朱荟云;吴芳;吴江东;张杰;董江涛;章乐;张帅;张大龙;武青青;张万江
鼠疫是由鼠疫耶尔森菌引起的人兽共患的烈性传染病,鼠疫生态地理景观是形成自然疫源地的重要因素.疫源地地理景观类型多样,结构复杂,探讨地理景观特征与鼠疫的关系及其相关的研究技术,对阐明各类疫源地的适宜生境、鉴别地理生态环境系统的脆弱性及预防鼠疫的发生流行具有重要作用.
作者:徐丹丹;尹家祥 刊期: 2017年第07期
目的 了解陕北乙肝患者中弓形虫的感染情况.方法 本研究筛查了139例乙肝患者,并以43例健康人群作为对照研究.结果 陕北弓形虫感染率较低,即乙肝患者中的感染率为5.04%,而健康人群中的感染率为O.弓形虫感染者主要为男性、HBeAg阳性、HBV病毒载量高的患者;统计分析显示弓形虫感染与以上3种因素之间均无统计学相关性.结论 陕北弓形虫感染率较低,并且弓形虫感染与HBV无统计学相关性.
作者:周衍衡;张瑞芹;李春霞;陈延平;徐光华;白占涛 刊期: 2017年第07期
目的 了解石家庄地区不同来源沙门菌毒力基因携带状况,为进一步开展沙门菌风险评估提供基础数据.方法 收集石家庄地区2011年至2016年食物中毒、屠宰场鸡肉及市售鸡肉的沙门菌分离株186株,进行血清分型,对8种毒力基因(invA、sopE、agfA、spvR、hilA、stn、pefA、shdA)进行PCR检测.结果 石家庄地区不同来源沙门菌中,共检出13种血清型,以肠炎沙门菌为显著优势群,上述8种毒力基因均有检出,其中携带率较高的毒力基因为hilA、stn、invA,分别是90.3%(168/186)、86.6%(161/186)和82.8%(154/186).结论 不同来源沙门菌的毒力基因携带状况不同.生禽食品的终端销售环节出现了较严重的污染,应采取措施加强对石家庄地区各早市流动生禽摊点储存和销售环节的食品卫生监督与防控.
作者:牛莉娅;徐保红;蔡文华;王燕;杨新英;郭玉梅;孙殿兴 刊期: 2017年第07期
目的 探究VEG株弓形虫卵囊对中国昆明小鼠的致病性.方法 分别选择<1个,100个~108个的VEG株弓形虫卵囊灌胃昆明小鼠,采用MAT、H &E和IHC方法研究小鼠对弓形虫的感染情况,并分析小鼠感染率,生存率及其大脑内的弓形虫包囊数量.结果 ≥102个VEG株弓形虫卵囊可引起小鼠100%感染,低致死剂量为102个卵囊,100%致死剂量为108个卵囊,急性期死亡时间为7 DPI~14 DPI,弓形虫的成囊率是32.14%(9/28),包囊数量为9~857个/只小鼠大脑,感染小鼠生存率为67.44%(29/43),长存活时间≥390 DPI.结论 VEG株弓形虫卵囊对昆明小鼠的毒力中等,包囊形成率较高.
作者:陆瑶瑶;冯永杰;董辉;杨玉荣 刊期: 2017年第07期
目的 对湖州地区一起急性腹泻疫情中检出的GI.8型诺如病毒进行序列测定和分子特征分析.方法 根据GI型诺如病毒保守序列自行设计5对引物,用一步法RT-PCR分段扩增GI.8型诺如病毒CHN/Huzhou/N10的全基因组序列,采用生物信息学相关软件对序列进行整理和分析.结果 CHN/Huzhou/N10全长7 740 bp,编码区包括3个开放读码框架(ORF1~ORF3),分别长5 400 bp(5~5 404 nt)、1 632 bp(5 388~7 019 nt)和642 bp(7 019~7 660 nt).RdRp区,VP1区和VP2区的系统进化分析显示CHN/Huzhou/N10属于GI.8基因型.衣壳蛋白区的氨基酸序列分析表明,与原型株Boxer/2001/US相比,CHN/Huzhou/N10 VP1区的氨基酸序列共有16个变异位点,12个位于P2区.其中aa347T→S,aa397T→E这2个变异位点分别位于HBGA受体结合袋位点Ⅱ和Ⅲ内.结论 本文获得了我国GI.8型诺如病毒CHN/Huzhou/N10的全基因组序列,相关序列信息可用于病毒的遗传进化研究、快速诊断试剂的研发以及疫苗的设计.
作者:纪蕾;吴晓芳;陈莉萍;韩建康 刊期: 2017年第07期
目的 明确PERV的整合是否影响HEK293细胞中HERV-W各基因表达水平.方法 根据GenBank中登录的基因序列,分别设计HERV-W gag、HERV-W pol、HERV-W env、syncytin-1和humanβ-actin引物,并分别建立SYBRGreen I荧光定量PCR检测方法,用于检测HEK293、HEK293-PERV中各基因mRNA的表达.结果 本研究建立的检测方法均具有良好的特异性、敏感性和稳定性,标准曲线的相关系数大于0.99,扩增效率介于95%~110%,可用于检测.结论 检测结果经2-△△o分析后,发现与对照相比,PERV整合后的HEK293-PERV中HERV-W gag、HERV-W pol、HERV-W env和syncytin-1 mRNA相对表达量分别升高37.08倍、42.56倍、2.49倍和13.17倍,为进一步明确PERV在异种移植中的安全性提供参考.
作者:马玲;唐海波;李军;白安斌;王志强;吴健敏 刊期: 2017年第07期
目的 了解福建省鼠类中巴尔通体(Bartonella spp.)的感染状况和基因特征.方法 2014-2016年采用笼日法在福建省闽东、闽西、闽南、闽北和闽中捕鼠,现场鉴定并记录捕获鼠类的采集时间、地点、鼠种、性别、鼠龄等资料.采集鼠心脏血,PCR扩增巴尔通体的gltA和16S~23S rRNA基因,阳性PCR产物送测序并进行序列比对分析,构建系统进化树.感染率间的比较采用x2检验或Fisher精确检验法.结果 调查共布放鼠笼5 917笼次,捕鼠381只,鼠密度为6.44%.巴尔通体感染率为12.34%.家鼠的巴尔通体感染率为10.61%,褐家鼠(Rattus norvebicus)和黄胸鼠(Rattus flavi pectus)感染率分别为11.30%和10.00%;野鼠的感染率为13.86%,黄毛鼠(Rattus losea)和针毛鼠(Rattus fulvescens)感染率分别为22.86%和18.00%,野鼠的巴尔通体感染率高于家鼠的感染率,但无统计学意义.从地区分布看,闽西、闽北一带的感染率较高,分别为20.00%和25.33%.闽南一带感染率低,为0.各地区感染率存在统计学意义(P<0.05).不同性别、鼠龄的巴尔通体感染率差异无统计学意义,而不同的生境下的感染率存在统计学差异(P<0.05).阳性样本测序分析显示,福建省鼠类感染的巴尔通体序列与B.tribocorum、B.elizabethae和B.grahamii序列接近.结论 福建省鼠类存在巴尔通体感染,存在对人群致病的风险.
作者:肖方震;林代华;周淑姮;徐国英;邓艳琴 刊期: 2017年第07期
德尔卑沙门菌是重要的人兽共患病原菌,可引起人食物中毒和败血症等症状,而且对牲畜的繁殖及健康带来严重威胁.本文就德尔卑沙门菌的流行现状、基因组学及致病机制等方面的研究进行总结,以期为该菌的防治提供指导.
作者:郑慧娟;潘志明;焦新安 刊期: 2017年第07期
目的 建立牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法.方法 以重组纯化的BRSV-G蛋白免疫家兔和小鼠,制备抗G蛋白的多克隆抗体(PcAb)和单克隆抗体(MAb),方阵滴定法优化DAS-ELISA方法抗体工作浓度及反应条件,并对其敏感性、特异性、符合率进行验证.结果 获得5株稳定分泌抗G蛋白MAb的杂交瘤细胞株,分泌抗体亚类均为IgG1型κ链,Western blot、IFA试验表明PcAb和MAb均与G蛋白和BRSV发生特异性反应,MAb作为捕获抗体的佳包被浓度为2.5 μg/mL,PcAb作为检测抗体佳工作浓度为5 μg/mL,判定临界值为0.22,低检测限为1.43 μg/mL,批内和批间重复性试验变异系数均小于10%,与常引起牛呼吸道疾病的几种病原均无交叉反应,与RT-PCR的敏感性、特异性、符合率分别为92.0%、100%、95.6%.结论 建立的检测BRSV的DAS-ELISA方法可用于临床样品的大规模检测,为BRSV疫情的监测和快速诊断奠定了基础.
作者:李艳婷;侯喜林 刊期: 2017年第07期
目的 探索液氮保种对田鼠巴贝虫标准株存活力的影响.方法 液氮保种1、3、6、9个月的田鼠巴贝虫标准株小鼠血室温复苏后感染正常BALB/c小鼠各3只(复苏1代,实验组),100 μL/只;同时取3只新感染田鼠巴贝虫活体保藏小鼠为对照组.实验组染虫率达高峰时再接种正常BALB/c小鼠(复苏2代),观察田鼠巴贝虫的形态变化及增殖情况,并观察不同保存时间复苏1代及复苏2代的染虫率情况.结果 液氮保种田鼠巴贝虫与活体保种的田鼠巴贝虫相比,形态变化不大,都会出现小滋养体、环状滋养体、裂殖体及未成熟和成熟裂殖子等多种形态.液氮复苏1代首次查见虫体及达到染虫率高峰的时间比动物保种延迟1~2 d,但复苏2代即恢复一致.田鼠巴贝虫染虫全血经液氮保存1、3、6、9个月,仅达到高峰期时间延迟,其存活力未见明显下降.结论 液氮保种对田鼠巴贝虫形态及存活力影响小,可成为一种较好的保存方式.
作者:蔡玉春;陈家旭;卢艳;艾琳;吴芬;陈韶红 刊期: 2017年第07期
目的 探讨类泛素-蛋白酶体系统对结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的影响.方法 采用刃天青显色法检测利福平对结核分枝杆菌的低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),比较分析结核分枝杆菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因的过表达或缺失突变对结核分枝杆菌利福平MIC的差异;检测分别加入羰基氰氯苯腙、利血平、维拉帕米和氯丙嗪4种外排泵抑制剂前后各菌株对利福平MIC的影响.结果 结核分枝杆菌Pup、Dop、PafA和Mpa基因的过表达均能增强单纯耐利福平结核分枝杆菌对利福平的耐药性,而Pup、Mpa、Dop和PafA基因的缺失均能显著降低单纯耐利福平结核分枝杆菌对利福平的耐药性,P值均<0.05.4种药物外排泵抑制剂能不同程度的降低各过表达菌株对利福平的MIC,P值均<0.05,并且,类泛素-蛋白酶体系统与外排泵抑制剂之间存在一定交互作用.结论 类泛素-蛋白酶体系统对结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的产生有影响;类泛素-蛋白酶体系统可能通过调控外排相关通路蛋白来影响结核分枝杆菌单纯利福平耐药性的产生.
作者:朱荟云;吴芳;吴江东;张杰;董江涛;章乐;张帅;张大龙;武青青;张万江 刊期: 2017年第07期
目的 对北京某医院就诊的一例疑似人感染猪链球菌病患者的血液来源菌株进行鉴定与毒力因子检测分析.方法 将患者血液分离菌株接种哥伦比亚血琼脂平板,经革兰氏染色镜检、血清凝集试验、VITEK 2 Compact微生物分析仪以及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测后,再用PCR技术检测猪链球菌种特异性基因(16SrRNA)和猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因(cps2J)以及多个毒力基因:溶菌酶释放相关蛋白(mrp)、溶血素(sly)、细胞外蛋白因子(ef)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、纤粘连蛋白结合蛋白(fbps)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gapdh)的编码基因和毒力相关基因orf2.结果 传统细菌鉴定方法和蛋白质谱技术以及核酸检测方法将这株患者血源性细菌分离株鉴定为猪链球菌2型,该菌株的毒力基因cps2J、sly、ef、gdh、fbps、gapdh和orf2的PCR检测均为阳性,mrp基因为阴性.结论 该株人血源细菌分离株为猪链球菌2型sly+/ef+/mrp强毒株.
作者:吕燕宁;李洁;杜轶威;黎新宇;王全意;陈丽娟 刊期: 2017年第07期
目的 调查克拉玛依地区散养犬感染鼠疫情况,为当地鼠疫防控提供依据.方法 通过间接红细胞凝集试验(IHA)检验犬只血清鼠疫F1抗体滴度.结果 采集的13份犬血清中阳性血清1份,阳性率为7.69%.结论 克拉玛依地区散养犬参与了动物鼠疫的流行,当地人群存在感染鼠疫风险.
作者:叶刚;黄江河;鲜军 刊期: 2017年第07期
在各类病原体特别是病毒的感染中,抗体依赖增强效应(Antibody-dependent enhancement,ADE)可使原有的感染加重,引起严重疾病.研究发现多种病原体的感染过程中均有抗体依赖增强效应ADE现象,且可能存在不同的发生机制.随着抗体依赖增强效应ADE现象产生机制研究的不断深入,有助于相应病原体疫苗的改造,从而使疫苗效用大化,对控制包括寨卡病毒在内的病原体的感染将提供巨大帮助.本文就近年来抗体依赖增强效应ADE发生机制的研究进展进行综述,包括Fc段受体依赖、补体系统介导、非中和抗体介导、病毒表面蛋白介导及细胞活动介导的抗体依赖增强效应ADE机制,同时以登革病毒、人类免疫缺陷病毒、柯萨奇病毒、埃博拉病毒、寨卡病毒及其他病原体为例进行分类介绍.
作者:袁伟壮;杨逸成;刘旭玲;何晓恩;惠媛;刘雨菁;李盈;赵卫 刊期: 2017年第07期
目的 了解中国东北地区野生鸟类的弓形虫感染情况.方法 在对东北地区野生鸟类进行调查时,从翼根静脉采集约500 μL全血,凝血后分别分离出血清,采用改良凝集试验(MAT)方法检测血清中弓形虫抗体的阳性率.结果 共收集到179份野生鸟类血清样本,其中弓形虫阳性血清样本20份,总的血清阳性率约为11.17%.179只野生鸟隶属于9目17科31种,其中鸽形目、雀形目、隼形目、鬻形目、佛法僧目、雁形目的血清阳性率分别为5.26%(1/19),9.09%(9/99),14.29%(3/21),15.00%(5/22),16.67%(1/6),和25.00%(1/4).按不同食性分类,肉食性、杂食性或水生动植物为食的鸟类的血清阳性率分别为12.00%(3/25),10.60%(15/141),15.38%(2/13).按照鸟类是否迁徙分类,候鸟和留鸟的血清阳性率分别为11.67%(14/120),10.71%(6/59).结论 东北地区的野生鸟类中弓形虫抗体的阳性率约为11.17%,显示弓形虫感染现象常见于野生鸟类.
作者:巫水珍;魏海霞;程鑫宇;戎可;彭鸿娟 刊期: 2017年第07期
目的 Eha是一个影响迟缓爱德华菌(Et)胞内生存的转录调控因子,本研究有助于揭示其调控Et抵御酸的分子机制.方法 用ATPase抑制剂洛霉素A1抑制巨噬细胞的酸化,菌落计数法比较酸化对野生株和eha基因缺失株胞内存活数目的影响;比较两种细菌在酸性应激实验中存活率的差异;构建pMP220-Peha LacZ质粒,采用β-半乳糖苷酶实验检测eha基因的启动子在不同酸性pH值下和不同培养时间的转录活性;选择Eha转录水平高的一个酸性pH值和培养时间,分别提取两种细菌RNA,进行RNA-Sequencing;并用qRT-PCR验证其结果.结果 野生株ET13在巨噬细胞内和不同pH酸环境中的存活率明显高于缺失株,阻止酸化胞内菌数明显高于未阻止酸化的胞内菌数(P<0.05).对数期细菌pH6.3培养基生长2h,RNA-Sequencing结果表明:eha基因缺失株转录水平和野生株相比,147个差异显著表达的基因(DEGs)(| log2 Rati-ol≥1),其中113个上调,34个基因下调,qRT-PCR随机抽样,和RNA-Sequencing表达趋势呈强相关.147个基因采用GO数据库进行功能聚类,分成25类,主要涉及细菌加工、定位、代谢、结合、催化、运输、细胞成份;基于KEGG通路的富集分析,有130个可以富集到55条通路中,包括与氨基酸、核苷酸、脂质代谢及铁的转运等路径,涉及基因较多的有双组分系统、ABC转运系统、不同环境中的微生物代谢和次级代谢产物等路径.结论 在酸性生存环境,Eha对Et的转录组呈多途径、多基因的适应性的全局性调控.
作者:刘念;李玉红;郑恩金;高大庆;陆承平 刊期: 2017年第07期
目的 探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白多表位拼接抗原的免疫反应活性.方法 对CARDS毒素蛋白的抗原表位进行分析,选取10个重要的表位进行拼接,反向翻译后合成并克隆,插入pET28a表达载体构建pET-CARDS表达质粒并转入受体菌.经IPTG诱导表达的多表位拼接CARDS蛋白使用6×His单克隆抗体和人阳性血清进行了免疫印迹的检测.结果 CARDS毒素蛋白的多表位拼接抗原表达载体构建成功,诱导后表达大小为30KDa的重组蛋白,Western blot测定其能与6×His单克隆抗体和人阳性血清发生反应.结论 本研究选取的CARDS毒素蛋白抗原表位具有较强的免疫活性,可为Mp感染的诊断提供新的候选抗原.
作者:刘宝山;赵芝娜;赵雨杰;王桂珍 刊期: 2017年第07期
目的 分析鸭大肠杆菌的血清型分布,并进行疫苗菌株的筛选.方法 近年来从山东、河北等地区的商品鸭场送检的病料中分离大肠杆菌,并进行血清型鉴定和生物特性分析;通过毒力检测和免疫原性试验筛选疫苗菌株.结果 共分离到44株鸭大肠杆菌.根据菌体抗原O进行分型,共鉴定血清型有6种:O78、O93、O76、O2、O92和O32;其中O78为优势血清型,占56.8%(25/44);O93血清型次之,占15.9%% (7/44).免疫原性试验证实O78血清型菌株SD具有较强的毒力和良好的免疫原性.结论 分析地区的鸭场鸭大肠杆菌以O78、O93、O76为优势血清型;免疫原性较好的SD菌株可作为下一步研制灭活疫苗的候选菌株.
作者:袁小远;王晓丽;亓丽红;邵桂宾;邵桂平;杨金兴;艾武;王永明 刊期: 2017年第07期