刘金涛
目的：分析2009年1月至2013年12月内蒙古林业总医院检验科临床生化项目室内质控失控原因，总结纠正措施及预防措施，逐步降低失控率。方法参照 Westgard 质控规则，回顾性分析5年间使用 OLYMPUS AU5421／AU640全自动生化分析仪及配套的试剂、质控品、校准品进行日常室内质量控制的失控结果，根据校准品、试剂、人为因素、质控品、仪器及其它因素等6大原因统计分析失控情况。结果临床生化项目室内质控5年间共失控242例次，失控发生次数呈逐年下降趋势，失控原因中涉及校准品69例次、试剂54例次、质控品50例次、人为因素31例次、仪器23例次、其它原因15例次。校准品原因、试剂原因、质控品原因占质量控制失控所有原因的70％以上，与人为因素、仪器因素及其它原因比较差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论校准品、试剂、质控品问题以及人为因素、仪器问题是发生质量控制失控的主要原因，临床实验室应针对其采取有效措施，制定规范的 SOP 文件，严格控制生化检测项目的质量，持续改进临床检验质量。
作者：王晓艳；孙辉；孙刚；蔡淑敏 刊期： 2015年第05期
作者： 刊期： 2015年第05期
目的：建立一种能同时测定血清中多种类固醇激素[包括脱氢表雄酮（ DHEA）、17α－羟孕酮（17α－OHP4）、雄烯二酮（AD）、雌酮（E1）、皮质酮（CORT）、双氢睾酮（DHT）、孕烯醇酮（P5）和17－羟孕烯醇酮（17－OHP5）]的快速、灵敏的稳定同位素稀释高效液相色谱串联质谱（ID－HPLC－MS／MS）方法。方法血清样品经甲基叔丁基醚（MTBE）提取，上清液吹干后加入羟胺进行柱前衍生化反应后检测。采用 Phenomenex C18反相色谱柱和 Phenomenex C18预保护柱。流动相 A 为含0．1％甲酸的水，流动相 B 为含0．1％甲酸的甲醇。质谱采用电喷雾电离（ESI）模式进行离子化，正离子多反应监测模式（MRM）扫描，内标法定量分析。结果血清中8种类固醇激素低定量限[LLOQ，以信噪比（S／N）≥10为标准]为0．03～0．625 ng／mL；在0．05～50．00 ng／mL范围内线性良好，相关系数（r）均≥0．9980；批内精密度为1．93％～13．81％，批间精密度为4．90％～16．18％，加标回收率为80．0％～130．6％。结论建立了同时测定8种类固醇激素的 ID－HPLC－MS／MS。该法灵敏度高、特异性强、准确且高效，可在10 min 内完成分离和检测，适用于人体血清中类固醇激素的定量分析。
作者：周亚飞；王月婷；于嘉屏 刊期： 2015年第05期
作者：[1]上海市临床检验中心；[2]《检验医学》编辑部 刊期： 2015年第05期
目的：了解华东医院感染老年患者多重耐药和广泛耐药革兰阴性杆菌耐药性及其分布，为指导临床合理使用抗菌药物和有效预防、控制医院感染提供依据。方法收集华东医院60岁以上老年患者临床标本（痰液、血液、尿液、胆汁及伤口分泌物等）进行细菌培养、鉴定和体外药物敏感性试验；对228例多重耐药和42例广泛耐药革兰阴性杆菌感染的患者资料进行回顾性研究，并用聚合酶链反应（PCR）检测8株广泛耐药的鲍曼不动杆菌的相关耐药基因。结果多重耐药菌排名前3位的是鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌；广泛耐药菌排名前3位的是鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和洋葱伯克霍德菌。广泛耐药的鲍曼不动杆菌检测到了TEM、SHV、PER、ant（2″）－Ⅰ、ant（3″）－Ⅰ、ant（6′）－Ⅰb、OXA－23、gyrA 和 qacEΔ1基因，IMP、VIM 和 OXA－24基因检测为阴性。结论华东医院老年患者医院感染的鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌耐药情况较为严重，呼吸科和重症监护病房尤其要加强抗菌药物的合理使用并进行细菌耐药性的监测等措施，有效预防、延缓和控制耐药菌株的产生和播散。
作者：方毅；赵付菊；赵虎 刊期： 2015年第05期
参考变化值为两个检验结果合计的随机变异。可通过评价个体连续检验结果差值的统计学差异，实现患者检验结果的临床监测。检验工作者应在充分认识其理论的基础上正确建立参考变化值，并指导临床应用。
作者：陈红燕；裘海文 刊期： 2015年第05期
目的：建立尿液儿茶酚胺[包括肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）和多巴胺（DA）]的液相色谱－串联质谱（LC－MS／MS）检测方法。方法以 E－d3、NE－d6和 DA－d4盐酸盐为内标，采用 WATERS ACQUITY UPLC? HSS T3色谱柱（2．1 mm ×100 mm，1．8μm）进行分离。流动相 A1为2‰甲酸水溶液，流动相 B1为甲醇（纯度为99．9％），流速为0．5 mL／min，按 A1∶B1＝95∶5等度洗脱。采用电喷雾（ESI）正离子模式进行质谱分析。对方法的线性、准确度（回收率）、不精密度及低检出限等进行性能验证。选取表面健康人群65名，建立 E、NE 和 DA 的参考区间。结果采用建立的 LC－MS／MS 检测尿液 E、NE 和 DA，保留时间分别为0．58、0．89和0．63 min，检测范围为0．50～800．00 ng／mL。 E、NE 和 DA 的加标平均回收率分别为97．95％、97．78％和101．03％，低检出限分别为0．25、2．50和2．50 ng／mL。 E、NE 和 DA 的参考区间分别为5．4～25．8、28．5～73．1和269．1～420．5μg／24 h。结论建立的LC－MS／MS 方法能同时检测尿液中的 E、NE 和 DA，可为嗜铬细胞瘤的诊断提供可靠的信息。
作者：彭颖斐；吴炯；郭玮；陈方俊；秦嘉倩；徐雯；潘柏申 刊期： 2015年第05期
目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染妊娠妇女甲状腺功能改变的特点。方法收集492例 HBV 感染妊娠妇女（HBV 感染组）孕早期甲状腺功能检测结果，并与118名未感染 HBV 的正常孕妇（正常对照组）的甲状腺功能进行对照。结果 HBV 感染组和正常对照组三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺激素（T4）和游离 T3（FT3）水平差异无统计学意义（P ＞0．05），但促甲状腺激素（TSH）和游离 T4（FT4）水平2组之间有明显差异（P 值分别为0．0001和0．0019）； HBV 感染组的妊娠妇女 TSH 降低的发生率明显高于正常对照组（P ＝0．008）。结论 HBV 感染的妊娠妇女更容易发生妊娠期亚临床或临床甲状腺功能亢进。
作者：马小艳；孙继云；蔡晧东 刊期： 2015年第05期
目的：探讨6种感染性标志物[白细胞（WBC）、中性粒细胞（NEU）、中性粒细胞淋巴细胞比率（NLR）、血小板（PLT）、C 反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）]在预测血流感染早期诊断中的价值。方法回顾性分析6种感染性标志物在150例血培养阳性组与138例血培养阴性组之间的差异。结果血培养阳性组6种感染性标志物与血培养阴性组比较差异均有统计学意义（P 均＜0．05）。 PLT 的受试者工作特征（ROC）曲线下面积（AUC）低，为0．58（95％CI：0．47～0．69），诊断效能低。 NLR 在血常规的4个参数（WBC、NEU、NLR、PLT）中 AUC 高，为0．69（95％CI：0．59～0．78），敏感性、阳性预测值、阴性预测值也为4个参数中高，分别为58．67％、81．13％、52．94％；CRP 有较好的敏感性（72．00％），但特异性在6个指标中低（52．17％）；PCT 的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和 AUC 均为高，分别为85．33％、93．48％、95．52％、79．25％和0．89（95％CI：0．83～0．96）。结论感染性标志物可作为诊断血流感染的有效补充，有助于临床早期诊断。
作者：钟倩怡；李招云；卢国光；缪蕾蕾 刊期： 2015年第05期
妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）常可致妊娠不良结局的风险增高，是围产儿病死率升高的主因之一，可严重影响围生儿的预后，因此应早期诊断、积极治疗，降低 ICP 致围生儿并发症的发病率及围生儿病死率。血清总胆汁酸（sTBA）是早期诊断 ICP 的灵敏指标之一。文章从 sTBA 与 ICP 的关系、sTBA 和肝功能指标对 ICP 的应用价值、sTBA 对胎儿的影响及 ICP 的发病机制方面对 sTBA 在 ICP 中的作用和临床应用价值进行了综述。
作者：刘金涛 刊期： 2015年第05期
质谱分析技术已被公认为是代谢性疾病化学诊断的有用手段。气相色谱质谱联用法可以对130余种代谢疾病进行筛查和化学诊断，串联质谱法可同时筛查30余种脂肪酸代谢异常疾患和部分氨基酸代谢异常，因而被世界各国广泛用于新生儿先天性代谢疾病的筛查。应用质谱分析技术分析诊断遗传代谢疾病的实验室逐年递增，但其实验操作较为繁杂。临床实验室国际标准化管理是保证质谱分析技术为临床检验服务的前提。网络化实验室体系可以简化实验室的操作，保证良好的实验室管理。
作者：张春花 刊期： 2015年第05期
目的：初步评价单一位点夹心抗体（SES）法结合循环增强荧光免疫技术（CEIFA）检测 B 型钠尿肽（BNP）的性能。方法用 SES 法结合 CEIFA 仪检测 BNP，对其精密度、线性范围、功能敏感性、回收率、样本稳定性及与西门子 ADVIA Centaur CP 化学发光仪（简称 Centaur CP）的相关性进行评估。结果 SES 法结合 CEIFA的批内和批间变异系数（CV）分别为4．38％～7．84％和10．47％～11．21％。线性范围为25～5000 pg／mL。功能敏感性为12．5 pg／mL。回收率为95．04％～109．2％。与 Centaur CP 比较，其回归方程为 Y ＝0．9983X －22．38（r ＝0．969，P ＜0．01）。对样本稳定性的要求低于 Centaur CP。结论 SES 法结合 CEIFA 测定 BNP 具有较好的性能，与传统的双抗体夹心发光法比较有一定优势，适合临床急诊实验室使用。
作者：肖春海；梁爽；刘静凡；李飞飞；朱庆华；瞿培培；董志武 刊期： 2015年第05期
目的：探讨新鲜血液白细胞计数参考方法测量不确定度的评定方法和程序。方法用国际临床血液学标准化委员会（ICSH）推荐的参考方法对新鲜血液样本进行白细胞计数；明确整个测定过程中测量不确定度分量来源，根据国标标准化组织（ISO）《测量不确定度表述指南》（GUM）文件中有关测量不确定度的评估方法，按 A、B 两类不确定度的计算方式对各分量分别进行评定，计算合成标准不确定度，后取95％可信区间，计算出扩展不确定度。结果新鲜血液白细胞计数的均值为6．71×109／L；合成标准不确定度为0．097×109／L，取95％可信区间、包含因子 k ＝2，计算得扩展不确定度为0．19×109／L。结论新鲜血液白细胞计数参考方法的测量不确定度主要来源于重叠计数校正及加样体积。因此，对血液样本的加样稀释和测定应严加控制，确保测量结果具有较小的不确定度。同时建立了白细胞计数测量结果不确定度评估模型，可应用于白细胞计数项目的量值溯源和标准化，为常规检测系统向参考方法溯源提供有效途径。
作者：郭晓俊；王青；宋颖；缪颖波；许蕾 刊期： 2015年第05期
目的：了解弱精子症患者精子运动参数和 DNA 碎片化指数（DFI）的变化情况。方法通过对41例弱精子症患者（弱精子症组）和48例活力正常不育患者（活力正常组）精液的常规检测、精液分析仪检测和荧光显微镜检查，比较弱精子症组和活力正常组精液常规参数（包括精子浓度、精子总数、活动率）、精子运动参数[包括前向运动率（ PR）、平均路径速率（ VAP）、曲线速度（ VCL）、直线速度（VSL）、直线性（ LIN）、摆动性（WOB）、前向性（STR）、头侧摆幅度（ALH）、鞭打频率（BCF）和平均角位移（MAD）]及 DFI。结果弱精子症组精子浓度、精子总数、活动率、PR、VAP、VCL、VSL、LIN、WOB、STR、ALH、BCF 及 MAD 分别为（69．0±49．1）×106／mL、（203±159）×106、60．8％±15．7％、21．1％±8．0％、（10．7±2．8）μm／s、（20．6±4．9）μm／s、（6．3±2．2）μm／s、29．9％±8．1％、51．4％±5．8％、57．2％±10．4％、（0．53±0．12）μm、（3．20±0．85） Hz 和（14．2±3．2）°，均明显低于活力正常组[（98．8±38．2）×106／mL（P ＜0．05）、（281±171）×106（P ＜0．05）、82．0％±7．9％（P ＜0．01）、45．1％±8．5％（P ＜0．01）、（18．5±3．0）μm／s（P ＜0．01）、（30．7±5．3）μm／s（P ＜0．01）、（12．0±2．3）μm／s（P ＜0．01）、39．6％±7．0％（P ＜0．01）、60．5％±5．0％（P ＜0．01）、65．1％±7．2％（P ＜0．01）、（0．72±0．13）μm（P ＜0．01）、（5．07±0．81）Hz（P ＜0．01）和（17．8±2．5）°（P ＜0．01）]；而 DFI（17．9％±12．5％）明显高于活力正常组（8．5％±6．4％，P ＜0．01）。结论弱精子症患者除了表现为常规检查中的精子活力低下外，还伴有精子浓度和总数下降、精子运动参数下降以及精子 DFI 的增高，这些参数的改变可能是弱精子症引起男性不育的机制之一。
作者：焦瑞宝；姚余有；唐吉斌；冯恒孝；凤俊蓉 刊期： 2015年第05期
目的：了解过敏原 IgE 抗体在不同过敏性疾病中的分布情况，为临床防治提供依据。方法采用免疫印迹法检测过敏性鼻炎（236例）、哮喘（250例）和湿疹（275例）患者血清过敏原特异性 IgE 抗体，同时对过敏性鼻炎、哮喘和湿疹患者的过敏原进行比较分析。结果761例患者吸入性过敏原检出率为41．66％，食入性过敏原检出率为8．28％；常见的过敏原为户尘螨（43．10％）、狗毛皮屑（12．22％）、牛奶（11．43％）和屋尘（10．78％）。11～30岁组的户尘螨（62．35％）、狗毛皮屑（21．11％）、屋尘（18．89％）和牛奶（26．47％）阳性率明显高于其他年龄组（P ＜0．05）。湿疹患者蟑螂、牛奶和点青霉／分枝孢霉／烟曲霉／黑曲霉／交链孢霉的阳性率明显高于过敏性鼻炎和哮喘患者（P ＜0．05）。过敏性鼻炎与哮喘患者过敏原分布差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论血清过敏原测定有利于了解患者过敏状态，协助过敏性疾病的诊断，为过敏性疾病制订环境干预措施和免疫治疗方案提供可靠依据。
作者：尧荣凤；姜培红；许国祥；徐龙；李智；薛龙；赵迪 刊期： 2015年第05期
目的：分析免疫球蛋白（IgE）、FcεRIα及其抗体水平在良性甲状腺疾病患者血清中的表达情况，探讨其与良性甲状腺疾病的相关性。方法收集41例 Graves′病（GD）、36例桥本甲状腺炎（HT）和36例甲状腺结节（TN）患者以及60名健康体检者（正常对照组）的临床资料及血清，采用竞争酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清 FcεRIα、抗 IgE 抗体和抗 FcεRI 抗体水平，采用速率散射比浊法检测血清 IgE 水平，分析4组间的表达差异并评估其与良性甲状腺疾病的相关性。结果 GD 组、HT 组及 TN 组 IgE 水平与正常对照组比较差异均无统计学意义（P ＞0．05），而 FcεRIα水平和抗 IgE 抗体水平均明显高于正常对照组（P ＜0．05）；GD 组抗 FcεRI 抗体水平明显高于正常对照组。 HT 组及 TN 组血清 IgE、FcεRIα、抗 IgE 抗体及抗 FcεRI 抗体与甲状腺激素抗体（TRAb）均无相关性。 GD 组血清 FcεRIα与 TRAb 呈明显负相关（rs ＝－0．350，P ＜0．05），抗 IgE 抗体和抗 FcεRI 抗体与TRAb 均呈明显正相关（rs 值分别为0．546、0．520，P 均＜0．05）。结论良性甲状腺疾病患者血清中高表达 IgE、FcεRIα及其抗体，并且在 GD 中与甲状腺抗体有明显相关性，提示此抗体系统可能参与了良性甲状腺疾病的发生、发展。
作者：王玉萍；崔泽林；蔺丽慧；王娟；李佳；彭霞；谢国钢；李莉 刊期： 2015年第05期
目的：探讨5－氮－2′－脱氧胞苷（5－Aza－CdR）对人肺癌 A549细胞凋亡及抑癌基因范可尼贫血互补基团F（FANCF）基因表达的影响。方法以浓度为0．5、5、50μmol／L 的5－Aza－CdR 处理人肺癌细胞株 A549，常规培养采用四唑盐（MTT）比色法观察细胞的生长活性，甲基化特异性聚合酶链反应（PCR）检测 FANCF 基因甲基化状态；以荧光定量 PCR 检测 FANCF mRNA 的表达，并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果5－Aza－CdR 能明显抑制肿瘤细胞的生长，细胞增殖抑制率（CPIR）随5－Aza－CdR 浓度和作用时间的不同而变化，呈剂量依赖性（P ＜0．005）和时间依赖性（P ＜0．001）；药物处理后 FANCF mRNA 表达明显升高，细胞凋亡率与5－Aza－CdR 剂量呈正相关（r ＝0．998， P ＜0．05）。结论5－Aza－CdR 能使 FANCF 基因去甲基化，促进细胞凋亡，增强抑癌功能，但同时有增加顺铂耐药的风险。
作者：余宗涛；张吉才；高琼；高波；胡春卉 刊期： 2015年第05期
盆腔肿块主要是指来自盆腔的生殖器官，如卵巢、子宫、输卵管，亦可为位于盆腔的其他器官或者组织的肿物。卵巢癌是女性生殖系统中常见的恶性肿瘤之一，是恶性程度高的妇科癌症，发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌，但死亡率居首位。卵巢癌的高死亡率主要是因为其诊断时多处于晚期，且容易发生腹腔转移及复发。如能早期发现治疗，5年存活率可达92％，但如晚期发现则愈后较差，5年存活率不足50％。因此，临床上迫切需要一种高灵敏度、高特异度的肿瘤标志物来提高盆腔恶性肿块的早期诊断水平。目前临床上广泛使用的肿瘤标志物为糖类抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125），但其特异度不高。人附睾蛋白4（ human epididymis protein 4， HE4）是一种新的肿瘤标志物，先在附睾上皮细胞内被发现，在良性肿瘤及正常组织中含量极低，但在卵巢癌中含量很高［3］，提示其可用来筛查卵巢癌。我们测定了妇科盆腔肿块患者的血清CA125和 HE4水平，以探讨 CA125、HE4及联合检测在盆腔良、恶性肿瘤鉴别诊断中的应用价值。
作者：王振华；应晓 刊期： 2015年第05期
目的：研究经皮冠状动脉介入术（PCI）手术患者血清促甲状腺激素（TSH）水平与心血管疾病严重程度的相关性。方法初次入组1122名行 PCI 术患者，根据所设定的筛选标准后入组1000名患者。根据 TSH检测结果，将人群分为正常组、亚临床甲状腺功能减退组（简称亚临床甲减组）和亚临床甲状腺功能亢进组（简称亚临床甲亢组）。将 Gensini 积分和患者是否接受支架治疗作为主要的临床终点事件，以 Gensini 积分＞50表示心血管疾病严重程度较高。结果正常人群组和亚临床甲减组中，Gensini 积分＞50的患者在两人群中的分布情况存在明显差异（P ＝0．003）。二元 Logistic 回归分析显示患者是否为亚临床甲减是心血管疾病严重程度较高（Gensini 积分＞50）的独立危险因素[OR ＝1．855，95％可信区间（CI）：1．244～2．766，P ＝0．002]。而在TSH 水平正常的人群中，Gensini 积分是否＞50以及患者行支架术的情况在各组中的分布均不存在明显差异。结论亚临床甲减是心血管疾病的危险因素。正常范围内 TSH 的改变与心血管疾病的相关性有待进一步研究。
作者：吴卫云；邬升超；颜红梅；吴炯；郭玮；张春燕；宋斌斌；潘柏申 刊期： 2015年第05期
目的：建立定量检测血清25－羟基维生素 D[25（OH）D]的液相色谱－串联质谱（LC－MS／MS）方法，并对此方法进行基本分析性能验证。方法使用 Waters? XevoTM TQ MS ACQUITY UPLC?液质联用仪（LC－MS／MS）同时定量检测血清中的25（OH）D2和25（OH）D3含量。参照美国食品和药品管理局（FDA）的生物分析方法验证导则标准对所建方法进行线性、检出限、精密度和准确性等基本性能的验证。结果LC－MS／MS检测25（OH）D2和25（OH）D3的线性范围为6．25～500．00 nmol／L；25（OH）D2和25（OH）D3的定量检出限分别为2．50和1．25 nmol／L；批内、批间变异系数（CV）分别为＜4％、＜6％；回收率为93．26％～112．16％；维生素D 国际室间质量评价计划（DEQAS）室间质评结果偏倚＜10％。结论建立的 LC－MS／MS 基本性能符合评价标准，能够灵敏且准确的检测出血清中25（OH）D2和25（OH）D3的浓度。
作者：宋斌斌；秦嘉倩；彭颖斐；张春燕；吴炯；王蓓丽；郭玮；潘柏申 刊期： 2015年第05期
检验医学杂志
主管:上海市卫生局
主办：上海市临床检验中心
