学术投稿

胞内磷酸化蛋白酪氨酸激酶的流式细胞术检测

吕合作;李柏青

关键词:蛋白酪氨酸激酶, 流式细胞术, γδT细胞
摘要:目的:建立流式细胞术检测细胞内磷酸化蛋白酪氨酸激酶(PTKs)的方法.方法:用佛波醇酯(PMA)及植物血凝素(PHA)刺激Jurkat细胞,用两种不同的固定和透膜方法处理细胞,加磷酸化PTKs特异性单抗P-Tyr-100及FITC标记的二抗,建立胞内磷酸化PTKs的流式细胞检测技术;同时,用免疫印迹方法检测磷酸化PTKs以资对照.用双色荧光技术,对结核杆菌抗原(Mtb-Ag)活化的外周血单个核细胞(PBMC)中的γδT细胞进行胞内PTKs分析.结果:PHA及PMA刺激能够使Jurkat细胞中磷酸化PTKs明显增加,流式细胞术与免疫印迹方法检测的结果一致.通过双色荧光技术检测发现,Mtb-Ag刺激PBMC,可以优先诱导γδT细胞胞内PTKs的活化.结论:利用流式细胞术可在单细胞水平分析细胞内PTKs的磷酸化状态.
蚌埠医学院学报杂志相关文献
  • 产甲胎蛋白胃癌2例报道及文献复习

    目的:旨在加深对产甲胎蛋白胃癌(alpha-fetoprotein-producing gastric carcinoma,AFPGC)的诊断、治疗及预后的认识.方法:回顾性复习2001年11月~2002年6月87例血清甲胎蛋白(AFP)升高的住院患者病历资料,对其中诊断为胃癌患者的手术标本进行苏木精-伊红 (HE)染色及免疫组化染色.总结有关资料并复习相关文献.结果:血清AFP高于正常水平的患者中,2例病理诊断为胃肝样腺癌.AFP、癌胚抗原(CEA)、α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)、α1-抗胰糜蛋白酶(α1-ACT)等免疫表型均呈阳性.常规化疗不能控制疾病进展,2者均出现肝转移.结论:AFPGC具有高度侵袭性,易出现肝转移,预后差.治疗首选胃癌根治术,术后推荐使用以丝裂霉素、伊立替康等为主的方案行辅助化疗,但仍有待发现更新的AFPGC综合治疗模式.

    作者:曹传武;钱建新;宋维;余宏宇;邹建军;骆益宙;高勇;王杰军 刊期: 2005年第02期

  • 大黄素对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡的影响

    目的:探讨大黄素对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡的影响.方法:SD大鼠30只,随机分为对照组、胰腺炎组和大黄素组,5%牛磺胆酸钠1 ml/kg制作大鼠重症急性胰腺炎模型,大黄素组为模型制作完成时及3 h后腹腔内注射大黄素2.5 mg/kg,观察12 h后各组大鼠血清淀粉酶、IL-6和腺泡细胞凋亡情况.结果:大黄素组血清淀粉酶、IL-6值低于胰腺炎组(P<0.01),细胞凋亡指数增加(P<0.01),病理损害减轻.结论:大黄素促进重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡,减少淀粉酶和IL-6释放,减轻胰腺病理损害.

    作者:刘牧林;刘瑞林;姜从桥;马良龙;方先业 刊期: 2005年第02期

  • 表皮干细胞研究进展

    干细胞是来自于胚胎、胎儿或成体内具有在一定条件下无限制自我更新与增殖分化能力的一类细胞,能够产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞,也能产生组成机体组织、器官的已特化的细胞,同时还能分化为祖细胞[1].皮肤外层的表皮终身不断自我更新,其基底部的干细胞持续增殖分化以取代外层终末分化细胞,外层细胞的死亡脱落与基底干细胞的分裂维持动态平衡,从而维持正常的组织结构[2].在创伤与烧伤等损伤情况下,表皮干细胞发挥增殖分化潜能,完成损伤的修复.有关表皮干细胞的研究已逐渐成为皮肤损伤后愈合过程的中心环节.在形态学上,表皮由外向内分别由角质层、透明层、颗粒层、棘层和基底层组成;其中基底层又称为生发层,由单层柱状上皮组成,呈栅状排列于基膜带上,邻接真皮.根据细胞动力学分析,在表皮中有三种细胞:干细胞、短暂扩充细胞和终分化细胞,只有干细胞在体外培养能形成完全克隆.现就表皮干细胞的研究作一综述.

    作者:方林森;余又新 刊期: 2005年第02期

  • 急性胰腺炎患者血清新喋呤水平变化及意义

    目的:探讨急性胰腺炎患者新喋呤变化规律及临床意义.方法:28例胰腺炎患者依据严重程度分为轻型组、重症组,测定发病当天及第4天、第8天、第14天患者血清新喋呤含量,记录APACHE Ⅱ评分,分析新喋呤水平与急性胰腺炎严重度关系.结果:重症胰腺炎发病第8天和第14天新喋呤水平均高于轻型组(P<0.01和P<0.001),其值与APACHE Ⅱ评分呈正相关(P<0.05).重症急性胰腺炎病死组发病第8天和第14天新喋呤水平亦均高于重症急性胰腺炎存活组(P<0.05和P<0.001).结论:急性胰腺炎患者血清新喋呤水平升高,与疾病严重程度有一定的相关性,动态检测新喋呤水平可能有助于急性胰腺炎严重程度及预后的判断.

    作者:刘瑞林;何先弟;刘牧林;马良龙;张嘉 刊期: 2005年第02期

  • 三升袋营养液配制及临床护理

    目的:总结三升袋营养液配制的基本原则、注意事项以及临床护理措施.方法:收集我院胃肠外科肠外营养患者应用三升袋临床治疗26例,分别采用周围和外周静脉途径给予三升袋营养,观察三升袋配制的基本原则、组分、注意事项以及应用于不同患者处理方法.结果:26例患者中,1例肠瘘合并糖尿病患者出现不适、精神萎靡、多尿,1例3周后深静脉留置管周围出现红肿,经相应处理好转;其余应用反映良好.结论:三升袋明显改善患者营养状况,操作方便,安全性高,值得推广.

    作者:梁贤芳 刊期: 2005年第02期

  • 止血带结扎患肢治疗深静脉血栓的护理体会

    随着生活水平的提高、居住环境的改变及心脑血管疾病的长期危害,老年人患下肢深静脉血栓形成的患病率有上升趋势.2002年3月~2004年5月,我科收住54例下肢深静脉血栓形成的患者,经下肢深静脉造影、彩超等辅助检查确诊为下肢深静脉血栓形成,经抗凝、溶栓、祛聚治疗,效果满意,现将护理体会作一介绍.

    作者:彭介梅 刊期: 2005年第02期

  • 结核分枝杆菌疫苗研究进展

    结核病是一种人畜共患的慢性消耗性疾病,发病率和病死率很高.近年来,全球结核病疫情呈上升趋势.结核病再度肆虐与获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)的广泛传播、耐药菌株的出现、人群流动增加、城市化发展、社区人口密度增加等因素有关.有关结核病的研究与日俱增,其中有关结核病的免疫学和疫苗的研究是这一领域的热点.近年来由于结核分枝杆菌基因组序列的研究,明确了与疫苗有关的新型结核分枝杆菌抗原.本文就结核分枝杆菌的有效抗原、机体抗结核细胞免疫特点及结核菌疫苗研究的进展作一综述.

    作者:马丽娜;夏佩莹 刊期: 2005年第02期

  • PICC置管在急性白血病患者中的应用

    经外周静脉置入中心静脉导管(peripherally inserted central catheter,PICC)适用于5天以上的中、长期静脉治疗和静脉输入高渗性药物,尤其对于血液病患者,既避免了化疗药物对外周静脉血管网的损伤,又为患者及时的静脉治疗和取血提供了保证.

    作者:贺雪梅 刊期: 2005年第02期

  • 产程图曲线异常86例观察及护理

    目的:探讨产程图对观察及处理异常产程的临床指导意义.方法:回顾性分析86例产程图曲线异常产妇在分娩各个阶段引起难产的因素及相应的处理措施.结果:潜伏期异常27例,活跃期异常47例,胎头下降延缓或停滞12例.自然分娩45例,手术产41例(阴道助产17例,剖宫产24例);生后1 min Apgar评分:>3~7分3例,≤3分1例,无孕产妇及围生儿死亡.结论:正确使用产程图观察产程对于及早识别难产、指导临床处理、适时结束分娩及降低母婴并发症非常重要.

    作者:李金芝;巨永;孙雪芹 刊期: 2005年第02期

  • 空肠异位胰腺3例报道及文献复习

    目的:探讨空肠异位胰腺的临床病理特点.方法:分析3例空肠异位胰腺的临床病理资料.结果:3例分别因胃溃疡、胆道结石、胃癌手术而意外发现,长径0.5~2.5 cm.结论:空肠异位胰腺少见,常不出现临床症状.

    作者:凌人 刊期: 2005年第02期

  • 狼疮性肾炎的治疗新进展

    狼疮性肾炎(LN)是系统性红斑狼疮(SLE)累及肾脏所引起的一种免疫复合物介导性肾炎,是SLE主要的并发症和死亡原因之一.SLE患者根据光镜、电镜和免疫荧光检查,几乎都有不同程度的肾损害.本病的治疗必须遵循分级治疗和个体化原则,现就LN治疗的新进展作一综述.

    作者:马胜银;刘朝阳 刊期: 2005年第02期

  • 介入治疗先天性心脏病疗效评价

    目的:探讨应用封堵器治疗动脉导管未闭(PDA)、房间隔缺损(ASD)及室间隔缺损(VSD)方法并评价其初步疗效.方法:24例患者(PDA6例,ASD13例,VSD5例)均在X线透视及造影和食管超声心动图监视下经导管置入封堵器治疗PDA、ASD及VSD.结果:全组技术成功率100%,24例患者均于术后24 h、1个月和3个月行经胸超声心动图检查,均无残余分流,术后完全封堵率100%.结论:经导管置入封堵器是治疗PDA、ASD和VSD的一种操作简便、技术成功率高、疗效可靠的介入方法.

    作者:张恒;蔡鑫;包宗明;高大胜;史晓俊;王洪巨;宋伟;吕宏安 刊期: 2005年第02期

  • 蚌埠地区农村中小学生头虱感染流行因素调查

    目的:探讨头虱感染与个人和社会因素的关系.方法:肉眼观察学生头部有毛发的部位,凡发现头虱成虫、若虫及活卵者均为感染阳性,同时对其卫生习惯、父母的文化程度及职业、家庭居住情况和家庭子女数等因素进行问卷调查.结果:受检学生头虱感染率为19.16%,男性为12.81%,女性为29.33%,两性别间差异有显著性(P<0.01).初中生感染率为10.00%,小学生感染率为27.67%,小学生感染率高于初中生(P<0.005).头虱感染与不勤洗头、洗澡及与家人共用卫生洁具有密切关系(P<0.005和P<0.01);父母文化程度及职业、居住情况和家庭子女数等因素对中小学生头虱感染率也有很大的影响(P<0.05~P<0.005).结论:蚌埠地区农村中小学生头虱感染率较高,与不良卫生习惯、父母文化程度及职业、居住情况和家庭子女数等因素密切相关.

    作者:王雪梅;沈继龙;孙新 刊期: 2005年第02期

  • 人参总皂甙对大鼠膈肌收缩能力的影响

    目的:探讨人参总皂甙(GS)对疲劳大鼠膈肌收缩能力的影响.方法:SD大鼠12只,随机分为两组.疲劳组6只,予低频电刺激(刺激参数:频率5 Hz,电压20 V,波宽2 ms,串脉冲数5,串间隔330 ms)10 min诱发疲劳,静置30 min;人参总皂甙(GS)组6只,予低频电刺激(参数如上述)10 min诱发疲劳,应用人参总皂甙160 mg/L灌流30 min.分别测量其颤搐张力(Pt)、大强直张力(P0)、力-频率曲线、峰值收缩时间(CT)、半舒张时间(1/2RT)、大收缩速率(+dT/dtmax)及大舒张速率(-dT/dtmax).结果:GS组大鼠膈肌P0高于疲劳组(P<0.05);GS组大鼠膈肌1/2RT短于疲劳组(P<0.05);GS组大鼠膈肌+dT/dtmax及-dT/dtmax均高于疲劳组(P<0.05).结论:人参总皂甙能改善疲劳大鼠膈肌的收缩能力.

    作者:王超;胡高;刘艳;周庆;邵岗;李远兰 刊期: 2005年第02期

  • 肿瘤患者化疗前后血清IL-2、IL-18和TNF-α检测及临床意义

    目的:探讨化疗药物对机体免疫系统是否存在不同程度的抑制作用.方法:采用间接法亲和素-生物素复合物技术和酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)检测32例恶性实体肿瘤患者化疗一个周期前后细胞因子白细胞介素2(interleukin 2,IL-2)、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:IL-2、IL-18、TNF-α在肿瘤患者化疗前后变化均不显著(P>0.05).结论:机体的细胞免疫系统在化疗药物细胞毒性物质作用下能够发挥较强的自我调节能力,维持自身细胞免疫水平于一定的稳定状态,从而发挥其免疫功能.

    作者:邓庆梅 刊期: 2005年第02期

  • 全反式维A酸诱导肺癌细胞株凋亡的研究

    目的:探讨全反式维A酸(ATRA)对小细胞肺癌细胞株SH-77的治疗作用及机制,寻找肺癌治疗的新途径. 方法:采用不同浓度的 ATRA处理肺癌细胞株SH-77,通过苔盼蓝拒染实验检测细胞活力、MTT法检测细胞生长抑制率和流式细胞术检测细胞周期分布、细胞凋亡和Bcl-2蛋白的表达.结果:不同浓度的ATRA对SH-77的生长均有抑制作用, G1/G0期细胞比例升高,S期细胞比例降低,增殖指数(PI)降低,凋亡指数(AI)和AI/PI比值升高,诱导细胞凋亡;Bcl-2蛋白比例下降(P<0.01).结论:ATRA对肺癌细胞株SH-77的生长有抑制作用,同时可诱导其凋亡,可能与下调其Bcl-2蛋白表达有关.

    作者:胡俊锋;陈余清;李殿民;夏雪梅;邓静;黄礼年 刊期: 2005年第02期

  • 同型半胱氨酸对ECV-304细胞NO和ROS形成的影响

    目的:观察同型半胱氨酸(Hcy)对ECV-304细胞产生一氧化氮(NO)及其对细胞内活性氧(ROS)产生的影响.方法:将不同浓度的Hcy与ECV-304细胞体外共培养24 h,硝酸还原酶法检测3种一氧化氮合酶(NOS)激动剂前后各组NO含量;流式细胞术检测细胞荧光强度,以反映ROS水平.结果: 0.50、1.00 mmol/L Hcy作用24 h时NO量明显低于对照组(P<0.01);加入3种NOS激动剂刺激后,仍显示Hcy对ECV-304细胞释放NO反应的抑制作用,1.00 mmol/L Hcy组与对照组和低浓度组差异均有显著性(P<0.01).0.50、1.00 mmol/L Hcy组的荧光强度明显高于对照组和低浓度组(P<0.01).结论:Hcy可促进血管内皮细胞内ROS的产生,并抑制NO的形成,且呈剂量-效应关系.

    作者:周继红;章尧 刊期: 2005年第02期

  • MxEP与EP方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效比较

    目的:观察和比较MxEP与EP方案治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和不良反应.方法:30例Ⅲ~Ⅳ期NSCLC采用MxEP方案[足叶乙甙(VP16)75 mg/m2,第1~5天;顺铂(DDP)30 mg/m2,第1~3天;米托蒽醌(MxT)10 mg,第2天]联合化疗.27例Ⅲ~Ⅳ期NSCLC采用EP方案(VP16 75 mg/m2,第1~5天;DDP30 mg/m2,第1~3天)联合化疗.结果:MxEP组CR和PR共17例,有效率56.7%,中位缓解期6个月,中位生存期13个月;EP组CR和PR共11例,有效率33.3%,中位缓解期3个月,中位生存期8个月,两组疗效差异有显著性(Ρ<0.05).主要的毒副反应为食欲减退、恶心呕吐、白细胞、血小板减少,患者均可耐受.结论:MxEP 是治疗晚期非小细胞肺癌的一种可以选择的方案.

    作者:黄柱华;周争光 刊期: 2005年第02期

  • 脾脏在大鼠急性胰腺炎炎症介质释放中的作用

    目的:探讨脾脏在全身炎症反应综合征(SIRS)中对炎症介质释放的作用.方法:大鼠胆胰管内注入3%牛磺胆酸钠(0.7 ml/kg)及胰蛋白酶(3 000 u/kg)制成急性胰腺炎模型以引起SIRS.实验大鼠随机分成4组:假手术组,脾切除组,脾切除+急性胰腺炎组,急性胰腺炎组.分别观察各组血清淀粉酶、TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10水平,取末段回肠行光镜及透射电镜观察肠黏膜受损情况.结果:脾切除+急性胰腺炎组TNF-α、IL-1β及IL-10均低于急性胰腺炎组(P<0.01);病理学检查显示,脾切除+急性胰腺炎组肠黏膜上皮仅轻微水肿,肠黏膜屏障基本完整,而急性胰腺炎组肠黏膜上皮水肿明显,绒毛坏死,上皮细胞变性,炎性细胞浸润.结论:脾脏在急性炎症反应早期,可以明显促进炎症介质的产生和释放,加重炎症反应.脾脏切除后可减少促炎因子的产生和释放,肠黏膜屏障受损减轻.

    作者:鲁正;朱言亮;何长林;刘牧林;刘金新 刊期: 2005年第02期

  • Richards钉治疗老年人股骨粗隆间骨折21例

    股骨粗隆间骨折是老年人常见的骨折,其治疗方法较多,但因受老年并发症的困扰,疗效常欠理想.2001年1月~2004年3月,我院采用Richards钉治疗股骨粗隆间骨折21例,经随访观察,疗效满意.现作报道.

    作者:赵建秋 刊期: 2005年第02期

蚌埠医学院学报杂志

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主管:安徽省教育厅

主办:蚌埠医学院