学术投稿

Sox9基因真核表达载体的构建及其诱导大鼠骨髓基质细胞定向分化为骨骺干细胞

胡伟华;陈安民;郭风劲;李锋;黄晖;张伟凯

关键词:骨骺干细胞, Sox9, 骨髓基质细胞, 转染
摘要:[目的] 从永生化骨骺干细胞中克隆Sox9基因并构建真核表达载体,并探讨Sox9诱导骨髓基质细胞向骨骺干细胞分化的可能性.[方法]以RT-PCR方法获得Sox9全长,插入pGEM-T Easy克隆载体中,测序正确后与pEGFP-IRES2表达载体酶切后连接,复合质粒以脂质体法转染骨髓基质细胞,观察转染效率,Sox9和 FGFR-3的表达.流式细胞术鉴定细胞表型,MTT法检测细胞增殖活性.[结果]成功的完成了Sox9的扩增和表达载体的构建 ,重组载体转染骨髓基质细胞后能检测到Sox9、FGFR-3的表达,增殖活性与骨骺干细胞无异.[结论]成功构建了Sox9真核表达载体,其能诱导骨髓基质细胞分化为骨骺干细胞并具有其特性.
中国矫形外科杂志相关文献
  • 三种钉板系统治疗股骨转子间骨折分析

    [目的]比较分析3种髓外钉板治疗的效果,探讨股骨转子间骨折的合理治疗方法.[方法]应用DHS治疗56例,DCS治疗54例,解剖钉板治疗38例.[结果]本组134例获得随访,其中DHS组53例,DCS组46例,解剖钉板组35例.随访时间6~18个月,平均为9个月.DHS组:平均手术出血量为250 ml,平均手术时间为100 min,并发症发生率13.2%,优良率84.9%;DCS组:平均手术出血量为220 ml,平均手术时间为90 min,并发症发生率4.3%,优良率93.5%;解剖钉板组:平均手术出血量为200 ml,平均手术时间为80 min,并发症发生率37.1%,优良率68.6%;[结论]DCS治疗转子间骨折疗效满意,可适应于不稳定型转子间骨折,其操作简便,固定可靠,并发症发生率较低;DHS 对Evans Ⅰa型、Ⅱb型转子间骨折固定效果较好;无锁定解剖钉板好用于Evans Ⅰa型转子间骨折.

    作者:宋世锋;陈世强;曾凡;徐梦凡;张光强;张熙民;肖海涛 刊期: 2009年第12期

  • 龙血竭治疗小腿陈旧性枪弹伤并发晚期感染1例报告

    1 一般资料患者,男,85岁,军队离休干部.1944年7月6日右小腿枪弹伤,弹片散布于小腿内,先后2次手术,都未能全部取出.多年来,右小腿经常肿痛,于2006年2月26日肿痛加剧、右小腿内侧皮肤发黑溃破,到军队医院就诊.X线片示:右胫骨中段及周围软组织内散在米粒样金属物,胫骨中段骨皮质增厚.诊断:右小腿陈旧性枪弹伤,右小腿感染并胫骨骨髓炎,收住院治疗.入院后给予抗炎、局部切开病灶清除,肿痛减轻,1个月后出院回家门诊治疗.

    作者:陈卫东;高付兰;柏燕 刊期: 2009年第12期

  • 经皮球囊扩张后凸成形术治疗严重骨质疏松性椎体压缩骨折

    [目的]探讨经皮球囊扩张椎体后凸成形术(PKP)治疗骨质疏松性严重椎体压缩骨折的可行性及疗效.[方法]回顾性分析15例(共17椎体)严重压缩骨折患者经皮球囊扩张椎体成形术治疗效果.所有手术均在C型臂X线机引导下进行.术前及术后分别进行视觉模拟疼痛评分、活动能力评分、椎体高度测量及Cobb′s角测量.[结果]所有手术均顺利完成,无严重手术并发症.VAS评分由术前的7.9±1.3下降至术后的2.5±0.8(P<0.05),活动能力评分由术前的3.2±0.3改善到术后的1.3±0.2(P<0.05);椎体高度由术前的(0.9±0.1)cm,增加到术后的(2.5±0.2 )cm(P<0.05);Cobb′s角由术前的32°±7.1°, 矫正到术后的22°±5.3°(P<0.05).均较术前明显改善,疼痛缓解和功能改善显著.[结论]PKP是治疗骨质疏松性严重椎体压缩骨折的安全有效方法,值得推广应用.

    作者:郝杰;胡侦明;孟纯阳 刊期: 2009年第12期

  • 应用锁定接骨板微创固定治疗肱骨近端骨折31例初步随访分析

    [目的]探讨肩峰下前外侧经三角肌分离入路运用Philos接骨板微创治疗肱骨近端骨折的初步效果.[方法]对2005年4月-2009年3月,采用Philos接骨板微创固定治疗31例肱骨近端骨折,回顾性分析临床效果.男17例,女14例,19例为摔伤,12例为车祸伤,年龄42~89岁.根据Neer 分型,二部分骨折5例,三部分骨折11例,四部分骨折15例.[结果]术后X线显示所有螺钉位置良好,骨折复位满意.术后随访8~36个月,平均随访18.8个月,未发现肱骨头坏死及腋神经损伤病例,骨折均得到了愈合,其中2例出现浅表性感染经治疗痊愈,根据Neer评分,优良率为87.1%.[结论]肩峰下前外侧经三角肌分离入路运用Philos接骨板具有个体化强、血运破坏少、固定可靠等优点,是治疗肱骨近端骨折的一种新方法.

    作者:张岩;杨铁毅;刘树义;郑士伟;宋炜中;吴亮 刊期: 2009年第12期

  • Sox9基因真核表达载体的构建及其诱导大鼠骨髓基质细胞定向分化为骨骺干细胞

    [目的] 从永生化骨骺干细胞中克隆Sox9基因并构建真核表达载体,并探讨Sox9诱导骨髓基质细胞向骨骺干细胞分化的可能性.[方法]以RT-PCR方法获得Sox9全长,插入pGEM-T Easy克隆载体中,测序正确后与pEGFP-IRES2表达载体酶切后连接,复合质粒以脂质体法转染骨髓基质细胞,观察转染效率,Sox9和 FGFR-3的表达.流式细胞术鉴定细胞表型,MTT法检测细胞增殖活性.[结果]成功的完成了Sox9的扩增和表达载体的构建 ,重组载体转染骨髓基质细胞后能检测到Sox9、FGFR-3的表达,增殖活性与骨骺干细胞无异.[结论]成功构建了Sox9真核表达载体,其能诱导骨髓基质细胞分化为骨骺干细胞并具有其特性.

    作者:胡伟华;陈安民;郭风劲;李锋;黄晖;张伟凯 刊期: 2009年第12期

  • 肌腱组织工程和基因转染

    骨髓源间充质干细胞是肌腱组织工程为常用的种子细胞.脂肪源干细胞具备相似的多分化潜能,有望成为肌腱组织工程的种子细胞. 纳米纤维材料可以模拟细胞外基质的结构和功能,作为肌腱组织工程的支架有明显的优越性.基因转染技术可克服外源性细胞因子在肌腱修复处作用短暂的不足.肌腱组织工程及基因转染的前景令人鼓舞,但仍面临诸多挑战,需进一步研究.

    作者:黄德清;冯燕茹 刊期: 2009年第12期

  • 同种异体骨软骨移植修复软骨损伤的研究进展

    关节软骨损伤的治疗是骨科领域一个难题,同种异体骨软骨移植是修复全层软骨损伤的有效方法.文中综述了同种异体骨软骨移植修复软骨损伤的研究进展,包括该方法的适应证和禁忌证,目前在临床的应用情况及治疗效果,并进一步探讨了同种异体骨软骨移植中的3个热点话题,如疾病传播、免疫排斥和移植物的保存.这些文献综述显示同种异体骨软骨移植修复关节软骨损伤具有特定优势,但进一步推广该方法仍有一些需要解决的问题.

    作者:李海鹏;刘玉杰;刘智 刊期: 2009年第12期

  • 椎体成形术治疗骨质疏松椎体骨折并椎体内囊性变

    [目的]探讨椎体成形术治疗骨质疏松椎体骨折并椎体内囊性变的特性和治疗效果.[方法]应用椎体成形术治疗骨质疏松椎体骨折并椎体内囊性变13例.根据骨质疏松和囊性变的程度决定充填骨水泥的剂量,并加入适当比例的异体骨粉.[结果]按照WHO疼痛缓解标准,CR(完全缓解)10例,PR(部分缓解)2例,MR(轻微缓解)1例.1例出现椎体周围少量骨水泥泄漏,无临床症状.1例手术后16 d发生下位椎体骨折,经过再次椎体成形术症状缓解,随访1年无复发,无再次骨折发生.[结论]椎体成形术治疗骨质疏松椎体骨折并椎体内囊性变是发生在高龄患者的特殊疾病,椎体成形术是治疗的首选,效果理想.但是在局部治疗的基础上要注意全身抗骨质疏松治疗和规范的康复训练,可以减少手术后并发症的发生.

    作者:宓士军;高景春;周广军;高万旭;孙敬宇;隆全利 刊期: 2009年第12期

  • X线诊断技术初的临床应用

    作者:李晓光 刊期: 2009年第12期

  • 肩锁关节脱位关节固定术后并发症防治的探讨

    [目的]探讨肩锁关节手术后常见并发症的原因并总结预防对策.[方法]回顾性分析2003年5月-2005年9月该类手术后病人45例的临床资料.[结果]45例均获得随访,术后发生再脱位8例,肩关节疼痛19例,功能障碍8例.[结论](1)肩锁关节再脱位与内固定物松动、撕裂、固定时间不充足,喙锁、喙肩韧带修补、重建不理想有关;(2)肩关节疼痛及功能障碍与术后锻炼不得法及肩关节创伤性炎症有关;(3)预防好办法是选用坚强的内固定方式,重视韧带的修补或重建,采用渐进、主动、持久的肩关节功能锻炼.

    作者:陈端 刊期: 2009年第12期

  • 伸指肌腱断裂修复治疗的研究进展

    手伸指肌腱损伤在手外科中极为常见,目前主要采用传统的8字缝合、十字缝合等,但是术后局部常出现隆起结节而影响外观,加上粘连,使手指活动时受限,影响功能,常需要2次手术治疗,所以伸指肌腱损伤需要一个系统的治疗方案.由此作者发明了一种克服以上缺点的新技术:交指样显微编织缝合加玻璃酸钠术,即采用显微外科无创技术;编织缝合法增强抗拉力,以重建肌腱高强度的连续性;玻璃酸钠防止粘连,避免2次手术松解;保护下系统的功能康复训练.

    作者:姜大伟;贾全章 刊期: 2009年第12期

  • 肘关节成形术的临床现状

    目前采用肘关节成形术可分为生物材料间置关节成形术和假体植入关节成形术.生物材料间置关节成形术既不能完全消除疼痛,也不能完全恢复功能,只适合于严重炎性或创伤后关节炎伴有关节活动受限的年轻病人.现代假体植入关节成形术已经历了30年的临床检验,其假体生存率已接近全膝关节置换的水平,全肘关节置换术后绝大多数功能有明显改进,疼痛明显缓解.但由于肘关节解剖的特点,全肘关节置换的并发症发生率高于全髋或全膝关节置换,应高度警惕全肘关节置换的并发症.本文介绍了肘关节成形术的类型、适应证、禁忌证与临床效果.

    作者:孙磊;宁志杰 刊期: 2009年第12期

  • 胫腓骨复杂骨折固定研究进展

    回顾性研究近年来大量胫腓骨复杂骨折固定治疗研究文献,探讨胫腓骨复杂骨折的特点和治疗目的,分析胫腓骨复杂骨折固定研究进展,总结各种治疗胫腓骨复杂骨折固定的特征.目前认为该类骨折在复杂骨折范畴内属于一种坍塌骨折,这对治疗管状骨复杂骨折恢复管状结构很有价值.一系列新型钢板和外固定器的出现也是值得研究的方向,骨外固定器与有限内固定合用以及序贯疗法的提出有待进一步研究.

    作者:万春友;金鸿宾;张金利;刘爱峰 刊期: 2009年第12期

  • 异种化学去细胞神经移植修复大鼠坐骨神经缺损的功能评价

    [目的]评价异种化学去细胞神经移植修复大鼠坐骨神经缺损后神经功能恢复,从而为临床应用去细胞异种神经移植修复神经缺损提供更为充分的理论依据.[方法]雄性Wistar大鼠15只,致左侧坐骨神经1 cm缺损,以等粗兔化学去细胞神经移植修复.每2周测定坐骨神经指数,移植后4个月动物麻醉后暴露移植段神经,刺激近侧神经干、于同侧胫后肌群记录运动诱发电位,之后取移植段神经切片后行HE组织化学及NF-160免疫组织化学染色. [结果]去细胞异种神经移植物未被宿主排斥,大量神经纤维长入移植物,神经电生理及坐骨神经指数显示宿主坐骨神经功能有部分恢复.[结论]去细胞异种神经移植可以作为修复周围神经缺损的一种有效方法.

    作者:赵志钢;陈秉耀;魏海温;王成琪;吴宝岭 刊期: 2009年第12期

  • 颈前路手术治疗下颈椎骨折脱位30例疗效观察

    [目的]观察早期前路减压植骨内固定术治疗下颈椎骨折脱位的临床疗效.[方法]对30例下颈椎骨折脱位采用前路手术减压、自体骨植骨及颈椎带锁钢板和或钛网内固定治疗.[结果]术后随访6~24个月,定期X线片观察损伤节段的稳定性和融合情况,以Frankel分级判定脊髓功能恢复情况.术后颈椎即获稳定,恢复脊柱正常序列、曲度及椎体高度,植骨在3~5个月融合,无钢板螺钉松动、断裂等并发症.术后神经功能获得不同程度的改善.[结论]早期前路减压植骨内固定术治疗严重下颈椎骨折脱位,不但可充分减压、使损伤节段获得满意的复位、得到即刻的稳定和重建,而且可防止继发性脊髓损伤,改善脊髓的功能状况,还可避免因发生并发症而错过手术时机.

    作者:朱庄臣;倪斌;卢旭华;周风金;刘军;于洋 刊期: 2009年第12期

  • 38例尺骨冠状突骨折治疗体会

    2002年3月-2008年9月,本院收治38例急性尺骨冠状突Ⅲ型骨折,分别采用前路及前后路联合手术切开复位内固定,取得满意效果.

    作者:李庶斌 刊期: 2009年第12期

  • 强力霉素对兔制动骨关节炎模型的治疗作用

    [目的]探讨强力霉素对兔制动骨关节炎模型的治疗作用及其作用机制.[方法]新西兰大白兔24只,随机分为正常、模型、对照和治疗组,每组6 只.除正常组外,所有动物以石膏固定左下肢于伸直位4周.然后治疗组给予强力霉素口服治疗,4周后观察股骨内髁的退变情况,并检测软骨Ⅱ型胶原含量、尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)和基质金属蛋白酶(matrix metallo proteinase,MMP)-13水平.[结果]治疗组软骨退变较模型和对照组明显减轻,模型与对照组之间Ⅱ型胶原含量、uPA和MMP-13的表达无统计学意义(P>0.05),其它各组均有显著统计学差异(P<0.01).uPA与MMP-13的表达呈正相关(r=0.973,P<0.05).[结论]强力霉素可抑制软骨退变,改善软骨结构.其作用与uPA、MMP-13的表达抑制有关.

    作者:张尚普;史晨辉;赵瑾 刊期: 2009年第12期

  • 脊髓损伤后异位骨化的危险因素

    [目的]探讨脊髓损伤后发生异位骨化的危险因素.[方法]将510例外伤性脊髓损伤患者根据X线片、CT检查分为异位骨化组(A组,59例)和无异位骨化组(B组,451例).比较两组患者的年龄、性别、脊髓损伤情况、血清钙浓度、痉挛及压疮情况,分析与异位骨化相关的危险因素.[结果]异位骨化发生率为11.6%.A、B组患者的年龄、性别、血清钙浓度、压疮发生率经统计学比较无显著性差异(P>0.05).A组患者中完全性瘫痪者及痉挛性瘫痪者、脊髓损伤位于颈髓及胸髓者,损伤程度为ASIA A、B级者与B组比较差异非常显著(P<0.01).[结论]完全性瘫痪和痉挛性瘫痪、颈髓和胸髓以上损伤及ASIA A、B级者易发生异位骨化.

    作者:李文勤;朱本科;张坤;林椿森;吴建省 刊期: 2009年第12期

  • 关节镜与C型臂X线机辅助下微创治疗胫骨平台骨折

    [目的]探讨在关节镜与C型臂X线机辅助下微创治疗胫骨平台骨折的方法及疗效.[方法]自2004年2月-2008年2月收治胫骨平台骨折患者31例,合并半月板损伤5例,侧副韧带损伤2例,前交叉韧带损伤3例.Schatzker分型为Ⅰ型5例,Ⅱ型11例,Ⅲ型11例,Ⅳ型3例,Ⅴ型1例,患肢基本消肿后进行手术,常规进行膝关节镜检查,对合并伤进行相应的处理后,在关节镜与C型臂X线机辅助下微创进行骨折复位、植骨及固定,术后早期行患肢功能锻炼.[结果]31例患者获6~18个月随访,平均随访时间12个月,在3~4个月骨性愈合,未出现塌陷、移位、膝关节畸形等.根据HSS膝关节临床功能评分标准:优21例,良7例,中3例.[结论]关节镜与C型臂X线机辅助下微创治疗胫骨平台骨折,具有创伤小、同时处理关节内合并伤、获得良好复位及术后功能恢复快、效果好的优点.

    作者:饶海群;黄大江;曾剑文;罗志平;谢建军;吴渊 刊期: 2009年第12期

  • 膝关节退行性骨关节炎钙化层病理改变研究

    [目的]对骨性关节炎软骨钙化层病理结构进行形态学分析,为临床诊治及预防相关疾病提供理论依据.[方法]标本均来源于临床诊断为膝关节退行性骨关节炎患者,共21例,其中,男1例,女20例.股骨髁负重区取材、修剪、固定后,常规制备石蜡切片,番红O/固绿染色,显微镜观察.[结果]本研究收集的标本平均年龄(65.57±7.43)岁;平均身高(155.38±5.32)cm;体均体重(59.95±8.99)kg;平均病程(13.04±9.66)年.番红O/固绿染色示钙化层病理改变主要为潮线复制、漂移,出现多条潮线结构,钙化层结构明显增厚,厚处为900多微米;钙化层增厚伴血管长入;非钙化软骨及钙化层纤维样改变;潮线间隙增宽;钙化层及深层软骨缺损.[结论]膝关节退行性骨关节炎钙化层形态结构具有特异性的病理改变.

    作者:王华伟;杨柳;王富友;段小军;王丽;郭林;陈光兴 刊期: 2009年第12期

中国矫形外科杂志

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主管:中国残疾人联合会

主办:中国残疾人康复协会 中国人民解放军第八十八医院