张慧晔;刘锋;王德勤;詹若挺;马新业;陈蔚文
目的:HMGR 和DXR 分别是萜类生物合成途径---MVA和MEP途径的关键酶,本研究探讨阳春砂A vHMGR 和A vDXR 在转基因烟草中的过量表达对不同萜类化合物生物合成的影响。方法:采用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)技术分析A vHMGR 和 A vDXR 的表达水平,应用专一底物法测定 HMGR 和DXR 的酶活性,利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术检测不同萜类化合物的变化。结果:A vHMGR 或A vDXR 单独过量表达抑制了HMGR 和DXR 的活性,提高了五针松烯、新植二烯、薄荷烯和甾醇的含量;而A vHMGR 和A vDXR 共同过量表达对不同植株中酶活性的影响有差异,提高了甾醇和植醇的含量,但抑制了新植二烯的积累。结论:A vHMGR 和A vDXR 单独或共同过量表达对烟草中不同萜类化合物的合成调控存在差异,同时也证明了MVA和MEP途径并不完全独立,而是有着相互交流,本研究为利用阳春砂A vHMGR 和A vDXR 进行萜类化合物的代谢调控提供了依据。
作者:王焕;魏洁书;杨锦芬;詹若挺;陈蔚文;叶圆 刊期: 2014年第07期
目的:研究DNA条形码技术在溪黄草药材品种鉴定中的适用性。方法:选取rbcL、psbA-trnH、matK和ITS2等4个条形码标记,对41份溪黄草药材样品(含溪黄草Rabdosiaserra、线纹香茶菜R. lo-phanthoides和纤花香茶菜R. lophanthoidesvar. graciliflora)进行DNA提取、PCR扩增及双向测序,对测序结果进行质量检查、人工校对和序列拼接获取标准碱基序列信息,通过比较序列获得成功率以及物种鉴定力(TaxonGap法),筛选适合溪黄草基原鉴定的DNA条形码序列。结果:条形码序列获得成功率依次为rbcL(100%)、psbA-trnH(90.2%)、ITS2(87.8%)和matK(70.7%);物种鉴定力方面,rbcL、psbA-trnH和ITS2等3条序列均可有效鉴定不同物种,但不适于分辨种下单位。结论:综合考察序列易得性和物种鉴定力,rbcL可作为溪黄草品种鉴定的首选条形码。
作者:张慧晔;刘锋;王德勤;詹若挺;马新业;陈蔚文 刊期: 2014年第07期
目的:研究茉莉酸甲酯对阳春砂挥发性萜类合成的影响,深入了解挥发性萜类生物合成的分子调控机制。方法:用不同浓度茉莉酸甲酯溶液喷施阳春砂的叶片和果实,用微波法提取果实中的挥发性萜类成分,应用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术检测挥发性萜类成分的变化,通过转录组测序构建cD-NA文库并进行生物信息学分析。结果:果皮和种子团中分别检测到20种和33种挥发性萜类成分,600μmol·L-1 MeJA喷果24 h后果皮和种子团中大部分挥发性萜类成分的积累量明显增加,如乙酸龙脑酯、樟脑和龙脑等;而200μmol·L-1 MeJA喷施叶片或果实对果皮及种子团中不同挥发性萜类含量的影响存在差异,且200μmol·L-1 MeJA喷施果实比喷施叶片更能提高种子团中挥发性萜类成分的积累量。此外,转录组测序共获得68168个Unigene,通过与公共数据库比对,共有48627个Unigene获得注释。对KEGG代谢通路的注释结果进行初步分析,发现挥发性萜类代谢密切相关的Unigene有208个,MYC2类转录因子(JA信号转导的重要调控因子)相关的Unigene有22个。结论:MeJA能有效调控阳春砂中挥发性萜类成分的代谢,转录组测序获得了多个与挥发性萜类合成相关的候选基因,为深入开展阳春砂挥发性萜类生物合成相关功能基因的发掘及调控研究提供了丰富的数据资源。
作者:王焕;杨锦芬;邓可;何雪莹;詹若挺;唐梁 刊期: 2014年第07期
辨证论治是中医诊疗疾病的精髓,“观其脉证、知犯何逆、随证治之”是辨证论治的具体过程。本文通过使用逻辑学的方法对辨证论治的过程进行研究与分析,指出中医诊治疾病的过程是一个信念修正的过程,中医理论体系的根源是隐喻的,隐喻认知的逻辑和信念修正是一种适合中医理论体系研究的逻辑方法。
作者:郭瑨;庄梅云;贾春华 刊期: 2014年第07期
载脂蛋白A-I(ApoA-I)是载脂蛋白A家族中早发现的蛋白,在脂质代谢过程中具有重要作用,主要参与胆固醇的合成及转运。ApoA-I与高脂血症及动脉粥样硬化的发生息息相关,临床上已经将血浆 ApoA-I/ApoB 作为高脂血症的指标之一。本文就 ApoA-I 基因多态性及其对胆固醇合成逆转(RCT)关系的研究进展进行综述。
作者:张翼;赵静;潘思源 刊期: 2014年第07期
目的:观察不同状态下电针心包经原穴大陵对心内压的影响,探索针灸的效应特征。方法:通过右颈总动脉插管至左心室的方法记录左心室内压。以心内压为指标,分别在正常生理、异丙肾上腺素和心得安等状态下观察电针“大陵”对大鼠左心室内压的影响。结果:以针刺的即刻效应来说,对正常大鼠电针大陵可以明显的兴奋心内压;在静脉给予心得安和异丙肾上腺素状态下,电针大陵无明显反应。而从针刺的效应方向上看,正常情况下电针大陵具有兴奋效应;心得安状态下具有抑制效应;异丙肾上腺素状态下效应不定。结论:据腧穴的特异性定向作用,大陵可以兴奋心内压。
作者:汪娅莉;余芝;徐斌 刊期: 2014年第07期
目的:建立黔产一枝黄花药材HPLC指纹图谱。方法:采用高效液相色谱法,以Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为282 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温25℃,分析了10批不同产地一枝黄花药材指纹图谱。结果:10批一枝黄花药材中有13个共有峰,经相似度计算,整体相似度良好。结论:该方法稳定、重复性好,可用于黔产一枝黄花药材的质量控制。
作者:冯华;聂明华;罗秀琼;王祥培 刊期: 2014年第07期
目的:研究山药在各历史时期临床运用,为临床使用山药提供依据。方法:收集《中医方剂大辞典精选本》中的山药方668首,对山药及其各功效出现的频次及频率进行统计分析。结果:山药各功效区别运用从宋代开始广泛,至明、清达到高点,近现代各功效区别运用走低。山药在整个历史时期,各功效的使用以补脾益胃和益肾强阴为主,其次为固肾敛阴和补肺生津。结论:本研究分析了山药在各历史时期临床运用,为临床科学组方及人们日常保健使用山药提供依据。
作者:周滢;周萍 刊期: 2014年第07期
目的:采用近红外光谱技术对不同产地鸡血藤进行定性和真伪鉴别分析。方法:利用近红外漫反射光谱法获取不同产地鸡血藤及其混伪品的近红外光谱图,运用近红外OPUS INDENT软件对相应的光谱图进行处理并建立定性鉴别模型。结果:建立的模型能有效地鉴别不同产地鸡血藤及其混伪品。结论:近红外光漫反射光谱法能够实现对不同产地鸡血藤及其混伪品的快速无损分析,为区分不同产地鸡血藤及其混伪品提供了一个客观的评价方法。
作者:张敏;韩正洲;严萍;刘海婵;张洁;詹若挺;陈蔚文 刊期: 2014年第07期
高脂血症是血管及脏器疾病的主要基础病变之一,中医药在防治高脂血症方面具有毒副作用小,疗效明显的优势,建立高脂血症诊断辅助平台有助于提高诊疗效率,并为高脂血症辨证分型标准化研究提供数据采集、存储与分析的平台。首先建立高脂血症四诊信息临床采集平台及数据库,记录患者就诊不同时期的望诊图像及其余三诊的文字信息,方便医师更准确地掌握治疗过程中患者的临床表现,从而总结治疗经验,提高治疗效果;在此基础上利用可调整相似度阈值的自适应聚类算法对已采集的897个病例四诊信息进行分类,终得到5类,将得到的每个类别中所对应样本的病症特征与所属中医的证候类别联系起来,后用相似性算法判断新采集病例属于的哪一类,为中医辨证分型诊断提供建议。
作者:涂泳秋;陈国华;朴胜华;郭姣 刊期: 2014年第07期
目的:对百可利原料药中主要有关未知物质成分进行研究,为药品安全、有效及质量控制提供基础研究数据。方法:采用活性炭吸附富集、硅胶柱层析色谱分离有关物质成分,并运用UV、IR、NMR、MS光谱法解析结构。结果:确认有关物质成分为千层纸素A。结论:对于百可利药品主要有关物质有效控制具有重要的科学意义,对药品制备工艺的优化和改进具有重要指导意义。
作者:张桥;陈保来;谢雪;赵祎武;沈娟;王振中;吕扬;杜冠华;萧伟 刊期: 2014年第07期
海洋中药用药经验模式,是我国几千年来不同时期的名医名家,应用海洋中药的心得体会和经验的提炼和总结。挖掘这些经验模式对指导海洋中药的临床应用和新药开发都具有重要的意义。但是这些经验多散见于海量古籍文献中,难以直接利用。本文以文献为研究对象,采用古籍文献的整理技术、文本数据挖掘的方法和基于非相关文献知识发现的关联网络构建技术,结合专家评价法,通过挖掘海洋中药几千年发展过程中积累的临床用药经验,构建海洋中药用药经验模式,为海洋中药的临床应用和进一步研发提供数据基础和科学依据。
作者:付先军;王振国;李学博;王长云 刊期: 2014年第07期
目的:观察异长春花苷内酰胺大剂量注射给药对麻醉Beagle犬心血管系统的影响,并考察其体外对离子通道的抑制作用。方法:采用生理记录仪观察异长春花苷内酰胺静脉注射前后不同时间点Beagle犬收缩压(Sys),舒张压(Dia),平均动脉压(MBP),心率(HR),心电图PR间期、QRS间期、QT间期、QTcb间期、QTcv间期等指标的变化;应用全细胞膜片钳技术考察不同浓度异长春花苷内酰胺对CHO-hERG细胞上hERG钾离子通道和HEK-293-Nav1.5细胞上Nav1.5钠离子通道的抑制作用。结果:与空白对照组相比,异长春花苷内酰胺60、18 mg·kg-1剂量组、溶媒对照组(含吐温-80)于给药后15 min Sys、Dia、MBP、HR明显降低(P<0.05),给药结束后各项指标可见恢复。与溶媒对照组相比,各给药剂量组在各观测时间点无显著性差异。与空白对照组及自身给药前相比,60、18、6 mg·kg-1剂量组、溶媒对照组于给药后15 min QT、QTcb、QTcv间期明显延长(P<0.05),给药结束后可见一定程度的恢复。与溶媒对照组相比,各给药剂量组QT、QTcb和QTcv间期在各观测时间点无显著性差异。异长春花苷内酰胺对hERG钾离子通道和Nav1.5离子通道抑制作用较弱,IC50为560.8μmol·L-1及>900μmol·L-1,远远大于阳性对照药。结论:异长春花苷内酰胺大剂量单次静脉注射对Beagle犬可能有一定的降低血压、减慢心率及延长QT间期的作用,停药后可恢复。其中血压降低、心率减慢与溶媒中所含吐温-80有关。体外对hERG钾离子通道和Nav1.5离子通道无明显影响,提示异长春花苷内酰胺对动物QT间期的影响可能为其它作用机制所致。
作者:苏真真;李娜;曹亮;孟兆青;刘文君;丁岗;王振中;萧伟 刊期: 2014年第07期
再生障碍性贫血(AA)是T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病。AA的发病机制研究主要集中在免疫功能异常、造血干细胞损伤、造血微环境异常3个方面。近年来,AA免疫机制异常越来越受到中医药血液病研究者的关注。AA发病机制中细胞因子及相关的细胞内信号转导通路尤其复杂,其中T-bet/IFN-γ信号通路在AA发生发展过程中起着重要的作用。本文就T-bet/IFN-γ及其相关信号传导通路在AA中的作用做一综述。
作者:张丰丰;赵宗江;张新雪;田晨;吴志奎 刊期: 2014年第07期
目的:建立高效毛细管电泳法测定保和丸中橙皮苷与连翘苷含量的方法。方法:采用区带毛细管电泳法,电泳条件为:未涂层石英毛细管柱(75 cm×50μm),运行缓冲液30 mmol·L-1硼砂溶液(含8%乙腈,pH9.64),压力进样50 kPa×20 s ,电压20 kV ,柱温20℃,检测波长254 nm。两次进样间用0.1 mol·L-1氢氧化钠和缓冲液分别冲洗10 min。结果:样品中橙皮苷与连翘苷均得到了很好的分离,其中橙皮苷与连翘苷分别在0.10~2.40 mg·mL-1(r=0.9994),0.07~0.84 mg·mL-1(r=0.9992)范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为99.85%,99.16%,RSD 分别为2.34%,2.78%。结论:该方法简便、灵敏,在一定程度上弥补了传统方法的不足,适用于保和丸中橙皮苷与连翘苷的含量测定。
作者:张超云;郝鹏飞;席先蓉 刊期: 2014年第07期
目的:研究psbA-trnH序列在近缘贯众基原物种鉴定中的有效性。方法:对常见鳞毛蕨属贯众基原物种psbA-trnH序列进行PCR扩增及测序,原始峰图通过CodonCodeAligner软件查看、拼接和校对,并根据GenBank注释截取标准条形码数据。利用TaxonGap方法在实验物种范围(9物种19样品)和扩大范围(17物种44样品)内评估该序列的鉴定效率。结果:物种鉴定范围扩大后psbA-trnH序列鉴定成功率由100%(9/9)降至82.4%(14/17),种内异质性数值高于种间可分离性的比例,由11.1%(1/9)上升为52.9%(9/17)。结论:psbA-trnH序列可作为整体贯众同名异物品种鉴定的推荐条形码,实际应用中需注意种内采样代表性的问题。
作者:刘锋;蒋研风羊;詹若挺;马新业;陈蔚文 刊期: 2014年第07期
目的:塞络通(SLT)是由人参、银杏叶、西红花组方,主治血管性痴呆的现代复方中药。为探讨SLT药效物质基础,并为给药方案提供依据,该文对治疗剂量SLT给与大鼠后,银杏内酯成分的血药浓度、药代特征、以及脑分布进行了研究。方法:实验建立了同时检测生物样品中4种银杏内酯的高灵敏度LC-MS/MS分析方法,经过对线性、专属性、回收率、准确度、精密度的考察,所建立的分析方法符合临床前药代动力学研究要求。结果:灌胃SLT 60 mg·kg-1后,4种目标成分均在大鼠血浆中检出,各成分曲线下面积(AUC0~t)从大到小顺序依次为白果内酯(BB)、银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)和银杏内酯(GC)。银杏内酯的血浆消除半衰期(t1/2)较短,在1.61~2.82 h之间,其中BB半衰期短。所有银杏内酯成分均能够快速进入在脑组织,GA和BB仍是脑组织中的主要成分。各银杏内酯在0.25、2、7 h的脑组织浓度均较同时间点血浆中药物成分低得多,且各成分在脑组织中浓度随时间下降较快。结论:研究结果表明,银杏内酯能够快速吸收进入体循环并进入脑组织,GA、BB和GB是其中主要的体内成分,它们能够共同作用于外周和脑组织,通过各自的药理活性机制达到塞络通对缺血性痴呆的疗效。
作者:张颖;林力;任常英;林成仁;刘建勋;Dennis Chang;Alan Bensoussan 刊期: 2014年第07期
目的:为研究阳春砂果实发育过程中可溶性糖含量、蔗糖代谢酶活性和基因表达量的动态变化规律,并为提高阳春砂的产量提供依据。方法:本研究以阳春砂幼果期、成熟中期和成熟末期的新鲜果实为试验材料,采用高效液相色谱法、紫外分光光度法对可溶性糖含量和酶活性进行测定,并结合3个发育时期果实的高通量测序表达谱数据,分析糖代谢中3个关键酶基因的表达趋势。结果:果糖、葡萄糖和蔗糖是阳春砂果实中的主要糖分,在果实发育过程中,果皮中的己糖(果糖和葡萄糖)含量逐渐降低,种子团中己糖含量先降低后升高;果皮和种子团中蔗糖含量和蔗糖合成酶净活性(合成方向减去分解方向活性)均逐渐升高。结论:基于RNA-seq的糖代谢中的关键酶基因表达趋势分析表明,蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶基因的表达趋势以先上升后不变为主,转化酶基因的表达趋势以逐渐上升为主。蔗糖合成酶是催化阳春砂果实中蔗糖合成与分解的关键酶,果实成熟末期是蔗糖合成酶活性和蔗糖含量高的时期。
作者:于安民;张敏;杨锦芬;林文华;严萍;梁锦培;詹若挺 刊期: 2014年第07期
从中医学角度对正气与元气的生理功能、正气与元气的关系进行论述,阐明正气和元气在人体的生命活动中具有重要作用,二者相辅相成。在艾滋病的发病中,艾滋病疫毒具有伤人正气的特点,在艾滋病疫毒侵犯人体正气时,人体的元气先受损,这与艾滋病疫毒的特点和元气自身的生理功能是密不可分的。因此,艾滋病疫毒伤正气与伤元气同时存在,贯穿艾滋病的全过程,伤正气关键在于伤元气。
作者:黄冠;徐立然;惠高萌;贺小举;李正 刊期: 2014年第07期
目的:针刺与氟桂利嗪对偏头痛疗效的评价。方法:计算机检索Pubmed、Cochrane Library、中国学术期刊全文数据库(CNKI)、中文科技期刊数据库(VIP)、万方数据库,全面搜集针刺与氟桂利嗪治疗偏头痛的随机对照试验(RCT),采用Cochrane风险偏倚评估工具评价纳入研究的方法学质量并提取有效数据,应用RevMan 5.2软件对符合要求文献进行汇总分析。结果:符合纳入标准的文献共10篇,总样本量893例。Meta分析显示:治疗组近期疗效优于对照组[RR=1.27,95%CI(1.11,1.45),P<0.0004];治疗组远期疗效优于对照组[RR=1.76,95%CI(1.05,2.94),P=0.03];治疗组对头痛程度的改善优于对照组[MD=-2.00,95%CI(-3.01,-0.99),P=0.0001]。结论:针刺治疗偏头痛疗效优于氟桂利嗪,但是本研究纳入文献总体样本量偏少,文献质量评价不高,漏斗图分析显示左右不对称,提示存在发表偏倚,本文结论有待更多高质量临床研究来进一步证实。
作者:杨佳;沈燕;王舒 刊期: 2014年第07期