学术投稿

单一多克隆双抗体夹心ABC-ELISA检测M-CSF可溶性受体

饶青;韩敬淑;耿以琪;杨文清;吴克复

关键词:可溶性受体, 巨噬细胞集落刺激因子, 夹心ELISA
摘要:用抗M-CSF受体的单克隆抗体和兔多克隆抗体及ABC复合物,建立了检测M-CSF可溶性受体(sM-CSFR的双抗体夹心ABC-FLISA.本法灵敏度高(0.1ng/ml),特异性强,重复性好,准确性高(CV<10%),可检出肿瘤患者及部分正常人血清中可溶性sM-CSFR的含量.本法的建立也为探讨sM-CSFR的生物学功能及临床意义提供方法学基础.
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    为探讨胸腺在重症肌无力发病机制中的作用,取重症肌无力患者手术摘除胸腺制备胸腺提取液,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,并利用细胞培养和细胞增殖试验观察胸腺提取液对正常人外周血单个核细胞增殖的影响,同时利用酶联免疫吸附试验测定其血清AchRab的含量.经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析发现约34%左右的重症肌无力患者胸腺提取液中存在分子量约为11000的蛋白,这些患者的胸腺提取液对外周血淋巴细胞增殖有显著的抑制作用,在胸腺摘除后血清AchRab水平也有更显著的下降,与胸腺提取液中没有这种蛋白的重症肌无力患者相比有显著差异(P<0.01).说明部分重症肌无力患者胸腺提取液蛋白成分和生物学活性异常,并可能与自身抗体的产生有关.

    作者:杜英;张清勇;阮丽荣;李付广;马希峰;李永丽 刊期: 2000年第04期

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    作者:任翠爱;张茂宏;徐从高;张锑 刊期: 2000年第04期

  • 血清铁蛋白检测在肝动脉化疗栓塞术中的意义

    据报道血清中铁蛋白(SF)可作为原发性肝癌(PHC)诊断,尤其是早期诊断的一个较灵敏的指标,并且具有独特的优越性[1].

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    为研究肿瘤细胞MHCⅡ类分子表达及对IFN-γ诱导HLA分子表达的反应性与CIITA表达的关系,本文采用Westemblot、免疫组化和流式细胞术检测肿瘤细胞HLA分子表达,以RT-PCR检测肿瘤细胞CIITA基因表达.肿瘤细胞HLAⅡ类分子表达与CIITA表达一致;组成性或诱导性表达CIITA的肿瘤细胞,经IFN-γ作用后其HLAⅠ、Ⅱ类分子表达增高;IFN-γ诱导后仍不表达CIITA的肿瘤细胞,其对IFN-γ促HLA表达的作用不反应.提示,某些肿瘤细胞对IFN-γ不能诱导HLA分子表达与CIITA诱导性表达缺陷有关.表面CIITA参与调控肿瘤细胞HLAⅠ、Ⅱ类分子表达.

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  • 多发性骨髓瘤的免疫学研究

    多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是发生在B细胞系统的恶性肿瘤.其特征是骨髓中浆细胞克隆性增殖并积聚,分泌单克隆的免疫球蛋白或其片段(M蛋白),同时伴有广泛的溶骨病变或骨质疏松.作为一种代表性的免疫增殖性疾病,MM的免疫学研究一直受到血液学和免疫学工作者的关注,近年来该领域更是成果斐然,引人瞩目.

    作者:侯健 刊期: 2000年第04期

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    为研究单纯性肾病综合征低IgG血症的发生机制.采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR),流式细胞术(FCM)等方法检测患儿外周血T淋巴细胞表面CD40配体(CD40L)表达.结果在发作期CD40L mRNA及蛋白质表达降低,恢复期其表达可接近正常水平,且CD40L表达量与血清IgG水平呈显著正相关.体外实验中加入CD40单克隆抗体(CD40mAb)可使患儿PBMC产生IgG及其亚类水平增高,但仍未达正常水平.单纯性肾病综合征低IgG血症的发生是综合因素作用的结果,CD40L信号减弱导致免疫球蛋白(Ig)同种型转换障碍是因素之一.

    作者:王菁;杨锡强;李成荣;李永柏;蒋利萍;王莉佳;张远维 刊期: 2000年第04期

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  • SEB诱导的正常人外周血T淋巴细胞的增殖

    肠毒素B(SEB)是一种新型的蛋白质抗原分子,具有多种免疫学活性,是超抗原(superantigen,SAg)中的一种.本研究以正常人外周血T淋巴细胞为材料,用SEB刺激后,检查T淋巴细胞的增殖与活化,报道如下:

    作者:李琳;季海生;陈钰;周严恒;任兴斌 刊期: 2000年第04期

  • 单一多克隆双抗体夹心ABC-ELISA检测M-CSF可溶性受体

    用抗M-CSF受体的单克隆抗体和兔多克隆抗体及ABC复合物,建立了检测M-CSF可溶性受体(sM-CSFR的双抗体夹心ABC-FLISA.本法灵敏度高(0.1ng/ml),特异性强,重复性好,准确性高(CV<10%),可检出肿瘤患者及部分正常人血清中可溶性sM-CSFR的含量.本法的建立也为探讨sM-CSFR的生物学功能及临床意义提供方法学基础.

    作者:饶青;韩敬淑;耿以琪;杨文清;吴克复 刊期: 2000年第04期

  • SLE病人外周血白细胞Bcl-2和Bcl-X mRNA表达研究

    测定SLE病人外周血白细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bcl-X mRNA表达量,探索凋亡在SLE发病中的作用和意义.采用荧光标记RT-PCR半定量方法,以β-actin为内参照,对50例SLE病人、24例RA病人和24例正常人外周血白细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bcl-X mRNA表达水平进行了检测.结果显示,SLE病人Bcl-2表达低于正常人(1.3728±1.2905 Vs 1.8418±1.01579,P<0.01),Bcl-Xs表达明显高于正常人(3.1126±2.0136 Vs 1.3275±0.6619,P<0.0001),亦高于RA病人(3.1126±2.0136 Vs 1.3061±0.5307,P<0.0001),Bc1-xl无明显改变;而RA病人Bcl-2表达低于正常人(1.0066±0.5821 Vs 1.8418±1.01579,P<0.01),Bcl-Xs和Bcl-xl表达与正常人相比均无统计学差别.SLE病人外周血白细胞抗凋亡的基因表达降低而促进凋亡的基因表达增加,提示凋亡在SLE发病中可能具有一定作用和意叉.

    作者:孙保东;沈南;裴军;钱捷;陈顺乐 刊期: 2000年第04期

  • IL-12、IL-2、PHA协同诱导狼疮肾炎患者PBMC增殖和合成Ig的研究*

    应用细胞培养技术,采用MIT和ELISA等方法,观察IL-12、IL-2、PHA体外协同诱导狼疮肾炎(LN)活动期、静止期外周血单个核淋巴细胞(PBMC)增殖和产生Ig自身抗体.结果表明:与正常对照相比,IL-12与IL-2、PHA可明显刺激活动期、静止期PBMC增殖和产生大量IgG、IgM,IgA无明显变化,且活动期强于静止期.单独应用IL-12对活动期PBMC作用明显.提示:IL-12可通过促进PBMC增殖产生大量自身抗体参与狼疮肾炎的发病.

    作者:李清刚;李幼姬;李志坚;曾丽霞 刊期: 2000年第04期

  • 乳腺癌患者血清IGF-Ⅱ、TGF-α水平及三苯氧胺治疗后变化

    我们检测34例乳腺癌患者血清胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)、转化生长因子-α(TGF-α)水平,并对12例雌激素受体阳性接受三苯氧胺治疗的患者进行动态观察,现将结果报告如下.

    作者:于学军;衣翠华;扈东艳;刘建伟;郝静 刊期: 2000年第04期

  • 多发性硬化症患者APL特异性T细胞系免疫生物学特性分析

    本文报告采用髓鞘碱性蛋白(MBP)的修饰性肽段配体(APL)对多发性硬化症(MS)患者治疗1年后,在细胞克隆水平分析T细胞免疫应答的结果.从5例患者外周血淋巴细胞中建立了31个APL特异性T细胞系.首先测定患者和健康人体内APL特异性T细胞的反应频率,发现患者中平均为31.6%±23.7%,而10例对照者中仅为5%±2%.31株APL反应性T细胞系对APL抗原表现出高度的增殖特异性.同时发现,APL特异性T细胞系与MBP优势肽段(氨基酸83-99)发生交叉反应的比例,患者中为19.4%(6/31),而对照组中仅有4.3%(1/23).未发现与MBP优势肽段83-99有交叉反应.来自MS治疗组的APL特异性T细胞系中,67%分泌IL-5和/或IL-13,表明这些T细胞系具有Th2细胞特性.以上结果提示,这一修饰性MBP多肽作为一种治疗性疫苗,有可能在体内通过诱导Th2调节细胞,下调自身反应性T细胞介导的免疫损伤,发挥治疗作用.

    作者:张冬青;李宁丽;余奇文;马安伦;张勇;周光炎;Jack P.Antel;Yufen Qin 刊期: 2000年第04期

  • 急性肾小球肾炎患儿外周血单个核细胞IL-13表达及其意义

    为探讨白细胞介素13(IL-13)在急性肾小球肾炎(AGN)发病机制中的作用,应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及ELISA法检测了24例AGN患儿外周血单个核细胞(PBMC)中IL-13 mRNA和蛋白水平的变化.结果表明,AGN急性期IL-13mRNA和蛋白水平显著高于正常对照组,恢复期降至正常水平.重症患儿急性期IL-13 mRNA和蛋白水平显著高于轻症患儿.IL-13水平与血清补体C3和尿红细胞计数呈显著相关关系.本研究结果提示IL-13在AGN中可能具有一定的抗炎作用.

    作者:张爱华;陈荣华;吴元俊;潘晓勤;黄文彦;蔡毅 刊期: 2000年第04期

  • 变应性鼻炎患者变应原皮试与血清特异性IgE检测的相关性研究

    变应性鼻炎(AR)的发生往往与环境中变应原有密切关系,找出变应原是AR诊断和治疗中的关键.对变应原的检测,近年来,采用体内变应原皮试和体外特异性IgE检测,为进一步研究这两项检查的临床应用价值,本文对两者进行了相关分析,其结果如下:

    作者:祁沁红;浦志成;程雷;陈子庆 刊期: 2000年第04期

  • 视网膜下液可溶性Fas表达的临床意义

    采用ELISA法检测了33例增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)患者视网膜下液sFas和sICAM-1、sVCAM-1的水平.结果表明sFas水平明显高于血清水平,而sICAM-1和sVCAM-1水平则明显低于血清水平.提示sFas可能参与了PVR的发病过程.

    作者:许迅;王裕发;何志平 刊期: 2000年第04期

  • IL-6相关转录因子在人骨髓瘤细胞系IL-6信号转导中的作用

    为研究IL-6在人骨髓瘤细胞系的信号传递过程中IL-6相关转录因子的活化状态.本研究在IL-6刺激前后提取人骨髓瘤细胞Sko-007的细胞核蛋白,分别以APRE、NF-IL-6/ATF、NF-κB、CRE、AP-1作为探针,采用凝胶阻滞电泳(electro-phoret-ic mobility shift asaay, EMSA)方法检测IL-6刺激前后Sko-007细胞中与以上DNA反应成分对应的转录因子的活化情况.结果显示,NF-IL-6和NF-κB在正常培养的Sko-007细胞中组成性激活;IL-6刺激前后STAT3和NF-IL-6的活化状态有明显改变;CBEB和NF-κB的活化状态无明显变化;AP-1的激活情况与细胞的生存状态有关.表明在Sko-007细胞中与IL-6信号传递密切相关的转录因子是STAT3和NF-IL-6;对细胞本身生存至关重要的转录因子是NF-IL-6和NF-κB.

    作者:宋伦;黎燕;沈倍奋 刊期: 2000年第04期

  • 国家级继续医学教育《临床实验诊断技术新进展》学习班

    作者: 刊期: 2000年第04期

现代免疫学杂志

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