学术投稿

人巨细胞病毒蚀斑实验条件的优化及在抗病毒物质活性测定中的应用

张俊玲;王明丽

关键词:巨细胞病毒/分离和提纯
摘要:目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)的蚀斑形成实验适工作条件,建立稳定易行的HCMV蚀斑技术,用于HCMV的定量测定及体外抗病毒物质活性测定的研究.方法 HCMV病毒悬液接种至人胚成纤维细胞(HF)单层,37℃吸附1 h,分别用含0.463‰、0.925‰ NaHCO3及0.5%、1%DMSO琼脂糖覆盖,1周后加盖第2层;2周后用0.5%结晶紫染色5 min,计数、计算pfu/ml,采用PCR法对蚀斑培养物进行鉴定;分别用患者血清及HCMV AD169株兔免疫血清进行蚀斑抑制实验,计算中和抗体滴度;蚀斑减少实验测定不同浓度更昔洛韦(GCV)的抗HCMV活性.结果 HCMV对照孔在5 d出斑,蚀斑为圆形、实心、不透明状;两种浓度NaHCO3,对蚀斑形成数量、大小有明显影响且病毒滴度差异有显著性(P<0.05).在含0.463‰ NaHCO3培养孔内,出斑时间提前至3 d;但不同浓度的DMSO对蚀斑数量、大小以及病毒滴度的影响差异无显著性(P>0.05).HCMV患者血清及HCMV AD169株兔免疫血清均可以抑制蚀斑形成.利用蚀斑减少实验测定GCV抗HCMV活性,可在7d内获得结果.结论 HCMV蚀斑形成实验条件经优化后,可以方便稳定地对HCMV进行定量测定以及抗病毒活性物质的筛选和评价.
安徽医科大学学报杂志相关文献
  • 羊下颌骨内置式三焦点牵张成骨的模型建立

    目的 建立三焦点牵张的骨缺损模型,证实内置式三焦点牵张快速、成骨好的优点,为后续的进一步研究建立基础.方法 按照国际牵张器标准自行设计加工的内置式三焦点牵张器,采用普通级实验用羊自身双侧下颌骨对照的方法.牵张固定期结束后处死取下颌骨样本,进行X线影像学和组织学检查.结果 实验羊均存活.X线显示骨缺损处已被修复,组织学HE染色可见骨小梁按牵张方向排列,成骨细胞活跃.结论 内置式三焦点牵张成骨的模型建立是适当可行的,可快速修复骨缺损,且成骨质量良好,这对于进一步的研究有重要的基础作用.

    作者:唐慧;王银龙;周健;何志良 刊期: 2007年第05期

  • 东菱迪芙治疗急性脑梗死的临床观察

    目的 评价东菱迪芙注射液治疗急性脑梗死的临床有效性和安全性.方法 采用随机对照方法,将80例急性脑梗死患者分为东菱迪芙治疗组和对照组.治疗前和治疗后对患者进行神经功能缺损程度评分、临床疗效评定,并测定纤维蛋白原、D-二聚体和纤维蛋白原降解产物等指标.结果 与对照组比较,治疗组患者神经功能缺损评分和生活能力状态的改善差异均有显著性(P<0.05);治疗后纤维蛋白原、纤维蛋白原降解产物、D-二聚体与对照组相比较差异有显著性(P<0.05).结论 东菱迪芙能够降解纤维蛋白原,改善急性脑梗死患者的神经功能缺损和日常生活能力,是一种安全有效的药物.

    作者:王传明;唐黎黎;傅佳 刊期: 2007年第05期

  • 大鼠关节软骨酸敏感离子通道的表达

    目的 探讨大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)的表达及其意义.方法 利用RT-PCR和Western blot检测ASICs在大鼠关节软骨的表达.结果 大鼠关节软骨存在ASIC1a、ASIC2a和ASIC3mRNA及其蛋白的表达.结论 ASICs在大鼠关节软骨组织的表达,其有望成为关节炎治疗的新靶点.

    作者:袁凤来;陈飞虎;李霞;雄志刚;黄学应;刘永靖;吴繁荣;姚莹;张晓明 刊期: 2007年第05期

  • 结肠慢传输型合并出口梗阻型便秘的诊断及手术治疗

    目的 探讨结肠慢传输型合并出口梗阻型便秘的诊断及手术治疗方法.方法 回顾性分析2003~2006年治疗的结肠慢传输型合并出口梗阻型便秘12例患者的临床资料.结果 12例患者经排便造影、结肠传输试验及钡剂灌肠检查确诊,均接受直肠通道矫正手术及部分结肠切除手术,效果良好,症状明显改善.结论 对结肠慢传输型合并出口梗阻型便秘的患者,排便造影、结肠传输试验及钡剂灌肠检查是确诊的方法,直肠通道矫正手术及部分结肠切除术是一种理想的手术方式.

    作者:孙杨忠;李恒爽;徐阿曼 刊期: 2007年第05期

  • 维持性血液透析患者同型半胱氨酸超敏C反应蛋白及肿瘤坏死因子与动脉粥样硬化关系

    目的 探讨维持性血液透析患者同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子与动脉粥样硬化关系.方法 测定40例1年以上透析充分的维持性血液透析(MHD)患者透析前同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血肌酐(Scr)、血尿酸(UA)、血糖(Glu)、血浆白蛋白(ALB)、血甘油三酯(TC)、胆固醇(TC).应用超声测定颈动脉中层厚度(MT)及有无颈动脉斑块形成.结果 IMT增厚和(或)有斑块形成组Hcy、hsCRP、TNF-α明显高于非增厚组,两组之间差异有显著性(P<0.05),而两组在收缩压、脉压、血TC、TG、血糖、血尿酸无统计学差异.结论 血Hcy、hsCRP、TNF-α的升高可以作为MHD患者动脉粥样硬化的独立危险因素.

    作者:丁琼;张守柱;阚明;吴永贵 刊期: 2007年第05期

  • Gi-2αmRNA在人增生性瘢痕肥大细胞中表达及对组胺释放的影响

    目的 探讨G蛋白与增生性瘢痕瘙痒发生的关系及可能的机制.方法 Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化分离肥大细胞,用荧光分光光度法检测G蛋白失活剂NEM对人增生性瘢痕、非增生性瘢痕以及皮肤中肥大细胞释放组胺的影响;RT-PCR法分析P物质(SP)对Gi-2αmRNA表达的影响.结果 ①与对照组比较,SP均明显增强三种组织中肥大细胞分泌组胺的效应,而NEM对其效应有明显的抑制作用.②对照组中,增生性瘢痕肥大细胞中Gi-2αmRNA的表达明显弱于非增生性瘢痕和正常皮肤(P<0.01);SP作用后,Gi-2αmRNA在三种组织中的表达与对照组比较差异无显著性.结论 G蛋白介导了SP刺激人皮肤和瘢痕组织中肥大细胞分泌组胺的效应;Gi-2αmRNA的弱表达可能在增生性瘢痕瘙痒发生中起重要作用.

    作者:赵李平;利天增;祁少海;徐盈斌 刊期: 2007年第05期

  • 罗格列酮保护糖尿病大鼠肾损害及对肾组织MCP-1表达的影响

    目的 观察罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏组织的保护作用及其对尿单核细胞趋化蛋白-1(UMCP-1)排泄和肾组织MCP-1表达的影响.方法 第2、4、8周检测糖尿病大鼠及罗格列酮治疗大鼠正常对照大鼠的尾外周血糖和糖化血红蛋白(HbA1c),第8周时测12h尿白蛋白排泄率(UAER)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)和UMCP-1排泄率,处死大鼠后留取肾脏标本用于逆转录聚合酶链反应半定量测定MCP-1mRNA的含量.结果 ①与正常对照组(C组)比较,与糖尿病组(D组)、与罗格列酮治疗组(R组)第2、4、8周血糖及HbAlc水平均明显升高(P<0.01),而两组间无统计学差异;②第8周,D、R组UAER及URBP、UMCP-1排泄率和肾脏肥大指数均高于C组(P<0.01),R组4项指标较D组明显降低(P<0.01),且UMCP-1排泄率与UAER、URBP排泄率及肾脏肥大指数呈正相关;③与C组相比,D组大鼠肾脏MCP-1mRNA表达明显上调(P<0.01),R组MCP-1mRNA表达也增加(P<0.05)但明显低于D组(P<0.05).结论 罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏具有确切的保护作用,部分可能与其抑制肾脏MCP-1过度表达和排泄有关.

    作者:郑茂;叶山东;陈燕;范爱红;李秀财;杨光伟;王迎新 刊期: 2007年第05期

  • 联机血容量监测联合可调钠透析对维持性血液透析患者血压及容量变化的观察

    目的 利用联机血容量测定及可调钠透析对维持性血液透析患者进行实时血容量监测从而制订个体化透析方案.方法 维持性标准钠透析(SSD)患者40例,根据透析中是否反复出现低血压反应进行分组.并对两组患者施行实时血容量监测.上述两组患者在实时容量监测基础上使用可调钠透析(VSD)并比较不同透析方法相对血容量(△BV)变化域值.结果 易于在超滤过程中反复出现低血压倾向的患者在年龄、透析龄、单次总超滤量及血红蛋白、血浆白蛋白等方面差异均存在显著性(P<0.05).在此基础上进行VSD后,透析中低血压等不适反应减少,具显著统计学意义.两组△BV域值均较SSD时存在差异且具统计学意义.同时发现经3个月VSD后,原有高血压患者血压较治疗前有明显改善.结论 我们的研究表明透析患者原发病、年龄、透析龄、透析间期体重增长程度及营养情况均是影响△BV域值改变的因素.VSD可以改善低血压反应且使△BV域值变化具统计学意义.VSD对原有高血压的患者血压控制较SSD有利.

    作者:肖蓓;阚明;吴永贵 刊期: 2007年第05期

  • 改良单开门加肌蒂移植预防硬膜外瘢痕粘连

    目的 观察改良单开门加肌蒂移植在预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的B超显象.方法 建立硬膜外瘢痕粘连模型,分别进行肉眼瘢痕粘连度评级,HE染色后光镜检查.结果 经B超及病理学检查证实,改良单开门加肌蒂移破植术后硬膜外无明显瘢痕生长,椎管容积无明显变化;改良单开门有部分瘢痕生长;椎板切除术后硬膜外有明显瘢痕生长.结论 用B超探讨对其诊断的可行性进行了试验研究表明,该观测方式是一种简便且价格低廉诊断方法.

    作者:孔晓春;房传武;张建湘;任启光 刊期: 2007年第05期

  • 颊脂垫瓣修复颌面部术后组织缺损及临床应用解剖

    目的 通过对颊脂垫的解剖观察,探讨颊脂垫瓣在口腔邻近组织缺损修复中的应用.方法 将带蒂颊脂垫瓣游离后疝入邻近缺损进行组织修复.结果 所有转移颊脂垫瓣全部成活,3月后全部黏膜化.结论 颊脂垫瓣作为一种可牺牲的组织瓣,其血运丰富、损伤小、操作方法简单、制备容易,在修复其邻近组织缺损中值得推广.

    作者:程继光;王元银;王银龙;何家才;范蓬 刊期: 2007年第05期

  • 右胸腹两切口在中、下段食管癌根治术中的应用

    目的 观察右胸腹两切口、食管-胃右胸顶吻合术治疗中、下段食管癌的近远期疗效,探讨其临床应用价值.方法 对1999年5月~2002年4月间采用右胸腹两切口治疗中、下段食管癌153例,观察吻合口瘘、吻合口狭窄、切缘阳性、淋巴结清扫情况及术后1、3、5年生存率并进行分析.结果 无吻合口瘘、吻合口狭窄发生,吻合口出血2例,清扫淋巴结共计1746个,其中转移淋巴结357个,淋巴结转移率40.5%(62/153),无切缘阳性发生.术后1、3、5年生存率分别为92.1%(140/153)、67.9%(104/153)、49%(76/153).结论 右胸腹两切口具有术野暴露好,吻合确切可靠,肿瘤切除率高,淋巴结清扫彻底,并发症发生率低,不切开膈肌,对呼吸功能影响小等优点,是目前中、下段食管癌较理想的术式.

    作者:马冬春;魏大中;范军;朱晓枫;徐美清;田界勇;郭明发;戎保林;柯立;梅新宇;徐世斌 刊期: 2007年第05期

  • 安徽地区汉族人家族性与散发性肥厚型心肌病MYH7基因18及20号外显子突变分析

    目的 分析安徽地区汉族家族性及散发性肥厚型心肌病(HCM)患者的致病基因β肌球蛋白重链(MYH7)突变位点的异同.方法 对3个家系中8例HCM患者及20例散发的HCM患者进行MYH7基因18及20号外显子扫描,双脱氧末端终止法测序.结果 3个家族性HCM(FHCM)家系8例患者中,有2例患者发现MYH7基因20号及18号外显子发生突变,分别为20号外显子发生Arg723Gly突变;18号外显子发生Arg663His突变;散发的20例HCM患者中,有1例发现MYH7的20号外显子上发生Ile736Thr突变,未发现18号外显子发生突变.结论 MYH7基因中18号、20号外显子突变可能是安徽地区FHCM的常见突变位点之一;散发性HCM(SHCM)可能与FHCM具有相似的发病机制,但与FHCM相比,在MYH7基因中突变率较低.

    作者:冯俊;王爱玲;程自平;徐岩;余元勋;杨春;史学功 刊期: 2007年第05期

  • 乳腺叶状肿瘤的形态学与免疫表型特征

    目的 观察乳腺叶状肿瘤的形态学与免疫表型特征,并探讨其在鉴别诊断中的价值.方法 筛选47例乳腺叶状肿瘤(良性22例、交界性16例、恶性9例)进行HE组织学观察和免疫组化检测(SP法)CD34、smooth muscle actin (SMA)、CD10、p53、Ki67的表达,并选取同期5例正常乳腺、5例腺病和10例纤维腺瘤作为对照.结果 ①28例腺上皮伴有明显的顶浆分泌,20例间质过度增生,10例间质细胞形成袖套状结构,10例上皮下发生黏液样变性,4例间质呈假血管瘤样改变,3例间质血管过度增生似血管瘤样改变,7例间质细胞呈漩涡状、栅栏状排列.②CD34在叶状肿瘤良性、交界性、恶性间质中呈中~强阳性分别为22/22例(100%)、10/16例(62.5%)、0/9例(O%)(P<0.01),CD10呈灶性阳性分别为4/22(18.18%)、14/16(87.5%)、8/9(88.89%)(P<0.01).结论 ①良性、交界性、恶性叶状肿瘤免疫表型的表达存在差异.②CD34、CD10对叶状肿瘤良、恶性鉴别诊断具有较大的参考价值.

    作者:开金云;孟刚 刊期: 2007年第05期

  • 两种大鼠生殖能力及其仔鼠生长发育指标的比较

    目的 比较Wistar大鼠和SD大鼠多项生殖能力及其胚胎/胎仔正常生长发育指标,以期为行为发育毒理学提供基础资料.方法 记录孕鼠生理变化、胚胎生长发育情况及仔鼠生理变化指标,采用修订Fox方案检测神经反射及运动协调功能.结果 发情前期Wistar大鼠受孕率为92.3%,SD大鼠受孕率为89.6%;精子涂片检查阳性大鼠的阴栓形成率则分别为93%(14/15)和100%(17/17);妊娠期孕鼠体重分别增加(114.7±9.5)g和(112.O±14.1)g.获得胚胎生长发育情况、出生后仔鼠生理发育、新生反射和感觉功能及运动协调功能指标.结论 阴栓形成可以作为受孕标志;两种大鼠胚胎/仔鼠的生长发育指标具有较稳定的时相.

    作者:吴源;吴庆四;杨媛媛;冀元棠 刊期: 2007年第05期

  • 吡格列酮对T2DM大鼠肾脏超微结构及NO、CRP水平的影响

    目的 观察吡格列酮(PIO)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏功能、超微结构及炎症因子的影响.方法 建立T2DM SD大鼠模型并随机分为糖尿病(DM)组和PIO组,测定PIO治疗6周前后的各项指标,电镜下观察肾脏结构变化.结果 ①DM组尿白蛋白(UAL)、血C反应蛋白及肾脏肥大指数明显高于正常对照(NC)组及PIO组;PIO组UAL较NC组及治疗前明显升高;②DM组及PIO组血一氧化氮水平明显低于NC组.③PIO组.肾脏超微结构较DM组明显改善.结论 抑制炎症反应可能是PIO保护.肾脏的一个重要机制.

    作者:陈丽;郭延云;章秋;李俊 刊期: 2007年第05期

  • 原发性胃淋巴瘤的临床诊断和外科治疗

    目的 探讨原发性胃淋巴瘤的诊断及治疗方法.方法 对34例原发性胃淋巴瘤的临床资料进行回顾性的分析.33例行手术治疗,其中D1根治术8例,D2根治术14例,全胃切除术者6例,姑息性切除术者3例,剖腹探查术者2例.结果 肿瘤φ<5 cm、低度恶性、病理ⅠE期和ⅡE期及采用根治术治疗,分别较肿瘤φ≥5 cm、高度恶性、病理ⅢE、ⅣE期及部分切除术治疗的原发性胃淋巴瘤患者预后好.结论 原发性胃淋巴瘤的术前诊断主要依靠胃镜检查.手术治疗和术后辅助化疗是治疗原发性胃淋巴瘤的重要手段.

    作者:蔡兆辉;于东风;刘弋 刊期: 2007年第05期

  • ICP患者外周血单个核细胞Th1及Th2细胞变化

    目的 研究妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者Th1和Th2型细胞免疫反应的变化,从免疫学角度探讨ICP发病机制.方法 采用流式细胞术,分别检测了20例重度ICP患者与20例正常晚期妊娠妇女的外周血单个核细胞和T细胞中Th1和Th2细胞所占的比例.结果 重度ICP组外周血单个核细胞中IFN-γ+细胞比例为17.82%±3.43%,明显高于正常晚期妊娠组12.66%±2.34%(P,<0.01),而IL-4所占的比例为1.17%±0.26%,低于正常晚期妊娠组1.37%±0.30%,差异有显著性(P<0.05);重度ICP组PB-MC中细胞因子Th1/Th2比率为16.00±4.66,显著高于正常晚期妊娠组9.89±2.82(P<0.01);重度ICP组外周血中T细胞分泌的Th1细胞比例为14.37%±1.38%,明显高于正常晚期妊娠组10.66%±1.18%(P<0.01),而Th2细胞比例1.05%±0.19%,低于正常晚期妊娠组1.24%±0.29%,差异有显著性(P<0.01);重度ICP组T细胞Th1/Th2比率为13.99±2.46,显著高于正常晚期妊娠组8.94±1.84(P<0.01).结论 重度ICP患者与正常晚期妊娠妇女比较,其体内表现为Th1型免疫反应增强,而Th2型免疫反应减弱.体内Th1/Th2细胞平衡紊乱可能与妊娠期肝内胆汁淤积症发生相关.

    作者:肖敏;凌斌;姚风球;周颖;赵卫东;陈铮铮;程志祥;沈国栋;高宗侠 刊期: 2007年第05期

  • PMA和PD98059对全反式维甲酸抑制HepG2细胞表达OPN的影响

    目的 研究佛波醇酯(PMA)和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059对全反式维甲酸(ATRA)体外抑制人肝癌细胞株(HepG2)表达骨桥蛋白(OPN)的影响及其机制的初步探讨.方法 PMA、PD98059分别处理经ATRA处理的肝癌细胞HepG2,光镜下观察细胞形态,Western blot检测骨桥蛋白(OPN)、ERK1/2表达及其磷酸化变化,Image Pro软件分析各条带灰度值变化并做统计学分析.结果 在ATRA显著抑制肝癌细胞表达OPN并诱导细胞分化的基础上,PMA可刺激OPN表达,这种作用可被PD98059明显抑制.结论 激活ERK1/2通路可逆转ATRA抑制HepG2表达OPN的作用.

    作者:何苇;谢斌;张玲;左莉;胡若磊;张素梅;朱华庆;程筱雯;周青;桂淑玉;汪渊 刊期: 2007年第05期

  • Duckett术在治疗尿道下裂中的应用

    目的 观察Duckett术治疗尿道下裂的疗效,并探讨提高疗效的措施.方法 2年来采用Duckett术治疗尿道下裂患者40例,平均5.3岁.冠状沟型14例,阴茎体型16例,阴茎阴囊型6例,阴囊型4例.结果 一次手术成功率75%.结论 在掌握好适应证和手术技巧以及较完善的术前准备和术后处理的条件下,Ducker术一期治疗尿道下裂疗效较满意.

    作者:范登信;张祖明;苏红;周林玉 刊期: 2007年第05期

  • 乙醇性脂肪肝模型大鼠肝脏G蛋白表达水平的变化

    目的 探讨乙醇联合高脂饮食诱导大鼠肝脏早期脂肪变性的可能机制.方法 高脂饮食配合乙醇灌胃,连续6周,制备大鼠脂肪肝模型.6周末取血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDI-C);制备石蜡及冰冻切片,进行肝脏病理学检查.Western blot分析各组大鼠肝脏组织中抑制型G蛋白α1(Cαill)、抑制型G蛋白α2(Gai2)、抑制型G蛋白α3(Gα3)、刺激型G蛋白(Gαs)表达水平的改变.结果 乙醇联合高脂饮食条件下大鼠血清ALT、AST、TG、TC明显升高且伴有HDL-C的显著下降;Oil Red O(油红O)染色结果显示乙醇联合高脂饮食组大鼠肝脏脂肪变明显;模型组大鼠肝组织中的Gαil、Gαi2、Gαs表达明显下降,Gαi3的表达水平在模型组中呈增高趋势.结论 乙醇联合高脂饮食能够进一步诱导大鼠肝脏的脂肪变性,病变程度与乙醇剂量呈正相关,其发病机制可能和G蛋白介导的信号传导通路的改变密切相关.

    作者:胡超杰;江志奎;刘超;何苇;陈孝宇;张素梅;朱华庆;周青;汪渊 刊期: 2007年第05期

安徽医科大学学报杂志

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主管:安徽省教育厅

主办:安徽医科大学