胞株.结论 成功建立了Tca8113/B7-H3细胞株,为以后的体内外试验提供了很好的平台,为近一步研究其抗肿瘤作用奠定了基础.
作者:邹多宏;郝艳红;周健;杨宏宇;何家才;王元银;阎旭;李宝金;唐爱发 刊期: 2007年第03期
目的 探讨脑血管病患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平以及叶酸和维生素B12对于血清Hcy水平的影响.方法 采用化学发光法测定165 例脑血管病患者血清Hcy水平,同时以82例健康志愿者为对照组.结果 研究表明,各型脑血管病患者的血清Hcy含量均明显高于对照组(P<0.05),且与脑血管病患者的危险因素高血压、糖尿病、冠心病史无明显相关性;同时发现叶酸、维生素B12可以明显降低患者血清Hcy的水平.讨论 HCY血症与脑血管病发病密切相关,是脑血管病的危险因素.通过早期的干预治疗能够降低血液中的同型半胱氨酸的水平.
作者:刘颖;周农;杨卫民 刊期: 2007年第03期
目的 研究一中国汉族人痒疹样营养不良型大疱性表皮松解症家系的基因突变.方法 采用聚合酶链反应及直接测序的方法对家系中11例患者进行COL7A1基因突变检测,以家系中的16例健康者和100例无亲缘关系的正常人作对照.结果 该家系11名患者的COL7A1基因的87号外显子第6859位碱基鸟嘌呤G被腺嘌呤A替代,家系中健康对照及无亲缘关系的正常人均未发现该突变.结论 甘氨酸替代突变c.6859G>A (p.G2287R) 引起该痒疹样营养不良型大疱性表皮松解症家系发病.
作者:常小丽;袁丞达;刘琴;吴要群;吕红莉;常红芹;王培光;高敏;肖风丽;周伏圣;方巧云;沈玉君;杨森;张学军 刊期: 2007年第03期
目的 探讨采用附加切口的改良滑行皮瓣在口腔颜面部缺损整复中的应用效果.方法 回顾性分析12例颜面和下唇缺损施行改良类H型和类T型滑行皮瓣修复的效果.结果 经随访,12例改良滑行皮瓣整复均获得一期愈合,无皮瓣缺血表现,愈合后局部组织瓣平整,外形效果良好.结论 改良类H型和类T型滑行皮瓣修复颌面部缺损,在一定程度上扩大了滑行皮瓣的覆盖面积,克服了缝合张力大的缺点,是修复颜面部小型缺损特别是下唇缺损理想的邻近皮瓣.
作者:吴晓亮;陈传俊;李志来 刊期: 2007年第03期
目的 研究多发性家族性毛发上皮瘤一家系的CYLD基因突变情况.方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增该家系成员的CYLD基因全部编码外显子及其侧翼序列,并对PCR产物进行序列分析,以100例无亲缘关系的正常人作对照.结果 该家系所有患者均出现CYLD基因c.2711C>T(p.P904L)错义突变,家系中健康对照及无亲缘关系的正常人未发现序列改变.结论 CYLD基因的错义突变c.2711C>T(p.P904L)是该家系患者的致病突变.
作者:吕红莉;黄一锦;周东;杜玉凤;赵小燕;梁燕华;权晟;刘琴;吴要群;常小丽;周伏圣;方巧云;沈玉君;高敏;杨森;张学军 刊期: 2007年第03期
目的 探讨烟碱对人的注意网络的影响.方法 运用注意网络测试,对有吸烟史者和无吸烟史者烟碱摄入前后进行注意网络功能的检查.结果 吸烟史者注意网络检查示烟碱摄入后平均反应时间显著缩短(P<0.05).无吸烟史者注意网络检查示烟碱摄入后执行控制反应时缩短降低(P<0.05).吸烟史组较无吸烟史组在烟碱摄入前平均反应时间显著延长(P<0.05).结论 烟碱(尼古丁)摄入时间的长短对人的执行控制网络和平均反应时的影响是不同的.
作者:谢成娟;杜静;王长青;汪凯 刊期: 2007年第03期
目的 克隆人巨噬细胞金属弹力酶催化域(HMEcd)基因,构建原核表达质粒,在大肠杆菌中表达HMEcd基因融合蛋白.方法 用RT-PCR方法提取人胃癌组织总RNA并扩增出HMEcd cDNA,克隆入pMD18-T载体,构建克隆载体pMD18-T-HMEcd,双酶切鉴定及DNA测序正确后再将HMEcd cDNA亚克隆至pET-28a(+)载体,构建原核表达载体pET-28a(+)-HMEcd,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,并行SDS-PAGE及Western blotting鉴定.结果 RT-PCR获得预期的HMEcd cDNA,双酶切鉴定及DNA测序证实将HMEcd基因分别正确插入克隆载体和原核表达载体中,SDS-PAGE及Western blotting鉴定证实表达出HMEcd融合蛋白.结论 成功表达出HMEcd基因融合蛋白,为进一步功能实验研究奠定基础.
作者:鲍德明;胡乃中;沈际佳;石海;许建明 刊期: 2007年第03期
目的 构建含T7 RNA聚合酶(T7 RNA Polymerase,T7 RNP)的真核表达载体,同时构建含T7启动子、增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein, EGFP)和T7 RNP转录终止信号的载体,并通过观察EGFP的表达推测T7 RNP表达和T7表达系统介导基因转录的功能.方法 根据编码T7 RNP的基因序列,应用PCR技术从含有T7 RNP基因的E.coli BL21(DE3)基因组中扩增编码T7 RNP的基因片段,克隆至载体pcDNA 3.1(+).同时从px8δt载体和pGEM-T easy/EGFP上切下T7 RNP识别的终止信号(terminator,TER)和编码EGFP的基因,克隆至载体pcDNAII.将获得的两个重组质粒共转染BHK细胞.48 h后,通过观察EGFP基因在真核细胞内的表达情况,推测T7 RNP基因的表达及表达后识别T7启动子介导基因转录功能.结果 成功构建了含T7 RNP编码基因的真核表达载体pcDNA 3.1(+)/T7 RNP和原核表达载体pcDNAII/EGFP/TER,共转染BHK细胞后,可观察到EGFP表达的绿色荧光.结论 T7 RNP能顺利在真核细胞内表达,并通过与T7启动子和TER的相互作用,成功实现了EGFP基因的转录和表达.
作者:虞结梅;杨兵;谢灿;陆燕燕;何金生 刊期: 2007年第03期
目的 探讨安达芬联合病毒唑治疗Hunt综合征的临床治疗效果以及影响Hunt综合征预后的因素.方法 选择Hunt综合征患者52例,随机分为两组.一组为对照组,使用病毒唑等常规治疗;另一组在常规治疗的基础上加用安达芬抗病毒治疗.对照组与试验组按照病程时间又各分两组. 结果 对照组与试验组两组疗效差异有显著性(P<0.05);两组病程时间》7 d组与≤7 d组疗效比较差异均有显著性(P<0.05).结论 安达芬联合病毒唑治疗Hunt综合征优于单用病毒唑治疗.病程时间以及病变程度是影响Hunt综合征预后的重要因素.
作者:陈登胜;杨见明;刘业海;段茂利 刊期: 2007年第03期
目的 研究原发性高血压病(essential hypertension,EH)伴左室肥厚(left ventricular hypertrophy,LVH)患者免疫球蛋白及T细胞亚群等指标变化情况.方法 依伴或不伴LVH将62例原发性高血压病患者分为两组,分别进行Ig、C3以及CD3、CD4和CD8水平测定,两组间进行比较.结果 高血压病伴LVH组与高血压不伴LVH组比较CD8水平显著下降(P<0.01),Ig、C3、CD4及CD4/CD8明显升高(分别P<0.001,P<0.01,P<0.01和P<0.001).而IgA、IgM、CD3两组间差异无显著性.结论 原发性高血压病伴LVH患者存在显著的IgG、C3、CD4及CD8水平变化.
作者:刘镜泉;张泓 刊期: 2007年第03期
目的 检测临床分离的葡萄球菌(金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌)对大环内酯类抗生素的耐药性.方法 用琼脂稀释法测定328株葡萄球菌(金葡菌185株,表皮葡萄球菌143株)对红霉素、罗红霉素、阿奇霉素、克林霉素的低抑菌浓度(MIC)值,用D实验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药性.结果 耐甲氧西林金葡菌对红霉素、罗红霉素、阿奇霉素和克林霉素的耐药率分别为90.7%、96.9%、97.9%和84.5%;甲氧西林敏感金葡菌对红霉素、罗红霉素、阿奇霉素和克林霉素的耐药率分别为79.5%、75%、76.1%和72.7%.耐甲氧西林表皮葡萄球菌对红霉素、罗红霉素、阿奇霉素的耐药率均为100.0%,对克林霉素的耐药率为99.1%;甲氧西林敏感表皮葡萄球菌对红霉素的耐药率为94.1%,对罗红霉素、阿奇霉素、克林霉素的耐药率均为97.1%.19株对红霉素耐药、克林霉素敏感的金黄色葡萄球菌,D试验阳性9株(9/19);2株对红霉素耐药、克林霉素敏感的表皮葡萄球菌,D试验均阴性.结论 葡萄球菌对大环内酯类抗菌药物耐药显著,此类药物不宜用于葡萄球菌感染的治疗.
作者:陈莲子;熊自忠;曹鸿霞 刊期: 2007年第03期
目的 探索根治腋臭的微创方法. 方法 通过腋部皮肤组织解剖学观察,设计保留真皮下血管网行顶泌腺体剥脱的手术方法. 结果 随访186例手术患者,疗效:好,177例;一般,7例;差,2例.5例遗留轻度异味,177例皮瓣血运良好,19例皮瓣散在表皮部分坏死,1例皮瓣部分坏死. 结论 保留真皮下血管网腋臭微创腺体剥脱手术是个较好的腋臭根治方法.
作者:杜晓扬;水庆付;褚燕军;陈柯 刊期: 2007年第03期
目的 比较开放与后腹腔镜肾囊肿去顶术的临床价值.方法 对68例开放肾囊肿去顶术和102例后腹腔镜肾囊肿去顶术的临床资料进行比较,统计分析两种术式在手术时间、术中平均出血量、术后住院天数、下床时间、肠蠕动恢复时间等的差别.结果 所有手术均获成功.开放手术组和后腹腔镜组手术时间分别为(71.88±3.57)min、(50.22±1.74)min;术中出血量分别为(53.13±5.12)ml、(17.25±1.22)ml;术后下床时间分别为(95.00±4.17 )h、(39.86±1.74)h;术后住院天数分别为(9.83±0.33)d、(5.21±0.18)d.两组间比较差异有显著性(P<0.01) ;肠蠕动恢复时间分别为(42.75±2.72)h、(36.11±1.73)h,两组间比较差异有显著性( P<0.05).结论 后腹腔镜肾囊肿去顶术在手术时间、术中出血量和术后下床时间、肠蠕动恢复时间等方面明显优于开放手术.
作者:杨勇飞;梁朝朝;郝宗耀;周骏;张贤生;叶元平;刘明;樊松;王克孝 刊期: 2007年第03期
目的 探讨骨巨细胞瘤中血管内皮生长因子(VEGF)和Survivin的表达及其与预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测30例骨巨细胞瘤患者术后肿瘤组织石蜡标本的VEGF和Survivin的表达,并与临床资料进行统计学分析.结果 VEGF和Survivin在骨巨细胞瘤中阳性率为76.7%(23/30)和73.3%(22/30),性别、发病部位及预后各组的VEGF表达差异均无显著性(P>0.05),临床分期组的VEGF表达差异有显著性(P<0.05).性别和发病部位组的Survivin的表达差异均无显著性(P>0.05),临床分期和预后组的Survivin的表达差异有显著性(P<0.05).结论 VEGF 和Survivin与骨巨细胞瘤患者临床分期有关.且Survivin的高表达预示骨巨细胞瘤患者预后不良,其可能作为评价骨巨细胞瘤患者预后的参考指标.
作者:毛庆;卜海富;桂斌捷 刊期: 2007年第03期
目的 研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对D-氨基半乳糖(D-GalN)与细菌脂多糖(LPS)引起小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 建立GalN/LPS引起的小鼠急性肝损伤模型.在GalN与LPS共处理前30 min经腹腔注射给予NAC,于GalN/LPS处理1.5 h后剖杀部分动物取血,测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;GalN/LPS处理8 h后剖杀剩余动物,取血和肝脏,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力和一氧化氮(NO)水平,检测肝脏组织Caspase-3活性与还原性谷胱甘肽(GSH)含量,采用DNA断裂分析方法检测肝脏凋亡,并对部分肝脏进行病理组织学检查.结果 与GalN/LPS处理组比较,NAC预处理组小鼠血清ALT活力、肝脏Caspase-3活性和GSH损耗均显著下降,肝脏组织病理学改变明显改善,DNA断裂分析未见明显凋亡梯度,而NAC对小鼠血清TNF-α含量和NO生成无显著影响.结论 NAC预处理对GalN/LPS引起的小鼠急性肝损伤有保护作用,主要通过其抗凋亡和抗氧化作用.
作者:王华;徐德祥;吕金伟;宁萑;赵磊;陈远华;张程;李祥云 刊期: 2007年第03期
目的 检测中国汉族人毛囊角化病ATP2A2基因突变. 方法 采用聚合酶链反应扩增患者和健康对照个体ATP2A2基因的全部外显子,并进行DNA测序,以100例无亲缘关系的正常人作对照.结果 在3例患者中共发现3个突变,包括2个移码突变(1922insG、2900insT)、1个错义突变(1031G→A),其中1031G→A为重复突变.在100例正常对照中均未发现上述突变.结论 移码突变(1922insG、2900insT)和错义突变(1031G→A)可影响ATP2A2基因转录和翻译产物,从而引起3例患者的发病.
作者:权晟;吕红莉;周伏圣;方巧云;沈玉君;杜文辉;任韵清;孙良丹;高敏;王培光;张学军;杨森 刊期: 2007年第03期
目的 研究一中国汉族人表皮松解性掌跖角化症(EPPK)家系KRT9基因是否发生突变,分析基因型和表型之间的相关性.方法 收集1例EPPK家系,采用聚合酶链反应及直接测序的方法对该家系中6例患者KRT9基因进行突变检测,以家系中的14例健康者和100例无亲缘关系的正常人作对照.结果 家系中6例患者KRT9基因的1号外显子第485位碱基鸟嘌呤G被腺嘌呤A替代,导致第162位的精氨酸被谷氨酰胺取代(R162Q),而家系中14例正常人和家系外100例正常人未发现此突变. 结论 错义突变c.485G>A是导致该家系临床表型的主要原因.
作者:刘琴;吴要群;常小丽;吕红莉;袁丞达;王培光;高敏;周伏圣;沈玉君;杜文辉;方巧云;杨森;张学军 刊期: 2007年第03期
目的 探讨氨茶碱对A549细胞吞噬凋亡嗜酸粒细胞的作用及对白介素(IL)-6 、IL-8分泌的影响.方法 分离纯化人外周血嗜酸粒细胞,48 h自然老化后进行凋亡鉴定,加入到不同浓度的氨茶碱干预后的A549细胞.动态观察A549细胞吞噬凋亡嗜酸粒细胞现象,并对已固定染色的细胞进行吞噬率统计.另将不同浓度的氨茶碱分别干预A549细胞、A549与凋亡的嗜酸粒细胞、A549与脂多糖,收获培养后的上清液,采用放射免疫法检测白细胞介素IL-6和IL-8的浓度.结果 氨茶碱以时间和浓度依赖的方式抑制A549细胞吞噬凋亡的嗜酸粒细胞;氨茶碱抑制脂多糖刺激A549细胞后IL-6、IL-8的分泌且存在浓度依赖关系.结论 氨茶碱抑制A549细胞吞噬凋亡的嗜酸粒细胞,可通过抑制IL-6、IL-8的方式发挥抗炎的作用.
作者:孔翎;汪诚;刘荣玉 刊期: 2007年第03期
目的 研究单核细胞趋化因子-1(MCP-1)与核转录因子-κB(NF-κB)在溃疡性结肠炎(UC)模型中的表达.方法 采用SP免疫组织化学方法对雄性SD大鼠UC模型组及正常对照组各30例标本中MCP-1、NF-κB的表达进行检测.结果 MCP-1主要表达于胞浆, NF-κB主要表达于胞浆及胞核.UC模型组结肠组织中的MCP-1及NF-κB的表达明显高于正常对照组(P<0.001).UC模型组结肠组织中MCP-1与NF-κB的表达呈正相关(r=0.87,P< 0.05).结论 MCP-1与NF-κB在UC结肠组织中的高表达密切相关.两者的高表达在UC发生发展中具有重要作用.
作者:肖梅;吴正祥;王巧民;张道权;叶献词 刊期: 2007年第03期
目的 比较腔内钬激光碎石术与开放手术治疗复杂性输尿管结石的有效性及安全性.方法 将2005年8月~2006年10月收治的复杂性输尿管结石患者72例(84侧)分为两组,其中采用腔内钬激光碎石术治疗39例(47侧),开放手术治疗33例(37侧).比较两组结石排净率、手术时间和术后住院日的差异.结果 钬激光碎石组的手术时间(56.72±15.67)min和术后住院日(4.87±3.05)d均明显短于开放手术组(81.49±20.95)min、(8.12±2.14)d,差异有显著性(P<0.01);两组结石的排净率差异无显著性(P>0.05).结论 腔内钬激光碎石治疗复杂性输尿管结石疗效确切、安全可靠,具有创伤小、手术时间短、术后恢复快等优点,可作为治疗复杂性输尿管结石的首选方法.
作者:苏红;吴兵;亓林;诸禹平;肖峻;黄涛 刊期: 2007年第03期