学术投稿

单一多克隆双抗体夹心ABC-ELISA检测M-CSF可溶性受体

饶青;韩敬淑;耿以琪;杨文清;吴克复

关键词:可溶性受体, 巨噬细胞集落刺激因子, 夹心ELISA
摘要:用抗M-CSF受体的单克隆抗体和兔多克隆抗体及ABC复合物,建立了检测M-CSF可溶性受体(sM-CSFR的双抗体夹心ABC-FLISA.本法灵敏度高(0.1ng/ml),特异性强,重复性好,准确性高(CV<10%),可检出肿瘤患者及部分正常人血清中可溶性sM-CSFR的含量.本法的建立也为探讨sM-CSFR的生物学功能及临床意义提供方法学基础.
现代免疫学杂志相关文献
  • 抗粘附肽YIGSR的衍生物对Lewis肺癌侵袭、转移能力的抑制作用

    采用高转移肿瘤细胞对基底膜成分的体外粘附、侵袭模型和Lewis肺癌细胞自发肺转移模型,研究了YIGSR均叉、杂叉聚合肽的抗肿瘤侵袭、转移活性.实验结果,RGD和YIGSR的杂叉肽和YIGSR的均叉肽对PG细胞较对照的YIGSR肽表现了更明显的粘附抑制作用,并降低了PG细胞的体外侵袭能力,降低了移值Lewis肺癌细胞肺转移小鼠的肺重量或肺转移瘤结节数,但对小鼠原发部位移植瘤重量无明显影响;YIGSR聚合肽的以上作用有一定的剂量依赖性.

    作者:赵铁华;邓淑华;杨鹤松;高巍;施波 刊期: 2000年第04期

  • 多发性骨髓瘤的免疫学研究

    多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是发生在B细胞系统的恶性肿瘤.其特征是骨髓中浆细胞克隆性增殖并积聚,分泌单克隆的免疫球蛋白或其片段(M蛋白),同时伴有广泛的溶骨病变或骨质疏松.作为一种代表性的免疫增殖性疾病,MM的免疫学研究一直受到血液学和免疫学工作者的关注,近年来该领域更是成果斐然,引人瞩目.

    作者:侯健 刊期: 2000年第04期

  • 尸肾移植急性排斥反应与患者淋巴细胞CD62L、CD11a、CD4、CD8表达的关系

    为探讨同种异体尸肾移植排斥反应病人淋巴细胞CD62L、CD11a表达与T细胞亚群及CD4/CD8的关系和意义.利用单克隆抗体-流式细胞仪荧光免疫技术,测定10例肾移植排斥反应病人术后不同时间外周血淋巴细胞CD62L、CD11a、CD4、CD8表达并计算CD4/CD8.结果,肾移植病人排斥反应时其CD62L(46.1±18.7 vs 31.3±10.5,P<0.01)、CD11a(49.5±20.2vs 31.9±12.4,P<0.01)、CD4(24.4±7.7vs 17.9±7.4,P<0.01)、CD8(14.7±2.9 vs 10.4±3.2,P<0.05)表达均较排斥前明显增加,抗排斥治疗后CD11a(14.8±6.2vs 49.5±20.2,P<0.01)、CD4(15.8±6.4vs 24.4±7.7,P<0.05)和CD4/CD8(1.28±0.6vs 1.73±0.79,P<0.05)均明显下降.CD62L变化和CD8呈明显正相关(r=0.9779,P<0.05).认为淋巴细胞CD62L、CD11a、CD4、CD8表达及CD4/CD8与肾移植排斥反应密切相关.免疫抑制剂,尤其甲基强的松尤能明显抑制淋巴细胞CD11a、CD4表达和CD4/CD8比值可能是其发挥抗排斥作用的重要机制.

    作者:蒋立城;潘光辉;白寒;丁红;裘宇容 刊期: 2000年第04期

  • 乳腺癌患者血清IGF-Ⅱ、TGF-α水平及三苯氧胺治疗后变化

    我们检测34例乳腺癌患者血清胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)、转化生长因子-α(TGF-α)水平,并对12例雌激素受体阳性接受三苯氧胺治疗的患者进行动态观察,现将结果报告如下.

    作者:于学军;衣翠华;扈东艳;刘建伟;郝静 刊期: 2000年第04期

  • 实验性自身免疫病与神经内分泌平衡失调

    本文简要回顾了HPG轴、HPA轴、GH、PRL等对免疫系统的调节作用,讨论了神经内分泌的调节失衡与实验性自身免疫病如EAE、AA、CIA、狼疮小鼠、肥鸡等之间的关系.提示:神经内分泌的平衡失调可能是自身免疫病发生的重要机制之一.

    作者:方鉴;张永祥;茹祥斌 刊期: 2000年第04期

  • MHC Ⅱ类反式激活蛋白调控肿瘤细胞HLA分子的表达

    为研究肿瘤细胞MHCⅡ类分子表达及对IFN-γ诱导HLA分子表达的反应性与CIITA表达的关系,本文采用Westemblot、免疫组化和流式细胞术检测肿瘤细胞HLA分子表达,以RT-PCR检测肿瘤细胞CIITA基因表达.肿瘤细胞HLAⅡ类分子表达与CIITA表达一致;组成性或诱导性表达CIITA的肿瘤细胞,经IFN-γ作用后其HLAⅠ、Ⅱ类分子表达增高;IFN-γ诱导后仍不表达CIITA的肿瘤细胞,其对IFN-γ促HLA表达的作用不反应.提示,某些肿瘤细胞对IFN-γ不能诱导HLA分子表达与CIITA诱导性表达缺陷有关.表面CIITA参与调控肿瘤细胞HLAⅠ、Ⅱ类分子表达.

    作者:张笑人;葛海良;张惠珍;王颖;蔡晓敏;周光炎 刊期: 2000年第04期

  • 视网膜下液可溶性Fas表达的临床意义

    采用ELISA法检测了33例增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)患者视网膜下液sFas和sICAM-1、sVCAM-1的水平.结果表明sFas水平明显高于血清水平,而sICAM-1和sVCAM-1水平则明显低于血清水平.提示sFas可能参与了PVR的发病过程.

    作者:许迅;王裕发;何志平 刊期: 2000年第04期

  • 急性肾小球肾炎患儿外周血单个核细胞IL-13表达及其意义

    为探讨白细胞介素13(IL-13)在急性肾小球肾炎(AGN)发病机制中的作用,应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及ELISA法检测了24例AGN患儿外周血单个核细胞(PBMC)中IL-13 mRNA和蛋白水平的变化.结果表明,AGN急性期IL-13mRNA和蛋白水平显著高于正常对照组,恢复期降至正常水平.重症患儿急性期IL-13 mRNA和蛋白水平显著高于轻症患儿.IL-13水平与血清补体C3和尿红细胞计数呈显著相关关系.本研究结果提示IL-13在AGN中可能具有一定的抗炎作用.

    作者:张爱华;陈荣华;吴元俊;潘晓勤;黄文彦;蔡毅 刊期: 2000年第04期

  • 血清铁蛋白检测在肝动脉化疗栓塞术中的意义

    据报道血清中铁蛋白(SF)可作为原发性肝癌(PHC)诊断,尤其是早期诊断的一个较灵敏的指标,并且具有独特的优越性[1].

    作者:戚晓军;尹淑珍;刘伟;吕明;刘阳 刊期: 2000年第04期

  • SEB诱导的正常人外周血T淋巴细胞的增殖

    肠毒素B(SEB)是一种新型的蛋白质抗原分子,具有多种免疫学活性,是超抗原(superantigen,SAg)中的一种.本研究以正常人外周血T淋巴细胞为材料,用SEB刺激后,检查T淋巴细胞的增殖与活化,报道如下:

    作者:李琳;季海生;陈钰;周严恒;任兴斌 刊期: 2000年第04期

  • SLE病人外周血白细胞Bcl-2和Bcl-X mRNA表达研究

    测定SLE病人外周血白细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bcl-X mRNA表达量,探索凋亡在SLE发病中的作用和意义.采用荧光标记RT-PCR半定量方法,以β-actin为内参照,对50例SLE病人、24例RA病人和24例正常人外周血白细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bcl-X mRNA表达水平进行了检测.结果显示,SLE病人Bcl-2表达低于正常人(1.3728±1.2905 Vs 1.8418±1.01579,P<0.01),Bcl-Xs表达明显高于正常人(3.1126±2.0136 Vs 1.3275±0.6619,P<0.0001),亦高于RA病人(3.1126±2.0136 Vs 1.3061±0.5307,P<0.0001),Bc1-xl无明显改变;而RA病人Bcl-2表达低于正常人(1.0066±0.5821 Vs 1.8418±1.01579,P<0.01),Bcl-Xs和Bcl-xl表达与正常人相比均无统计学差别.SLE病人外周血白细胞抗凋亡的基因表达降低而促进凋亡的基因表达增加,提示凋亡在SLE发病中可能具有一定作用和意叉.

    作者:孙保东;沈南;裴军;钱捷;陈顺乐 刊期: 2000年第04期

  • 哮喘患者外周血单核细胞5-脂氧合酶及5-脂氧合酶激活蛋白基因表达的研究

    白三烯类(LTs)是花生四烯酸经5-脂氧合酶(5-LO)途径,并在5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)参与下生成的一类代谢产物,可趋化炎性细胞(LTB4),引起气道收缩、气道粘膜分泌增加和气道高反应性(LTD4、LTE4、LTC4),在哮喘的发病中起重要作用.有研究表明,哮喘患者稳定期及发作期LTs水平均较正常人高,因此,本研究用逆转录PCR方法检测了38例过敏性哮喘患者外周血单核细胞5-LO及FLAPmRNA的含量,并以20例正常人作对照,以探讨LTs增高的机制,并为通过该途径治疗哮喘提供资料.

    作者:李伟杰;邓伟吾;郭雪君;黄绍光 刊期: 2000年第04期

  • 国产Cla型皮埋避孕剂对妇女IL-2、IL-6、TNF-α和IFN-γ产生的影响及意义探讨

    对159例应用国产左旋18甲基炔诺酮皮埋避孕剂(Cla型)妇女血清中和外周血单个核细胞(PBMC)自发分泌的细胞因子水平进行了测定,结果表明,在该药应用早期(<1.5年),血清中和PBMC分泌的IL-2和TNF-α水平明显高于正常对照组(P<0.01),PBMC分泌IL-6的水平则有所降低;而IFN-γ未见明显变化,以上变化在中晚期(1.5~6.0年)基本恢复正常,并保持稳定.血清中IL-2、IL-6和TNF-α的水平变化与PBMC自发分泌水平相关.PBMC在体外经PHA刺激后,分泌四种细胞因子的水平与正常对照组无显著性差别.

    作者:蔡翠芳;万瑶;谭颖慧;方芳;于秀丽;关艳敏;杨学芳 刊期: 2000年第04期

  • 国家级继续医学教育《临床实验诊断技术新进展》学习班

    作者: 刊期: 2000年第04期

  • uPA阳性口腔颌面部恶性肿瘤T细胞亚群变化

    本文用RT-PCR方法测定了口腔颌面部恶性肿瘤患者组织中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)和纤溶酶原抑制剂1、2型(PAI-1、PAI-2)基因的表达;用MTT和流式细胞术对恶性肿瘤患者免疫细胞的应答反应进行了研究.结果显示,在恶性肿瘤组织中uPA、PAI-1、PAI-2的基因表达分别为100%、66%和22%.而在良性肿瘤和正常组织中PAI-1和PAI-2的表达为0%.表明PAI-1、PAI-2基因的表达与组织中肿瘤的恶性变化有关.实验发现恶性颌面部肿瘤患者外周血CD4+T细胞数量明显增加,达到50.1%,但经超抗原SEB刺激以后这一比例却由初的41%降低到17.1%.本文进一步讨论了上述变化的意义和可能的机制.

    作者:陈钰;许亦权;杨舸;步荣发 刊期: 2000年第04期

  • 鸭IL-2 cDNA及基因组序列的初步分析

    从鸭外周血分离的单核细胞在体外经PHA(5μg/ml)刺激20h后,提取总RNA及mRNA并通过逆转录制备cDNA.采用近克隆的鸡白细胞介素-2(ChIL-2)cDNA序列为探针对cDNA进行Southem blot杂交,以识别鸭白细胞介素-2(DuIL-2)特异的cDNA序列.从鸭外周血单核细胞中提取的基因组DNA经限制性内切酶BamHI、EcoRI、XbaI消化后,以上述探针进行杂交,分析DuIL-2基因组序列.结果表明,无论是鸭cDNA或基因组DNA,经Southem杂交后,均得到特异性杂交条带,证实ChIL-2与DuIL-2具有较高序列同源性.DuIL-2 mRNA表达时形成两种转录子,大小分别为959bp、780bp.同鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)探针产生的杂交信号比较,ChIL-2产生的杂交信号相对较弱,推测可能和DuIL-2 mRNA在上述条件下拷贝数相对较少以及ChIL-2与DuIL-2 cDNA序列同源性相对较低有关.

    作者:黄爱龙;Allison Jilbert;Ieva Kotlarski 刊期: 2000年第04期

  • 含M-CSF条件培养液对RAW264.7细胞产生NO的影响*

    巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)是一种单核吞噬细胞特异性的生长因子.近年来的研究表明,M-CSF可以增强巨噬细胞杀伤细菌等病原体及肿瘤细胞的能力,对抗感染及抗肿瘤具有重要意义.一氧化氮(NO)是可由单核吞噬细胞产生的一种自由基,对病原体及肿瘤细胞同样具有杀伤作用.为探讨M-CSF的抗感染、肿瘤作用是否与其刺激单核吞噬细胞产生NO有关,我们以L929细胞条件培养液(L929-CM)作为M-CSF来源,观察了M-CSF对巨噬细胞系RAW264.7细胞NO产生的影响.结果发现,L929-CM可以刺激RAW264.7细胞NO的产生;且RT-PCR显示L929-CM处理使RAW264.7细胞诱导型NO合酶(iNOS)表达增加.

    作者:庞战军;周玫;陈瑗 刊期: 2000年第04期

  • IL-6相关转录因子在人骨髓瘤细胞系IL-6信号转导中的作用

    为研究IL-6在人骨髓瘤细胞系的信号传递过程中IL-6相关转录因子的活化状态.本研究在IL-6刺激前后提取人骨髓瘤细胞Sko-007的细胞核蛋白,分别以APRE、NF-IL-6/ATF、NF-κB、CRE、AP-1作为探针,采用凝胶阻滞电泳(electro-phoret-ic mobility shift asaay, EMSA)方法检测IL-6刺激前后Sko-007细胞中与以上DNA反应成分对应的转录因子的活化情况.结果显示,NF-IL-6和NF-κB在正常培养的Sko-007细胞中组成性激活;IL-6刺激前后STAT3和NF-IL-6的活化状态有明显改变;CBEB和NF-κB的活化状态无明显变化;AP-1的激活情况与细胞的生存状态有关.表明在Sko-007细胞中与IL-6信号传递密切相关的转录因子是STAT3和NF-IL-6;对细胞本身生存至关重要的转录因子是NF-IL-6和NF-κB.

    作者:宋伦;黎燕;沈倍奋 刊期: 2000年第04期

  • 慢性肝病患者血清和腹水IL-8的变化和临床意义

    采用双抗体夹心ELISA法检测了慢性肝病患者血清和腹水中IL-8水平报道如下.1.材料和方法1.1 研究对象临床确诊的慢性肝病合并腹水患者32例,合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)13例,另采集30例健康体检者作正常对照.

    作者:郑伟强;龙尧;张武英;高孝慈 刊期: 2000年第04期

  • 肾小球疾病患者外周血T淋巴细胞亚群的观察

    细胞免疫在肾小球肾炎的发生发展过程中发挥着重要的作用[1],但慢性肾小球肾炎患者外周血T淋巴细胞亚群在临床上尚无一致的结论[2],可能与运用不同的检测方法有一定关系.本文运用流式细胞仪,检测肾病患者外周血T淋巴细胞亚群,藉以探讨对二者之间的关系.

    作者:余仁欢;聂莉芳;许勇钢;王国栋;魏晓超 刊期: 2000年第04期

现代免疫学杂志

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