学术投稿

重组腺病毒载体转染ApoE-/-小鼠的安全性评价和在主动脉血管组织的表达情况

王雪梅;魏琴;段明军;张春;姜涛;杨毅宁

关键词:重组腺病毒, 脂联素, ApoE-/-小鼠, 基因治疗, 转染效率和安全性
摘要:腺病毒介导的脂联素过表达对ApoE-/-小鼠动物的安全性检测.将48只普通饮食饲养的12周龄雄性ApoE-/-小鼠分为对照组和脂联素干预组,每组24只.对照组给予一次性尾静脉注射生理盐水100μl;干预组则同法注射100μl重组腺病毒(Ad-APN-eGFP,3.0×l08 p.f.u).分别在注射后0天、1周、2周、及4周处死小鼠,取全血和主动脉血管组织.用ELISA法测定血清中脂联素浓度;用WB法检测血管组织中标识绿色荧光蛋白(GFP)以确定重组腺病毒的转染率.全自动生化仪检测血常规指标、肝功能(ALT、AST)、肾功能指标(CR、BUN)、心肌酶(CK、CKMB)、以确定重组腺病毒转染的安全性.腺病毒对血常规指标和心肌酶的表达没有显著影响,对肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)(1周时组间差异P<0.01和2周时组间差异P<0.05)、肾功能指标尿素氮BUN(1周时组间差异P<0.01)有一过性影响.重组腺病毒可在体内高效介导外源基因脂联素的表达,血清中的脂联素浓度在病毒转染后1周达到了高值,约是正常对照组的4倍(78.28 ±15.02 vs 23.42 ±5.35)μg/ml,2周内稳定表达.1周时GFP蛋白在血管组织中表达的量高,1周时GFP/GAPDH为83.63±1.50%,随后逐渐降低,2周时GFP/GAPDH为54.00±4.00%,4周时GFP/GAPDH为22.00±3.99%.重组腺病毒注射存在一过性的肝毒性和肾毒性,但是对动物的生理状态没有显著影响.重组腺病毒对ApoE-/-小鼠的血管组织有高效转染、2周内安全、稳定表达的特性.
生物医学工程研究杂志相关文献
  • 基于Micro-CT的小鼠骨小梁LBF模型提取及特征分析

    针对小鼠股骨Micro-CT切片图像,提出一种骨小梁形态与分布特征的定量分析方法.利用形态学与LBF模型结合方法提取股骨中的骨小梁,通过模拟骨质疏松症状与提取后的正常骨小梁进行几何形态参数测量的对比,同时利用灰度共生矩阵分析骨小梁的纹理分布特征参数进行实验对比.实验结果表明,骨小梁变细、断裂以及消失等状态,其对比度、熵、能量、相关性等参数会发生明显变化,为定量化分析骨质疏松提供了一种研究方法.

    作者:陈树越;李颖;邹凌 刊期: 2016年第02期

  • 一种新型显色生物芯片识读仪软件的设计

    为了提高显色生物芯片图像处理的准确性且实现信号点自动定位,从而提升显色生物芯片识读仪的自动化程度,我们设计了一种用于显色生物芯片识读仪的配套软件.在EClipse中使用OpenCV,实现在Linux环境下完成对显色生物芯片图像的分析工作.然后将数据交由PC端处理判型,提高了工作效率.在图像分析软件中,借助摄像机读取CODE128条形码存储的阵列信息,提高定位准确性.通过与同类型上市识读仪软件进行对比实验,结果表明本研究设计的软件可靠.

    作者:陆恩泽;林志松;朱滨;邢军芬 刊期: 2016年第02期

  • 载纳米银海藻酸钙敷料的制备及体外细胞毒性、抗菌性能的检测

    以湿法纺丝法制得的海藻酸钙羧甲基纤维复合物作为敷料载体,再利用浸渍法将纳米银粒子搭载于敷料之上,制备质量分数为0.5、1、2、4%的载纳米银海藻酸钙抗菌敷料.采用紫外-可见光分光光度计和扫描电子显微镜检测敷料的物理学表征,并检测抗菌敷料的细胞毒性及抗菌性能.结果表明载纳米银海藻酸钙抗菌敷料表面可见纳米银均匀附着,于去离子水中可释放纳米银粒子,而载银量1%的海藻酸钙敷料无明显细胞毒性且对常见四种菌株均有良好的抗菌性能,是一个理想的载银浓度.

    作者:林志群;赵大川;郎敏;柳学文;陈瀛;陈飞;黄宗海 刊期: 2016年第02期

  • 一次性使用无菌注射器中抗氧剂1010的迁移研究

    本研究建立了测定抗氧剂1010的HPLC方法,并对一次性使用无菌注射器中抗氧剂1010在去离子水、0.1M盐酸溶液、0.1M氢氧化钠溶液、无水乙醇、丙二醇及乙腈中的迁移溶液进行了测定,为一次性使用无菌注射器的安全使用提供实验依据.

    作者:李永贵;张锡霞;王晶;王勤 刊期: 2016年第02期

  • 基于腹腔镜手术训练的眼动特征研究

    在腹腔镜模拟训练过程中,研究不同训练模式下被测试者的注视策略,探索腹腔镜训练的新模式.被测试者被随机分为无指导组,视频学习组和专家指导组进行左右移环任务.利用Tobii X1 Light型眼动仪调用模拟训练箱中的摄像头,采集受试者的眼动数据.通过对数据处理分析,计算注视点个数,平均注视时间,注视时间百分比,扫描距离指标.与对照组相比,视频学习和专家指导模式下,任务完成时间降低23%,扫描距离缩短25%,注视点个数减少17%,平均注视时间没有显著差异.视频组和专家指导组之间无明显差异.结果表明不同学习模式下,被测试者的注视行为有明显差异.视频学习和专家指导下效果更好,可以用专家操作时的注视点视频指导初级训练者进行训练.

    作者:叶莎莎;王殊轶;张燕群;吕坤勇;宋成利 刊期: 2016年第02期

  • 功能基因在皮肤微生物群落分析中的应用

    使用16S rRNA基因可变区分析皮肤微生物群落时存在一定的不足,需要开发一些功能基因引物对其进行补充.在分析皮肤微生物群落中细菌的优势种属的基础上,设计并筛选了3对扩增功能基因的引物,并将之应用于较大规模样本的皮肤微生物群落特征分析中.新设计的引物不仅能够将细菌准确地鉴定到种这一层级,而且也能实现对不同样品间的微生物群落结构特征进行比较.新设计的引物在皮肤微生物群落的分析中取得了较好的效果,有较好的应用前景.

    作者:姚雪;李辉;张凯鑫;周怀谷;罗亚平 刊期: 2016年第02期

  • 微生物鉴定分析系统基于IHE LBL的集成研究

    基于医学信息标准化集成架构,实现系统互联与数据采集,并生成规范的微生物检测标本标签.运用IHE LBL技术框架设计并实现微生物鉴定系统与客户端组成的集成平台.结合Windows Socket消息机制,使标签信息以HL7消息的形式进行流转,实现标签信息采集,终生成QR Code通用标签.完成了IHELBL集成模式中各角色和事务的通讯,以及HL7消息的构造与解析、QR Code标签的构造,并对HL7消息进行了验证.通过系统集成获取到的标签信息有更高的准确性和安全性,并可提高微生物实验室的工作效率,方便标本标签的管理,有助于微生物实验室实现信息化、区域化集成与共享.

    作者:颜景浩;孙迎;李丕丁 刊期: 2016年第02期

  • 人发角蛋白凝胶对L-929细胞的增殖作用研究

    利用人发角蛋白良好的可降解吸收和生物相容性,研究其作为软组织填充材料的可行性.实验以人发为原料,通过提取、纯化等方法获得角蛋白的水溶液,并制备成可注射的凝胶,研究采用SDS-PAGE对角蛋白的组成进行表征,通过对膜的吸水性实验表征凝胶的水合性能,并使用MTT法对凝胶材料的细胞增殖作用进行评价.SDS-PAGE结果显示提取的角蛋白分子量集中在30、50和65KD左右,角蛋白具有快速吸水性能且吸水率可高达850%,人发角蛋白对L-929小鼠成纤维细胞表现出明显的增殖作用,在24、48、72 h的平均增殖率分别达到119%、122%和123%.实验制备的人发角蛋白凝胶对L-929细胞具有明显的增殖作用,具有作为软组织填充材料的应用前景.

    作者:陈剑斌;许少波 刊期: 2016年第02期

  • 重组人睫状神经营养因子干预家兔视神经损伤动物模型视神经蠕变特性的分析

    以蠕变特性指标研判重组人睫状神经营养因子干预动物视神经损伤的效果.以钳夹法复制动物视神经损伤模型,以重组人睫状神经营养因子连续干预30 d后,对各组动物进行视觉电生理检测,之后取各组动物视神经进行组织形态观察和蠕变实验.视神经损伤模型以重组人睫状神经营养因子干预治疗组Pl峰值大于视神经损伤模型组,差异显著(P<0.05).以重组人睫状神经营养因子干预治疗组视神经纤维结构尚存,较少部分视神经纤维排列不规则,视神经无明显变细,视神经损伤模型组兔视神经纤维束结构消失,神经纤维和胶质细胞变性、坏死.视神经损伤以重组人睫状神经营养因子干预治疗组7200s应变上升量大于视神经损伤模型组组、差异显著(P<0.05).以重组人睫状神经营养因子干预治疗动物视神经损伤模型后视神经的织形态、蠕变特性等得到较大的恢复.

    作者:王玲;吕雪漫;姜琦;袁毅 刊期: 2016年第02期

  • 重组腺病毒载体转染ApoE-/-小鼠的安全性评价和在主动脉血管组织的表达情况

    腺病毒介导的脂联素过表达对ApoE-/-小鼠动物的安全性检测.将48只普通饮食饲养的12周龄雄性ApoE-/-小鼠分为对照组和脂联素干预组,每组24只.对照组给予一次性尾静脉注射生理盐水100μl;干预组则同法注射100μl重组腺病毒(Ad-APN-eGFP,3.0×l08 p.f.u).分别在注射后0天、1周、2周、及4周处死小鼠,取全血和主动脉血管组织.用ELISA法测定血清中脂联素浓度;用WB法检测血管组织中标识绿色荧光蛋白(GFP)以确定重组腺病毒的转染率.全自动生化仪检测血常规指标、肝功能(ALT、AST)、肾功能指标(CR、BUN)、心肌酶(CK、CKMB)、以确定重组腺病毒转染的安全性.腺病毒对血常规指标和心肌酶的表达没有显著影响,对肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)(1周时组间差异P<0.01和2周时组间差异P<0.05)、肾功能指标尿素氮BUN(1周时组间差异P<0.01)有一过性影响.重组腺病毒可在体内高效介导外源基因脂联素的表达,血清中的脂联素浓度在病毒转染后1周达到了高值,约是正常对照组的4倍(78.28 ±15.02 vs 23.42 ±5.35)μg/ml,2周内稳定表达.1周时GFP蛋白在血管组织中表达的量高,1周时GFP/GAPDH为83.63±1.50%,随后逐渐降低,2周时GFP/GAPDH为54.00±4.00%,4周时GFP/GAPDH为22.00±3.99%.重组腺病毒注射存在一过性的肝毒性和肾毒性,但是对动物的生理状态没有显著影响.重组腺病毒对ApoE-/-小鼠的血管组织有高效转染、2周内安全、稳定表达的特性.

    作者:王雪梅;魏琴;段明军;张春;姜涛;杨毅宁 刊期: 2016年第02期

  • 基于逆运动学的下肢步态参数计算和测量

    步态参数分析是神经疾病康复的重要评估手段,能够方便、准确的测量人体下肢步态参数具有重要意义.本研究把人体下肢简化为由铰链连接的串联多刚体,利用三维运动捕捉仪检测脚尖与髋关节空间坐标与姿态,根据机器人逆运动学的方法计算下肢关节角度.通过测量人体骨骼模型的关节角度,分析逆运动学方法的精度与可靠性,分析显示逆运动学法计算的关节角度算术平均误差为3.12°,具有小于10%的大允许误差,且其与向量法计算数据在0.01水平上是显著相关的.本研究提出的逆运动学方法能够保证计算精度与可靠性,减少了测量需要的标识点数目和点滑移对测量的影响,增加了测量的方便性.

    作者:王勇哲;沈林勇;章亚男;钱晋武 刊期: 2016年第02期

  • 基于IMF能量熵的脑电情感特征提取研究

    为提高脑电信号情感识别分类准确率,结合经验模态(EMD)分解和能量熵提出一种新的脑电特征提取方法.本研究主要介绍了EMD分解的基本原理,分析了传统EMD算法中的“端点效应”,采用分段幂函数插值算法改善了EMD分解的精度和性能,然后将改进后的算法应用到脑电信号特征提取,获取脑电信号的IMF分量后计算出IMF能量熵作为情感识别的特征,后通过分类实验对比改进后的EMD算法和传统EMD算法对脑电情感特征的分类准确率.实验结果显示改进的EMD算法能使识别率提高15%左右,并且以IMF能量熵为特征的平均识别率在80%以上,实验结果表明将IMF能量熵用于脑电信号情感识别是可行的.

    作者:陆苗;邹俊忠;张见;肖姝源;卫作臣 刊期: 2016年第02期

  • 高效液相色谱法对PHEMA液体栓塞材料中单体残留的超痕量分析

    应用高效液相色谱法测定了聚甲基丙烯酸-β-羟乙酯(PHE MA)液体栓塞材料中的单体甲基丙烯酸-β-羟乙酯(HEMA)残留量.采用色谱柱AichromBond-1 C18(4.6 mm ×250 mm,5 μm)进行分离,流动相为乙腈-水(30∶70);检测波长为220 nm;进样量为20 μL.单体在质量浓度为0.1~ 4.0 mg/L的范围,峰面积与单体浓度线性关系良好,相关系数0.9992,检测下限为0.01 mg/L.当试样加标浓度为0.5,2.0,4.0 mg/L时,加标回收率在99.5% ~ 102.0%之间,RSD≤2%.

    作者:朱肖杰;朱小敏;马丽霞;王传栋;夏毅然;孟建文 刊期: 2016年第02期

  • 基于多维特征和支持向量机核函数优化的自动化肺结节检测模型

    为了解决特征级肺结节检测研究中的特征结构不合理和分类器性能低下两个问题,提出了一种多维特征表达与支持向量机(support vector machine,SVM)核函数优化相结合的自动化肺结节检测模型.首先提取多维特征数据量化感兴趣区域(region of interest,ROI),然后利用网格寻优算法优化SVM核函数,后基于优化的SVM分类器识别结节区域和非结节区域.仿真实验结果表明,该模型耗时短、检测正确率高,具有一定的临床应用价值.

    作者:刘银凤;张俊杰;周涛;夏勇;吴翠颖 刊期: 2016年第02期

  • 子母式集尿袋声光报警技术的设计

    设计一套适合子母式集尿袋临床使用的报警装置,可自动识别集尿袋内尿液是否达到要求高度并报警,提高临床自动化水平.根据非接触式检测和光电转换方法,采用红外对管将测量尿液高度转化为测量电压值,由电压变化判断尿液是否达到报警高度,达到要求就进行报警,否则不报警.后通过数值估算和电子仿真验证设计方案可行性,实物验证临床可行性.通过实际实验,当集尿袋内的尿液达到报警高度时,光敏二极管的输出电压变小,蜂鸣器报警,结果表明可以满足要求.根据此方法设计的子母式集尿袋声光报警装置有效可行,能够满足临床使用,可减少护士工作量,为集尿袋的临床使用提供更多选择.

    作者:邱帅;严荣国;张智豪;王成;王艳 刊期: 2016年第02期

  • 基于多台Kinect传感器的步态采集系统

    步态分析有助于对神经疾病患者的康复功能状态进行评价,帮助制定康复治疗方案及评定康复疗效,步态数据的采集是步态分析的前提与保障.针对现有的步态采集系统采集到的步态周期较少的问题,我们提出了一种基于多台Kinect设备,用于步态数据采集的新方法,成功延长了采集的距离.系统以建立无线局域网为基础,实现了同时控制多台Kinect;将人体模型作为采集目标,结合加权整体小二乘法标定系统的坐标系.后采集步态数据,实现数据的融合,取得了较好的融合效果,将步态数据与运动捕捉仪数据进行对比,证明了此系统的可行性.

    作者:吴楠;钱晋武;沈林勇;赵凌 刊期: 2016年第02期

生物医学工程研究杂志

生物医学工程研究杂志

主管:山东省科学技术协会

主办:山东生物医学工程学会 山东省医疗器械研究所 山东省千佛山医院