李小元;陈先文;徐仿成;胡慧敏;王烈成
目的 构建人蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)真核表达载体pcDNA3.1-hPTP1B并在猴肾成纤维细胞COS-7中稳定表达,分离纯化表达的重组融合蛋白,进行酶活性测定及抑制剂的初步实验.方法 应用RT-PCR从2型糖尿病患者的外周血总RNA中扩增出PTP1B cDNA全长序列,并在基因上下游分别引入BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ两个酶切位点,酶切后定向导入pcDNA3.1/Hismyc-B多克隆位点,构建真核表达载体pcDNA3.1-hPTP1B,转染COS-7细胞,G-418筛选2周后取细胞裂解上清液经Ni2+亲和层析柱纯化后,测定了其酶活性及小分子抑制剂钒酸钠的IC50.结果 从2型糖尿病患者外周血中扩增得到1 301 bpPTB1B cDNA全长序列,经双酶切鉴定及测序分析,表明hPTP1B已克隆到poDNA3.1/Hismyc-B中.RT-PCR和免疫印迹表明转染成功.酶活性实验初步显示rhPTP1B的活性随酶浓度增加而增加,随PTP1B的特异性抑制剂钒酸钠的浓度增加而减少.结论 获得具有酶活性的融合蛋白rhPTP1B,为进一步筛选其特异性抑制剂奠定基础.
作者:张吕钊;鲁云霞;李俊 刊期: 2007年第05期
目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)的蚀斑形成实验适工作条件,建立稳定易行的HCMV蚀斑技术,用于HCMV的定量测定及体外抗病毒物质活性测定的研究.方法 HCMV病毒悬液接种至人胚成纤维细胞(HF)单层,37℃吸附1 h,分别用含0.463‰、0.925‰ NaHCO3及0.5%、1%DMSO琼脂糖覆盖,1周后加盖第2层;2周后用0.5%结晶紫染色5 min,计数、计算pfu/ml,采用PCR法对蚀斑培养物进行鉴定;分别用患者血清及HCMV AD169株兔免疫血清进行蚀斑抑制实验,计算中和抗体滴度;蚀斑减少实验测定不同浓度更昔洛韦(GCV)的抗HCMV活性.结果 HCMV对照孔在5 d出斑,蚀斑为圆形、实心、不透明状;两种浓度NaHCO3,对蚀斑形成数量、大小有明显影响且病毒滴度差异有显著性(P<0.05).在含0.463‰ NaHCO3培养孔内,出斑时间提前至3 d;但不同浓度的DMSO对蚀斑数量、大小以及病毒滴度的影响差异无显著性(P>0.05).HCMV患者血清及HCMV AD169株兔免疫血清均可以抑制蚀斑形成.利用蚀斑减少实验测定GCV抗HCMV活性,可在7d内获得结果.结论 HCMV蚀斑形成实验条件经优化后,可以方便稳定地对HCMV进行定量测定以及抗病毒活性物质的筛选和评价.
作者:张俊玲;王明丽 刊期: 2007年第05期
目的 观察罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏组织的保护作用及其对尿单核细胞趋化蛋白-1(UMCP-1)排泄和肾组织MCP-1表达的影响.方法 第2、4、8周检测糖尿病大鼠及罗格列酮治疗大鼠正常对照大鼠的尾外周血糖和糖化血红蛋白(HbA1c),第8周时测12h尿白蛋白排泄率(UAER)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)和UMCP-1排泄率,处死大鼠后留取肾脏标本用于逆转录聚合酶链反应半定量测定MCP-1mRNA的含量.结果 ①与正常对照组(C组)比较,与糖尿病组(D组)、与罗格列酮治疗组(R组)第2、4、8周血糖及HbAlc水平均明显升高(P<0.01),而两组间无统计学差异;②第8周,D、R组UAER及URBP、UMCP-1排泄率和肾脏肥大指数均高于C组(P<0.01),R组4项指标较D组明显降低(P<0.01),且UMCP-1排泄率与UAER、URBP排泄率及肾脏肥大指数呈正相关;③与C组相比,D组大鼠肾脏MCP-1mRNA表达明显上调(P<0.01),R组MCP-1mRNA表达也增加(P<0.05)但明显低于D组(P<0.05).结论 罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏具有确切的保护作用,部分可能与其抑制肾脏MCP-1过度表达和排泄有关.
作者:郑茂;叶山东;陈燕;范爱红;李秀财;杨光伟;王迎新 刊期: 2007年第05期
目的 观察右胸腹两切口、食管-胃右胸顶吻合术治疗中、下段食管癌的近远期疗效,探讨其临床应用价值.方法 对1999年5月~2002年4月间采用右胸腹两切口治疗中、下段食管癌153例,观察吻合口瘘、吻合口狭窄、切缘阳性、淋巴结清扫情况及术后1、3、5年生存率并进行分析.结果 无吻合口瘘、吻合口狭窄发生,吻合口出血2例,清扫淋巴结共计1746个,其中转移淋巴结357个,淋巴结转移率40.5%(62/153),无切缘阳性发生.术后1、3、5年生存率分别为92.1%(140/153)、67.9%(104/153)、49%(76/153).结论 右胸腹两切口具有术野暴露好,吻合确切可靠,肿瘤切除率高,淋巴结清扫彻底,并发症发生率低,不切开膈肌,对呼吸功能影响小等优点,是目前中、下段食管癌较理想的术式.
作者:马冬春;魏大中;范军;朱晓枫;徐美清;田界勇;郭明发;戎保林;柯立;梅新宇;徐世斌 刊期: 2007年第05期
目的 探讨原发性胃淋巴瘤的诊断及治疗方法.方法 对34例原发性胃淋巴瘤的临床资料进行回顾性的分析.33例行手术治疗,其中D1根治术8例,D2根治术14例,全胃切除术者6例,姑息性切除术者3例,剖腹探查术者2例.结果 肿瘤φ<5 cm、低度恶性、病理ⅠE期和ⅡE期及采用根治术治疗,分别较肿瘤φ≥5 cm、高度恶性、病理ⅢE、ⅣE期及部分切除术治疗的原发性胃淋巴瘤患者预后好.结论 原发性胃淋巴瘤的术前诊断主要依靠胃镜检查.手术治疗和术后辅助化疗是治疗原发性胃淋巴瘤的重要手段.
作者:蔡兆辉;于东风;刘弋 刊期: 2007年第05期
目的 观察Duckett术治疗尿道下裂的疗效,并探讨提高疗效的措施.方法 2年来采用Duckett术治疗尿道下裂患者40例,平均5.3岁.冠状沟型14例,阴茎体型16例,阴茎阴囊型6例,阴囊型4例.结果 一次手术成功率75%.结论 在掌握好适应证和手术技巧以及较完善的术前准备和术后处理的条件下,Ducker术一期治疗尿道下裂疗效较满意.
作者:范登信;张祖明;苏红;周林玉 刊期: 2007年第05期
目的 建立从陈皮中提取橙皮苷(HDN)的方法并观察HDN抗炎作用.方法 采用碱提酸沉法从陈皮中提取HDN,经D-101大孔树脂纯化,用高效液相色谱仪(1-HPLC)测定含量;采用4种炎症模型(二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶诱导大鼠足肿胀、棉球诱导大鼠肉芽肿和大鼠佐剂性关节炎)观察HDN的抗炎作用.结果 HDN提取率4.2%,含量96.7%;HDN能显著抑制小鼠耳肿胀,并对大鼠角叉菜胶足肿胀、棉球肉芽肿及佐剂性关节炎均呈剂量依赖性抑制作用.结论 碱提酸沉法简便、可行,可用于HDN的提取;实验结果表明HDN具有较强的抗炎作用.
作者:李荣;胡成穆;姜辉;张茜;李俊 刊期: 2007年第05期
目的 探讨先天性外耳、中耳畸形Ⅰ期成型术的临床疗效.方法 回顾性分析2000年1月~2007年1月我科收治的28例(31耳)先天性外耳、中耳畸形Ⅰ期成型术病例.所有病例术前均行颞骨高分辨率CT(HRCT)扫描和听力检查,术中均采用鼓窦径路重建外耳道和鼓室成形术,并利用自体肋软骨行Ⅰ期全耳廓再造术.结果 听力重建28例(31耳),术后1月听力均有提高,术后语言频率平均听力提高25 dB以上;术后随访6月~5年的19例(21耳),其中术后语言频率平均听力提高20~40 dB 11耳,>40 dB 2耳,8耳无明显改善.再造耳廓全部成活,有较好的外观.外耳道成形28例(31耳)中,外耳道狭窄2耳,外听道再闭锁者1耳,均经及时处理得到缓解.所有病例均没有出现面瘫及迷路漏等并发症.结论 先天性外耳、中耳畸形Ⅰ期成型术临床疗效较好,缩短了住院时间,减少了患者的痛苦和经济费用,可作为治疗该类疾病的有效方法.
作者:卢智慧;张文继;吴开乐;赵益;陶冶 刊期: 2007年第05期
目的 观察改良单开门加肌蒂移植在预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的B超显象.方法 建立硬膜外瘢痕粘连模型,分别进行肉眼瘢痕粘连度评级,HE染色后光镜检查.结果 经B超及病理学检查证实,改良单开门加肌蒂移破植术后硬膜外无明显瘢痕生长,椎管容积无明显变化;改良单开门有部分瘢痕生长;椎板切除术后硬膜外有明显瘢痕生长.结论 用B超探讨对其诊断的可行性进行了试验研究表明,该观测方式是一种简便且价格低廉诊断方法.
作者:孔晓春;房传武;张建湘;任启光 刊期: 2007年第05期
目的 分析安徽地区汉族家族性及散发性肥厚型心肌病(HCM)患者的致病基因β肌球蛋白重链(MYH7)突变位点的异同.方法 对3个家系中8例HCM患者及20例散发的HCM患者进行MYH7基因18及20号外显子扫描,双脱氧末端终止法测序.结果 3个家族性HCM(FHCM)家系8例患者中,有2例患者发现MYH7基因20号及18号外显子发生突变,分别为20号外显子发生Arg723Gly突变;18号外显子发生Arg663His突变;散发的20例HCM患者中,有1例发现MYH7的20号外显子上发生Ile736Thr突变,未发现18号外显子发生突变.结论 MYH7基因中18号、20号外显子突变可能是安徽地区FHCM的常见突变位点之一;散发性HCM(SHCM)可能与FHCM具有相似的发病机制,但与FHCM相比,在MYH7基因中突变率较低.
作者:冯俊;王爱玲;程自平;徐岩;余元勋;杨春;史学功 刊期: 2007年第05期
目的 研究妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者Th1和Th2型细胞免疫反应的变化,从免疫学角度探讨ICP发病机制.方法 采用流式细胞术,分别检测了20例重度ICP患者与20例正常晚期妊娠妇女的外周血单个核细胞和T细胞中Th1和Th2细胞所占的比例.结果 重度ICP组外周血单个核细胞中IFN-γ+细胞比例为17.82%±3.43%,明显高于正常晚期妊娠组12.66%±2.34%(P,<0.01),而IL-4所占的比例为1.17%±0.26%,低于正常晚期妊娠组1.37%±0.30%,差异有显著性(P<0.05);重度ICP组PB-MC中细胞因子Th1/Th2比率为16.00±4.66,显著高于正常晚期妊娠组9.89±2.82(P<0.01);重度ICP组外周血中T细胞分泌的Th1细胞比例为14.37%±1.38%,明显高于正常晚期妊娠组10.66%±1.18%(P<0.01),而Th2细胞比例1.05%±0.19%,低于正常晚期妊娠组1.24%±0.29%,差异有显著性(P<0.01);重度ICP组T细胞Th1/Th2比率为13.99±2.46,显著高于正常晚期妊娠组8.94±1.84(P<0.01).结论 重度ICP患者与正常晚期妊娠妇女比较,其体内表现为Th1型免疫反应增强,而Th2型免疫反应减弱.体内Th1/Th2细胞平衡紊乱可能与妊娠期肝内胆汁淤积症发生相关.
作者:肖敏;凌斌;姚风球;周颖;赵卫东;陈铮铮;程志祥;沈国栋;高宗侠 刊期: 2007年第05期
目的 探讨G蛋白与增生性瘢痕瘙痒发生的关系及可能的机制.方法 Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化分离肥大细胞,用荧光分光光度法检测G蛋白失活剂NEM对人增生性瘢痕、非增生性瘢痕以及皮肤中肥大细胞释放组胺的影响;RT-PCR法分析P物质(SP)对Gi-2αmRNA表达的影响.结果 ①与对照组比较,SP均明显增强三种组织中肥大细胞分泌组胺的效应,而NEM对其效应有明显的抑制作用.②对照组中,增生性瘢痕肥大细胞中Gi-2αmRNA的表达明显弱于非增生性瘢痕和正常皮肤(P<0.01);SP作用后,Gi-2αmRNA在三种组织中的表达与对照组比较差异无显著性.结论 G蛋白介导了SP刺激人皮肤和瘢痕组织中肥大细胞分泌组胺的效应;Gi-2αmRNA的弱表达可能在增生性瘢痕瘙痒发生中起重要作用.
作者:赵李平;利天增;祁少海;徐盈斌 刊期: 2007年第05期
目的 观察吡格列酮(PIO)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏功能、超微结构及炎症因子的影响.方法 建立T2DM SD大鼠模型并随机分为糖尿病(DM)组和PIO组,测定PIO治疗6周前后的各项指标,电镜下观察肾脏结构变化.结果 ①DM组尿白蛋白(UAL)、血C反应蛋白及肾脏肥大指数明显高于正常对照(NC)组及PIO组;PIO组UAL较NC组及治疗前明显升高;②DM组及PIO组血一氧化氮水平明显低于NC组.③PIO组.肾脏超微结构较DM组明显改善.结论 抑制炎症反应可能是PIO保护.肾脏的一个重要机制.
作者:陈丽;郭延云;章秋;李俊 刊期: 2007年第05期
目的 研究佛波醇酯(PMA)和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059对全反式维甲酸(ATRA)体外抑制人肝癌细胞株(HepG2)表达骨桥蛋白(OPN)的影响及其机制的初步探讨.方法 PMA、PD98059分别处理经ATRA处理的肝癌细胞HepG2,光镜下观察细胞形态,Western blot检测骨桥蛋白(OPN)、ERK1/2表达及其磷酸化变化,Image Pro软件分析各条带灰度值变化并做统计学分析.结果 在ATRA显著抑制肝癌细胞表达OPN并诱导细胞分化的基础上,PMA可刺激OPN表达,这种作用可被PD98059明显抑制.结论 激活ERK1/2通路可逆转ATRA抑制HepG2表达OPN的作用.
作者:何苇;谢斌;张玲;左莉;胡若磊;张素梅;朱华庆;程筱雯;周青;桂淑玉;汪渊 刊期: 2007年第05期
目的 探讨结肠慢传输型合并出口梗阻型便秘的诊断及手术治疗方法.方法 回顾性分析2003~2006年治疗的结肠慢传输型合并出口梗阻型便秘12例患者的临床资料.结果 12例患者经排便造影、结肠传输试验及钡剂灌肠检查确诊,均接受直肠通道矫正手术及部分结肠切除手术,效果良好,症状明显改善.结论 对结肠慢传输型合并出口梗阻型便秘的患者,排便造影、结肠传输试验及钡剂灌肠检查是确诊的方法,直肠通道矫正手术及部分结肠切除术是一种理想的手术方式.
作者:孙杨忠;李恒爽;徐阿曼 刊期: 2007年第05期
目的 探讨大鼠关节软骨酸敏感离子通道(ASICs)的表达及其意义.方法 利用RT-PCR和Western blot检测ASICs在大鼠关节软骨的表达.结果 大鼠关节软骨存在ASIC1a、ASIC2a和ASIC3mRNA及其蛋白的表达.结论 ASICs在大鼠关节软骨组织的表达,其有望成为关节炎治疗的新靶点.
作者:袁凤来;陈飞虎;李霞;雄志刚;黄学应;刘永靖;吴繁荣;姚莹;张晓明 刊期: 2007年第05期
目的 探讨表皮生长因子受体(ErbB4)和核蛋白抗原(Ki-67)在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测了10例正常口腔黏膜组织和58例口腔鳞癌中的ErbB4和Ki-67的表达.结果 ErbB4在正常口腔黏膜组织中未见表达,在口腔鳞癌中表达较强,阳性率为58.6%,与临床分期、病理分级、淋巴结转移有相关性.Ki-67在正常口腔黏膜组织中未见表达,与临床分期、淋巴结转移无相关性,而与病理分级有关.相关分析显示口腔鳞癌中ErbB4的表达与Ki-67呈正相关.结论 ErbB4和Ki-67的表达可作为评估和判断口腔鳞癌恶性潜能的重要参考指标.
作者:薛浩伟;张令达;李莉;杨懿;潘树矿;潘涛 刊期: 2007年第05期
目的 探讨原发性或隐源性癫痫儿童行为问题和自我意识现状,以及影响因素.方法 应用Achenbach儿童行为量表(CBCL)和Piers-Harris儿童自我意识量表(PHSS)对68例原发性或隐源性癫痫儿童进行评定,并将结果与中国常模进行比较.同时应用回归分析对其影响因素进行分析.结果 原发性或隐源性癫痫儿童的行为问题的异常检出率为44.12%,明显高于全国常模(P<0.01),且突出表现在多动(20.59%)、交往不良(14.71%)和强迫行为(14.71%)等因子.原发性或隐源性癫痫儿童自我意识总分及行为、智力与学校情况、躯体外貌与属性、幸福与满足等因子的分值明显低于全国常模(P<0.05).对年龄、性别、受教育程度、病程、起病年龄和癫痫发作控制情况等多个变量多元逐步线性回归分析发现,癫痫发作控制与否是影响其精神行为问题的显著的因素.而性别与起病年龄也是显著影响因素.结论 原发性或隐源性癫痫儿童存在精神行为问题,且自我意识水平偏低.癫痫儿童的精神问题受着癫痫发作控制情况、起病年龄和性别的显著影响.
作者:董斌;周农;尹世杰 刊期: 2007年第05期
目的 比较Wistar大鼠和SD大鼠多项生殖能力及其胚胎/胎仔正常生长发育指标,以期为行为发育毒理学提供基础资料.方法 记录孕鼠生理变化、胚胎生长发育情况及仔鼠生理变化指标,采用修订Fox方案检测神经反射及运动协调功能.结果 发情前期Wistar大鼠受孕率为92.3%,SD大鼠受孕率为89.6%;精子涂片检查阳性大鼠的阴栓形成率则分别为93%(14/15)和100%(17/17);妊娠期孕鼠体重分别增加(114.7±9.5)g和(112.O±14.1)g.获得胚胎生长发育情况、出生后仔鼠生理发育、新生反射和感觉功能及运动协调功能指标.结论 阴栓形成可以作为受孕标志;两种大鼠胚胎/仔鼠的生长发育指标具有较稳定的时相.
作者:吴源;吴庆四;杨媛媛;冀元棠 刊期: 2007年第05期
目的 了解安徽省阜阳市某县农村婴儿的营养状况,并进一步探讨不同喂养方式与婴儿生长发育的关系.方法 以安徽省某县农村地区所有3~12月婴儿作为研究对象进行普查.制定统一调查表,现场调查由经培训的乡村或社区医生承担,被调查乡村或社区领导协助,由课题负责人对调查员进行统一培训.调查员对婴儿的身高与体重进行测量,并对婴儿的监护人进行询问,了解婴儿一般情况、母乳喂养情况等以及监护人自身的情况,逐一填写调查表.结果 本次有效调查1 490人,男921人,女569人.其中纯母乳喂养532人,占35.7%,混合喂养748人,占50.2%,人工喂养210人,占14.1%,不同性别间喂养方式差异没有显著性.1 490名婴儿的WAZ值平均为1.043 6±1.281 9,HAZ值为0.394 7±1.483 7,Kaup指数为18.293 7±2.887 9,母乳喂养和混合喂养组婴儿的WAZ、HAZ值均高于人工喂养组;1 490名婴儿中,低体重者21人,占1.4%;生长迟缓者100人,占6.7%,以人工喂养组婴儿的发育迟缓率高;不同喂养方式婴儿的Kaup指数差异无显著性意义.结论 母乳喂养与混合喂养组婴儿的生长发育好于人工喂养组,应大力提倡母乳喂养.
作者:王素芳;徐芳;郑亚娟;阮亮 刊期: 2007年第05期