学术投稿

磷酸脂配体体外激活人外周血γδT细胞的研究

黄岚;陈松华;戴慧敏;刘伟;葛锡锐

关键词:γδT细胞, 激活, 辅佐细胞, 细胞毒性
摘要:人γδT细胞可识别非肽类的磷酸脂分子.本研究用非肽类磷酸脂配体MEP在体外选择性扩增人外周血γδT细胞.MEP激活的PBMC中主要为CD3+CD45RO+γδTCR+细胞群.激活的γδT细胞可分泌IFN-γ,但不分泌IL-4,因此激活的γδT细胞可能分泌Thl型细胞因子.MEP激活γδT细胞需要有辅佐细胞的存在,但不需要抗原的处理和递呈,并且激活的γδT细胞对多种肿瘤细胞具有非MHC限制性的细胞毒作用.以上结果提示MEP,可有效激活γδT细胞,使其表现出独特的免疫学特征和生物学功能.
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  • 分子克隆技术在变应性疾病研究中的应用

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  • 新型疫苗--预防和控制疾病的新途径

    免疫学基础理论研究的进展对预防性和治疗性疫苗的研制有极其重要的促进作用.抗原的加工与递呈机制的深化、多种细胞因子及相互作用的揭示、抗原表达的分析、新细胞因子及趋化因子的克隆与表达、核酸免疫及其机制的研究、人类基因组中有关免疫应答及调控因子的新进展等均已经或将会对人类用疫苗预防与控制疾病发生深远的影响.

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    观察了新鲜分离和经体外培养36h的人外周血树突状细胞DC-0和DC-36,在GM-CSF或TNF作用下,辅助淋巴因子和PHA激活的杀伤细胞(LPAK)体外杀伤人肝癌细胞株BEL-7402的影响.实验在BEL-7402、LPAK和DC(DC-0或DC-36)相混合的基本条件下,分别添加GM-CSF(500u/ml,100u/ml)或TNF(5000u/ml,500u/ml),温育48h后用中性红比色法检测细胞毒活性.结果显示,加入GM-CSF各组的细胞毒活性明显增高(P<0.01),并在浓度为100u/ml时达到大效应.加入TNF各组的细胞毒活性也明显增高(P<0.01),但存在着剂量依赖关系.DC-36各组与相应的DC-0组比较,细胞毒活性明显增高(P<0.01).表明新鲜分离的DC经36h培养后,其辅助的抗肿瘤活性明显增强,与GM-CSF和TNF也有更大的协同作用.

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    本文采用TUNEL法及流式细胞仪观察不同鼠龄外周血淋巴细胞凋亡及凋亡发生率,并用免疫组织化学检测Bcl-2、Bcl-xl及Bax基因表达变化.结果发现老年鼠组外周血淋巴细胞群中存有典型的凋亡细胞,凋亡细胞发生率明显高于青年组.老年鼠PBL的Bcl-2,Bcl-xl表达下调,而Bax的表达量明显增加.提示在衰老过程中存在着免疫细胞凋亡,其发生与相关调控基因的表达一致.

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    作者:吴国球;高茂馗;何岳文 刊期: 2000年第01期

  • 基因工程技术制备人源抗HBsAg抗体Fab片段

    将从抗体文库中筛选出的抗HBsAg-Fab阳性克隆转化大肠肝杆菌,IPTG诱导表达,经Western-blot鉴定,证实上清中含有可溶性抗HBsAg-Fab片段,应用自制的羊抗人免疫球蛋白片段抗体(anti-Fab)与Gama-bind交联制备的亲和层析柱纯化表达产物,所得纯化产物在SDS-PAGE中形成单一条带,经Western-blot证实具备良好抗原特异性,Dot-blot证实具备良好抗原结合活性.

    作者:尤长宣;罗荣城;丁雪梅;韩焕兴;胡栋平;范列英 刊期: 2000年第01期

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    以二氧乙烯十六烷醚、胆固醇和油酸为原料制备非磷脂脂质体,试验证明其包裹率高、稳定性好.与破伤风类毒素(TT)铝佐剂疫苗相比较,TT非磷脂脂质体疫苗二针免疫小鼠产生的抗体应答水平高一倍左右,抗体亚类以IgG1为主,加入IFN-γ可增加IgG2aI亚类应答.但免疫脾细胞IL-2产量不高.此外,该疫苗鼻粘膜接种可诱导显著的血清抗体应答.因而这种新型脂质体值得疫苗工作者重视.

    作者:沈诚诚;刘庆良 刊期: 2000年第01期

  • 活性染色质诱导抗核抗体生成及肾损伤

    系统性红斑狼疮(SLE)的病因和诱导抗核抗体(ANA)生成的激发原迄今不明.本实验试图用ConA活化淋巴细胞的染色质免疫同系BALB/c小鼠,寻找诱导ANA生成的真正免疫原,阐明SLE发生的激发原是自身活化细胞的核成分,而且证明它所诱导的ANA具有致病性.从ConA活化的脾细胞中提取染色质,然后免疫同系BALB/c小鼠,用ELISA方法测定IgG类抗双链DNA(dsDNA)、抗组蛋白抗体,用免疫荧光法检测抗核抗体核型和免疫复合物沉积,用免疫印迹法测定抗核抗体谱,在光镜下检测肾损伤及电镜下检测肾小球沉积物,用考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量.结果显示,活性染色质能诱导IgG类抗dsDNA、抗组蛋白等多种抗核抗体生成,且肾小球有显著免疫复合物沉积和蛋白尿形成.该实验表明,活化淋巴细胞的染色质是诱导SLE发生的真正自身免疫原.

    作者:吴厚生;马爱妞;张鹏;郭玲;胡新美 刊期: 2000年第01期

  • 多发性骨髓瘤细胞XG-7诱导CD8和TCRαβ阳性的T细胞增殖分化成为细胞毒效应细胞

    采用经密度梯度离心获得的正常健康人外周血淋巴细胞(PBL)与多发性骨髓瘤细胞XG-7进行混合肿瘤淋巴细胞培养.3H-TdR掺入实验证实XG-7细胞可刺激PBL增殖;间接免疫荧光检测显示增殖的PBL中,GD4+/CD8+细胞比例偏移,CD8+T细胞增加.激活的CD8+T细胞在含IL-2的培养体系中得到迅速扩增,占细胞总数的96%以上.流式细胞仪检测显示,扩增的T细胞表达CD3,CD8和TCRαβ,而不表达CD4,CD16和CD56.细胞毒实验结果表明,扩增的CD8+T细胞不仅杀伤原刺激细胞XG-7,也可杀伤其它肿瘤细胞如RPMI8226,U266和Daudi.上述结果说明了经XG-7细胞所刺激PBL中的CD8+T细胞可增殖分化成为抗肿瘤细胞的细胞毒效应细胞,这使得它们有可能在临床上用于肿瘤病人的治疗.

    作者:顾综江;王月丹;邱玉华;谢炜;朱华亭;张学光 刊期: 2000年第01期

  • 二十一世纪的呼唤生命科学的重任

    世纪相交又一轮,千年百载两更新,人类社会已跨入充满希望的21世纪.我们都是新世纪的宠儿,幸运地亲迎普天同庆的千禧年,于不经意中成为世纪变迁的见证人,这将在我们的一生留下永恒的回忆.值此机会,谨向本刊的广大作者、读者、编委和长期支持我们的朋友们致以崇高的敬意和美好的祝愿.

    作者:<上海免疫学杂志>编辑部 刊期: 2000年第01期

  • 抗核周因子对类风湿性关节炎的临床意义

    本文以人颊粘膜细胞为基质,藉间接免疫荧光法检测抗核周因子(APF),并与类风湿关节炎(RA)的各项临床表现进行比较.结果发现APF在RA患者中阳性率为62.5%,特异性为92.2%;其阳性率与RA的多关节痛、晨僵及X线骨破坏呈明显相关性,但与类风湿因子(RF)无相关性.

    作者:张晓;余运能 刊期: 2000年第01期

  • 细胞凋亡的线粒体调控与Bcl-2基因家族

    线粒体结构和功能障碍是各种刺激因素诱导细胞凋亡的中心事件,由此导致线粒体内凋亡诱发因子释放,参与对细胞凋亡的调控;Bcl-2基因家族与此调控密切相关.

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    1 抗原分子特点与淋巴细胞的识别及效应T及B细胞经TCR及BCR与抗原分子结合,因抗原分子组成或结构不同,引起不同的细胞效应.抗原类似分子(agonist)增强免疫应答,或致部分免疫应答;抗原拮抗剂(antagonist)则致免疫无能或耐受.

    作者:陈慰峰 刊期: 2000年第01期

  • 重症肌无力实验模型中胸腺细胞凋亡及其机制的研究

    为观察重症肌无力中胸腺细胞凋亡的变化,制备了实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型,采用切口及末端标记(TUNEL)的方法观察了病程的不同阶段中胸腺细胞的凋亡情况.结果表明,EAMG的胸腺出现了细胞凋亡指数的减少,在免疫后第4周,细胞凋亡指数减少明显(P<0.01).进一步观察,可见实验鼠从第4周开始,EAMG胸腺中Bcl-2的表达增加,而且细胞凋亡指数的减少与Bcl-2表达分数的增加呈明显的负相关.由此可见Bcl-2表达的增加,可导致EAMG胸腺中激活免疫细胞的正常凋亡过程抑制,可能是MG自身免疫发病机制之一.

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