学术投稿

SPRR1A基因真核荧光表达载体的构建

张鼎;孙西美;邵正仁;陈传好

关键词:神经元纤维, 基因表达, 调节, SPRR1A, 真核荧光表达载体
摘要:目的:构建可在真核细胞中表达SPRR1A (small proline-rich repeat protein 1A)的荧光表达载体.方法:应用PCR技术扩增出编码SPRR1A的全长基因,将SPRR1A DNA克隆到pEGFP-N1质粒,通过抗性基因筛选阳性克隆,经酶切和测序鉴定.结果:酶切和DNA序列鉴定均证实插入片段与GenBank提供的序列(L05187)一致.结论:成功构建了SPRR1A真核荧光表达载体.
蚌埠医学院学报杂志相关文献
  • STAT3、cyclin D1在妇科肿瘤中的研究进展

    细胞信号转导调节机制是肿瘤发生机制研究中一个新领域,目前发现许多与肿瘤密切相关的信号转导途径.信号转导和转录活化因子(signal transducers and activators of transcription,STATs)是1990年Darnell在研究干扰素信号通路时发现的一类由细胞因子、生长因子等多肽类配体激活的转录因子,是酪氨酸蛋白激酶-信号转导和转录活化因子(JAKs-STATs)转导途径中的重要成员.研究发现STATs家族中特别是STAT3在促进肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞凋亡、促进侵袭转移及免疫逃逸各方面尤为重要[1,2].STAT3通过调控下游靶基因特别是细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的转录,从而调节细胞的生长、分化和凋亡.STAT3的异常激活会导致细胞的异常增殖与凋亡障碍,促进肿瘤的形成与发展.近年来在妇科恶性肿瘤中已检测到STAT3及cyclin D1的异常表达,提示STAT3可能成为妇科肿瘤转移及预后评估的重要指标,也可能为肿瘤治疗提供一条新途径.

    作者:贾文娟;李胜泽 刊期: 2009年第02期

  • 胸腔内注射尿激酶治疗结核性胸膜炎疗效观察

    目的:观察胸腔内注射尿激酶治疗结核性渗出性胸膜炎的疗效.方法:将64例结核性渗出性胸膜炎患者随机分为治疗组和对照组,两组在相同的抗结核化疗方案治疗下,治疗组胸腔穿刺抽液后胸腔内注射尿激酶20万u,对照组抽液后不注射尿激酶.结果:尿激酶治疗组预防胸膜增厚粘连的疗效优于对照组(P<0.05).结论:胸腔内注射尿激酶治疗结核性渗出性胸膜炎有助于减少胸膜粘连增厚,未发现不良反应.

    作者:陈建军 刊期: 2009年第02期

  • 经外周静脉置入中心静脉导管并发症观察及其护理

    目的:探讨经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)并发症的发生率及护理措施.方法:观察116例PICC置管患者的并发症发生情况并给予相应护理.结果:116例PICC置管患者出现并发症40例,其中导管堵塞10例,管腔内返血8例,穿刺点渗血8例,机械性静脉炎6例,导管脱出4例,穿刺点感染4例.经给予相应护理措施后,继续留置PICC管32例,拔管8例.结论:加强护理人员对PICC置管技术及并发症的原因和护理措施的掌握,可有效减少PICC临床应用并发症的发生.

    作者:汪艳萍;陈欣 刊期: 2009年第02期

  • 原发性肝癌三维适形放疗35例疗效分析

    目的:探讨三维适形放疗治疗原发性肝癌的疗效.方法:采用6 MV X线直线加速器对35例中晚期肝癌进行三维适形放疗.单次剂量2~4 Gy,每天1次,5次/周,总剂量40~62 Gy.结果:完全缓解(CR)率8.6%,部分缓解(PR)率51.4%,稳定率34.3%,进展率8.6%,总有效率(CR+PR)为60.0%.1年生存率为57.1%.结论:三维适形放疗是治疗不能手术的中晚期肝癌的有效途径.

    作者:詹必红 刊期: 2009年第02期

  • SPRR1A基因真核荧光表达载体的构建

    目的:构建可在真核细胞中表达SPRR1A (small proline-rich repeat protein 1A)的荧光表达载体.方法:应用PCR技术扩增出编码SPRR1A的全长基因,将SPRR1A DNA克隆到pEGFP-N1质粒,通过抗性基因筛选阳性克隆,经酶切和测序鉴定.结果:酶切和DNA序列鉴定均证实插入片段与GenBank提供的序列(L05187)一致.结论:成功构建了SPRR1A真核荧光表达载体.

    作者:张鼎;孙西美;邵正仁;陈传好 刊期: 2009年第02期

  • 输尿管结石三种碎石方法的疗效观察

    目的:比较原位体外冲击波碎石(ESWL)、输尿管插管注水后ESWL与输尿管镜气压弹道碎石(URL)3种方法治疗输尿管结石的疗效.方法:采用Dornier Compact S型低能量电磁式碎石机治疗输尿管结石450例,其中ESWL 302例,输尿管插管注水后ESWL碎石148例.Storz 8/9 F硬质输尿管镜、气压弹道碎石装置治疗输尿管结石120例.结果:输尿管上段结石,原位ESWL组、插管注水ESWL组及URL组2周排净率分别为85.83%、89.66%和89.36%,各组间差异无统计学意义(P>0.05).而对于输尿管中下段结石,输尿管插管注水ESWL组与输尿管镜气压弹道碎石组的2周排净率分别为97.78%、98.63%,二者差异无统计学意义(P>0.05),但均显著高于原位ESWL组87.91%的排净率(P<0.005).结论:输尿管上段结石首选原位ESWL,而对于输尿管中下段结石,输尿管插管后ESWL是一种安全、有效的治疗方法,其疗效与URL相当,优于原位ESWL.

    作者:章璟;王国增;姜宁;石泉;贺伟;李健;赵玉隆 刊期: 2009年第02期

  • CXCR4抑制性多肽对不同乳腺癌细胞株中CXCR4表达的影响

    目的:探讨CXCR4抑制性多肽(NT21MP)对HER-2受体表达不同的乳腺癌MCF-7细胞和 SKBR3 细胞CXCR4受体表达的影响.方法:免疫组化法和RT-PCR法检测MCF-7、SKBR3细胞中HER-2与CXCR4的表达;分别用1 μg /ml和10 μg /ml NT21MP处理乳腺癌SKBR3、MCF-7细胞48 h后,用RT-PCR法和Western blot法检测CXCR4 mRNA及其蛋白的表达.结果:CXCR4在乳腺癌细胞SKBR3和MCF-7 表达水平相似(P>0.05),HER-2表达水平差异有统计学意义(P<0.01);NT21MP显著下调人乳腺癌细胞SKBR3、MCF-7细胞中CXCR4 受体的表达,但存在细胞差异性(P<0.01).结论:NT21MP能不同程度地下调乳腺癌细胞MCF-7和SKBR3 CXCR4受体表达.

    作者:章菊;杨清玲;陈昌杰;刘臣彪;王惠;丁勇兴;李成华 刊期: 2009年第02期

  • 《毒理学基础》课程教学改革的研究和实践

    目的:探讨提高<毒理学基础>教学质量的方法.方法:采用优化课程的教学方法和加强实验教学改革等措施,以提高课堂教学和实验教学质量.结果:通过优化教学方法,有效地提高了学生的学习兴趣;通过毒理学实验教学改革,提高了学生的实际操作能力.结论:对<毒理学基础>教学采取一些改革措施,可以有效地提高学生对本课程的理解掌握,引导并提高学生的综合知识和运用能力以及解决问题的能力.

    作者:张玉媛;王春华;王允;贾克;孔刚;周纯先 刊期: 2009年第02期

  • 蚌埠地区流行性脑脊髓膜炎47例流行病学分析

    目的:总结蚌埠地区流行性脑脊髓膜炎(流脑)流行病学特征,为流脑预防控制提供临床依据.方法:回顾性分析47例流脑患者临床特征,对其中30例患者进行流行病学调查.结果:1~4月份流脑发病占总病例数的72.34%,11~20岁占总病例数的65.96%,病例主要集中在凤阳县和蚌埠市,流行菌群以C群为主,暴发型流脑发生比例为31.91%.结论:蚌埠地区有C群流脑流行,季节性明显,发病年龄高移,应加强易感人群A+C群流脑多糖疫苗接种.

    作者:郑艳;聂素梅 刊期: 2009年第02期

  • 聚丙烯酰胺水凝胶注射隆乳并发症处理

    目的:探讨聚丙烯酰胺水凝胶(polyacrylamide hydrogel,PAHG)注射隆乳并发症的处理方法及效果.方法:对13例PAHG注射隆乳并发症患者,应用刮除、生理盐水反复冲洗和抽吸、切除部分受浸润的腺体及肌肉等方法去除PAHG.结果:13例患者术前乳房胀痛、外形不满、硬结不消、乳房弹性差、心理负担重等明显好转,切口愈合良好. 结论:经乳房下皱褶切口能将绝大部分PAHG取出,极少残留,手术切开是处理PAHG隆乳并发症较为有效的方法.

    作者:范启江;戴骏骏;赵天兰;谢晓明;余道江 刊期: 2009年第02期

  • 住院早产儿疾病10年回顾性分析

    目的:探讨住院早产儿疾病近10年的变化趋势.方法:回顾分析1997~2006年收治的801例早产儿的临床资料,按前后5年(按出院时间分为Ⅰ组和Ⅱ组)进行对比分析.结果:Ⅱ组早产儿住院率较Ⅰ组升高(P<0.05),且小胎龄、低体重早产儿比例明显增加,而病死率Ⅱ组较Ⅰ组明显降低(P<0.01);Ⅱ组窒息、败血症和硬肿症发生率较Ⅰ组有所下降(P<0.05),肺透明膜病的病死率明显降低.结论:早产儿住院率提高,尤其小胎龄、低体重早产儿比例明显增加,而病死率下降;对缺氧缺血性脑病、肺炎、黄疸等常见病仍要做好早期的干预治疗;加强对超低出生体重儿的治疗.

    作者:张德凤;潘家华 刊期: 2009年第02期

  • 生物技术综合实验建设的研究

    目的:提出生物技术综合实验开设思路,开展综合实验,培养学生的创新意识和创新能力.方法:建设生物技术综合实验,主要包括相关课程、实验内容、综合的实验方法与手段.结果:逐步加强和提高学生解决问题的能力,收到了良好的教学效果.结论:生物技术综合实验的开设有利于培养学生的创新能力和应用能力.

    作者:杨清玲;章尧;陈昌杰;周继红;连超群 刊期: 2009年第02期

  • 小儿包皮环切术120例护理分析

    目的:总结小儿包皮环切术术前、术中、术后护理经验.方法:回顾分析120例小儿包皮环切术术前、术中、术后的临床护理资料,随访术后疗效.结果:120例包皮环切术后切口发生感染1例,其余均正常愈合,平均愈合时间为5天.结论:术前、术中、术后心理指导,适当、到位的护理措施,术后健康指导,从而提高手术的成功率.

    作者:杨迎春 刊期: 2009年第02期

  • 高龄长期卧床患者并发下肢深静脉血栓形成的护理

    目的:总结高龄长期卧床患者并发下肢深静脉血栓形成的护理要点.方法:对10例下肢深静脉血栓的患者采用溶栓、抗凝等药物治疗,并给予病情观察、用药护理、一般护理、体位护理、心理支持、健康教育等护理.结果:8例患者经过治疗护理10~15天后痊愈,2例好转,无肺栓塞的发生.结论:上述一系列护理措施治疗下肢深静脉血栓效果显著.

    作者:高玉芳;刘红芬;周义双 刊期: 2009年第02期

  • 人源肝癌细胞系中甲胎蛋白基因表达及甲基化的研究

    目的:了解不同人源肝癌细胞系甲胎蛋白(AFP)基因表达及不同区域甲基化状态,探讨肝癌发生的表达遗传学调控机制.方法:采用亚硫酸氢盐-基因组测序(bisulfite-assisted genomic sequencing,BAGS)技术,检测人源HepG2、SMMC-7721肝癌细胞系和人成纤维细胞中AFP基因启动子区及CpG岛区的甲基化水平,RT-PCR检测基因的表达,并分析相关性.结果:HepG2细胞高表达AFP,SMMC-7721细胞低表达AFP,成纤维细胞不表达AFP;在启动子区,HepG2细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,尤其是第一个和第二个CG位点,SMMC-7721细胞的甲基化程度较之高,而成纤维细胞甲基化程度整体很高;在CpG岛区,成纤维细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,主要是第6个和第7个CG位点,SMMC-7721、HepG2细胞的甲基化程度较之高.结论:AFP基因启动子甲基化程度与基因表达水平存在负相关,AFP基因CpG岛甲基化程度与基因是否表达有关,AFP基因启动子低甲基化可能是AFP高表达的分子机制.

    作者:王玮;陈立军;初殿伟;呼文亮 刊期: 2009年第02期

  • 碳酸锂配合131I治疗低摄碘率甲状腺功能亢进

    目的:观察碳酸锂对甲状腺摄碘率(radioactive iodineup take,RAIU)的影响,探讨碳酸锂配合131I治疗低摄碘率Graves′病患者的临床疗效.方法:对36例RAIU<50%的Graves′病患者,给予碳酸锂0.25 g口服,每天3次,共7天,测定RAIU,根据RAIU的变化,比较服用131I剂量的差别.结果:36例在服用碳酸锂后,高RAIU由(45.58±4.01)%上升至(64.36±4.66)%,有统计学意义(P<0.001),服锂前平均需服131I量为(991.6±577.2) MBq,服锂后降至(503.2±288.6) MBq.结论:碳酸锂能够提高Graves′病患者的RAIU,从而使部分不适合131I治疗的患者可能采用131I治疗,并在一定程度上减少了放射性131I的治疗用量.

    作者:丁正强;陶新全;刘恒超;张在矩 刊期: 2009年第02期

  • 心包腔内置管间断抽液治疗心包积液21例临床观察

    目的:观察心包腔内置管间断抽液治疗心包积液的临床疗效.方法:21例心包积液患者应用中心静脉导管,采用Seldinger导管法经皮心包腔内置管,间断抽取心包积液,观察临床疗效及并发症.结果:19例采用剑突下置管,2例采用心尖部置管,5例出现随呼吸运动心前区轻微疼痛,2例出现引流不畅,改变体位后通畅,1例术后第2天发生心包积液漏入胸腔.结论:心包腔内置管间断抽液治疗心包积液具有较好的疗效,特别是肿瘤所导致的恶性心包积液.

    作者:胡司淦;张宁汝;邵杉;蔡鑫 刊期: 2009年第02期

  • 口腔正畸黏结剂的研究进展

    在口腔医学发展过程中,酸蚀技术于19世纪50年代被引入,而大范围推广则花了十年余的时间.从此,正畸黏结技术的发展极大推动了口腔正畸学的发展.在过去十年中,我们见证了釉质黏结技术的发展,如采用玻璃离子黏结、引入自酸蚀引发剂以及新型强的光固化照射源等,它们和自锁托槽以及无托槽矫治技术(the invisalign technique)一起,都成为当前正畸领域研究的前沿和热点.本文就正畸黏结剂的应用基础及发展近况作一综述,并展望其未来的发展趋势.

    作者:韩骁;周健;唐旭炎 刊期: 2009年第02期

  • 改良R显带技术在恶性血液病染色体核型鉴定中的应用

    目的:建立易于识别的改良染色体R显带方法.方法:用改良的染色体R显带方法对30例各种类型的染色体进行显带,并对显带的染色体核型进行研究;将传统R显带技术中用10%吉姆萨染液取代吖啶橙工作液,调整欧氏液各种试剂成分和简化试验步骤.结果:30例恶性血液病的染色体核型结果分析显示29例有染色体的核型异常.其中11例慢性粒细胞白血病,均可见费城染色体(即Ph1).7例急性淋巴细胞性白血病中有3例出现Ph1,其中1例为嵌合体,其余4例急性淋巴细胞白血病中分别出现-22,+Mar(D?)、del(11)(q23)及正常核型或多倍体.10例急性髓性白血病,其中3例M2中2例t(8;21).1例出现15q+;5例M3中3例见t(15;17),1例考虑为M5,1例少见核型,1例M1根据核型应诊断为M2型.2例骨髓增生异常综合征出现-21,+16数目上的异常,1例出现小Mar,未发现特征性染色体异常.结论:采用改良R显带技术对染色体进行核型研究可以获得一种较稳定带纹丰富的染色体显带图像,使染色体核型鉴定更简便、易于识别,可在实验室中进行推广.

    作者:王细宏 刊期: 2009年第02期

  • 非小细胞肺癌外周血癌胚抗原mRNA表达与肿瘤微血管密度的相关性

    目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)外周血癌胚抗原(CEA)mRNA的表达与肿瘤微血管密度(MVD)之间的相关性.方法:采用逆转录巢式聚合酶链反应(nested RT-PCR)和微流控芯片(micro-fluid chip)技术检测57例NSCLC患者术前外周血CEA mRNA;选择单克隆抗体CD31和CD34,采用免疫组化对肿瘤组织进行MVD计数.结果:57例NSCLC患者外周血CEA mRNA阳性表达率为61.4%;CD31和CD34显示的MVD结果分别为(29.7±12.1)条和(38.2±12.7)条,范围分别是10~61条和19~76条.CEA mRNA阳性表达率和MVD计数呈正相关关系(P<0.05).结论:在NSCLC患者,其肿瘤MVD较高的则更容易发生外周血微转移.

    作者:王祖义;汪国文;刘学刚;唐震;史向前;李小军;刘以尧;段贵新;周晓;贡会源 刊期: 2009年第02期

蚌埠医学院学报杂志

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主管:安徽省教育厅

主办:蚌埠医学院