郑合明；王传钢；高平；张栓虎；杜正旺；王羽
目的 研究小干扰RNA(siRNAs)表达载体沉默RAB5A基因的位置效应,寻找沉默RAB5A基因的佳作用靶点.方法 利用MFold软件分析RAB5A mRNA的二级结构,构建针对RAB5A mRNA不同位点的siRNAs表达载体,转染Anip973细胞后,通过RT-PCR和Western-blot方法评价siRNAs对RAB5A基因表达的抑制作用.结果 针对RAB5A mRNA编码区内可及位点设计的siRNAs分别抑制72%和85%的RAB5A基因表达,而针对不可及位点设计的siRNAs则完全没有活性;非编码区内也存在沉默RAB5A基因的siRNAs有效作用靶点;siRNAs分子与RAB5A mRNA靶序列之间引入2个错配碱基时,siRNAs的抑制活性完全丧失.结论 MFold软件分析的RAB5A mRNA二级结构可以作为分析和寻找可及位点的依据,siRNAs的作用效率与RAB5A mRNA靶位点的可及性密切相关.
作者：陈香梅；李蒙；刘珊珊；李钰 刊期： 2006年第06期
1975年,Cossart等[1]首先在1名健康献血者血中发现了人微小病毒B19(human parvovirus B19,HPVB19),继而,在1981年又证实HPVB19对人类具有致病性[2].HPVB19感染后,可引起再生障碍性贫血、血管性紫癜、传染性红斑、关节病等.孕妇感染后可经胎盘引起宫内感染,导致胎儿贫血、水肿、死胎.
作者：赵志军；李强 刊期： 2006年第06期
目的 研究真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-FGF2(成纤维细胞生长因子2)在骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达及其对MSCs的影响.方法 基因克隆构建pcDNA3.1/V5-His-FGF2真核表达载体,利用FuGENETM6转染大鼠MSCs,RT-PCR、免疫荧光检测其表达情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测其对MSCs生物学活性的影响.结果 构建了含FGF2基因的真核表达载体;RT-PCR证实外源FGF2基因可转染到MSCs;免疫荧光检测转染24 h即可在MSCs中表达;MTT法检测转染48、72 h后细胞吸光度值(0.3871±0.0433、0.4349±0.0319)明显高于空载体组(0.3457±0.0162、0.3881±0.0434)(t1=2.833、t2=2.313,P＜0.05)和未转染组(0.3378±0.0215、0.3641±0.0365)(t1=3.227、t2=3.650,P＜0.05),而空载体对细胞增殖无影响(P＞0.05).结论 构建了FGF2真核表达质粒,并在MSCs中成功表达,为FGF2基因治疗的研究奠定了坚实的基础.
作者：徐威；于波；李厚伟；陈香梅；安毅；李呼伦 刊期： 2006年第06期
目的 研究鼠疫胶体金免疫层析法(GICA)快速检测鼠疫F1抗体技术在鼠疫血清学诊断、监测及流行病学调查中的应用及效果评价.方法 应用GICA、双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)和间接血球凝集试验(IHA)对比检测190份啮齿动物血清和11份鼠疫免疫血清中鼠疫F1抗体.结果 190份动物血清IHA检测结果均为阴性;GICA检测出1份阳性血清,滴度1∶10;DAgS-ELISA检测出3份阳性血清,滴度1∶4(++)2份和1∶16(+)1份.3种方法检测11份鼠疫免疫血清均为9份阳性,但GICA敏感性低于IHA和DAgS-ELISA(GICA与IHA:t=3.257,P＜0.05;GICA与ELISA:t=3.625,P＜0.01;IHA与ELISA:t=1.437,P＞0.05).201份血清检测结果,GICA与IHA总符合率99.50%,与DAgS-ELISA总符合率99.00%,3种方法检测结果差异无统计学意义(χ2=0.5,P＞0.05).结论 GICA检测鼠疫F1抗体敏感特异、简便快速,与DAgS-ELISA同样为鼠疫血清学快速诊断和鼠疫监测中有应用价值的检测技术.
作者：刘合智；史献明；白雪薇；王海峰；张月芝；李玉贵；杜国义；白小英；胡乐乐；杨顺林 刊期： 2006年第06期
目的 观察蛇纹石除氟砖茶水对大鼠血、肝、肾单个核细胞DNA损伤的影响.方法 用活化蛇纹石将含氟为5.0、50.0 mg/L的砖茶水分别除氟至1.5 mg/L,予以Wistar大鼠自由饮用,同时设立对照组和未除氟组,共分5组,计70只喂养3个月.用单细胞凝胶电泳技术观察血、肝、肾单个核细胞DNA百分含量、尾长和尾动量.结果 除氟组血、肝、肾3种单个核细胞DNA损伤与对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);含氟5.0、50.0 mg/L砖茶水组血单个核细胞DNA损伤与对照组、除氟组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);含氟50.0 mg/L砖茶水组大鼠肝细胞DNA损伤与对照组、除氟组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);砖茶水组肾单个核细胞DNA损伤与对照组、除氟组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 未发现活化蛇纹石除氟砖茶水(含氟量1.5 mg/L)引起大鼠DNA损伤.
作者：石玉霞；姜树林；孙殿军 刊期： 2006年第06期
目的 观察不同剂量氟化物在不同时间段对成纤维细胞和成骨细胞核心结合因子α1(cbfa1)表达的影响.方法 采用细胞培养的方法,将细胞分为对照组和6个染氟组(0.1、1.0、100.0、1 000.0、10 000.0、20 000.0μg/L),分别在5个染氟时间段(2、4、24、48、72 h)收集培养细胞培养上清液和细胞,应用酶联免疫吸附(ELISA)法和免疫组化方法检测cbfa1蛋白含量和表达,应用RT-PCR方法检测染氟48 h cbfa1 mRNA的表达.结果 ①与对照组比较(2.13±0.07),成纤维细胞染氟48 h时,cbfa1蛋白含量在0.1、1.0、100.0、1 000.0、20 000.0μg/L组[(2.35±0.08)、(2.28±0.09)、(2.32±0.09)、(2.25±0.08)、(2.28±0.09)]及染氟72 h的10 000.0μg/L组(2.48±0.22)明显升高;染氟48 h,cbfa1 mRNA表达呈升高趋势,其中10 000.0μg/L组(1.29±0.30)与对照组(1.02±0.12)比较,明显增强;免疫组化结果显示,染氟48 h的0.1μg/L组成纤维细胞内可见明显cbfa1阳性表达.②在成骨细胞,染氟组cbfa1蛋白含量较对照组有不同程度增加;染氟48 h时,0.1、1.0、100.0、1 000.0μg/L组cbfa1 mRNA表达较对照组(1.27±0.20)升高,其中0.1μg/L组(1.34±0.19)明显升高.结论 氟能提高成纤维细胞和成骨细胞cbfa1蛋白含量,促进cbfa1和cbfa1 mRNA表达,成纤维细胞可能在氟骨症骨周化骨的发生中起重要作用.
作者：井玲；齐玲；李彤；李广生 刊期： 2006年第06期
目的 掌握陕西省克山病病情变化及环境因素的改变对克山病发病的影响,科学的指导和评价陕西省克山病防治和科研工作.方法 在陕西省旬邑县土桥镇东曹村设立监测点,对全部常住人口进行临床检查、描记心电图,对克山病病人及可疑病例拍摄2 m后前位X线胸片.观察全县范围内急型、亚急型、慢型克山病的发病及转归情况.对监测点人群发硒、粮硒水平进行测定,调查病区人群经济水平及膳食结构.结果 ①2005年监测点东曹村无急型、亚急型克山病发病,潜在型、慢型克山病检出率分别为3.79%和0.35%;监测人群异常心电图检出率为11.38%,人均发硒(0.579±0.012)mg/kg,粮食硒(0.089±0.082)mg/kg.②2005年旬邑县无急型、亚急型克山病发病,自然慢型克山病发病率为0.53/万,慢型克山病患病率为2.86/万.结论 陕西省旬邑县克山病病情总体处于平稳低发态势,但仍有相当数量的潜在型、慢型克山病新发病例出现,说明病区环境中仍然存在着与克山病有关的一些致病因素,并对病区人群构成潜在的威胁.因此,继续加强病情监测,仍是今后陕西省克山病防治工作的重点.
作者：杨杰；何新科；吕晓亚；陈平；邓建侠；燕晓峰；刘婷；何玲侠 刊期： 2006年第06期
目的 掌握2005年全国大骨节病病情,为大骨节病防治提供依据.方法 在各病区省、自治区,各选1～2个当前大骨节病重病村作为监测点,每个点拍摄100名左右7～13岁儿童右手X线片,按大骨节病诊断标准,集体读片,确诊病例,统计检出率.结果 东部7省、市共11个监测点,大骨节病X线阳性检出率均低于3.00%;西部5省、区10个监测点中有5个超过10.00%,高达25.00%(青海省上、下鹿圈村).其中四川为0.96%和5.04%,陕西为5.56%和6.02%,内蒙古为10.53%和0,甘肃为14.71%和16.98%,青海为12.10%和25.00%.东、西部各监测点大骨节病平均X线检出率为5.21%.结论 与以往病情相比,全国大骨节病病情(检出率)高点继续下移,平均检出率呈下降趋势,但西部一些病区病情仍然较重,如青海省和甘肃省等,要继续强化大骨节病防治措施的落实,争取早日实现控制和消除大骨节病的目标.
作者：全国大骨节病监测组 刊期： 2006年第06期
在抗生素问世之前,人们对治疗鼠疫往往束手无策,因此,在历史上鼠疫曾给人类造成无数次灾难.自抗生素发明及逐步应用以后,人类对治疗鼠疫才有了根本性的进展,鼠疫病人的死亡率由此而大大地降低.
作者：张贵；张贵军；刘振才 刊期： 2006年第06期
目的 研究人肝再生增强因子(ALR)转基因表达对细胞周期素B2启动子(cyclin B2p)转录的调节作用,从而进一步探讨ALR的生物学作用及机制.方法 根据文献确定细胞周期素B2p区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素B2p,克隆至报告基因表达载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclin B2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,同时与ALR的真核表达载体pcDNA3.1(-)-ALR共转染HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性.结果 成功构建pCAT3-cyclin B2p报告基因表达载体;pCAT3-cyclin B2p与pcDNA3.1(-)-ALR共转染HepG2细胞系的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的25.13倍,是pCAT3-cyclin B2p单转染的2.60倍.结论 人ALR对细胞周期素B2p基因的转录表达具有反式激活作用.
作者：邵凤娟；成军；马英骥；郭江；刘妍；王巧侠 刊期： 2006年第06期
目的 了解鼠疫主要宿主密度的变化规律.方法 利用时间序列分析中的自回归模型,建立吉林省各鼠疫监测县预测黄鼠密度的数学模型,预测吉林省各鼠疫监测县2005-2007年黄鼠密度.结果 成功地建立了12个前瞻性预测黄鼠密度的数学模型,预测结果显示,2005、2006、2007年,每年4月份吉林省黄鼠密度分别在0.0369～0.9507、0.0682～0.9298、0.0581～0.9214只/hm2.结论 使用自回归模型,可以前瞻性预测鼠疫主要宿主密度的变化.
作者：周方孝；张雁冰；张芳；张贵；冮森林；刘振才 刊期： 2006年第06期
为做好贵州省尿碘检测工作,作者对贵州省省级与市(地、州)级尿碘实验室间的尿碘检测结果进行误差原因分析,结果报告如下.
作者：姚仲英；王娟；周德梅 刊期： 2006年第06期
目的 探讨营养性低钙与慢性氟中毒细胞内钙超载的相关性.方法 采用饮水加入氟化钠进行大鼠染毒实验,配以低钙饮食,应用Fura-2/AM荧光指示剂标记单细胞,显微荧光标记测定慢性氟中毒大鼠肝、肾、脑细胞内游离钙([Ca2+]i)的变化.结果 氟可刺激细胞内[Ca2+]i水平增高,正常饮食投氟组肝、肾、脑细胞内[Ca2+]i水平分别为(124.11±11.35)、(127.20±14.40)、(136.75±15.91)nmol/L,与正常饮食对照组(86.37±27.55)、(95.65±8.75)、(99.20±12.89)nmol/L比较,差异有统计学意义(t=4.001、4.706、4.953,P＜0.05);低钙饮食+氟组肝、肾、脑细胞内[Ca2+]i水平[(151.57±19.61)、(162.62±31.41)、(158.79±27.65)nmol/L]与低钙饮食对照组[(103.17±14.29)、(103.59±11.40)、(115.26±30.91)nmol/L]比较,差异有统计学意义(t=4.789,P＜0.05;t=8.581、6.003,P＜0.01);低钙饮食+氟组骨病变明显;细胞内[Ca2+]i水平与血清离子钙(i[Ca])、总钙(t[Ca])呈负相关(r=-0.59).结论 慢性氟中毒可致机体组织细胞钙超载,低钙可加重氟中毒时的细胞内钙超载,提示细胞内钙超载可能参与氟骨症发病机制并起着重要作用.
作者：张文岚；孙玲；薛立娟；吴岩；李广生 刊期： 2006年第06期
目的 比较微波、超声波和二者联合应用对人牙齿的脱钙效果.方法 将3对双尖牙制成12个试件,分别应用微波、超声波、联合波和常规方法,在室温下用10%乙二胺四乙酸二钠脱钙.通过检测脱钙残液中钙离子浓度,评价不同方法、不同时间的脱钙效果,电镜下观察脱钙后牙片表面结构变化.结果 不同脱钙方法的脱钙效果明显不同,组间比较差异有统计学意义(F=1 136.52,P＜0.01).联合波组脱钙残液中,钙离子浓度分别高于微波组、超声组和常规组(q=21.94、51.51、78.90,P＜0.01),且脱钙均匀;微波组钙离子浓度高于超声组和常温组(q=29.57、56.96,P＜0.01),但脱钙均匀程度不如超声组;超声组高于常温组(q=27.39,P＜0.01),常温组表面脱钙不均匀;微波、超声波、联合波和常规方法各组组内不同时间脱钙效果比较,差异有统计学意义(F=43.16、16.70、33.35、59.78,P＜0.01).结论 微波超声法联合应用,能缩短人牙脱钙时间、使牙齿表面脱钙相对均匀,是一种快速有效的牙齿脱钙方法;单纯应用微波或超声方法脱钙,效果亦优于常规方法.
作者：刘英群；祝莹颖；王铜 刊期： 2006年第06期
近年来,随着自来水覆盖率的不断提高,江苏省泰州市城乡饮用水来源发生了明显变化.
作者：郭加宏；周红卫；陈剑峰；黄文明 刊期： 2006年第06期
目的 建立农产品中5种环境激素有机氯农药的检测方法.方法 采用凝胶渗透色谱净化方法,对粮食、蔬菜样品进行前处理,宽口毛细管气相色谱/电子捕获分离、检测.结果 粮食、蔬菜中有机氯农药滴滴滴(DDD)、滴滴伊(DDE)、滴滴涕(DDT)、七氯和环氧七氯的回收率在79.8%～11.23%;重现性分别为3.67%、5.98%、4.31%、7.12%、6.39%.结论 方法操作简单,净化效率高、干扰少、适用于农产品中环境激素类有机氯农药残留分析.
作者：富英群；侯咏；王艳梅 刊期： 2006年第06期
目的 探讨青海省近10年鼠疫流行势态,为制定预防控制对策提供依据.方法 采用回顾性分析方法,对1996-2005年青海省鼠疫监测和鼠疫自然疫源地调查资料进行分析.结果 称多县存在青海田鼠鼠疫自然疫源地;喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地近10年动物鼠疫流行猛烈,主要分布在海西西部和青南高原,流行季节为每年的5～11月,高峰期为6～9月;人间鼠疫的流行期在每年的5～10月,高峰期为8～10月,鼠疫临床分型以肺型居多,约占41.86%,腺型为37.21%,败血型为18.61%.但首发病例仍以腺鼠疫居多,人间病例的消长与捕猎旱獭活动的时间有关.结论 青海省近10年动物鼠疫和人间鼠疫有上升的趋势.
作者：李敏；王国钧；崔百忠；慕有；田富彰；杨晓艳；杨汉青；张珊瑚；张青雯 刊期： 2006年第06期
布鲁杆菌病(简称布病)为人畜共患传染-变态反应性疾病.北京市的布病多年来一直未有大的流行.近年来由于农村的经济体制改革,畜牧业发展较快,出现了多次畜间局部疫情爆发,进而导致人间疫情的发生.
作者：李文玲；杨学明；李旭 刊期： 2006年第06期
目的 应用基因表达谱芯片筛选急性病毒性心肌炎相关基因,并对这些基因的功能进行初步分析.方法 将8 464条小鼠PCR产物按微聚阵排列点样于化学涂层的载玻片上,制成基因芯片;用柯萨奇B3(CVB3)病毒感染BALBc小鼠,在感染后的第4、8、21天,分别将正常和病毒性心肌炎心肌中mRNA逆转录,合成荧光分子(cy3/cy5)掺入的cDNA链制备表达谱探针,芯片杂交和严格洗片后,用ScanArray3000荧光扫描芯片荧光信号图像,利用计算机分析病毒性心肌炎心肌与正常心肌中丝氨酸苏氨酸磷酸化酶基因(PIM-3)、血管形成因子基因(Ang)-1、组织相容性基因-2的表达,并对获得的基因进行生物信息学分析.结果 小鼠在CVB3感染后的第4、8、21天,心肌中分别发现了1 684、284、98条差异表达基因;PIM-3、Ang-1、组织相容性基因-2的表达被持续抑制.结论 应用基因表达谱芯片可筛选出差异表达基因,PIM-3、Ang-1、组织相容性基因-2的差异表达可能与病毒性心肌炎发生和发展有关.
作者：赵德超；于波；高彦辉；吴健；周令望；钟学宽 刊期： 2006年第06期
目的 了解全国鼠疫菌分离株是否存在抗链霉素基因.方法 根据Guiyoule等人在EMBL公布的抗链霉素相关基因,设计2对引物,对271株代表性鼠疫菌进行PCR扩增.结果 实验用271株代表性菌株中尚未发现有鼠疫菌抗链霉素基因.结论 目前在所实验的271株菌株还未发现鼠疫菌耐链霉素菌株.
作者：赵海红；戴二黑；金丽霞；祁美英；李存香；崔百忠；戴瑞霞；杨晓艳；李敏；杨瑞馥 刊期： 2006年第06期
中华地方病学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华医学会,哈尔滨医科大学
