学术投稿

鼠疫耶尔森氏菌荧光标记扩增片段长度多态性分型方法

裴德翠;庞昕;宋亚军;翟俊辉;陈泽良;刘海洪;郭兆彪;王津;杨瑞馥

关键词:FAFLP, 鼠疫耶尔森氏菌, 基因分型, 聚合酶链反应
摘要:目的建立荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)技术平台,探讨鼠疫菌基因分型.方法用5种核酸限制性内切酶消化鼠疫菌基因组DNA,选择佳内切酶组合,酶切片段经接头连接后,用荧光素标记的5条EcoRⅠ引物和9条MseⅠ引物组成的引物配对扩增,选择佳引物组合,进行系列PCR条件的优化.扩增产物经ABI PRISM 3100Genetic Analyzer(遗传分析仪)检测,GeneScan等软件进行分析.结果成功建立FAFLP技术平台.结论 FAFLP具有快速、简便、廉价、分辨率高、重复性好和污染少的优点,可用于鼠疫菌的基因分型分析.
中华地方病学杂志相关文献
  • 山东沿海地区Graves病与尿碘水平关系的调查

    目的明确山东沿海地区Graves病患病情况及影响因素.方法采用随机分层正群抽样法,对山东沿海地区烟台、威海、日照和青岛Graves病的患病情况及碘营养状况进行调查.结果沿海居民Graves病患病率为1.38%,其中40%患者有Graves病家族史,30~39岁为高发年龄组.靠海越近,居民饮食碘增多,尿碘也越高(t=23.39~40.66,P<0.01),Graves病患病率也越高(μ=2.02,P<0.05).尿碘超过300μg/L以上时,Graves病患病率随尿碘水平的增高而升高,(X2=14.09、53.55,P<00.1).Logistic多元逐步回归分析发现Graves病发生与TPO和尿碘对数值呈正相关.沿海Graves病组甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)高于内陆对照组(t=2.00~2.40,P<0.05).结论山东沿海地区Graves病患病率为1.38%.居民离海越近,含碘食物摄入增多,尿碘的排泄率越高,Graves病的患病率也越高.30~39岁为甲状腺疾病的高发年龄组.从预防Graves病角度出发尿碘可控制在300μg/L以内.

    作者:阎胜利;王颜刚;王斐;赵世华;余霄龙 刊期: 2004年第03期

  • 降钙素基因相关肽免疫反应纤维在大鼠心肌内的分布和密度

    目的观察降钙素基因相关肽免疫反应(CGRP-IR)纤维在大鼠心肌内的分布和密度,为心肌病的研究奠定形态学基础.方法用免疫组织化学法显示大鼠心肌内的CGRP-IR纤维,计算其分布密度.结果在心房肌内和心室肌内均可见CGRP-IR纤维分布于心肌纤维之间,心房肌内CGRP-IR纤维的面积密度和数量密度均高于心室肌.结论CGRP-IR纤维在大鼠心肌内分布广泛,其分布密度存在部位差异.

    作者:张云芳;李玉兰;刘慧冬;李益民;李晓冬;赵玲辉;刘颖 刊期: 2004年第03期

  • 131I治疗非毒性甲状腺肿的临床评价

    目的对131I治疗非毒性甲状腺肿(NTG)进行临床评价.方法对35例经临床确诊的NTG患者,采用131I治疗,随访1年以上,观察临床疗效及近期副作用.结果35例NTG患者,治愈14例,有效19例,无效2例,甲低15例;治愈率和总有效率分别为40%和94.3%,甲低发生率为42.9%;治疗1年后甲状腺平均缩小60.2%.治疗后除部分患者出现一过性的颈部肿胀及甲亢表现外,未见其他明显的近期不良反应.结论131I治疗NTG疗效肯定、简便、相对安全.对甲状腺肿大明显,甲状腺制剂治疗无效,且不愿接受手术的NTG患者,131I治疗是值得推荐的方法.

    作者:段东;罗加;李建国;李小放 刊期: 2004年第03期

  • 河南省黄河冲积平原水源性高碘甲状腺肿流行病学调查

    目的掌握河南省水源性高碘地区分布和高碘甲状腺肿流行情况,更好地落实防治措施.方法以乡为单位进行全省外环境水碘基线调查;对全省原碘缺乏病非病区进行流行病学抽样调查.结果发现位于豫东黄河冲积平原的18个县(市、区)水碘较高,在测定的5 023份水样中,水碘值在150μg/L以上的占47.6%;高碘水源呈片状分布,呈乡与乡、县与县连在一起;高碘地区和适碘地区并存.碘的摄入量与甲状腺肿的流行存在明显的剂量-效应关系,学龄儿童的甲状腺肿大率随水碘的升高而升高.结论河南省豫东黄河冲积平原18个县(市、区)所辖的164个乡为水源性高碘地区和高碘病区,存在高碘甲状腺肿的地方性流行.

    作者:王羽;郑合明;王传刚;李小烽;罗君;柯庚寅;杜正旺;杨金 刊期: 2004年第03期

  • 腐殖酸对NMRI鼠关节软骨粘弹性的影响

    目的探讨腐殖酸对NMRI鼠关节软骨粘弹性的影响及影响机制.方法用含30 mg/L腐殖酸的饮水饲养第二代NMRI鼠,应用生物化学及生物力学的方法对子代鼠关节软骨的结构、胶原水平及粘弹性进行观察.结果与对照组相比,实验组关节软骨胶原水平明显下降(P<0.01),软骨的粘弹性显著降低(P<0.01).结论NMRI鼠关节软骨粘弹性的改变与腐殖酸对软骨胶原的表达及排列结构的影响有关.

    作者:朱少华;P.P.Fietzek 刊期: 2004年第03期

  • 自身免疫性甲状腺疾病与细胞凋亡

    自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid disease,AITD)是人类常见的自身免疫性疾病,主要包括Graves'病(GD)和桥本氏甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis,HT).

    作者:孙富军;田恩江;陈祖培 刊期: 2004年第03期

  • 鼠疫耶尔森氏菌荧光标记扩增片段长度多态性分型方法

    目的建立荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)技术平台,探讨鼠疫菌基因分型.方法用5种核酸限制性内切酶消化鼠疫菌基因组DNA,选择佳内切酶组合,酶切片段经接头连接后,用荧光素标记的5条EcoRⅠ引物和9条MseⅠ引物组成的引物配对扩增,选择佳引物组合,进行系列PCR条件的优化.扩增产物经ABI PRISM 3100Genetic Analyzer(遗传分析仪)检测,GeneScan等软件进行分析.结果成功建立FAFLP技术平台.结论 FAFLP具有快速、简便、廉价、分辨率高、重复性好和污染少的优点,可用于鼠疫菌的基因分型分析.

    作者:裴德翠;庞昕;宋亚军;翟俊辉;陈泽良;刘海洪;郭兆彪;王津;杨瑞馥 刊期: 2004年第03期

  • 柯萨奇B3m病毒致小鼠急性心肌损伤的双向凝胶电泳分析

    目的建立双向凝胶电泳体系分析柯萨奇B3m病毒(CVB3m)致小鼠急性心肌损伤过程中的蛋白质组差异,探讨CVB3m致心肌损伤的机制.方法分别提取感染CVB3m第0,4,8及21天的BALB/C鼠心肌组织总蛋白,采取固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离总蛋白,用Image Master软件进行图像分析.结果心肌组织总蛋白平均抽提浓度为13.9 g/L;获得正常小鼠和急性CVB3m感染鼠不同感染时期(第4,8和21天)心肌组织双向电泳凝胶图谱,图像分析4块胶平均蛋白点数为(792±32)个,匹配率为61.25%±6.25%.随机选定不同感染时期的8个差异表达的蛋白质点,得到了表观相对分子质量和表观等电点等一系列数据.结论获得了CVB3m致小鼠急性心肌损伤的双向凝胶电泳图谱,建立了该模型的蛋白质双向凝胶电泳数据库,有利于该病毒引起小鼠心肌损伤机制的进一步研究.

    作者:于波;吴健;李立群;张烁 刊期: 2004年第03期

  • 娄底市地方性氟中毒现况调查

    目的调查地方性氟中毒(地氟病)的现状,探讨致病因素,为改灶降氟提供科学依据.方法根据农村居民使用燃料类型,分类抽样,检查学生氟斑牙、尿氟,并测定食物、饮水、煤的含氟量.结果不同燃料类型的乡镇居民都查出地氟病,以煤为惟一燃料的乡镇人群患病率高.历史地氟病病区仍是病区,新发现病区乡镇5个.用煤火薰的茶叶、辣椒、腊肉、干蔬菜含氟高.结论煤氟高加上居民不合理的建房结构和炉灶设置,厨房无排气装置及围灶取暖、烟薰食品等综合作用导致地氟病.

    作者:曾桂华;龙新建;胡东风;肖求文;张彬;王乔笙;朱攀;周方球;王晓长 刊期: 2004年第03期

  • 阿霉素对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

    目的研究阿霉素(ADM)对大鼠心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响.方法将雄性wistar大鼠24只,随机分为ADM组和对照组,每组12只,ADM组按每次给ADM 2mg/kg腹腔注射,隔日一次共6次;对照组给等体积的生理盐水腹腔注射.于实验第30天,应用生化方法测定心肌组织中的一氧化氮(NO)水平及iNOS的活性;用TUNEL法检测心肌细胞的凋亡指数;用RT-PCR方法检测心肌组织iNOS mRNA的表达.结果与对照组比较ADM组大鼠心肌组织NO、iNOS活性增加(P<0.01),心肌细胞凋亡指数及iNOS mRNA的表达均显著增高(P<0.01).结论ADM能诱导大鼠心肌细胞iNOS mRNA表达增加,使NO合成增多,引起细胞凋亡而参与对心肌的损害.

    作者:刘宝刚;鄂明艳;李雅杰;周令望;于维汉 刊期: 2004年第03期

  • 湖南省碘缺乏病防治成本效益和防治效果分析

    目的分析湖南省1981~2000年碘缺乏病(IDD)防治成本效益和成本效果.方法对1979年以来湖南省IDD防治统计和湖南省年鉴资料进行分析,并对防治成本、效益进行货币折现.结果IDD防治成本效益比为1:27.80,防治效果显著.结论食盐加碘防治IDD是一项效益巨大的公共卫生事业;鉴于环境碘缺乏不能改变,防治IDD工作应长期坚持.

    作者:高立冬;王仁禹;谭红专;郭先驰 刊期: 2004年第03期

  • 2002年全国碘缺乏病外环境水碘监测结果分析

    目的了解全国外环境水碘的分布情况,为因地制宜防治碘缺乏病提供背景资料.方法各省在每个地级行政区划单位随机抽取3个县,每个县随机抽取1~3个行政村,全省总数不少于30个.每个行政村采集不同饮用水源的水样进行检测碘水平.结果16个省份的水碘中位数<5.0μg/L,24个省份的水碘中位数<10μg/L,在4个省份发现了水碘>200μg/L的县.结论全国缺碘地区广泛存在,高碘地区范围不明确,急需查清.

    作者:于钧;刘守军;苏晓辉;张树彬 刊期: 2004年第03期

  • 平遥县地方性氟中毒调查

    平遥县位于山西省中部,是晋中市饮水性氟中毒的重病区.为了及时准确地掌握平遥县地方性氟中毒病情及病区外环境水介质的氟水平,了解改水防治地方性氟中毒效果,于2002年5月上旬在全县范围开展了占全县总人口10%的地方性氟中毒流行病学调查.

    作者:梁丽青;乔兆宝 刊期: 2004年第03期

  • 碘和甲状腺肿流行规律的发现、检验和建立

    为建立碘和甲状腺肿流行呈U形曲线关系的规律,调查了河北、山东、贵州3省17个点的水碘、尿碘和甲状腺肿大率,并用国际通用的PPS抽样法和国家统一的盐碘、尿碘、甲状腺容积的标准检测方法,由省级单位加以实施.发现随着水碘、尿碘的递增,甲肿率呈现由高而低再低而高的U形趋势,这种趋势得到了1999、2002两次全国碘缺乏病监测数据和必需微量元素的剂量效应曲线的验证.碘与甲状腺肿流行呈U形关系是一个客观存在的规律.

    作者:于志恒;刘守军;朱惠民;王世英;时钟孚;杨英奎;苏晓辉 刊期: 2004年第03期

  • 河北省内陆与沿海城镇7~12岁学生智商调查

    为了解内陆与沿海城镇7~12岁小学生智商(IQ)情况,承德市红十字会于2002年9~12月在两地进行了调查,结果报告如下.一、对象与方法1.样本选择:内陆选承德市的喇嘛寺等4所小学7~12岁学生1068名,沿海选秦皇岛市河东小学7~12岁学生978名.

    作者:常存宝;樊素莲;张福祥;王亚珍;魏玲 刊期: 2004年第03期

  • 放射治疗引起大鼠血管内皮细胞损伤的观察

    放射治疗是治疗肿瘤的有效的方法之一,增大照射剂量可以杀灭肿瘤细胞,但能造成肿瘤周围正常组织损伤.损伤的根源在于血管的损伤,而血管内皮细胞的损伤早于血管的其他结构.放射引起内皮细胞结构变化的基础研究较多,对血管内皮细胞分泌功能的研究较少,特别是内皮素方面的研究,本实验通过大鼠放射损伤探讨内皮素在监测血管内皮细胞损伤中的作用.

    作者:鄂明艳;刘珊珊;李秀兰;尤庆山 刊期: 2004年第03期

  • 当前碘缺乏病防治应当注意的问题

    一、坚持全民食盐加碘(USI)是可持续消除碘缺乏病(IDD)的根本保证中国是受碘缺乏严重威胁的国家之一,约有7.2亿人生活于缺碘地区.20世纪70年代防治前的统计,II度以上的地方性甲状腺肿(甲肿)患者有3 500万人,典型地方性克汀病患者有25万人.更严重的是还有数量更大的亚克汀患者,估计有数百万之多.

    作者:陈祖培 刊期: 2004年第03期

  • 嘉祥县布鲁氏菌病流行特征及因素分析

    布鲁氏菌病(布病)为人畜共患的传染性疾病.近几年来,由于农牧业发展迅速,牲畜饲养量、屠宰户增加,致使布病又呈现上升趋势,甚至局部暴发.为了解嘉祥县布病的发病情况,现将1998~2001年发生的73例布病流行特征及因素分析如下.

    作者:丁伟;赵留芝 刊期: 2004年第03期

  • 郑州市孕妇碘营养水平研究

    目的以孕妇和新生儿作为重点研究目标,了解郑州市碘营养现况.方法用国家规定的检测方法测定盐碘和孕妇尿碘;采用免疫放射分析(IRMA)国产试剂测定新生儿脐带血TSH.结果(1)碘盐合格率控制在国家规定的标准内.(2)孕妇早、中、晚孕期尿碘中位数分别为231.40、212.44、192.25μg/L,以晚期偏低,但在3111份尿样中仍有516份尿碘中位数<100μg/L,说明部分孕妇和胎儿仍处于严重缺碘状态中;选择连续采2期以上尿样的728名孕妇进行尿碘连续观察,孕妇晚期尿碘水平与新生儿TSH值高度相关(r=0.65,P<0.01).结论持续消除碘缺乏病应加大宣传力度,指导孕妇合理补充碘营养,确保儿童的健康生长.

    作者:张英环;李玉秦;杨建国;赵妮;蒋贤芳;刘阳阳;刘桂枝;荆丙林;杨华丽;白青 刊期: 2004年第03期

  • 分区性颈淋巴结清扫术在治疗甲状腺癌颈淋巴结转移中的应用

    目的探讨分区性颈清术在治疗甲状腺癌颈淋巴结转移中的价值.方法选择35例甲状腺癌颈淋巴结转移患者实施分区性颈淋巴结清扫术,同时选择实施传统清扫术的相同诊断的患者38例做对照组,对实施两种不同手术后的患者的生存率、复发情况、生存质量进行3年随访观察.结果两组患者术后3年生存率无明显差别,而分区性清扫术后患者的生存质量明显优于行传统颈清扫术的患者.结论应用分区性颈淋巴结清扫术可以在很大程度上取代传统的颈淋巴结清扫术,达到与传统手术相同的临床效果,同时又能大限度地减少手术创伤,提高生存质量.

    作者:赵雪松;陈玉英;杨继新 刊期: 2004年第03期

中华地方病学杂志

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主办:中华医学会,哈尔滨医科大学