刘德纯；林清森
目的在小鼠模型中评价含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白分子基因的真核表达质粒pcD-SjFABPc与含IL-2基因佐剂的质粒构建体pCD-IL-2经肌注、皮内途径导入机体后所诱生的免疫反应.方法碱裂解法大量制备重组质粒pcD-SjFABPc、 pCD-IL-2重组质粒及空质粒pcDNA3,经肌肉及皮内注射免疫BALB/c小鼠,每只鼠注射100μg,两周后同量加强免疫一次.分别于末次免疫后的第20d、50d及65d用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖与NK细胞活性,并用双夹心ELISA测定血清细胞因子IL-2、IFN-γ及IL-10含量;ELISA法测定免疫鼠血清IgG抗体.结果 NK细胞杀伤活性及脾淋巴细胞增殖测定,加佐剂组(pcD-SjFABPc联合 pCD-IL-2组)较不加佐剂组(pcD-SjFABPc组)NK细胞杀伤及脾淋巴细胞增殖活性皆增加(P＜0.05).两途径三次检测IL-2及IFN-γ值均明显高于NS对照组和空质粒组,且加佐剂组的明显高于不加佐剂组的(P＜0.05);不同途径各组IL-10值与NS及空质粒对照组的比较则无显著性差别(P＞0.05).注射质粒后20d和50d,未测出抗体;免疫后65d检测,pcD-SjFABPc和pcD-SjFABPc联合pcD-IL-2免疫组的OD值明显高于对照组(P＜0.01),而该两组OD490值之间无显著性差异(P＞0.05).结论基因佐剂pcD-IL-2具有协同pcD-SjFABPc增强免疫鼠细胞免疫应答的作用,并可刺激IL-2、 IFN-γ细胞因子的产生,而特异的IgG抗体的产生则不依赖基因佐剂的作用.
作者：冯新港；余新炳；吴忠道；周俊梅 刊期： 2001年第06期
目的测定恶性疟原虫(P.f)海南株CTP基因序列,了解该虫株CTP基因序列与其它种类的CTP基因序列的差异,用于药物靶位的筛选.方法用PCR的方法特异性的扩增CTP基因,并将此基因克隆于测序载体pUC19,采用Sanger双脱氧链末端终止法测序.结果我国海南株的CTP基因序列与其它的CTP基因有不同程度的差异.结论 P.f CTP作为潜在的抗疟药物靶值得进一步深入研究.
作者：陈慧红；余新炳；吴忠道；陆家海；徐劲 刊期： 2001年第06期
肺炎支原体(Mp)肺炎是小儿呼吸道感染的主要病原之一,占所有肺炎总数的10%～30%[1],鉴于近年来其发病率有明显增加趋势,故将我院我科住院及门诊2000年2月至2001年8月共收治的Mp肺炎98例分析报告如下.
作者：李健；华雪玲；陈征；郑浩 刊期： 2001年第06期
目的为深入研究阿尔泰山林区莱姆病伯氏疏螺旋体致病之病理特征.方法采用从当地林区媒介分离到的螺旋体接种于20d龄的实验小鼠腹腔和皮下,于接种后30d、60d、90d分别处死实验鼠,取肝脏做病理切片,HE染色,光镜下观察.结果肝组织切片,实验鼠9张(只),对照鼠3张(只),光镜下7只实验鼠肝组织呈散在嗜酸性变,肝细胞核固缩,胞浆红染,肝细胞浊肿,散在肝细胞坏死,淋巴细胞浸润于静脉血管周围.结论小白鼠感染伯氏螺旋体后可导致肝细胞损害,致肝细胞坏死改变.
作者：华满堂；金兆清；陈大仓；陆红斌；刘长林；吴庆军 刊期： 2001年第06期
齿龈内阿米巴(Entamoeba gingivalis,E.g)寄生于人及多种哺乳动物口腔龈沟、牙垢的一种原虫,它是牙周病病原体之一,提高它在口腔的检出率对疾病防治和获取虫体提供研究有一定意义;为了研究需要,培养大量的虫体能否成功与培养基的种类、pH、培养温度有关外,亦与细菌有关.我们经多年培养发现,在改良的LES培养基液面若有一层菌膜形成,就可能有E.g生长,否则就少虫或无虫生长,哪些细菌能促进E.g生长、繁殖?国内未见报道,国外仅Gannon等报道小肠结肠炎耶尔森氏菌有促进E.g生长作用,为此,进行E.g培养成功率与口腔共生菌的关系研究.
作者：刘光英；陈金富；温旺荣 刊期： 2001年第06期
目的建立病毒性心肌炎动物模型.方法用CoxB3病毒Nancy株,经腹腔注射,感染BALB/c小鼠.结果病毒接种后,导致小鼠严重心肌炎;自4d到33d,右心室外壁均可见黄白色斑块;第4d,心肌溶解坏死,有少量的炎症细胞肌间浸润,在第4d后到14d,单核细胞和淋巴细胞浸润增多,并达高峰,也是病死高峰;14d后炎症浸润逐渐消退,损伤开始修复,疤痕形成.结论本心肌炎动物模型可用于研究心肌炎的自然病程,心肌炎的可能后遗症,以及药物治疗心肌炎的疗效和作用机制理研究.
作者：刘捷；邓玉莲；许春萱；沈晓娜；沈晓丽 刊期： 2001年第06期
疯牛病(Mad cow disease)是个俗名,科学名称是牛海绵状脑病(Bovine spongiform encephalopathy),此传染病的病原是一种蛋白质,称为朊粒(prion),许多人称朊粒是朊病毒,因为过去认为是病毒,但又不能证明是那种的DNA或RNA病毒,故列为未分类病毒项下.现已明确,它是一种致病的能传染的蛋白质,不是病毒.朊粒有两种,正常动物的朊粒(PrPc或PrP-sen)及致病性朊粒(PrPsc或PrP-res),引起疯牛病的朊粒称PrPBSE.
作者：廖延雄 刊期： 2001年第06期
目的用两对引物对临床标本中肺炎衣原体进行检测,对阳性PCR产物部分序列进行测定和同源性分析,探讨肺炎衣原体的基因分型.方法用根据肺炎衣原体16s rRNA及种特异性53kDa蛋白抗原基因序列设计的两对引物Cpnl～Cpn2,53A～53B对1994年5月～1999年3月间采集的有呼吸道疾患病人的鼻咽拭子标本182份进行PCR检测,从阳性标本中随意挑取136和144号标本,纯化PCR产物,进行核苷酸测序,并将测序结果与已报道的肺炎衣原体分离株进行同源性比较分析.结果标准AR-39株及21例标本均扩增得到约460nts的16s rRNA基因片段,25例标本扩增得约830nts的53kDa蛋白基因核酸片段.对136、144号标本的PCR产物测序结果显示,244nts的16s rRNA基因序列完全相同,且与标准肺炎衣原体AR-39、TW183、IOL207及CWL029的对应序列100%同源,而与马肺炎衣原体分离株N16相比较有3处突变,与非洲热带蟾蜍分离株CPXT1比较有3处突变,与小鼠肺炎衣原体分离株J138相比有一处不同,表明人的肺炎衣原体株16r RNA基因较为保守,与动物分离株有差异;标本145nts的53kDa蛋白基因也100%同源,该序列与从人体分离的AR-39株以及从小鼠分离的J138株序列完全一致,表明肺炎衣原体53kDa蛋白抗原是高度保守的种特异性抗原.结论衣原体的基因型分析有助于研究其流行规律,更好地进行疾病监控,但肺炎衣原体的进一步分型研究尚有赖于发掘其它可用作分型的基因及对更多的分离株进行分析.
作者：饶贤才；胡福泉；俞树荣 刊期： 2001年第06期
目的探讨肠球菌溶血素的毒力因子作用.方法分别检测39株临床标本分离的粪肠球菌以及31株健康人群粪便分离的粪肠球菌的溶血素检出率;并检测了β溶血肠球菌、非β溶血肠球菌对9种抗生素的敏感性.结果临床菌株的溶血素检出率为58.9%,健康人群分离株的溶血素检出率为19.3%(P＜0.005);β溶血株对抗生素的耐药性明显高于非β溶血株(P＜0.01).结论以上结果提示肠球菌溶血素与其毒力有关.
作者：强华；林建银；蒋明森；王耿夏；佘菲菲；苏东辉 刊期： 2001年第06期
目的对在畜间疫病流行区,新发现致病性产H2S李斯特氏菌进行生物学特性研究,以确定其在微生物学中地位,为其命名提供依据.方法从形态染色、培养特性、生化反应、抗原性方面鉴定,并利用分子生物学技术作DNA G+C mol%含量测定,PCR、16SrRNA序列检测同源性.结果通过表型生物学特性鉴定,产H2S李斯特氏菌与已知7型李斯特菌不同,其G+C mol%为30.5%、16SrRNA序列分析同源性与无害李斯特菌(L.im)为71.0%,灰色李斯特菌(L.g)为37.8%,西氏李斯特菌(L.s)28.4%.结论经系统发育树分析,证实产H2S李斯特氏菌为李斯特氏菌属,国际上首次报告的新种.
作者：郭仰霖；王培玉；谢登煌；曾凡伟；郭大为；张远富；温远元；阙庆华；邓富玉；李玉珍 刊期： 2001年第06期
目的探讨弓形虫病并发于艾滋病时的临床病理学特征.方法回顾性研究17例艾滋病合并弓形虫病的常规尸检材料,总结其临床表现与病变特点.结果 17例患者均有神经系统受累的病理改变与相应临床症状,多数有呼吸系统症状但仅4例查见弓形虫,8例心肌有弓形虫感染但无明显临床表现,8例为播散性感染,5例合并巨细胞病毒感染,10例血清弓形虫抗体效价升高,17例均在尸检组织中查到弓形虫,9例死于脑或肺弓形虫病.结论弓形虫病与艾滋病有密切关系,并有一些重要的临床病理学特征,如潜在感染的复活,播散性感染,显著的脑部病变,合并其他机会性感染,血清抗体效价低下等.
作者：刘德纯；林清森 刊期： 2001年第06期
目的比较3种抗真菌疗法,治疗隐球菌脑膜炎的疗效.方法将本组隐球菌脑膜炎患者35例,分为3组,A组:单用二性霉素B(AMB)静脉滴注,B组:单用氟康唑静滴.C组:前期采用AMB静滴且力争1周内达到有效治疗量(0.5～0.75mg/(kg·d)并同时鞘内注射(0.1～1mg/次)每周1～2次,直到脑脊液(CSF)菌体转阴后再应用氟康唑维持CSF连续3次镜检阴性.结果 A组:12例患者中,痊愈6例,好转4例,死亡2例.B组:8例患者,痊愈3例、好转2例、死亡3例、复发1例.C组:15例患者,痊愈14例、好转1例、无1例死亡或复发.结论静脉滴注AMB加鞘内注射,配合二期治疗法是一种治疗隐球菌脑膜炎的可取办法.
作者：雷惠新；程琼；陈名峰；黄声榕 刊期： 2001年第06期
探讨弓形虫感染与新生儿先天畸形的关系,有着十分重要的临床意义和现实意义.乌鲁木齐市是个以汉、维为主的多民族聚居区,有关这方面的报道资料很少.为了解本市不同民族、不同职业孕妇弓形虫感染状况,为有效地防治本病提供科学依据,进行了本次调查,结果如下.
作者：白润苓；赵尔民 刊期： 2001年第06期
目的构建恙虫病东方体sta56基因的重组表达质粒,并在E.coli中表达Sta56重组抗原.方法从恙虫病东方体Karp株基因组中扩增出sta56基因的ORF及其中长1 053bp的大片段,用TA克隆技术将此大片段克隆,并以重组质粒为模板,扩增编码Sta56抗原亲水氨基酸区的一段长342bp的DNA,插入pProEX HTb载体,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE及Western blot进行分析.结果从恙虫病东方体基因组中扩增出sta56基因的ORF,以截短片段构建了重组表达质粒pHTbOt342,SDS-PAGE显示蛋白表达带的分子量约为15.4kDa,Western blot证实该融合蛋白能被恙虫病患者阳性血清所识别.结论在大肠杆菌中表达的Sta56重组蛋白具有免疫反应性.
作者：邓艳琴；严延生；何似；翁育伟；陈亮 刊期： 2001年第06期
近期美国遭遇炭疽袭,引发恐慌,恐怖组织欲利用生物武器,由来已久.
作者：杨婷婷；施强 刊期： 2001年第06期
目的探讨约氏疟原虫感染早期自然传播阻断的发生机制.方法观察小鼠红内期原虫血症水平、蚊体内有性阶段的虫体发育状况以及PRBC提取物对脾细胞产生NO的诱导作用.结果当红细胞感染率达到15%～20%这一阈值时,配子体对蚊的感染力明显减弱或丧失;PRBC提取物能够诱导脾细胞合成NO,其诱导能力具有剂量依赖性.结论疟原虫自然传播阻断的发生取决于红细胞感染率的高低和中间宿主体内免疫细胞活化后产生的NO水平.
作者：曹雅明；刘英杰；安春丽；闫建中 刊期： 2001年第06期
弓形虫病是一种人兽共患的寄生性原虫病.人类感染弓形虫后常常无明显临床症状,多呈隐性感染状态.当机体免疫功能低下或有免疫缺陷时可引起急性发作.弓形虫与优生优育有着密切的关系,当孕妇感染弓形虫后,无论有无临床症状,都会直接影响胎儿的发育,可导致孕妇异常妊娠,流产、早产、胎儿畸型与死亡[1].因此,弓形虫病在临床上越来越受到重视,弓形虫病的免疫诊断试剂盒也就应运而生.然而,目前市场上弓形虫病的各种诊断试剂盒质量参差不齐,既无统一标准,又在无序生产与使用,给弓形虫病的诊断与防治造成严重危害[2].为了解国内外弓形虫病诊断试剂盒质量及其质量标准.我们抽查国内外6个厂商生产的10种弓形虫IgG抗体和IgM抗体诊断试剂盒,采用弓形虫国际标准血清进行质量比较.
作者：辛晓芳；秦进才；薄淑英 刊期： 2001年第06期
构建弓形虫速殖子表面抗原蛋白SAG1的真核表达载体,直接注入小鼠骨骼肌,观察该基因的表达程度和表达定位,研究利用骨骼肌异源表达SAG1,探讨发展一种简易、有效和安全的基因免疫途径的可能性.免疫组化结果显示,直接肌肉注射重组真核表达载体pcDAN3-SAG1可使SAG1在免疫小鼠骨骼肌中表达,并分泌到肌间隙.
作者：陈海峰；陈观今；王又红；郑焕钦；郭虹 刊期： 2001年第06期
目的建立酵母菌快速鉴定新方法.方法依据双歧鉴定法和层次分析原理建立了双歧层次分析法(DHPA),用DHPA法及API 20C AUX试条鉴定酵母菌.结果 DHPA法和API法对酵母菌43个KIU鉴定的正确性均为100%.DHPA法与API法对酵母菌2 238个试验代码分析的总符合率为77.3%,对256株临床酵母菌的鉴定符合率为81.3%.在48株两种方法鉴定不符合的菌株中,有8株为API法缺码,占鉴定不符合菌株的16.7%,而DHPA法则无缺码现象.结论 DHPA法解决了API法存在的的缺码或不能鉴定问题,是酵母菌准确、快速、简便、经济和实用的鉴定方法.
作者：何林；李芳芳；吴劲松；卢月梅；梁训宏；杨发达 刊期： 2001年第06期
目的运用表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)技术快速、经济地发现日本血吸虫(中国大陆株)新基因.方法随机挑取日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA文库单个重组克隆进行部分测序以获得EST,获得的EST通过BLAST程序同EMBL寄生虫数据库和GenBank数据库进行比较及同源性分析.结果本研究共随机挑取日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA 文库单个重组克隆200个,获得了76个有EST价值的序列,其中7.9%为日本血吸虫已知序列,5.3%为日本血吸虫同源序列.曼氏血吸虫或其他生物的同源序列占有EST价值的序列的22.4%,未知序列占59.2% .在获得的76个有EST价值的序列中,66个成功在GenBank dbEST中登录.通过同源性分析,发现了一些令人感兴趣的基因.结论 EST方法有助于快速、经济地发现日本血吸虫(中国大陆株)成虫新基因.
作者：卞国武；余新炳；吴忠道；徐劲；单志新；马长玲 刊期： 2001年第06期
中国人兽共患病学报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国微生物学会
