黄民；张春晓；刘永峰；王绍
目的:探讨水杨酸钠给药对小鼠下丘核神经元GABAα、NR1表达及听反应的影响.方法:实验将36只成年健康昆明小鼠分三组(n=12):A组:对照组;B组:水杨酸钠给药组(450mg.kg.d-1);C组:水杨酸钠(450mg.kg-1.d-1)+利多卡因(10mg.kg-1.d-1)组.各组均经腹腔注射给药,A组给以同等剂量的生理盐水,所有动物自由饮食.给药15 d后进行检测.采用RT-PCR技术检测小鼠下丘核区GABAα、NR1mRNA的表达;采用细胞外电生理记录技术研究下丘核区神经元在水杨酸钠给药后强度-发放率函数、强度-潜伏期函数和频率调谐曲线的变化.结果:①水杨酸钠组的下丘核区GABAαmRNA表达较对照组明显降低(P＜0.05);水杨酸钠+利多卡因组与对照组比较无显著性差异(P＞0.05);水杨酸钠组NR1mRNA表达较对照组明显升高(P＜0.01),水杨酸钠+利多卡因组与对照组比较有显著性差异(P＜0.05);②水杨酸钠给药后发放率和潜伏期函数呈非单调性改变,而神经元的调谐曲线从狭窄型向宽阔型转变;③水杨酸钠+利多卡因组发放率和潜伏期函数呈非单调性改变,而神经元的调谐曲线从狭窄型向宽阔型转变例数显著减少(P＜0.05,P＜0.01).结论:①水杨酸钠引起实验小鼠下丘核GABAαmRNA表达下调,同时又使小鼠下丘核NR1mRNA表达增高;②水杨酸钠给药后发放率和潜伏期函数呈非单调性改变,而神经元的调谐曲线从狭窄型向宽阔型转变③利多卡因有逆转水杨酸钠给药后发放率和潜伏期函数呈非单调性改变和神经元的调谐曲线从狭窄型向宽阔型转变的作用.
作者：尹时华；龚树生；鄢开胜；李穗；陈沛；陈广理 刊期： 2006年第02期
目的:观察胍基丁胺对血清诱导大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响.方法:采用组织块贴壁法原代培养大鼠PASMCs,取对数生长期PASMCs分对照组和胍基丁胺组,比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力,液闪计数仪测定3H-TdR掺入量,流式细胞仪测定细胞周期,图像分析法测定增殖细胞核原含量(PCNA)作为细胞增殖的指标.结果:胍基丁胺对PASMCs培养液中LDH活力无明显影响;胍基丁胺可显著减少血清诱导增殖PASMCs的3H-TdR掺入量和PCNA的含量(P＜0.01),使G0/G1期细胞比例显著增加,G2/M期细胞比例显著减少(P＜0.01).随着胍基丁胺浓度的增加,PASMCs3H-TdR掺入量也相应显著减少(P＜0.01).结论:胍基丁胺对PASMCs不产生明显的细胞毒性作用;但可抑制血清培养大鼠PASMCs的增殖,这种抑制作用呈剂量依赖性.
作者：曹学武；高钰琪 刊期： 2006年第02期
目的:了解丁羟回醚(BHA)对小鼠胎肝(FL)细胞神经组织特异基因表达的影响及其信号途径.方法:小鼠胎肝细胞,以DMEM/F12+10%胎牛血清培养液培养;第4 d后,去悬浮细胞,留黏附细胞,加入或者不加入磷酸肌醇3羟基激酶(PI3K)抑制剂LY294002(20 μmol/L)处理24 h,再加入BHA至终浓度0.2 mmol/L,然后继续培养5d.用Western blot和半定量RT-PCR方法分析BHA处理前后神经组织细胞特异基因表达.结果:胎肝细胞本身表达神经组织特异基因水平较低或者不表达.BHA则促进了胎肝细胞内神经组织特异基因表达:NF-L mRNA增加5.8倍、NF-H mRNA增加8 0倍、TH mRNA增加30倍、BF-1 mRNA增加2.68倍;NF-L蛋白增加11.29倍、NF-H蛋白增加5 5倍、BF-1蛋白增加2.53倍、TH蛋白增加4.76倍.而LY294002能明显抑制BHA诱导的神经组织细胞特异蛋白NF-L、NF-H、BF-1和TH的表达.结论:PI3K活性与BHA诱导小鼠胎肝细胞表达神经组织细胞特异结构和功能基因有关.
作者：刘革修；张洹；何冬梅 刊期： 2006年第02期
目的:探讨PPARγ激活物对心脏非心肌细胞(cardiac nonmyocyte,CNM)增殖的影响及其可能涉及的PPARγ途径.方法:体外原代培养新生大鼠的CNM,以AngⅡ刺激,并分别给予不同浓度的吡格列酮和15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2).以MTT比色法和3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验检测CNM增殖情况,以瞬时基因转染CNM测定PPARγ活化后对靶基因的转录调控活性.结果:AngⅡ刺激后CNM明显增殖、3H-胸腺嘧啶脱氧核苷的掺入明显增加,经不同浓度的吡格列酮和15d-PGJ2作用后,呈剂量依赖性抑制CNM的增殖和3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入.将PPARγ表达质粒载体与含乙酰辅酶A氧化酶(ACO)启动子的过氧化酶体增殖反应元件(PPRE)表达质粒共转染CNM,其荧光素酶的表达量较非共转染显著增强;以吡格列酮和15d-PGJ2刺激后,荧光素酶的相对表达量呈剂量依赖性显著增强.结论:PPARγ激活物吡格列酮和15d-PGJ2在体外显著抑制新生大鼠CNM的增殖,这一过程可能与PPARγ的激活有关.
作者：叶平；伍士敏；刘永学 刊期： 2006年第02期
目的:探讨中药刺五加注射液(ASS)对庆大霉素(GM)耳毒性作用的影响及其机制.方法:豚鼠随机分成对照组、GM组、ASS+GM组和ASS组.采用听性脑干反应(ABR)、透射电镜技术(TEM)、Western blot方法观察用药前后豚鼠的ABR阈值、形态学变化及caspase-3的表达情况.结果:用药后GM组ABR阈值明显升高;ASS组ABR阈值与对照组相比无显著性差异,与GM组和ASS+GM组相比明显降低.透射电镜观察用药后GM组毛细胞损伤严重,出现了凋亡的形态学特征,而ASS+GM组损伤较轻.Western blot结果表明用药后GM组豚鼠caspase-3表达明显增加;ASS+GM组caspase-3的表达稍有升高.结论:刺五加注射液对庆大霉素耳毒性具有拮抗作用,其机制可能是通过抑制caspase-3的表达来实现的.
作者：贾琳琳；汤浩 刊期： 2006年第02期
目的:研究缺血/再灌注损伤心肌肌浆网四种钙调控蛋白mRNA表达的变化.方法:将SD大鼠分为正常对照组和缺血/再灌注损伤组,采用Langendorff离体灌流技术,全心停灌15 min后行45 min复灌制备缺血/再灌注模型,记录心脏收缩功能各项参数(左室发展压、+dp/dt-max、-dp/dt-max),进行心律失常评分,同时对两组心肌标本进行半定量RT-PCR检测,测定SERCA、PLB、IP3R2和RyR2四种蛋白质的mRNA表达水平的变化.结果:与正常对照组比较,各时间点缺血再灌注心脏左室发展压、+dp/dt-max、-dp/dt-max均显著下降,再灌注阶段的心律失常评分明显增高,同时发现心脏SERCA,IP3R2,RyR2 mRNA表达降低,然而PLB mRNA表达未出现变化.结论:缺血再灌注损伤造成心脏功能减退,心律失常增多,并可诱导心室肌钙调控蛋白SERCA、IP3R2、RyR2mRNA表达下调.
作者：郑霞；孙坚；胡申江；朱朝晖；汪国忠；李江；张必祺 刊期： 2006年第02期
目的:观察低氧/复氧和间歇性低氧对少突胶质前体细胞(O2A)增殖的影响.方法:取混合培养4 d的胶质细胞,按实验分为低氧/复氧、间歇性低氧和常氧3组,低氧/复氧组细胞置低氧环境(3%O2)中分别培养1 h、2 h、3 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h和72 h后取出,恢复常氧培养至9 d.间歇性低氧组每天上午定时将细胞置于低氧环境中分别培养1 h、2 h、3 h、4 h后取出,恢复常氧培养.每天一次,分别重复1～4次后,常氧培养至9 d.然后同时取出各组细胞,进行O2A细胞的分离纯化和细胞计数.结果:低氧/复氧1 h、2 h、3 h组和间歇性低氧1 h、2 h、3 h组,O2A细胞数均较常氧组明显增多.结论:低氧/复氧和间歇性低氧都可促进体外培养的O2A细胞明显增殖.其机制尚有待于进一步研究.
作者：丁爱石；殷红兵；吴卫平；朱玲玲；徐全刚；赵彤；范明 刊期： 2006年第02期
目的:观察中药天年饮(Tiannianyin,TNY-traditional chinesemedicine)对D-半乳糖衰老大鼠脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量的影响.方法:选用成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组均为10只:正常组、衰老模型组、TNY用药组、阴性对照组.D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型,采用高效液相色谱-电化学法检测各组大鼠下丘脑、海马NE、DA、5-HT的含量.结果:D-半乳糖衰老大鼠下丘脑、海马NE、DA、5-HT的含量明显降低(与正常大鼠相比P＜0.01):TNY可明显提高脑单胺类神经递质的含量(用药组与模型组相比P＜0.05).结论:TNY可有效调整中枢神经递质的合成,具有良好延缓衰老的作用.
作者：宋成军；陈志宏；张松岩；高福禄 刊期： 2006年第02期
目的:观察内源性内皮素-1(ET-1)在低氧所致心肌细胞凋亡中的作用及受体机制.方法:培养的新生乳鼠心肌细胞分为低氧对照组和内皮素受体拮抗剂预处理+低氧组,前者仅给DMEM液,后者给予ETA受体拮抗剂BQ610或BQ123及ETB受体拮抗剂BQ788后低氧培养24 h,TUNEL和AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况.结果:TUNEL检测显示低氧24 h对照组心肌细胞凋亡百分数为24.2%±2.2%,BQ61 0 5μmol/L+低氧24 h组为13.2%±3.7%,显著低于低氧24 h组(P＜0.01).流式细胞术检测显示BQ123(0.04,0.2,1.0μmol/L)浓度依赖性地抑制低氧引起的心肌细胞凋亡及浓度依赖性提高低氧培养心肌细胞存活率,而BQ788对低氧引起的心肌细胞凋亡及存活率的降低无明显影响.结论:内源性ET-1参与促进低氧引起的心肌细胞凋亡,该作用主要是通过ETA受体介导.
作者：卢红；林丽；严晓红；王媛；任安经；袁文俊 刊期： 2006年第02期
目的:观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)对内毒素休克(ES)时海马损伤的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:将日本大耳白兔经静脉注入内毒素的主要活性成分脂多糖(LPS,8mg/kg)复制ES模型.动物(32只)随机分为对照组、LPS组、CCK-8+LPS组和非特异性CCK受体拮抗剂丙谷胺(Pro)+LPS组(n=8).监测平均动脉压(MAP)的变化,光、电镜观察海马的组织形态学改变,比色法检测海马NOS和SOD活性、NO和MDA含量的改变,用SD大鼠(12只,同上复制模型及分组)以免疫组织化学染色法观察海马iNOS和nNOS表达的变化.结果:与对照组相比,注入LPS后出现MAP显著而持续下降(P＜0.01);海马部位神经元损伤明显;iNOS和nNOS表达增强,NOS活性、NO和MDA含量显著升高(P＜0.05、P＜0.01和P＜0.01),SOD活性则降低(P＜0.01).预先注入CCK-8可明显减轻上述变化,预先注入Pro则加剧以上变化.结论:CCK-8可减轻ES时脑内海马部位的损伤,其机制可能与其抗氧化作用和抑制NO的过量生成有关.
作者：韦鹏；凌亦凌；牛志云；段国辰；杨世方 刊期： 2006年第02期
目的:测定大鼠骨元素含量和血清相关激素及IL-6含量,研究运动对去卵巢大鼠骨元素代谢和相关激素的影响.方法:健康4月龄雌性SD大鼠24只,用抽签法随机分成4组:正常对照组;假去卵巢组;去卵巢组;去卵巢+运动组.运动组于去卵巢术后第7 d开始运动训练,每周5 d,每天连续匀速跑45 min,16 m/min,跑道倾角0°,持续10周.结果:去卵巢大鼠骨Ca,Mg,S,Co,Mn,Zn等含量降低,骨P含量升高,血清E2,P,TSH,T4,CT,Cortisol,GH等显著降低,IL-6,FSH,LH等的含量显著升高.运动训练可使去卵巢大鼠骨Ca,Mg,S,Co,Mn等含量回升,血清E2,P,TSH,T4,CT,Cortisol,GH等显著回升,IL-6,FSH,LH等显著回降.结论:运动可纠正去卵巢所致的大鼠骨元素代谢和相关激素的改变.
作者：张兆强；刘浩宇；刘锡仪 刊期： 2006年第02期
目的:观察胃动素对新生大鼠胃窦平滑肌细胞内Ca2+浓度的影响及机制.方法:采用激光共聚焦显微镜结合细胞内荧光染色观察不同条件下相同浓度胃动素对培养大鼠胃窦平滑肌细胞内Ca2+浓度的影响.结果:细胞膜Ca2+通道阻断剂维拉帕米、含Ca2+螯合剂EGTA的D-Hank's液及细胞内Ca2+释放阻断剂TMB-8均可不同程度抑制MTL对胃窦平滑肌细胞内Ca2+的升高作用.结论:MTL具有升高胃窦平滑肌细胞内Ca2+的作用,细胞外Ca2+内流和内Ca2+释放参与了这种作用.
作者：方萍；董蕾；罗金燕；孙秀珍 刊期： 2006年第02期
目的:探讨富硒板党对小鼠低氧耐受形成中脑组织兴奋性氨基酸(EAA)含量的影响.方法:将小鼠用富硒板党处理后,建立小鼠急性重复低氧耐受模型,观察富硒板党对小鼠低氧耐受形成中的脑组织谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)和甘氨酸(Gly)的影响.结果:富硒板党对正常小鼠脑组织EAA含量无影响,可使低氧耐受形成中脑组织Glu、Asp含量降低,对GABA、Gly无明显影响.结论:富硒板党能明显降低低氧小鼠脑组织中EAA含量,从而发挥对脑损伤的保护作用.
作者：肖本见；陈国栋；谭志鑫；李玉山；兰宗平 刊期： 2006年第02期
目的:探讨褪黑素(melatonin,MLT)抑制17-β-雌二醇(17-β-estradiol,E2)诱发垂体催乳素(prolactin,PRL)瘤的增生及其机制的初始阶段,MLT对雌激素受体的作用.方法:在体实验采用每日定时给各组SD大鼠分别皮下注射不同浓度的MLT,建立MLT抑制E2诱发的垂体PRL瘤增生的动物模型.离体实验采用原代培养细胞原位杂交方法,探讨垂体PRL瘤细胞MLT受体的表达、MLT对雌激素受体(ER)表达的作用;应用电泳迁移率改变(EMSA)的方法,观察MLT对雌激素受体(ER)与雌激素反应元件(ERE)结合的效应.结果:每只大鼠每日定时皮下注射0.25或0.50 mg MLT能显著抑制E2诱发的垂体PRL瘤的增生(分别P＜0.01、P＜0.05);E2诱发的垂体PRL瘤细胞内有MLT受体MLT1a和MLT1b;给0.25 mg/day/rat MLT组的大鼠垂体PRL瘤细胞内ER的表达显著减少(P＜0.01)、ER与ERE的结合量显著降低(P＜0.01).结论:一定剂量的MLT能显著抑制E2诱发的SD大鼠垂体PRL瘤的增生,其作用机制之一可能与MLT抑制ER的表达、及其部分阻断ER与ERE的结合有关.
作者：杨全会；许建宁；张荣；高列；许荣焜 刊期： 2006年第02期
目的:观察大豆甙元磺酸钠对力竭应激性溃疡的影响,探讨其可能的作用途径.方法:采用小鼠力竭性游泳,计数胃部溃疡点数建立应激溃疡模型,腹腔注射不同剂量的大豆甙元磺酸钠及一氧化氮合酶(NOS)抑制剂(L-NAME)并通过NADPH-黄递酶组织化学法检测胃壁NOS阳性神经元的变化.结果:大豆甙元磺酸钠具有保护胃粘膜的作用,且呈剂量效应;L-NAME可防止应激引起的胃粘膜损伤,L-NAME与有效剂量的大豆甙元磺酸钠联合使用后,大豆甙元磺酸钠对胃粘膜的保护作用明显增强;正常及应激小鼠胃壁NOS神经节数目基本不变,大豆甙元磺酸钠对正常小鼠胃壁NOS神经元影响不明显,而对应激小鼠胃壁单位面积及单个神经节内NOS阳性神经元数目均有显著降低作用.结论:应激时NO升高可导致溃疡,大豆甙元磺酸钠能够保护胃粘膜,其作用是通过抑制应激状态下NOS的升高,限制应激状态下NO过度升高,起到保护胃粘膜的作用.
作者：安锋利；安书成；张尊听 刊期： 2006年第02期
目的:观察可卡因对痛阈和LHb痛相关神经元放电的影响.方法:皮下注射不同剂量可卡因,观察大鼠痛阈的变化;用玻璃微电极记录静脉注射可卡因前后,Hb神经元对伤害性刺激的反应.结果:低剂量可卡因降低大鼠痛阈;高剂量可卡因提高大鼠痛阈.静脉注射可卡因后,LHb痛兴奋单位自发放电增加,对痛的兴奋反应加强;LHb痛抑制单位自发放电减少,对痛的抑制反应减弱.结论:低剂量可卡因降低痛阈,同时提高LHb痛相关神经元的敏感性.
作者：黄民；张春晓；刘永峰；王绍 刊期： 2006年第02期
目的:研究褪黑素对海马CA3区长时程增强(LTP)诱导阶段的影响及可能的机制.方法:用细胞外电生理记录方法,通过向大鼠海马CA3区分别微量注射褪黑素、Tacrine(胆碱酯酶抑制剂)和DNQX(非NMDA受体的竞争性拮抗剂),以海马CA3区群体兴奋性突触后电位(fEPSP)斜率的改变为指标,观察PP-CA3通路的LTP变化.结果:①0.2μg/μl、1μg/μl和5μg/μl的褪黑素对CA3区的诱发电位和LTP均有抑制作用,随着剂量加大,抑制作用加强.②褪黑素能抑制Tacrine对LTP诱导的易化作用.③DNQX能部分阻断褪黑素对LTP诱导的抑制作用.结论:褪黑素对LTP诱导的抑制作用可能与胆碱能系统和非NMDA受体有关.
作者：杨荣；肖鸿美；黄丹；胡新武；胡晓玲 刊期： 2006年第02期
目的:探讨匹伐他汀对Klotho基因敲除杂合子小鼠血管新生的促进作用及其作用机制.方法:建立Klotho基因敲除杂合子小鼠(hetero kl+/)和同窝出生野生型小鼠(wild kl+/+)下肢缺血模型并分为4组:①hetero正常组;②hetero匹伐他汀组;③wild正常组;④wild匹伐他汀组.使用激光多普勒血流测定仪测定klotho(kl+/-,kl+/+)小鼠投药前、下肢缺血手术后双下肢血流.免疫荧光组化SP法计数Klotho(kl+/,kl+/+)小鼠缺血肢毛细血管数.免疫酶组化直接法计数Klotho(kl+/,kl+/+)小鼠缺血肢磷酸化Akt阳性细胞数.蛋白印迹杂交方法检测Klotho(kl+/)小鼠缺血肢VEGF蛋白表达.结果:匹伐他汀使Klotho(kl+/,kl+/+)小鼠术后缺血肢血流恢复明显,缺血肢与非缺血肢血流面积比明显增加;匹伐他汀使Klotho(kl+/-、kl+/+)小鼠缺血肢毛细血管密度增加、p-Akt阳性细胞数明显增加;匹伐他汀使Klotho(kl+/)缺血肢VEGF蛋白表达增强.结论:匹伐他汀有促进Klotho基因敲除杂合子小鼠血管新生的作用.其作用机制可能是通过VEGF-p-Akt-NO径路实现的.
作者：张月兰；田文；张子新；曾定尹；齐国先 刊期： 2006年第02期
目的:观察线粒体钙单向转运体在心肌低氧/复氧损伤中的作用并探讨其机制.方法:应用Langendorff大鼠心脏灌流模型,低氧/复氧(H/R)采用冠脉前降支结扎30 min、复灌120 min的方法.用生物信号采集系统记录左室发展压(LVDP)、左室压大上升/下降速率(±dP/dtmax)、左室舒张末压(LVEDP);分光光度法分别检测冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量和线粒体活性氧(ROS);TTC染色法检测心肌梗死面积.结果:与单纯低氧/复氧组相比,复氧起始给予线粒体钙单向转运体抑制剂钌红(5μmol/L)明显改善左心室各项功能指标,减小心肌梗死面积,降低线粒体ROS和冠脉流出液中LDH含量;而在复氧期起始给予线粒体钙单向转运体激动剂精胺(20μmol/L),显著升高了线粒体ROS活性,冠脉流出液中LDH含量在复氧5 min、20 min、30 min时显著增多,左心室各项功能指标与心肌梗死面积与单纯低氧/复氧组相比无显著差异.ROS清除剂MPG(1 mmol/L)与精胺联合应用则取消了精胺的作用.结论:抑制线粒体钙单向转运体可能通过减少线粒体ROS的生成减轻心脏低氧/复氧损伤.
作者：叶挺梅；张世忠；夏强 刊期： 2006年第02期
目的:探讨在体外培养条件下人脐血单个核细胞向肝细胞的分化.方法:用FGF4、HGF诱导新鲜分离的脐血单个核细胞,并于培养16 d通过RT-PCR、免疫细胞化学染色方法等方法检测肝细胞标志物的表达情况.结果:培养16 d后,生长因子组贴壁的脐血MNCs中出现细胞体积增大、胞质丰富的双核细胞,RT-PCR和免疫细胞化学染色显示有肝细胞标志物的阳性表达(P＜0.05).结论:在生长因子诱导下,脐血单个核细胞能够分化为类肝细胞.
作者：房家智；张芳婷；汪晓湘；万汇涓；叶静；龙霞；于洁 刊期： 2006年第02期
中国应用生理学杂志
主管:
主办：中国生理学会,军事医学科学院,卫生学环境医学研究所
