李宁丽;张冬青;周光炎;Annie Cartman;Jean-Yves Leroux;A. Robin Poole;张一平
将从抗体文库中筛选出的抗HBsAg-Fab阳性克隆转化大肠肝杆菌,IPTG诱导表达,经Western-blot鉴定,证实上清中含有可溶性抗HBsAg-Fab片段,应用自制的羊抗人免疫球蛋白片段抗体(anti-Fab)与Gama-bind交联制备的亲和层析柱纯化表达产物,所得纯化产物在SDS-PAGE中形成单一条带,经Western-blot证实具备良好抗原特异性,Dot-blot证实具备良好抗原结合活性.
作者:尤长宣;罗荣城;丁雪梅;韩焕兴;胡栋平;范列英 刊期: 2000年第01期
编者按千年之交的钟声已经敲响,20世纪,免疫学从实践中兴起,在征服各种危害人类疾病的斗争中发展,一跃而成为生命学科的前沿领域.新千年的到来,意味着新的使命和新的挑战.本刊藉2000年改版之际,特邀部分专家教授,以笔会的形式,对免疫学的发展各抒己见.自然,要评述一门新兴学科的未来,远不是几篇短文所能承担的.然而,笔会虽小,却可以展望,也可以启迪,更可表露同仁们的心迹:祝愿我国免疫学事业蓬勃发展,让我们以更大的成就迎接免疫学的新世纪.
作者:陈竺 刊期: 2000年第01期
作者:洪坤学;褚嘉佑;林克勤;杨昭庆 刊期: 2000年第01期
作者:刘强;程志清;李树雯;姚航平 刊期: 2000年第01期
本文旨在探索定量测定IFN-γmRNA的竞争RT-PCR方法的适条件.自行设计和制备了内标准品IFN-γcDNA片段作为竞争模板,建立定量测定IFN-γmRNA的竞争RT-PCR法.用所建立的方法测定了健康人PBMC经一定浓度的calciumionophore和不同浓度的PMA培养不同时间所诱生的IFN-γmRNA.结果表明,在calciumionophore2.0μmol/L浓度下,用PMA100ng/ml诱导6h,IFN-γmRNA达高水平.本法可对细胞内用于IFN-γmRNA作定量测定和用于IFN-γ基因表达机制的研究,方法简便且敏感.
作者:朱晴晖;帅月敏;章谷生 刊期: 2000年第01期
建立一种特异快速地诱导扩增人外周血γδT细胞的方法.用5~10ml外周血通过CD3细胞的富集、γδ单抗的诱导以及肿瘤细胞刺激的培养体系进行γδT细胞的体外扩增.结果显示,γδT细胞能在短时间内快速大量扩增到109~1010的数量级;诱导4周的CD8、γδ阳性的细胞百分率分别为42.69%和58.67%,明显高于诱导前的23.97%和6.62%;γδT细胞对NK敏感的K562细胞和NK抵抗的Daudi细胞均有较高的杀伤活性;γδT细胞对经抗HSP单抗封闭后的Daudi细胞的杀伤率明显下降.该培养体系是一种用血量少、特异、经济、快速的人外周血γδT细胞体外扩增方法.
作者:陈雪华;马安伦;张冬青;王树军;张笑人;张惠珍;葛海良 刊期: 2000年第01期
免疫学基础理论研究的进展对预防性和治疗性疫苗的研制有极其重要的促进作用.抗原的加工与递呈机制的深化、多种细胞因子及相互作用的揭示、抗原表达的分析、新细胞因子及趋化因子的克隆与表达、核酸免疫及其机制的研究、人类基因组中有关免疫应答及调控因子的新进展等均已经或将会对人类用疫苗预防与控制疾病发生深远的影响.
作者:闻玉梅 刊期: 2000年第01期
系统性红斑狼疮(SLE)的病因和诱导抗核抗体(ANA)生成的激发原迄今不明.本实验试图用ConA活化淋巴细胞的染色质免疫同系BALB/c小鼠,寻找诱导ANA生成的真正免疫原,阐明SLE发生的激发原是自身活化细胞的核成分,而且证明它所诱导的ANA具有致病性.从ConA活化的脾细胞中提取染色质,然后免疫同系BALB/c小鼠,用ELISA方法测定IgG类抗双链DNA(dsDNA)、抗组蛋白抗体,用免疫荧光法检测抗核抗体核型和免疫复合物沉积,用免疫印迹法测定抗核抗体谱,在光镜下检测肾损伤及电镜下检测肾小球沉积物,用考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量.结果显示,活性染色质能诱导IgG类抗dsDNA、抗组蛋白等多种抗核抗体生成,且肾小球有显著免疫复合物沉积和蛋白尿形成.该实验表明,活化淋巴细胞的染色质是诱导SLE发生的真正自身免疫原.
作者:吴厚生;马爱妞;张鹏;郭玲;胡新美 刊期: 2000年第01期
采用经密度梯度离心获得的正常健康人外周血淋巴细胞(PBL)与多发性骨髓瘤细胞XG-7进行混合肿瘤淋巴细胞培养.3H-TdR掺入实验证实XG-7细胞可刺激PBL增殖;间接免疫荧光检测显示增殖的PBL中,GD4+/CD8+细胞比例偏移,CD8+T细胞增加.激活的CD8+T细胞在含IL-2的培养体系中得到迅速扩增,占细胞总数的96%以上.流式细胞仪检测显示,扩增的T细胞表达CD3,CD8和TCRαβ,而不表达CD4,CD16和CD56.细胞毒实验结果表明,扩增的CD8+T细胞不仅杀伤原刺激细胞XG-7,也可杀伤其它肿瘤细胞如RPMI8226,U266和Daudi.上述结果说明了经XG-7细胞所刺激PBL中的CD8+T细胞可增殖分化成为抗肿瘤细胞的细胞毒效应细胞,这使得它们有可能在临床上用于肿瘤病人的治疗.
作者:顾综江;王月丹;邱玉华;谢炜;朱华亭;张学光 刊期: 2000年第01期
人γδT细胞可识别非肽类的磷酸脂分子.本研究用非肽类磷酸脂配体MEP在体外选择性扩增人外周血γδT细胞.MEP激活的PBMC中主要为CD3+CD45RO+γδTCR+细胞群.激活的γδT细胞可分泌IFN-γ,但不分泌IL-4,因此激活的γδT细胞可能分泌Thl型细胞因子.MEP激活γδT细胞需要有辅佐细胞的存在,但不需要抗原的处理和递呈,并且激活的γδT细胞对多种肿瘤细胞具有非MHC限制性的细胞毒作用.以上结果提示MEP,可有效激活γδT细胞,使其表现出独特的免疫学特征和生物学功能.
作者:黄岚;陈松华;戴慧敏;刘伟;葛锡锐 刊期: 2000年第01期
本文检测尿毒症患者血浆IL-10、IL-6、TNF-α的变化,提示这些细胞因子在慢性肾脏功能不全病情进展及免疫调节中的作用.
作者:王沙燕;戴勇;黄瑞芳;彭保;齐晖;李德萍 刊期: 2000年第01期
我们已有的工作揭示,在混合皮肤移植的体外模型MELC中,自体角朊细胞可通过间接递呈同种异体抗原诱导免疫抑制.本文在此基础上,进一步分析其中Th1和Th2相关细胞因子含量的变化.结果发现:(1)MELC引入自体角朊细胞后约32h,原同种异体应答中出现的IFN-γ和IL-2分泌格局开始让位于IL-4和IL-10,64h后IFN-γ和IL-2完全消失,表明发生了淋巴细胞Th1向Th2亚群的极化;(2)单抗封闭试验表明,IL-10在其中起关键作用;(3)经自体和异体角朊细胞调变过的淋巴细胞对MELR的作用相反,前者抑制,后者促进.这是首次从T亚群相互作用上探索并揭示混合皮肤移植引起局部免疫耐受的机制.
作者:曹颖平;郑泽铣;李宁丽;沈佰华;史济湘;周光炎 刊期: 2000年第01期
作者:王长军;唐家琪;李先富;潘秀珍;操敏 刊期: 2000年第01期
1998年美国Thomson和Gearhart两个实验室分别报告人体胚胎干细胞(ES细胞)和胚胎生殖细胞(EC细胞)建系成功,由此激起人体ES细胞定向分化的研究.美国<时代>周刊将此列为20世纪末世界十大科技成就之首,并认为ES细胞和人类基因组将同时成为新世纪具发展和应用前景的领域.
作者:周光炎 刊期: 2000年第01期
以二氧乙烯十六烷醚、胆固醇和油酸为原料制备非磷脂脂质体,试验证明其包裹率高、稳定性好.与破伤风类毒素(TT)铝佐剂疫苗相比较,TT非磷脂脂质体疫苗二针免疫小鼠产生的抗体应答水平高一倍左右,抗体亚类以IgG1为主,加入IFN-γ可增加IgG2aI亚类应答.但免疫脾细胞IL-2产量不高.此外,该疫苗鼻粘膜接种可诱导显著的血清抗体应答.因而这种新型脂质体值得疫苗工作者重视.
作者:沈诚诚;刘庆良 刊期: 2000年第01期
本文通过溶血磷脂处理外周血淋巴细胞(粘附细胞和非粘附细胞)后加入维生素D3结合蛋白DBP,37℃、5%CO2孵育3h,其上清液超氧阴离子产物浓度明显增高(P<0.01).未用溶血磷脂处理或不加入DBP,超氧阴离子产物无明显升高(P>0.5).提示溶血磷脂激活巨噬细胞,是通过DBP的作用而实现的.单独用溶血磷脂不能激活巨噬细胞,因此DBP可能是巨噬细胞激活因子前体.
作者:吴国球;高茂馗;何岳文 刊期: 2000年第01期
世纪相交又一轮,千年百载两更新,人类社会已跨入充满希望的21世纪.我们都是新世纪的宠儿,幸运地亲迎普天同庆的千禧年,于不经意中成为世纪变迁的见证人,这将在我们的一生留下永恒的回忆.值此机会,谨向本刊的广大作者、读者、编委和长期支持我们的朋友们致以崇高的敬意和美好的祝愿.
作者:<上海免疫学杂志>编辑部 刊期: 2000年第01期
为了研究健康人T细胞库中是否存在G1特异性T细胞,我们应用重组人软骨抗原凝集原C1为抗原(rG1),采用国际标准半有限稀释建系法,从4名正常人外周血中建立了11株rG1特异性T细胞系.4名健康供者的rC1特异性T细胞系出现频率分别为0.6/106(RP)、0.5/106(AC)、1.6/106(YZ)和2.0/106(JY),平均为1.1±0.5/10-6.远远低于类风湿性关节炎病人外周血rG1特异性自身反应性T细胞.所有T细胞系与rG1及WI和PPD共同培养以观察其特异性反应性,结果发现所建立的11株T细胞系对人软骨抗原凝集素G1区具有良好的特异性.本研究结果提示正常人外周血中确有rG1特异性T细胞系,但是出现频率远远低于类风湿性关节炎病人(另文报道).
作者:李宁丽;张冬青;周光炎;Annie Cartman;Jean-Yves Leroux;A. Robin Poole;张一平 刊期: 2000年第01期
为观察重症肌无力中胸腺细胞凋亡的变化,制备了实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型,采用切口及末端标记(TUNEL)的方法观察了病程的不同阶段中胸腺细胞的凋亡情况.结果表明,EAMG的胸腺出现了细胞凋亡指数的减少,在免疫后第4周,细胞凋亡指数减少明显(P<0.01).进一步观察,可见实验鼠从第4周开始,EAMG胸腺中Bcl-2的表达增加,而且细胞凋亡指数的减少与Bcl-2表达分数的增加呈明显的负相关.由此可见Bcl-2表达的增加,可导致EAMG胸腺中激活免疫细胞的正常凋亡过程抑制,可能是MG自身免疫发病机制之一.
作者:殷伟;乔健;吕传真 刊期: 2000年第01期
分子生物学对变应性疾病的研究影响深远,尤其变应原重组技术的发展和应用,在变应性疾病发病机制的研究及开发新的诊疗手段方面展现了良好前景.本文着重对分子克隆技术在变应性疾病诊断与治疗方面的研究进展进行了简要回顾.
作者:王金德;许以平 刊期: 2000年第01期