学术投稿

电泳迁移率变动分析化学发光法检测T细胞NF-κB活性

孙大康;李柏青

关键词:免疫学技术, 凝胶电泳迁移率变动分析, 增强化学发光, 核因子-κB, T细胞
摘要:目的:建立凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测T细胞激活后核因子κB (NF-κB)活性的方法.方法:人外周血单个核细胞(PBMC)用抗CD3单克隆抗体(mAB)激活T细胞后,提取细胞核蛋白与生物素标记的NF-κB特异性探针结合,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,转移至正电荷尼龙膜,加链霉亲和素辣根过氧化物酶和化学发光底物后用X光胶片显影,检测NF-κB活性.结果:人PBMC用抗CD3 mAB刺激后15 min,明显可见NF-κB活化,30 min时达高峰,60 min时降低.结论:EMSA化学发光法检测转录因子活性是一种较简捷和高灵敏度的技术,可用于检测T细胞活化后NF-κB活性变化.
蚌埠医学院学报杂志相关文献
  • 颅内生殖细胞瘤的诊断与治疗现状

    按照世界卫生组织肿瘤分类标准(2000),颅内生殖细胞肿瘤(germ cell tumors )分为以下几类:生殖细胞瘤(germinoma)、胚胎性癌( embryonal carcinoma )、卵黄囊瘤(yolk sac tumor )、绒毛膜癌(choriocarcinoma)、畸胎瘤(teratoma)(未成熟畸胎瘤、成熟畸胎瘤和畸胎瘤恶性变)和混合性生殖细胞肿瘤(mixed cell tumors)[1].此类肿瘤起源于胚胎中轴线的原始休眠细胞.生殖细胞瘤是多见的,其发生率可达颅内生殖细胞肿瘤的65%[2].常见部位为松果体区与蝶鞍区,少见于下丘脑、脚间池、桥小脑脚、小脑蚓部,发生于中脑和延髓的极为罕见[3,4].由于生殖细胞瘤的临床表现多样、影像无特异性及治疗方法的多选择,致其诊断治疗存在较多争议.

    作者:朱安凯;万经海 刊期: 2006年第01期

  • 经尿道电切术联合羟喜树碱灌注治疗腺性膀胱炎24例

    目的:观察经尿道电切术联合羟喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)灌注治疗腺性膀胱炎的疗效.方法:对24例腺性膀胱炎患者首先去除诱发因素,经尿道电切术后行HCPT膀胱灌注.结果:临床症状完全消失18例,复发2例,好转4例.结论:经尿道电切术联合羟喜树碱灌注是治疗腺性膀胱炎的一种有效方法.

    作者:张青川;朱永献;关超;周文生 刊期: 2006年第01期

  • 复能剂长短程疗法在急性有机磷农药中毒中的对比分析

    1998年1月~2004年10月,我院内科在治疗口服急性有机磷农药中毒(AOPP)时,将复能剂治疗时间延长至1周,将口服的AOPP患者43例作为治疗组,与此前5年治疗口服AOPP患者45例作对照,以观察复能剂长程疗法与传统短程疗法的疗效差别,并进行对比分析.

    作者:李红兵;刘二志 刊期: 2006年第01期

  • 经皮肝门静脉栓塞食管胃底静脉治疗门脉高压性上消化道出血

    目的:观察食管胃底静脉栓塞治疗门脉高压性上消化道出血的效果.方法:选择确诊的门脉高压上消化道出血患者5例,行选择性食管胃底静脉栓塞治疗.结果:明显扩张迂曲的静脉消失,近期止血效果良好.结论:栓塞食管胃底静脉治疗门脉高压性上消化道出血效果肯定,值得应用.

    作者:兰春虎;王青;赵玲 刊期: 2006年第01期

  • 多巴胺对低氧高碳酸诱发膈肌疲劳的治疗作用

    目的:观察多巴胺(dopamine,DA)对低氧高碳酸诱发膈肌疲劳的治疗作用.方法:取SD大鼠32只,随机分为4组:对照组、对照+DA组、模型组及模型+DA组.对照组和对照+DA组通氧气(95%O2+5%CO2)作对照,其它两组通低氧高二氧化碳混合气(21%O2,12%CO2,67%N2)4 min复制膈肌疲劳模型,第2、4组各给DA(1 mmol/L),利用MedLab-U/4c生物信号采集处理系统采集数据,并分析单收缩力(Pt)、大强直收缩张力(Po)、峰值收缩时间(CT)、半舒张时间(1/2RT)等.结果:与对照组相比,模型组Pt、Po显著降低(P<0.05和P<0.01).与模型组相比,治疗组Po显著升高(P<0.05).予不同频率刺激膈肌时,模型组大鼠肌张力均低于对照组(P<0.05~P<0.01),而治疗组在高频刺激时肌张力明显高于模型组(P<0.05~P<0.01).结论:DA能增强大鼠膈肌收缩功能,对低氧高碳酸所致膈肌疲劳具有治疗作用.

    作者:王相岩;汪蕊;陈耀;赵玉飞 刊期: 2006年第01期

  • 浸水急性冷应激对大鼠脑皮质神经元一氧化氮释放量的影响

    目的:探讨浸水急性冷应激对大鼠脑皮质神经元一氧化氮(nitric oxide,NO)释放量的影响.方法:将27只健康、成年、雄性Wistar大鼠随机分为A、B、C组.A组为对照组,不作任何处理;B组为浸水急性冷应激30 min组;C组为浸水急性冷应激60 min组.大脑皮质NO含量使用硝酸酶还原法试剂盒测定.结果:A组大鼠脑皮质NO含量与B组差异无显著性(P>0.05),而C组大鼠脑皮质NO含量均明显高于A组和B组(P<0.01).结论:一氧化氮在急性冷应激早期或许对脑皮质神经元有保护作用.

    作者:高莉;关宿东;祝延 刊期: 2006年第01期

  • 血尿酸降低对2型糖尿病早期肾损伤的诊断价值

    目的:探讨血尿酸降低对2型糖尿病早期肾损伤的诊断价值.方法:测定83例2型糖尿病患者血尿酸(UA)水平,同时检测其尿微量白蛋白(U-mALB)和尿β2微球蛋白(U-β2M),并分组进行统计学分析.结果:2型糖尿病患者早期的肾小管功能有受损,肾小球功能未明显受损伤时,U-β2M升高,并且U-mALB正常时尿酸值才低于两者正常组和正常对照组(P<0.05和P<0.01).结论:血尿酸可作为2型糖尿病患者早期肾损伤预示指标.

    作者:吴学兵;孙文化;钱雅琴;曹云芳 刊期: 2006年第01期

  • 外周血cTnI-mRNA对扩张型心肌病的诊断价值

    目的:探讨外周血心肌肌钙蛋白I(cTnI)-mRNA在外周血的分布规律及其对扩张型心肌病的诊断价值.方法:32例扩张型心肌病患者,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,分别从外周全血及单个核细胞扩增cTnI-mRNA,同时对照研究外周血心肌酶谱(肌酸激酶及其同工酶、天门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶)活性及cTnI定性;1例心脏移植标本作病理学观察;20例正常献血标本设为对照组.结果:电镜观察,可见心肌线粒体肿胀、嵴断裂、严重空泡样变及细胞核异形变、染色质浓缩边聚;所有病例外周血单个核细胞扩增cTnI-mRNA均为阴性,外周全血扩增cTnI-mRNA 14例阳性;对照组单个核细胞及外周全血扩增均为阴性;32例中,酶学检测6例异常,外周血cTnI定性检测5例异常,RT-PCR法检测外周血cTnI-mRNA 14例阳性,RT-PCR的阳性率均高于酶学及cTnI定性检测(P<0.05和P<0.01).结论:cTnI-mRNA存在于外周血浆;RT-PCR法扩增外周血cTnI-mRNA较酶学、cTnI定性检测对扩张型心肌病的诊断有更高的敏感性.

    作者:高增栋;朱健华;姚登福;吴玮 刊期: 2006年第01期

  • 奥美拉唑、左氧氟沙星、呋喃唑酮三联疗法治疗幽门螺杆菌感染

    目的:探讨奥美拉唑加左氧氟沙星加呋喃唑酮三联一周疗法根除幽门螺杆菌(Hp)的疗效及安全性.方法:选择100例符合条件的Hp阳性慢性胃炎和消化性溃疡患者,随机分为两组.治疗组采用奥美拉唑(20 mg,2次/天)加左氧氟沙星(200 mg,2次/天)加呋喃唑酮(100 mg,2次/天),治疗7天;溃疡患者继用奥美拉唑20 mg,1次/天,3周.对照组采用奥美拉唑(20 mg,2次/天)加克拉霉素(250 mg,2次/天)加甲硝唑(400 mg,2次/天),治疗7天;溃疡患者维持治疗同上.疗程结束4周后复查Hp,观察Hp根除率、症状缓解率、溃疡愈合率及不良反应等.结果:治疗组和对照组的症状缓解率、Hp根除率、溃疡治愈率、不良反应发生率分别为93.5%、89.1%、92.9%、21.7%和88.9%、80.0%、93.3%、24.4%.两组差异无显著性(P>0.05).治疗组与对照组每例根除Hp费用分别为107.82元、130.07元,治疗组根除Hp期望成本比对照组低41.58元.结论:奥美拉唑加左氧氟沙星加呋喃唑酮三联一周疗法是根除Hp的理想方案,可被作为根除Hp一线治疗的选择.

    作者:束庆文;娄诗金;刘太平;疏东升;汪全红;潘小龙;蔡善武;金小春;薛刚 刊期: 2006年第01期

  • 干、湿化学法检测部分生化项目结果比较

    目的:对干化学法和湿化学法测定部分生化项目的结果进行比较.方法:收集44例无溶血、无脂浊血标本,分别在全自动生化分析仪和干化学分析仪上测定8个临床生化项目:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TB)、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr).结果:ALT、AST、ALB、UA和Scr的两种分析方法的结果差异均无显著性(P>0.05);TP、BUN和TB用两种分析方法的测定结果差异均有显著性(P<0.05~P<0.001).结论:干化学和湿化学两种分析方法对同一项目进行检测时,某些项目检测结果差异有显著性.定期对不同分析仪结果之间进行比对和校准,是保证测定结果准确性的必要措施.

    作者:杨萍 刊期: 2006年第01期

  • COX-2、p53与乳腺癌微血管密度和淋巴结转移的相关性

    目的:探讨COX-2、p53在乳腺癌组织中的表达及其与微血管密度和淋巴结转移的关系.方法:应用原位杂交方法检测60例乳腺癌和20例癌旁正常乳腺组织COX-2 mRNA的表达,应用免疫组织化学S-P法检测两组织中的COX-2、p53的表达,并用第FⅧ因子相关抗原抗体标记血管内皮细胞,计算肿瘤内微血管密度(MVD).结果:COX-2(+)或p53(+)组MVD均显著高于COX-2(-)或p53(-)组(P<0.01),COX-2和p53均阳性时MVD大(P<0.01).淋巴结转移组COX-2、p53阳性率均高于无淋巴结转移组(P<0.005和P<0.05).结论:COX-2 、p53在乳腺癌组织中的表达与乳腺癌血管生成和淋巴结转移有关,二者在乳腺癌血管生成中可能具有协同作用.

    作者:余立权;李德群;陶仪声 刊期: 2006年第01期

  • 原发性中枢神经系统淋巴瘤的CT和MRI表现

    目的:探讨原发性中枢神经系统淋巴瘤的影像特征.方法:回顾性分析19例经病理证实的原发性中枢神经系统淋巴瘤CT和MRI表现.结果:19例中瘤灶31个,单发14例,多发5例;其中脑表面12个,室管膜旁13个,脑深部6个.CT检出26个病灶,检出率83.9%.CT表现呈等或稍高密度,19个密度均匀,7个密度不均.MRI检出所有31个病灶,检出率100%.肿瘤MRI 表现T1WI 信号略低于灰质,T2WI信号与灰质相似,22个信号均匀,9个信号不均.80.6%瘤灶表现为明显实质样强化,16.1%病灶伴脑膜或室管膜强化.占位效应以及瘤周水肿程度大多数为轻到中度.结论:大多数原发性中枢神经系统淋巴瘤有一定的影像学特征,少数不典型者鉴别困难.

    作者:周莹;周胜利;刘雨成 刊期: 2006年第01期

  • 妊娠性滋养细胞肿瘤患者200例整体护理体会

    目的:探讨妊娠性滋养细胞肿瘤患者整体护理的要点.方法:对200例妊娠性滋养细胞肿瘤患者制定详细的护理计划,实施系统化整体护理.结果:大部分患者能够愉快地接受治疗,康复出院;41例有潜在大出血倾向及1例脑转移患者治愈;2例重度骨髓抑制患者,1例抢救成功,另1例因继发感染而死亡.结论:整体护理考虑患者的身心因素,兼顾家庭、社会经济因素,有利于提高护理质量和水平.

    作者:王素侠;郭琼;史倩 刊期: 2006年第01期

  • 幽门螺杆菌空泡毒素编码基因及致病机制研究进展

    自1983年Warren与Mashall从人胃黏膜分离出幽门螺杆菌(Helicobacter pylory,Hp)后,人们逐渐认识到Hp是胃炎、消化性溃疡的病因;然而困扰人们的是,为何感染Hp后,有些患者终发展成为消化性溃疡,而另一些仅仅是胃炎?1988年Leunk发现部分Hp菌株能产生一种使体外培养的哺乳细胞产生空泡样变的毒素,据此将Hp分为空泡毒作用阳性Hp(Tox+Hp)及空泡毒作用阴性HP(Tox-Hp);并发现Tox+Hp较Tox-Hp致病力强,Tox+Hp能引起试验动物胃黏膜广泛而严重的炎症、糜烂甚至溃疡,而Tox-Hp则不能定植在胃黏膜上或仅引起较轻的炎症.消化性溃疡患者大多感染的是Tox+Hp,而胃炎患者大多感染的是Tox-Hp.

    作者:赵芳芳;夏佩莹 刊期: 2006年第01期

  • 以阴道出血为首发症状的盆腔卵黄囊瘤1例

    患儿女性,7个月,阴道出血1周,于2004年12月25日住蚌埠医学院附属医院儿科.查体:阴道内有少许鲜血流出,外生殖器及肛门无异常,其余各部未见异常.彩超:膀胱后探及49 mm×40 mm×35 mm实质性包块,形态规则,包膜完整,内见斑片状血彩,示动静脉频谱,盆腔未探及子宫及卵巢.入院诊断:(1)阴道出血原因待查;(2)盆腔实质性包块性质待查.

    作者:汪向明;马莉;蔡兆根;于东红 刊期: 2006年第01期

  • SLE患者妊娠期并发多脏器功能障碍综合征7例临床分析

    目的:探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者妊娠期并发多脏器功能障碍综合征(mutiple organ dysfunctiong syndrome,MODS)的预防与诊治.方法:对7例SLE妊娠期引起的多脏器功能损害临床资料进行回顾性分析.结果:2例妊娠前已确诊为SLE,5例入院后确诊SLE.孕产妇抢救成功6例,1例放弃治疗,围生儿死亡6例.结论:SLE患者妊娠并发多脏器功能障碍对孕产妇及围生儿危害极大,处理的关键是尽早确诊并积极治疗原发病;适时终止妊娠,保护相关脏器功能和全身支持疗法至关重要.

    作者:申震;赵卫东;吴大保;张秀英 刊期: 2006年第01期

  • 无负荷试验与脐血流测定评估妊娠期肝内胆汁淤积症患者围生儿预后

    目的:探讨脐动脉血流速度测定及无负荷试验评估妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)患者围生儿预后的应用价值.方法:联合应用胎心无负荷试验及多普勒测定脐动脉血流速度,对71例ICP患者(ICP组)及60例正常孕妇(对照组)进行观察. 结果:ICP组收缩期末和舒张期末峰值比(S/D)与无负荷试验异常发生率均高于对照组(P<0.05),ICP组的S/D和无负荷试验结果异常的围生儿预后不良发生率明显高于结果正常组(P<0.005).结论:ICP患者应常规进行S/D测定及无负荷试验,以便及时处理改善围生儿预后.

    作者:刘文杰;汤希伟 刊期: 2006年第01期

  • 胆囊切除术后黄疸20例原因及处理

    胆囊切除术后黄疸在临床上并不少见,原因复杂,除损伤外,较多是非损伤性的.治疗与发病原因直接相关.本文通过20例术后黄疸的分析,探讨其发病原因及处理对策.

    作者:李培生;贲大刚;宣善井 刊期: 2006年第01期

  • 血浆血管内皮生长因子水平与食管鳞癌临床病理指标的相关性

    目的:研究血浆血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与食管鳞癌临床病理指标及1年内复发、转移的关系.方法:86例食管鳞癌患者根据淋巴结清扫的不同程度分为食管癌切除组和扩大淋巴结清扫组,使用ELISA法测定外周血VEGF表达.记录每位患者的临床病理指标.结果:扩大淋巴结清扫组平均清扫淋巴结组数、平均手术时间均显著高于食管癌切除组(P<0.01),两组术后并发症发生率差异无显著性(P>0.05).食管癌切除组中血浆VEGF阳性者术后1年复发转移率均显著高于阴性者(P<0.05).扩大淋巴结清扫组中,血浆VEGF阳性者平均转移淋巴结组数、术后1年复发转移率均高于阴性者(P<0.05).Logistic回归分析表明,PN分期是判断术后复发转移的独立预测因子.结论:ELISA法测定血浆VEGF在判断食管癌的进展程度及复发转移等临床病理指标方面及手术方式的选择、术后辅助治疗的选择有一定参考价值.

    作者:张晖;方文涛;陈文虎 刊期: 2006年第01期

  • 刺五加注射液对小鼠实验性急性心肌缺氧的保护作用

    目的:观察刺五加对小鼠急性心肌缺氧的保护作用.方法:常压缺氧条件下分别观察小鼠平均存活时间和心肌耗氧量;采用夹闭气管法观察小鼠平均心电消失时间.结果:刺五加注射液高、低剂量组均能延长小鼠平均存活时间,降低心肌耗氧量.结论:刺五加注射液能明显降低小鼠心肌氧耗,保护缺氧心肌,延长小鼠存活时间.

    作者:马锐;徐欢;杨丽丽;程亮;唐云国;叶云 刊期: 2006年第01期

蚌埠医学院学报杂志

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主管:安徽省教育厅

主办:蚌埠医学院