陈伟
目的 利用基因工程方法表达细粒棘球绦虫抗原B重组蛋白(rAgB),并分析其免疫反应性.方法 将rAgB基因片段插入原核表达载体pET41a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,经异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得重组蛋白rAgB-GST.用谷胱甘肽琼脂糖树脂亲和层析柱(GST-sepharose 4B)纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的表达情况.用蛋白质印迹(Western blotting)分析其免疫反应性,并用免疫胶体金包虫诊断试剂盒作为对照.结果 PCR、舣酶切及DNA测序结果均显示重组质粒pET41a-rAgB构建成功.SDS-PAGE结果表明,重组蛋白rAgB-GST的相对分子质量(Mr)为40 800,纯化蛋白含量为78.4%.Western blotting分析结果显示.重组蛋白rAgB-GST检测细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血清的阳性率分别为79.2%(95/120)和51.1%(23/45),但与卫氏并殖吸虫病患者、华支睾吸虫病患者血清以及健康人血清反应均为阴性.rAgB-GST的敏感性和特异性分别为79.2%(95/120)和81.0%(98/121),均略高于免疫胶体金棘球蚴病诊断试剂盒的敏感性(72.8%,75/103)和特异性(76.9%,30/39).结论 重组rAgB-GST蛋白可被细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血清识别,有较好的免疫反应性.
作者：吕国栋；刘涛；林仁勇；王星；王俊华；任智慧；温浩；卢晓梅 刊期： 2009年第02期
自然因素与疟疾传播的关系密切,国内外对气温、降雨量、湿度和地形地貌等自然因素与疟疾传播的关系作了大量研究.近年来以计算机和卒间技术为基础发展起来的3S技术[地理信息系统(GIS)、遥感(RS)和全球定位系统(GPS)]在疟疾研究的资料收集、数据分析和模型建立等方面广泛应用,本文对3S技术在自然因素与疟疾传播关系中的应用和研究进展进行综述.
作者：张少森；周水森 刊期： 2009年第02期
目的 评价1992-2001年世界银行贷款中国血吸虫病控制项目期间,湖北省荆州市血吸虫病的防治效果.并观察该项目结束2年后疫情变化情况.方法 采用回顾性纵向调查方法.收集整理1992-2003年荆州市8个县(市、区)人畜查病、治病、扩大化疗、查螺、灭螺和健康教育等年报资料,利用u检验进行疫情动态分析.结果 2001年荆州市血吸虫病患者(77009例)比1992年(140438例)下降了 45.2%,其中急性和晚期血吸虫病患者(63和1 032例)分别比1992年(244和1 841例)下降74.2%和43.9%;人群平均感染率由1992年的7.8%降至4.7%:防治前后人群平均感染率的差异有统计学意义(u=28.864,P<0.01).2001年感染血吸虫的耕牛(3454头)比1992年(8 035头)下降了57.0%,耕牛平均感染率亦由1992年的7.9%降至2001年的3.7%,防治前后耕牛平均感染率的差异有统计学意义(u=9.338,P<0.01).2001年钉螺面积(19 368 hm2)比1992年(25 395 hm2)下降了23.7%.项目结柬2年后,2003年急性血吸虫病例100例,比1992年下降了59.0%,但比2001年上升了58.7%.人群平均感染率上升至8.4%,比1992年和2001年分别上升了7.7%和78.7%(u=6.453、34.804,P<0.01).耕牛平均感染率为6.5%,比1992年下降了17.7%,比2001年上升了75.6%(u=3.061、5.894,P<0.01).钉螺面积上升至32 853 hm2.比1992年和2001年分别增加了29.3%和69.6%.结论 人畜同步化疗可在短期内控制疫情和传播,项目结束后疫情发生反弹,甚至高于项目开始前的疫情水平.
作者：何亮才；曾巍；王加松；袁梅枝；董娟；付正银 刊期： 2009年第02期
目的 以犬新孢子虫Nc-5基因为目的 基因的PCR诊断方法.检测奶牛流产的胎牛脑组织的新孢子虫.方法 根据GenBank发布的新孢子虫特异性基因片段Nc-5基因序列,设计1对特异性引物,以犬新孢子虫(Neosporacaninum)标准株DNA为模板,PCR扩增Nc-5基凶,与pMD18-T载体连接,转化大肠埃希菌JM109,获得阳性重组质粒pMD18-T-Nc-5,并测序.以环形泰勒虫、牛巴贝斯虫、刚地弓形虫、杜氏利什曼原虫以及犬新孢子虫标准株DNA为模板进行扩增以验证PCR的特异性,采用紫外分光光度计测定犬新孢子虫标准株DNA浓度和纯度.取高纯度的DNA样品用灭菌水稀释,分别取不同量的DNA进行PCR扩增,确定PCR方法的敏感性;利用该方法对32份奶牛流产的胎牛脑组织样品进行检测,同时,对其中23份流产的母牛血样进行ELISA血清学检测(作为对照),以评价犬新孢子虫PCR方法的榆测效果.结果 克隆的犬新孢子虫标准株月的基因大小为350 bp,与GenBank(AY459289)中Nc-5基因序列一致性为98%,建立的犬新孢子虫PCR方法与环形泰勒虫、牛巴贝斯虫、刚地弓形虫和杜氏利什曼原虫均无交叉反应,低能检测犬新孢子虫DNA 3.125 pg,检测流产胎牛脑组织阳性率为18.8%(6/32).ELISA检验流产母牛血样抗体阳性率为17.4%(4/23),这4份阳性样品与其流产胎牛PCR检测结果均为阳性.结论 建立的犬新孢子虫PCR诊断方法用于检测奶牛流产的胎牛脑组织新孢子虫的感染效果较好.
作者：王春仁；翟延庆；赵兴存；谭秋菊；陈佳；陈爱华；王宇 刊期： 2009年第02期
微孢子虫是专性细胞内寄生的真核生物,其作为人类新发病原越来越受到重视,故快速、准确的检测技术对于微孢子虫病的防治显得尤为重要.本文简要综述了以染色技术、免疫组化技术和分子生物学技术等为主的微孢子虫识别方法的研究进展,以期为有效防治微孢子虫病提供参考.
作者：王永宾；刘吉平 刊期： 2009年第02期
目的 了解广西壮族自治区(简称广西)居民饮食习惯和常见食源性寄生虫病的分布情况.方法 2002-2005年,以自然村为单位开展调查,广西各县有食生或半生肉类饮食习惯的居民均为问卷调查对象.抽样调查流行区食源性寄生虫病的分布情况.其中,华支睾吸虫病流行Ⅸ调查9县27个点13 990人,带绦虫病及猪囊尾蚴病调查10县(市)22个点22 772人,旋毛虫病调查10县(市)20个点9 638人,并殖吸虫病调查6县18个点9 347人.采用粪检、ELISA和皮试方法,检测居民感染情况.结果 广西109县中有食生或半生肉类饮食习惯的共64县,占总县数的58.7%,包括壮、汉、瑶、苗、毛南、侗族和布依等7个民族.占广西民族成分的58.3%.食品有鱼、猪、牛和鸭肉,蟹、虾、红螺和牡蛎等.食用方式多样,如拌佐料或直接生食、火锅、腌制、冲开水和浸酒等.主要食源件寄生虫病有:华支睾吸虫病主要分布于邕汀、左江和右江流域,呈中部偏西、偏南区域性分布,平均感染率为9.8%;带绦虫病及猪囊尾蚴病,主要分布于广西北部的融水县(感染率分别为43.3%和2.1%)和北部偏中地区的宾阳县和广西西部的田林县(感染率分别为2.1%、1.6%和1.0%、1.1%),呈片状分布;旋毛虫病主要分布于德保、百色、鹿寨和南丹等县,血清阳性率分别为9.8%、6.4%、5.3%和3.1%,呈点状分布.并殖吸虫病主要分布于融水、龙胜及全州县,皮试阳性率为2.6%.结论 广西少数民族有食生或半生饮食习惯人数多、食用晶种及方式多样,存在多种食源性寄生虫病.
作者：黎学铭；欧阳颐；杨益超；林睿；许洪波；谢祖英；李树林；商少明 刊期： 2009年第02期
目的 了解华支睾吸虫ATP合酶b亚基(CsATP-synt_B)的虫体组织定位,并以HeLa细胞为替代模型观察其亚细胞定位.方法 用CsATP-synt_B重组蛋白免疫SD大鼠,取其抗血清对华支睾吸虫成虫石蜡切片进行间接免疫荧光染色,观察CsATP-synt_B蛋白在华支睾吸虫成虫组织中的分布.根据生物信息学预测的CsATP-synt_B线粒体转运序列(MTS序列)和核定位序列(NLS序列)位置,设计4组引物[CsATP-synt_B全长序列,以及3个缺失突变体(MTS-缺失线粒体转运序列、NLS缺失核定位序列、MTS-NKS粒体-核定位双缺失)引物],扩增出全长基因和3个突变体基因,构建重组质粒pEGFP-Nl-CsATP-synt_B1-300、pEGFP-Nl-CsATP-svnt_B30-300、pEGFP-Nl-CsATP-synt_B(1-238)+(257-300)及pEGFP-Nl-CsATP-synt_B(30-238)+(257-300).将这些重组质粒用阳离子脂质体转染HeLa细胞,48 h后用激光共聚焦显微镜观察CsATP-synt_B全长基因和3个突变体在HeLa细胞的表达和亚细胞定位.结果 CsATP-synt_B蛋白在华支睾吸虫成虫中分布较为广泛,主要分布在腹吸盘、卵巢、卵黄腺和皮层.绿色荧光蛋白GFP表明CsATP-synt_B全长序列表达于线粒体或细胞核,线粒体转运序列缺失突变体表达于细胞核,核定位序列缺失突变体表达于线粒体.双缺失突变体仅表达于胞浆.结论 CsATP-synt_B蛋白在华支睾吸虫的分布与线粒体的分布一致,主要集中在能量代谢较旺盛的组织部位.CsATP-synt_B蛋白既可进入线粒体,也可进入细胞核,理论预测的定位序列得到证实.
作者：胡旭初；周红娟；胡凤玉；马长玲；赵俊红；黄灿；郑小凌；徐劲；余新炳 刊期： 2009年第02期
缅甸拉咱市单纯间日疟原虫感染者48例分为氯喹A方案组(26例)和B方案组(22例),分别采用成人总剂量1 200 mg(第1天顿服600 mg,第2、3天300 mg/d)和1 500 mg(第1天顿服750 mg,第2、3天375 mg/d)的三天疗法治疗.于服药当天、服药后第1、2、3、7、14、21和28天采集指血或耳垂血制作厚、薄血涂片检查疟原虫,测量体温和观察药物不良反应.氯喹治疗后,两组病例血内无性体原虫3d内全部阴转.第28天随访治愈率为100%.结果 表明,缅甸拉咱市的间日疟病例对氯喹治疗均敏感,该边境地区间日疟病例可采用氯喹进行临床治疗.
作者：梁桂亮；孙晓东；王剑；张再兴 刊期： 2009年第02期
根据多房棘球绦虫emY162基因序列设计引物,利用PCR以细粒棘球绦虫原头蚴和成虫的基因组DNA和cDNA为模板扩增egG1Y162基因,构建PUCm-T/egG1Y162和PUCm-T/egG1Y162 cDNA重组质粒,经PCR、酶切及测序后,进行序列分析.细粒棘球绦虫2个不同发育阶段均克隆出esG1Y162基因,从基凶组DNA和cDNA克隆得到的片段长度分别为1 680 bp和459 bp,登录号分刖为AB458258和AB458259.
作者：曹春宝；马秀敏；丁剑冰；贾海英；吾拉木·马木提；马海梅；温浩 刊期： 2009年第02期
经PCR鉴定的吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫各感染1只除脾绵羊,取羊耳尖血涂片,光学显微镜观察其形态.两种泰勒虫的细胞浆呈浅蓝色,细胞核为紫色,主要形态包括梨籽形、圆形(或卵圆形)、针形、杆状、三叶草形、十字架形、逗点形和不规则形等.在整个病程中,梨籽形、圆形(或卵圆形)和针形3类虫体数量居多.两种羊泰勒虫在形态学上无明显差异.
作者：李有全；关贵全；马米玲；罗建勋；殷宏 刊期： 2009年第02期
目的:研究寨克硝唑苯甲酸酯体外抗阴道毛滴虫的效果.方法 以肝浸汤培养基培养阴道毛滴虫,将滴虫混悬液接种于96孔培养板中,分塞克硝唑苯甲酸酯组、塞克硝唑组、甲硝唑组、不加药物的对照组及空白组,通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)观察塞克硝唑苯甲酸酯的体外抗滴虫效果.另将滴虫混悬液接种于试管中,分塞克硝唑苯甲酸酯组、塞克硝唑组、甲硝唑组和不加药物的对照组,通过计数法观察塞克硝唑苯甲酸酯的体外抗滴虫效果.结果 培养24 h后,塞克硝唑苯甲酸酯浓度为0.15、0.31、0.63、1.25、2.50、5.00、10.0及20.0μg/ml时呈浓度依赖性地抑制滴虫增殖(t=9.02,P<0.01),MTT法相对抑制率分别为14.6%、28.7%、31.3%、60.4%、89.0%、89.2%、95.6%和100%:计数法相对抑制率分别为18.2%、31.1%、39.7%、68.8%、84.6%、90.1%、94.6%和100%.培养6～24h,呈时间依赖性地抑制滴虫增殖.体外抗阴道毛滴虫的低杀灭浓度为20μg/ml,低抑制浓度为0.15μg/ml.结论 塞克硝唑苯甲酸酯具有较强的体外抗滴虫效果.
作者：张霄翔；郑珊珊；朱梅梅 刊期： 2009年第02期
目的:探讨重组德国小蠊变应原(rBlag2)治疗过敏性哮喘小鼠的效果及机制.方法 18只BALB/c小鼠随机均分为阴性对照组(A组)、哮喘模型组(B组)和重组蛋白rBlag2治疗组(C组).B、C两组分别腹腔注射经Al(OH)3佐剂乳化的重组蛋白rBla g2,剂量为50 mg/(只·次),共3次,每次间隔1周.A组以50 ml生理盐水代替变应原.末次致敏后2周,进行免疫治疗,C组腹腔注射rBla g2,100 mg/(只·次),每两天1次,连续8次.A、B两组以PBS代替变应原.末次治疗后1周,将小鼠麻醉,B、C两组每鼠每天滴鼻50 mg rBla g 2,连续7 d.A组以PBS代替变应原滴鼻.于后1次滴鼻后24 h检测各项指标:各组小鼠气道高反应性,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和细胞种类以及血清中rBla g 2抗原特异性IsE和IgG2a的变化;HE染色观察小鼠肺组织的改变.免疫组化检测肺嗜酸粒细胞(EOS)B淋巴细胞瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达.结果 与B组相比,C组气道高反应检测中扩大间隙(Penh)值下降(P<0.05);血清中rBla g 2特异性IgE降低,IgG2a增加(P<0.01);C组EOS细胞阳性数量明显减少.且Bcl-2蛋白阳性表达较弱.B组BALF的细胞总数和EOS数分别为(24.60±15.08)×105个/ml和(22.20±3.76)×105个/ml.而C组细胞总数[(14.30±4.95)×105个/ml]和EOS数[(5.20±1.56)×105个/ml]显著减少(P<0.01).B组肺部气管周围炎性细胞聚集,肺组织上皮损伤,组织水肿,而C组肺部变应性炎症明显减轻.与A组相比,C组各项检测指标接近A组.结论 rBla g 2对小鼠过敏性哮喘有治疗作用,可能是EOS细胞凋亡在其中起重要作用.
作者：沈小英；朱清仙；刘志刚；李湘辉 刊期： 2009年第02期
2006年5月对浙汀省江山市某镇2所学校学生及其在学校及家庭密切接触者中的腹泻患者进行流行病学个案调查和粪检.并随机抽检学校自来水和患者家庭井水进行微生物指标检测.本次阿米巴痢疾暴发起止时间为2006年5月10 日～6月5 日,经病原学检测溶组织内阿米巴原虫阳性31例,其中学生/幼托儿童23例(占74.2%),另8例为散居儿童、农民及个体户.病例主要分布在六一幼儿园(9例)和贺村中心小学(8例),罹患率分别为7.4%(9/122)和0.7%(8/1 229),其他学校为散在病例.594名密切接触者中检出包囊携带者9例,携带率为1.5%.问卷调查显示,31例患者中,22例饭前便后均不洗手,14例与本次患病者有密切接触史.两所学校自来水和10例发病者家庭井水样品中7份样品的大肠埃希菌指标超过国家标准(≥50),但均无溶组织内阿米巴滋养体或包囊污染.
作者：毛立雄；郑建俊；王新明；姚立农；程华良；祝秋国 刊期： 2009年第02期
脑裂头蚴病是一种罕见的中枢神经系统寄生虫病,由曼氏迭宫绦虫中蚴期幼虫——裂头蚴感染引起2002年10月～2008年9月中南大学湘雅医院神经外科经开颅手术证实脑裂头蚴病2例报告如下.
作者：奚健；王君宇；刘景平；杨治权；黄军；方加胜 刊期： 2009年第02期
目的 应用蛋白质组学技术分析杜氏利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体蛋白质表达状况.方法 分别提取和纯化杜氏利什曼原虫四川 SC6株前鞭毛体与纯培养无鞭毛体的总蛋白,分别经pH3～10的预制胶条进行双向电泳分离,凝胶用考马斯亮蓝染色,凝胶网像以PDQuest 1.0软件分析,并对主要差异表达蛋白点用电喷雾质谱法进行鉴定.结果 等量的前鞭毛体与纯培养的无鞭毛体总蛋白经双向电泳分离后均可获近700个蛋白点,其中超过90%的蛋白点的分布和相对强度基本一致.与前鞭毛体比较,6个蛋白点在无鞭毛体蛋白中明显高表达.3个蛋白点低表达.6个明显高表达的蛋白点中有5个为已知功能蛋白,分别为Reiske铁硫蛋白前体、α微管蛋白、过氧化物酶1、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶前体和甘露糖-1-磷酸瓜氨酸转移酶;3个低表达的蛋白点中有2个为已知功能蛋白,分别为热休克蛋白70和B微管蛋白.这些差异调节表达蛋白与碳水化合物/能量代谢,应激反应,细胞膜和细胞骨架形成相关.结论 前鞭毛体与无鞭毛体蛋白质的表达存在差异.
作者：敬保迁；邓世山；张仁刚；张洁 刊期： 2009年第02期
顾以铭教授不幸于2009年1月10 日在南京逝世,享年83岁.
作者：陈伟 刊期： 2009年第02期
统计分析125例内脏利什曼病患者血细胞7项参数及骨髓检查结果,发现多数患者血细胞7项参数均显著低于参考范同;骨髓检查结果显示,感染骨髓象伴缺铁性贫血(IDA)及细胞成熟障碍者占64.8%.统计结果表明,内脏利什曼病患者多表现为较严重的感染和缺铁性贫血以及血细胞参数显著降低,这可作为反映内脏利什曼病严重程度的重要指标.
作者：张惠琴；余红彬；王欢 刊期： 2009年第02期
患者,女性,59岁,农民,江两省于都县仙下乡三贯村人.
作者：谢琼珺；徐仙赟；苏水莲 刊期： 2009年第02期
目的 比较不同方法提纯隐孢子虫卵囊DNA的效果.方法 将分离纯化的隐孢子虫卵囊分别加入美国Promega公司(简称Promega)和上海捷瑞公司(简称捷瑞)基凶组DNA纯化试剂盒的裂解液、2%Triton X-100和5%异硫氰酸胍,同时联合使用冻融法、蛋白酶K法和声裂法裂解卵囊,用试剂盒法或Chelex-100法提纯卵囊基因组DNA,用实时PCR测定隐孢子虫卵囊囊擘蛋白(COWP)基因拷贝数,以Promega试剂盒为参照比较不同纯化方法的提纯效果.结果 Promega试剂盒的裂解液裂解隐孢子虫卵囊的效果好.纯化所得卵囊COWP基因拷贝数可达(6.45～9.86)×106;其他依次为捷瑞试剂盒的裂解液[(2.38～3.69)×106、5%异硫氰酸胍[(1.27～2129)×105]和2%Triton X-100[(2.06～866.70)×103].冻融法+蛋白酶K法+声裂法提纯隐孢子虫卵囊DNA效果佳,其次为冻融法+声裂法和蛋白酶K法+声裂法,冻融法+蛋白酶K法效果差.结论 冻融法+蛋白酶K法+声裂法联合使用能使卵囊DNA的提纯效率达到大,捷瑞基因组DNA纯化试剂盒和5%异硫氰酸胍裂解法提纯隐孢子虫卵囊DNA可获得与Promega试剂盒相近的效果.
作者：陈盛霞；吴亮；沈玉娟；章秋霞；李婷婷；姜旭淦；徐馀信；曹建平 刊期： 2009年第02期
捕捉收集贵阳市花溪地区4个乡镇的野生蛙类,剖检调查裂头蚴感染情况,将分离获得的裂头蚴感染幼犬作虫种鉴定.捕获的野生蛙为黑斑蛙(Rana nigromaculata),其裂头蚴感染率较高为16%(131/818),感染度为1～113条,平均3.44条/蛙.感染幼犬证实该地区寄生于黑斑蛙的裂头蚴为曼氏迭宫绦虫裂头蚴.
作者：毛家志；周碧君；王开功；文明 刊期： 2009年第02期
中国寄生虫学与寄生虫病杂志
主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
主办：中华预防医学会,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
