学术投稿

GC-MS快速测定鱼腥草注射剂致过敏介质释放的方法研究

陈艳;张永勇;梁忠丽;唐岚;侯晓蓉

关键词:组胺, GC-MS, 鱼腥草注射剂, 衍生化, 血浆, 犬
摘要:目的 建立犬血浆中组胺GC-MS定量测定方法.方法 12只比格犬随机分4组,给药组注射含高、中、低3种浓度吐温-80的鱼腥草注射剂和生理盐水组,30 min后取犬血浆,加入氯甲酸乙酯/三氯甲烷进行衍生化.组胺作为过敏标志物用气质联用法进行测定,DB-WAX色谱柱(30m×0.25 mm,0.25 μm);柱温从150℃开始,再以40℃/min的速度升至240℃.质谱条件采用SIM选择离子模式,选择m/z166为组胺的检测离子,选择m/z 192为内标9-methylanthracene的检测离子,内标以及组胺标的色谱保留时间分别为11和13.5 min.结果 组胺在2~ 32 mg/L范围内具有良好线性关系,r2=0.999,平均回收率为100.6%( RSD=1.86%),低检测限为0.7 mg/L(S/N =3).结论 本实验方法操作简便、准确、回收率好,可快速检测中药注射剂引起的组胺过敏介质的释放,为临床、制药企业解决中药注射剂的安全性问题提供科学方法.
中成药杂志相关文献
  • 川芎嗪对实验性结肠炎ICAM-1表达的影响

    目的 观察川芎嗪对实验性结肠炎结肠组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨川芎嗪在治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制.方法 将BALB/C小鼠36只随机分成正常、模型、川芎嗪治疗三组,每组12只,雌雄各半.模型组和川芎嗪组小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)水溶液连续7d,诱发形成溃疡性结肠炎,川芎嗪治疗组小鼠在造模同时,腹腔注射川芎嗪注射液,80 mg/kg,每天1次,连续7d.按照UC疾病活动指数和组织学评分标准,评价川芎嗪对小鼠UC的治疗作用,并用免疫组化技术检测结肠组织中ICAM-1的表达.结果 与正常组比较,模型组的疾病活动指数(DAI)和组织学评分分值升高、ICAM-1表达增强(P<0.01);与模型组比较,川芎嗪治疗组DAI和组织学评分分值降低、ICAM-1表达减弱(P<0.01).结论 ICAM-1在DSS诱导的小鼠实验性结肠炎中表达增强,川芎嗪对此具有显著的抑制作用.

    作者:陈文敏;江琼;石永江 刊期: 2012年第01期

  • HPLC法同时测定风灵凝胶中三七皂苷R1、秋水仙碱、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1

    目的 建立同时测定风灵凝胶(丽江山慈菇、三七)中有效成分三七皂苷R1、秋水仙碱、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1的高效液相色谱法.方法 采用高效液相色谱法进行梯度洗脱,流动相为乙腈-水,色谱柱为Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm,5μm).结果 三七皂苷R1、秋水仙碱、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1分别在5.2 ~ 166.0 μg/mL、0.8 ~25.2μg/mL、20.8~ 666.3 μg/mL、22.1~708.4 μg/mL范围内线性关系良好;各成分加样回收率均符合要求;每支风灵凝胶中含秋水仙碱不得少于4.7 mg,含三七总皂苷不得少于657.0 mg.结论 该方法简便、稳定,专属性强,重现性好.可用于风灵凝胶各有效成分的测定.

    作者:刘容飞;谢燕;袁秀荣 刊期: 2012年第01期

  • 知母皂苷对Aβ25-35引起小脑颗粒细胞损伤的保护作用及其机制探讨

    目的 观察知母皂苷对淀粉样β蛋白25-35( Aβ25-35)激活小鼠巨噬细胞引起小脑颗粒细胞损伤的保护作用及探讨其作用机制.方法 小鼠小脑颗粒细胞与腹腔巨噬细胞联合培养及腹腔巨噬细胞单独培养,损伤组加入Aβ25-35( 20μmol/L),保护组同时加入不同质量浓度知母皂苷(10、30、100μmol/L).联合培养的细胞通过免疫组化染色观察微管相关蛋白-2( MAP-2)的表达和测定乳酸脱氢酶(LDH).单独培养的巨噬细胞用ELISA法和Griess法分别测定培养液中白细胞介素-1β(IL-1β)和一氧化氮(NO).Western blot检测巨噬细胞磷酸化p38MAPK表达水平.结果 知母皂苷组可使MAP-2表达阳性的小脑颗粒细胞数目较Aβ25-35组明显增加,LDH漏出量减少;巨噬细胞培养液中IL-1β和NO生成量减少以及巨噬细胞磷酸化p38MAPK表达水平明显降低.SB203580也能抑制Aβ25-35引起的IL-1β和NO生成量增加.结论 知母皂苷通过抑制Aβ25-35激活巨噬细胞p38MAPK通路,使IL-1β和NO表达水平降低,从而对小脑颗粒细胞起到保护作用.

    作者:刘卓;金英;隋海娟;闫恩志 刊期: 2012年第01期

  • 镰形棘豆总黄酮软膏剂的制剂工艺研究

    目的 制备具有高渗透性的镰形棘豆总黄酮软膏剂,并探讨影响其体外累积渗透量的因素.方法 首先建立2',4 '-二羟基查尔酮的体外测定方法,用体外透皮实验方法考察总黄酮的透皮性能,在单因素考察基础上,以累计透过量为考察指标,选择促渗剂(油酸)用量、载药浓度、单硬脂酸甘油酯与三乙醇胺的比例三个因素进行正交设计,优化镰形棘豆总黄酮软膏剂处方.结果 通过正交设计优化得到渗透性能良好的镰形棘豆总黄酮软膏剂,镰形棘豆总黄酮软膏剂其主要成分2 ',4 '-二羟基查尔酮的累积透皮率较溶液剂提高了2倍.结论 镰形棘豆总黄酮软膏剂具有良好的渗透能力.

    作者:陈志鹏;瞿敏明;刘丹;肖衍宇;蔡宝昌;陈新梅 刊期: 2012年第01期

  • 妇科千金片对急性盆腔炎大鼠子宫、卵巢TNF-α、IL-2mRNA转录水平的影响

    目的 观察妇科千金片(千斤拔、单面针、金樱根、穿心莲、功劳木、党参、鸡血藤、当归)对急性盆腔炎大鼠子宫、卵巢细胞因子TNF-α、IL-2 mRNA表达的影响,初步探讨该药抗炎免疫作用的分子机制.方法 采用混合菌(大肠杆菌、解脲支原体和金黄色葡萄球菌)接种法建立急性盆腔炎大鼠模型.妇科千金片给药后取大鼠子宫、卵巢,提取总RNA,进行RT-PCR反应,通过光密度扫描进行半定量分析.结果 与假手术组相比,模型组TNF-α、IL-2 mRNA表达均上升,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组比,妇科千金片治疗组TNF-α、IL-2 mRNA表达均下降(P<0.05).结论 妇科千金片的抗炎免疫作用可能是通过降低TNF-α、IL-2 mRNA表达,减轻由细胞炎症因子介导的炎症反应来实现的.

    作者:鲁耀邦;屈金艳;郭建生;左之文;师振予;王小娟;桂柳姿 刊期: 2012年第01期

  • 抗纤方对小儿肝硬化纤维化的影响

    目的 探讨中药抗纤方对小儿肝硬化患者肝纤维化的治疗作用及其机制.方法 将98例小儿乙型肝炎(乙肝)后肝硬化患者随机分为两组观察.对照组用常规西药治疗方法;中药治疗组在对照组用药基础上服用中药抗纤方;疗程均为1年.观察患者治疗前后肝纤维化指标:透明质酸酶、层黏连蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、肝功能、乙肝标志物的变化;部分患儿进行肝活检病理检查.结果 随着治疗时间的延长,两组肝纤维化指标水平均明显下降,中药治疗组各指标下降更为明显,停药4个月后肝纤维化指标有所回升,但仍低于治疗前,两组间差异有统计学意义;中药治疗组丙氨酸转氨酶和总胆红素复常率(81.09%和49.51%)均明显高于对照组(46.1%和19.3%);停药4个月后ALT和TBil复常率两组比较差异有统计学意义;HBsAg、HBeAg、HBV-DNA阴转率及临床症状改善率优于对照组;两组均未出现药物不良反应.结论 抗纤方有较明显的抗小儿肝纤维化、改善肝功能、抑制HBV及其复制等作用.

    作者:张小兆 刊期: 2012年第01期

  • HPLC法测定穿心莲滴丸中脱水穿心莲内酯的溶出度

    目的 建立穿心莲滴丸中脱水穿心莲内酯溶出度的测定方法,以有效的控制其内在质量.方法 建立溶出介质中脱水穿心莲内酯的HPLC测定方法;采用《中国药典》二部附录XC溶出度测定第一法,测定穿心莲滴丸和穿心莲片中的脱水穿心莲内酯在不同时间的累积溶出百分率.结果 脱水穿心莲内酯在6.056 ~ 121.12 μg/mL范围内线性关系良好;平均回收率为101.23%,RSD为1.48%.滴丸与片剂中脱水穿心莲内酯在10 min时溶出百分率分别超过80%和5%,说明制成滴丸后可加速有效成分的溶出.结论 将穿心莲提取物制成滴丸剂,可显著改善难溶性成分脱水穿心莲内酯的溶出速率;通过测定穿心莲滴丸中脱水穿心莲内酯的溶出度,可有效控制滴丸的质量.

    作者:宋英;陆静冉;沈鸣;王建新 刊期: 2012年第01期

  • 高血压引起动脉硬化的发病机制及其中医药防治

    长期高血压可引起动脉硬化,其中以动脉粥样硬化为常见,且给患者带来严重的后果.近年来,越来越多的研究报道了高血压引起动脉粥样硬化的各种影响因素,从而产生了一些新的治疗靶向.本文介绍了高血压与动脉粥样硬化之间的关系,主要从脂质浸润学说、损伤反应学说、炎症学说和神经体液因素分析高血压引起动脉粥样硬化的发病机制,并对中医药防治该疾病的临床前研究和临床研究进行了综述,评价了中医药防治该疾病所取得的成就、未来前景及存在问题.

    作者:陈婵;陈长勋 刊期: 2012年第01期

  • 新疆蔷薇红景天抗冠心病有效成分的提取纯化研究

    目的 优选出新疆蔷薇红景天抗冠心病有效成分的提取纯化工艺.方法 以新疆蔷薇红景天中水溶性提取物的出膏率、红景天苷和酪醇为评价指标,采用正交及均匀设计优选了新疆蔷薇红景天抗冠心病有效成分的提取纯化工艺,并采用药效试验对纯化前后的提取物进行了药效的考察.结果 优选出的提取工艺为提取两次,每次2h,第一次加药材量16倍水,第二次加药材量12倍水.优选出的醇沉除杂工艺为移取相对密度为1.00 g/mL的提取液适量,加95%乙醇调溶液醇质量分数为85%,用40%氢氧化钠溶液调pH为9.0,置冰箱冷藏24h,减压过滤,浓缩即得.醇沉工艺对药效无影响.结论 验证试验表明优选出的新疆蔷薇红景天抗冠心病有效成分的提取纯化工艺稳定、合理、可行.

    作者:马桂芝;滕亮;马亮英;李军;孙殿甲 刊期: 2012年第01期

  • 补骨脂生品及炮制品体外抑菌活性研究

    目的 以中药补骨脂为研究对象,研究补骨脂生品及炮制品对金黄色葡萄球菌(SA)、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(M RSA)和β-内酰胺酶阳性的金黄色葡萄球菌(ESBLs-SA)的体外抑菌活性.方法 以小檗碱为阳性对照,利用K-B法和液体培养法进行体外抑菌活性研究.结果 石油醚部位是补骨脂生品主要的抑菌活性部位,补骨脂生品及炮制品对SA的抑制活性>MRSA> ESBLs-SA,酒炙补骨脂(甲醇总提取物)和酒炙补骨脂(石油醚部位)在质量浓度为50 mg/mL对3种菌的抑菌圈均为12 mm,活性较好;液体培养法中,酒炙补骨脂石油醚部位(IC50 =0.10 mg/mL)活性好.结论 不同炮制方法对补骨脂抑菌作用有明显的影响,尤其是酒炙补骨脂抑菌活性增强的较显著.

    作者:李昌勤;赵琳;康文艺 刊期: 2012年第01期

  • GC-MS快速测定鱼腥草注射剂致过敏介质释放的方法研究

    目的 建立犬血浆中组胺GC-MS定量测定方法.方法 12只比格犬随机分4组,给药组注射含高、中、低3种浓度吐温-80的鱼腥草注射剂和生理盐水组,30 min后取犬血浆,加入氯甲酸乙酯/三氯甲烷进行衍生化.组胺作为过敏标志物用气质联用法进行测定,DB-WAX色谱柱(30m×0.25 mm,0.25 μm);柱温从150℃开始,再以40℃/min的速度升至240℃.质谱条件采用SIM选择离子模式,选择m/z166为组胺的检测离子,选择m/z 192为内标9-methylanthracene的检测离子,内标以及组胺标的色谱保留时间分别为11和13.5 min.结果 组胺在2~ 32 mg/L范围内具有良好线性关系,r2=0.999,平均回收率为100.6%( RSD=1.86%),低检测限为0.7 mg/L(S/N =3).结论 本实验方法操作简便、准确、回收率好,可快速检测中药注射剂引起的组胺过敏介质的释放,为临床、制药企业解决中药注射剂的安全性问题提供科学方法.

    作者:陈艳;张永勇;梁忠丽;唐岚;侯晓蓉 刊期: 2012年第01期

  • 应用洗脱-推挤逆流色谱法高效分离制备人参皂苷Rg1、Rf及Rd

    目的 运用洗脱-推挤逆流色谱技术(EECCC)分离制备人参皂苷Rg1、Rf及Rd.方法以乙酸乙酯-正丁醇-0.1%甲酸水(2∶1∶3,v/v)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,仪器转速为1 250r/min,操作体积流量为40 mL/min,切换体积为2 400 mL.结果 在此条件下,经一步纯化从300 mg样品中分离纯化得到71 mg人参皂苷Rg1、21 mg人参皂苷Rf及53 mg人参皂苷Rd,经高效液相色谱分析,纯度分别达到96.2%、94.3%和95.1%.结论 EECCC制备方法快速,简单.对于分离分配系数高的物质十分有效.

    作者:程屹俊;梁琼麟;王义明;伍军;罗国安 刊期: 2012年第01期

  • 黄连生物碱类成分经Caco-2细胞模型转运的协同作用研究

    目的 研究来源于中药黄连中的4种生物碱成分盐酸黄连碱、盐酸药根碱、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀经Caco-2细胞模型共同转运后的吸收特征.方法 利用Caco-2细胞单层模型研究4种黄连生物碱从绒毛面到基底面的共同转运特征,并与4种生物碱单独进行的转运过程进行比较.采用超高效液相色谱法测定4种生物碱的浓度,计算表观渗透系数(Papp)及吸收率(%),并与阳性对照药普萘洛尔和阿替洛尔进行比较.结果 经Caco-2细胞单层共同转运后黄连碱、药根碱、小檗碱、巴马汀的表观渗透系数( Papp)及吸收率(%)均是其单独转运时的1.63倍,1.28倍,1.55倍及1.05倍.结论 黄连4种生物碱类成分共同作用可促进其肠道吸收.

    作者:张伯莎;安叡;王跃;王新宏 刊期: 2012年第01期

  • 无梗五加茎中3种酚酸类成分的HPLC-DAD-MS分析

    目的 利用高效液相色谱-二极管阵列检测器-质谱法,对无梗五加茎中3种酚酸类成分进行定性定量分析.方法 RP-HPLC,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C8(250 mm× 4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-甲醇-酸水溶液梯度洗脱;体积流量为1 mL/min;柱温为50℃;进样量为10 μL;定性检测波长为270 nm,定量检测波长为260 nm、324 nm;离子源ESI,负离子扫描模式.结果 原儿茶酸、绿原酸和咖啡酸在25 min内均被很好地分离,经光谱及质谱的分析得到确认.3种成分分别在0.102 ~2.04,0.256~5.12,0.295~5.90 mg/mL质量浓度范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 8).3种成分的精密度、重复性、稳定性的RSD均小于2.0%,平均回收率范围为99.2% ~ 100.4%,RSD为1.0%~2.2%.结论 不同产地无梗五加茎中3种成分的含有量有较大的差别.方法准确、重现性好,可用于无梗五加茎中原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸成分的分析测定.

    作者:金敏婷;苏瑞;许鑫;张舒婷;方洪壮 刊期: 2012年第01期

  • RP-HPLC法同时测定天麻中游离天麻素、巴利森苷和总天麻素

    目的 建立同时测定天麻中游离天麻素、巴利森苷和总天麻素的高效液相色谱方法.方法 色谱柱为LUNA C18(2)(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,柱温35℃,检测波长270nm.结果 游离天麻素、巴利森苷和总天麻素的平均回收率分别为99.27%、98.97%和99.22%,RSD分别为1.32%、1.11%和1.72%(n=6).结论 该方法简便、可行,重现性好,可用于天麻药材的质量控制.

    作者:刘玉红;易进海;陈燕;黄志芳;刘云华 刊期: 2012年第01期

  • 大孔树脂纯化穿心莲内部沸腾提取液的工艺研究

    目的 以提取穿心莲内酯为例,对采用减压内部沸腾法得到的提取液进行大孔吸附树脂纯化的研究,用来解决叶绿素含有量高的中药的分离纯化问题.方法 运用静态吸附法对6种大孔吸附树脂进行筛选,动态吸附法对吸附和洗脱工艺进行优化,并和乙醇回流提取液分离效果进行比较.结果 减压内部沸腾提取液通过HPD-100大孔树脂纯化后,制得的浸膏中穿心莲内酯的纯度从初始的11.16%提高到72.70%,比醇提高出15.46%,回收率达82.89%,且树脂残留色素量较少,重复使用次数比醇提增加一倍.结论 采用减压内部沸腾提取有效地降低了提取液的色素量,提纯效果好、产品质量高,树脂寿命长.

    作者:彭梦微;韦藤幼;陈晓光;童张法 刊期: 2012年第01期

  • 辅料对改善强力宁提取液喷雾干燥粘壁现象的作用研究

    目的 研究不同辅料对解决中药复方强力宁提取液喷雾干燥粘壁的效果.方法 对辅料的种类、用量,喷雾干燥的工艺进行优化,并通过对有效成分溶出度的考察初步评价其可能对药效的影响.结果 强力宁提取液中添加占干膏量10%的轻质氧化镁,及3%微晶纤维素,在工艺为进风温度120℃,雾化压力1.05 bar,进液体积流量4.5 mL/min,进风风量35.0 m3/h的条件下进行喷雾干燥,可有效改善粘壁问题.且紫丁香苷溶出度实验显示,加入辅料不影响药物的溶出.结论 轻质氧化镁对改善强力宁提取液喷雾干燥粘壁非常有效,同时加入少量的微晶纤维素能够改善喷雾干燥粉末的团聚现象.

    作者:王优杰;冯怡;杨胤;徐德生;阮克锋;谢亚林 刊期: 2012年第01期

  • HPLC指纹图谱对延灯滴丸质量评价的研究

    目的 建立延灯滴丸(灯盏花、延胡索等)的指纹图谱,作为延灯滴丸的质量评价指标.方法 采用高效液相色谱法,二极管阵列检测器,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(pH 3.0梯度洗脱),柱温40℃,体积流量0.8 mL/min,检测波长280 nm.结果 HPLC-DAD色谱图中有25个共有峰,采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”自动处理,10批样品的相似度均大于0.99.结论 该方法简便,稳定,重现性好.可作为延灯滴丸的质量评价指标.

    作者:崔佰吉;张宏梅;张秀荣 刊期: 2012年第01期

  • 加减温经汤对寒凝血瘀模型大鼠子宫内膜ER、PR表达的影响

    目的 观察加减温经汤对寒凝血瘀模型大鼠性激素及子宫内膜ER、PR表达的影响,完善加减温经汤治疗寒凝血瘀型妇科疾病的作用机制.方法 将SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组,将模型组和治疗组大鼠置于0~1℃冰水中造成寒凝血瘀大鼠模型;同时治疗组给予加减温经汤灌胃2周.择动情间期断头取血,采用放射免疫法检测血清E2、P;取子宫进行免疫组织化学染色,观察子宫内膜ER、PR的表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清E2、P值下降,子宫内膜ER、PR表达降低,差异有统计学意义(均P<0.01或P<0.05);与模型组比较,治疗组血清E2、P值水平升高,子宫内膜ER、PR表达增强,差异有统计学意义(均P<0.01或P<0.05),血清E2、P值及子宫内膜ER表达恢复至正常水平(均P >0.05).结论 加减温经汤可通过调节卵巢激素分泌,增强子宫内膜雌孕激素受体表达,改善子宫功能,治疗寒凝血瘀型妇科疾病.

    作者:徐丁洁;成秀梅;杜惠兰;徐洪 刊期: 2012年第01期

  • 新疆马鹿角提取物对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响

    目的 研究新疆马鹿角提取物对体外培养成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响.方法 以MC3T3-E1细胞作为药物筛选模型,用MTT法测定不同浓度的新疆马鹿角提取物促细胞增殖作用,采用碱性磷酸酶活性测定和骨钙素含有量检测,观察不同浓度的新疆马鹿角提取物促细胞分化作用,以Von kossa钙化染色法观察新疆马鹿角提取物溶液对MC3T3-E1细胞钙化能力的影响.结果 MTT检测结果表明5×102、5×101、5 μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在24、48、72 h均可促进MC3T3-E1细胞增殖,且呈时间依赖性.ALP检测结果表明5×102、5×101 μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在24、48、72 h可提高MC3T3-E1细胞内ALP的活性.BGP检测结果表明5×102、5×101 μg/mL新疆马鹿角提取物溶液在8、12 d可促进MC3T3-E1细胞内BGP的合成和分泌.Von kossa染色钙化面积百分比结果表明3组新疆马鹿角提取物溶液与对照组比较无明显区别.结论 新疆马鹿角提取物可促进成骨细胞株MC3T3-E1的增殖和分化能力.

    作者:刘盟;马玉;高晓黎;魏丽;阿尔孜古丽·吐尔逊 刊期: 2012年第01期

中成药杂志

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主管:上海市卫生局

主办:国家食品药品监督管理局,信息中心中成药信息站,上海中药行业协会