周廷发;唐贞申
目的 将肠道病毒71型(EV71)临床分离株接种小鼠观察其致病特点.方法 将6株EV71临床株分别腹腔接种1日龄BALB/c小鼠,观察小鼠表现以及脑、肺脏、骨骼肌组织病理变化;采用免疫组化和RT-PCR方法,检测组织中病毒抗原和基因片段.结果 临床分离的6株EV71(C4亚型)接种1日龄小鼠均出现病症,其中JN200804株实验小鼠症状较重,小鼠脑组织和骨骼肌可观察到细胞空泡变性、淋巴细胞浸润等病理变化;JN200804株感染组小鼠脑内检测到EV71抗原和基因片段.结论 6株EV71临床株均可感染小鼠并致病,重者出现松弛型麻痹并死亡,轻者出现震颤、麻痹但可恢复至正常.
作者:宋楠楠;张颖;李鹏;岳盈盈;李志会;盖中涛;孟红 刊期: 2012年第08期
目的 应用口腔矫治器(OA)治疗阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者,比较有效者和无效者的颅面形态及上气道结构的CT测量指标差异,探讨OA治疗OSAS的效果.方法 随机选取采用OA治疗有效及无效的OSAS患者各9例,两组患者在年龄、体质量指数(BMI)、呼吸暂停指数(AHI)相匹配.对两组患者进行CT扫描,分析比较其CT测量指标的差异.结果 与治疗有效者相比,治疗无效者的ANB角较小(P<0.05),下颌平面角(SN-MP)、腭咽部的横截面积及腭咽部气道容积则明显增大(P<0.05).结论 使用OA治疗OSAS患者,应注意患者颅面形态和上气道形态,预测其治疗效果,选择合适的治疗方法.
作者:杜林娜;郭泾 刊期: 2012年第08期
目的 探讨不明原因早期复发性自然流产(RSA)患者和正常对照组早孕子宫蜕膜组织中杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR) CD158表达的特征.方法 选择2009年1月至2010年6月就诊的RSA患者和同期计划生育门诊因计划外孕行人工流产术者各30例,并根据孕周分组,流式细胞术检测蜕膜组织细胞表面标记,比较RSA患者和对照者CD56、CD16、CD158a(KIR2DL1/S1)、CD158b(KIR2DL2/S2)表达的变化规律.结果 ①RSA患者CD56+细胞数显著少于对照者(P =0.007),CD56+/CD16-细胞较对照组降低(P<0.05);②RSA患者CD158a在CD56+/CD16-细胞表面的表达显著降低(P =0.026);③按孕周分组分析显示,孕7~10周患者CD56+/CD16-细胞表面表达CD158a较同期对照者显著降低(P=0.010);④正常早孕蜕膜组织CD158a、CD158b与CD56表达呈显著正相关(P<0.01).结论 早孕蜕膜组织CD56+/CD16-细胞减少可能为不明原因自然流产的发病机制之一.CD56+/CD16-细胞表面CD158a表达下降与不明原因自然流产有关,且其变化与早孕孕周相关.
作者:王珊;陈子江;许成岩;宋辉;赵跃然;傅艺冰 刊期: 2012年第08期
目的 探讨血液透析患者矿物质和骨代谢紊乱的控制情况.方法 从本院透析中心选取规律血液透析的患者共91例进行横断面研究,收集其临床资料、用药情况,检测矿物质代谢的指标.根据2003年美国肾脏病生存质量指导指南建议,与透析预后及实践模式(DOPPS 4)研究作比较,分析血液透析患者矿物质代谢紊乱的控制情况及相关因素.结果 血透患者血钙、血磷、甲状旁腺激素(iPIH)的达标率分别为58.2%、49.5%和34.1%,与DOPPS4的研究结果(血钙、血磷及iPTH的达标率分别为56.0%、54.5%和32.1%)比较差异无统计学意义(P>0.05).Logistic回归分析显示,年龄(优势比OR值:0.96,95% CI:0.94 ~0.99)和血清前白蛋白(优势比OR值:1.01,95% CI:1.0 ~ 1.02)与高磷血症独立相关.结论 血液透析患者的矿物质代谢紊乱控制情况与发达国家相似,但高磷血症的问题更加突出,应引起进一步重视.
作者:孔祥雷;宝群;魏勇;贾晓妍;陈萍;唐利军;王尊松;李文斌;崔美玉;许冬梅 刊期: 2012年第08期
目的 构建弓形虫棒状体蛋白18(ROP18)和微线体蛋白2(MIC2)的基因融合的重组真核表达质粒,并在转录和翻译水平进行鉴定.方法 利用分子克隆技术构建重组真核表达质粒pBudCE4.1-ROP18-MIC2,经PCR、酶切及测序鉴定正确后,体外转染人包皮成纤维细胞(HFF),采用RT-PCR在48 h时检测转录水平,SDS-PAGE在72 h时检测蛋白表达.结果 重组真核表达质粒pBudCE4.1-ROP18-MIC2构建正确,经RT-PCR、SDS-PAGE鉴定,弓形虫ROP18、MIC2可在HFF细胞中瞬时表达.结论 成功获得重组真核表达质粒pBudCE4.1-ROP18-MIC2,为进一步研究弓形虫疫苗的免疫保护性奠定基础.
作者:陈琳;何深一;石娜;周怀瑜;丛华;白杨;赵广会;赵群力 刊期: 2012年第08期
目的 研究亚低温对过氧化氢损伤后脑微血管内皮细胞核转录因子(NF-κB)表达的影响.方法 分离并培养大鼠脑微血管内皮细胞,用过氧化氢损伤的方法建立脑出血后血肿周围炎症反应内皮细胞模型.将细胞分为实验组(ICH)和对照组(C).ICH组分为过氧化氢损伤常温组(ICH+ N)和过氧化氢损伤亚低温组(ICH+ H),C组分为常温对照组(C+N)和亚低温对照组(C+H).采用Western blot技术检测各组NF-κB的表达水平.结果 实验组NF-κB的表达水平均高于各自对照组(P<0.01),ICH+N组蛋白表达水平高于ICH+H组(P<0.01).结论 亚低温可有效降低过氧化氢损伤的脑微血管内皮细胞NF-κB的表达,从而减轻血肿周围炎症反应,发挥其脑保护作用.
作者:李彦芬;王敏忠;张镛;杜怡峰;郭守刚;李春霞;刘雪平 刊期: 2012年第08期
目的 研究糖基化终末产物(AGE-BSA)对原代培养的基底前脑胆碱能神经元形态、生存率、凋亡率、胆碱乙酰转移酶(ChAT)与乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响.在体外水平研究AGEs在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)神经元缺失发生中的作用及其可能机制.方法 原代培养大鼠基底前脑胆碱能神经元,观察细胞生长变化,进行免疫荧光细胞化学鉴定;用300 μg/mLAGE-BSA以及糖基化终末产物受体(RAGE)中和抗体阻断处理原代培养的基底前脑胆碱能神经元,作用不同时间后置于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用MTT法检测神经元的存活率;采用流式细胞术检测神经元的凋亡率;经比色法检测ChAT和AchE的活性变化.结果 AGEBSA干预胆碱能神经元72 h后,细胞形态发生明显损伤性变化,细胞存活率明显降低,凋亡率增高,ChAT活性明显下降,AchE活性明显升高;RAGE中和抗体阻断组72 h较之AGE-BSA组,细胞形态损伤变化较轻,生存率偏高,凋亡率较低,ChAT活性较高,AchE活性偏低,但比空白对照组生存率降低,凋亡率增高,ChAT活性明显下降,AchE活性明显升高.结论 糖基化终末产物作用72 h可以引起胆碱能神经元的损伤,并造成ChAT活性下降和AchE活性明显升高,部分阻断其与特异性受体RAGE的结合可以减弱其损伤作用,提示糖基化终末产物通过其受体参与了对胆碱能神经元的损伤作用.
作者:殷青青;刘雪平;董传芳;董雪丽;李艳菊;罗鼎真;侯训尧 刊期: 2012年第08期
目的 探讨农村居民主观幸福感与自杀态度的关系.方法 选取山东省西部农村两县,采用分层随机抽样共获得341户,对每户中20 ~ 75岁人群抽取1~2名进行调查.采用一日重建法(DRM)测量主观幸福感,自杀态度采用自杀态度问卷(QSA)测量.采用秩和检验和多元线性回归模型进行分析.结果 农村居民一日总体幸福感得分为-24.20~ 36.20,50%分值为20.00.上午、下午、晚上主观幸福感差异有统计学意义(x2=66.75,df=2,P<0.001).农村居民对自杀态度多持中立或矛盾态度.多元线性回归模型分析显示,与主观幸福感相关的因素有体质量超重或肥胖、抑郁得分、焦虑得分,与自杀态度相关的因素有抑郁得分.主观幸福感与自杀态度无关.结论 主观幸福感与自杀态度无相关性,但两者均与抑郁得分相关.改善心境状况将有助于改善主观幸福感或影响农村居民自杀态度.
作者:贾存显;庄茂强;王健 刊期: 2012年第08期
目的 探讨过氧亚硝酸盐(ONOO-)诱导人脑血管平滑肌细胞(HBVSMCs)盘状结构域受体2(DDR2)表达的机制.方法 体外培养HBVSMCs,用倒置相差显微镜、吖啶橙染色法和MTT比色法对PD98059预处理的细胞进行细胞形态学及细胞生存率检测,采用Western blot及Real-time PCR技术,检测ONOO-作用下HBVSMCs中DDR2表达及施加ERK1/2抑制剂PD98059后DDR2/MMP-9表达的变化.结果 10 μmol/L ONOO-诱导DDR2在蛋白及mRNA水平上呈现高表达(P<0.05),随着ONOO-浓度的增加,DDR2逐渐呈现低表达(P<0.05).PD98059预处理后的HBVSMCs,无明显形态学变化,对其进行生存率检测亦无显著影响(P>0.05).PD98059显著抑制ONOO-诱导的DDR2/MMP-9表达(P<0.05).结论 ERK1/2信号转导途径抑制剂PD98059可以抑制ONOO-诱导的DDR2/MMP-9表达,ONOO-诱导HBVSMCsDDR2的表达机制与ERK1/2信号转导途径有关.
作者:万小娟;黄凌燕;张国栋;李建峰 刊期: 2012年第08期
目的 研究酒精性肝损伤的超微结构变化,以揭示乙醇引起肝脏毒性的发病机制.方法 建立酒精性脂肪性肝病大鼠模型,观察肝脏组织病理和超微结构变化,并探讨二者之间的关系.结果 电镜下观察模型组可见较多脂滴,线粒体基质密度增高;重者可见线粒体膜断裂,嵴断裂或消失,形态各异;糖原增多,分布不均;细胞核内染色质分布异常.停止乙醇灌胃后病理改变明显减轻.结论 随着乙醇给予量的增加和时间的延长,电镜和光镜下的肝脏病理改变呈一致性加重,其中线粒体改变出现的早而且重,戒酒后病变明显减轻.因此戒酒应成为酒精性肝病治疗的首要原则.
作者:刘莉;阎明;李强;张海涛 刊期: 2012年第08期
目的 评价EuroSCORE预测冠脉旁路移植(CABG)术后患者再入院风险的应用价值.方法 自2009年至2010年在我院接受单纯CABG手术患者1 875例.评价EuroSCORE预测患者术后再入院风险的校准度和区分度,其中校准度提示该评分系统预测阳性事件的准确程度,区分度提示该评分系统能在多大程度上把具备不同风险程度的患者区分开来,也即评分系统的鉴别力.区分度越高,越能把不同风险程度的患者区分开来.同时,按照风险评分将患者分为5组,对不同风险组患者术后随访期间再入院情况进行比较.结果 患者随访期限(24.4±10.1)个月.EuroSCORE预测CABG术后再入院事件的校准度和区分度较好(H-L检验:P =0.37;ROC曲线下面积为0.719).根据EuroSCORE评分高低,生存曲线分析发现,EuroSCORE评分越高的患者CABG术后再入院事件发生率越高(Log Rank:<0.001).结论 EuroSCORE可在临床工作中对CABG术后再入院发生风险进行预测.
作者:袁昕;郑哲;胡盛寿 刊期: 2012年第08期
目的 建立一种稳定高效、存活率高的大鼠输精管平滑肌细胞体外分离及培养方法,为相关研究提供理想的细胞模型.方法 采用组织块消化法对大鼠离体输精管平滑肌细胞进行原代培养.采用形态学观察、HE染色、抗α-SMA免疫细胞化学荧光染色对细胞进行鉴定,台盼蓝染色计算细胞存活率及细胞总数,胰酶消化传代并绘制生长曲线.结果 对照实验表明胶原酶Ⅱ消化效果优于胶原酶Ⅰ,佳消化时间为60 min,同时控制吹打次数、沉淀时间及培养环境,获得了理想的平滑肌细胞总数及存活率.平滑肌细胞呈典型的梭形、长条形,可传代,且出现平滑肌细胞培养典型的“峰-谷”状特征,生长曲线为“S”型.经抗α-SMA免疫荧光鉴定,培养细胞为平滑肌细胞,纯度为(92.6±4.3)%.结论 采用组织块消化法成功建立了大鼠输精管平滑肌细胞的体外分离及培养方法.
作者:臧元伟;高路;吴栋;张红媛;陈凯;付姗姗;刘璐;李景新 刊期: 2012年第08期
目的 探讨冠心病患者外周血内皮祖细胞(EPCs)的水平及其对内皮功能的影响.方法 随机选取经冠脉造影确诊为冠心病患者53例为冠心病组,非冠心病患者52例为正常对照组,采用超声测定其内皮舒张功能指标(FMD),采用流式细胞术检测各组EPCs水平,同时检测反映内皮功能的生化指标,采用免疫散射比浊法测定高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,硝酸盐还原酶法测定NO.结果 在基线水平上,冠心病组内皮功能较正常对照组明显低下,EPCs数目明显减少,hs-CRP水平升高,NO含量减低,差异均有统计学意义(P均<0.05);FMD与EPCs数量显著相关,FMD随EPCs数量增加而改善,呈正相关趋势(r=0.52,P<0.01).同时,反映内皮功能的指标hs-CRP与FMD、EPCs均呈负相关趋势(r=-0.43,r=-0.50,P<0.05),NO与FMD、EPCs均呈正相关趋势(r=0.54,r=0.45,P<0.05).结论 冠心病患者EPCs数量较健康人群明显减少,内皮功能明显低下,同时内皮功能随EPCs数量增加而改善.
作者:陈伟;谈红;李晓燕;杨燕;韦修莹;陈英剑;张红明 刊期: 2012年第08期
目的 探讨右美托咪啶对高血压患者枕后开颅面神经显微血管减压术麻醉用药以及麻醉苏醒的影响.方法 选择合并高血压病面神经显微减压术患者48例,随机分为两组,每组24例.研究组麻醉诱导前静脉微量泵入右美托咪啶负荷量(1 μg/kg),继以维持0.2 ~0.7 μg/(kg·h);对照组则微量泵入相同剂量的生理盐水.两组术中控制血压,收缩压维持在术前基础值的70%~ 80%.两组麻醉诱导选用丙泊酚、芬太尼和维库溴铵.以丙泊酚和瑞芬太尼持续泵注维持麻醉,观察两组患者麻醉药泵注速度、麻醉苏醒时间及拔管时间.结果 研究组麻醉药泵注速度[丙泊酚(0.076±0.014) mg/(kg·min)vs (0.092±0.018) mg/(kg·min);瑞芬太尼(0.106±0.032)μg/(kg·min) vs (0.131 ±0.030)μg/(kg· min)]、麻醉苏醒时间[(5.2 ±2.1)min vs (9.3 ±2.4)min]及拔管时间[(5.3 ±2.4)min vs (10.3±3.2)min]与对照组相比差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 右美托咪啶用于高血压患者枕后开颅术可明显减少麻醉用药量,缩短麻醉苏醒时间,加快拔管.
作者:周廷发;唐贞申 刊期: 2012年第08期
目的 分别比较热休克蛋白60(HSP60)在多西紫杉醇(Docetaxel)诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡及耐药前后表达的差异,并探讨其意义.方法 采用20 μmol/L Docetaxel诱导PC-3细胞凋亡,后采用逐渐加量的方式培养PC-3细胞Docetaxel耐药株;采用双向荧光差异凝胶电泳(DIGE)技术定量筛选未处理组PC-3细胞与凋亡PC-3细胞,及PC-3细胞敏感株与耐药株的差异蛋白,并采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对其进行成分鉴定,进而检测HSP60的表达.结果 HSP60在Docetaxel诱导PC-3凋亡细胞中表达上调,在Docetaxel耐药株中表达下调.结论 HSP60在PC-3凋亡细胞中高表达,在Docetaxel耐药株中的低表达,提示其可能与PC-3细胞的凋亡及耐药有重要关系.
作者:王海滨;马伟明;萧畔;马天加;张怀强 刊期: 2012年第08期
人角膜基质细胞存在于角膜基质层中,在正常状态下为静止状态,呈扁平、树枝状,在维持角膜透明性中起重要作用,细胞间通过间隙连接进行物质和信息交换.就角膜基质细胞的分布、不同表型、功能及其与角膜疾病的关系作了综述.
作者:樊廷俊;胡修忠;葛源 刊期: 2012年第08期
目的 建立一种高效液相色谱-荧光检测器检测食用油中苯并芘的方法.方法 对济南市场上食用油中苯并芘含量进行调查分析,采用SHIMADZU shim-pack VP-ODS (250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇:水(90∶10,V/V)为流动相,流速为1.0 mL/min,样品使用无键合硅胶固相萃取柱处理后,在激发波长285 nm、发射波长406 nm处进行检测.结果 方法的低检出限(S/N=3)为0.039μg/kg,样品的加标回收率为85.8% ~ 90.7%,日内精密度为2.9% ~4.1%,日间精密度为3.7%~5.3%.结论 该方法灵敏度高,选择性好,定量准确,适用于食用油中苯并芘的检测.
作者:杨燕;付亚群;吴晓萌;姜青青;邵丽华 刊期: 2012年第08期
目的 探讨依达拉奉对帕金森病(PD)小鼠脑细胞自噬的影响.方法 随机将30只健康雄性C57BL/6小鼠,分为正常对照组、模型组、治疗组各10只.后两组给予腹腔注射百草枯10 mg/kg、代森锰30 mg/kg,每周二、四各1次,连续6周.建模成功后治疗组给予依达拉奉3 mg/kg腹腔注射2周,正常对照组给予等量生理盐水.观察3组小鼠行为学的改变、并用Western blot法检测中脑自噬特异性标记物LC3Ⅱ、beclin 1的表达.结果 与治疗组比较,模型组悬挂时间明显缩短,中脑LC3Ⅱ、beclin 1的表达显著增高.结论 依达拉奉治疗可显著抑制PD小鼠模型脑细胞自噬.
作者:周波;文敏;王赟;龙高群;瞿廷念;李宏伟;焦玲;张春林 刊期: 2012年第08期
目的 探讨氯胺酮长期低剂量给药对食蟹猴自发活动和丘脑细胞凋亡的影响.方法 12只月龄为(46.25±5.40)个月的雄性食蟹猴随机分组为氯胺酮组(8只)和对照组(4只).氯胺酮组按体质量1 mg/kg每天静脉注射氯胺酮(l mg/mL),对照组注射相应量的生理盐水(l mL/kg).采用观察法定期观察和记录动物给药前后的自发活动.3个月后处死动物,用TUNEL法测丘脑细胞的凋亡状况,Western blot法测得丘脑细胞的Bcl-2和Caspase-3的表达水平.结果 实验开始时,对照组和氯胺酮组动物的行走、攀爬、移动和跳跃自发行为无统计学差异.随着用药时间延长,氯胺酮组行为出现了逐渐减少的趋势,至第90天时行走、攀爬、移动和跳跃均低于初次用药时,差异具有统计学意义;对照组自发活动没有明显的改变.这提示氯胺酮组的自发活动行为出现了抑制现象.与对照组相比,氯胺酮组丘脑凋亡细胞增多,丘脑细胞的Caspase-3的表达水平升高,差异都具有统计学意义.Bcl-2的表达水平降低,但差异无统计学意义.结论 低剂量氯胺酮持续使用3个月可导致青年早期食蟹猴自发活动显著减少,可能出现了药物耐受现象;低剂量氯胺酮持续应用可致丘脑细胞的凋亡,其机制可能与Caspase-3表达增高有关.
作者:张宇哲;江虹;孙琳;李青;孙华;于洪鸾;高进;潘芳 刊期: 2012年第08期
目的 探析急性乙型肝炎伴严重高胆红素血症(血清总胆红素> 171 μmol/L)的发病情况及其相关的危险因素.方法 调查并分析了济南市传染病医院618例住院急性乙型肝炎患者人口资料、血生化、乙肝病毒血清学及病毒学指标.结果 618例患者中,549例(88.5%)伴有胆红素升高,其中202例(32.7%)血清总胆红素大于171 μmol/L.单因素分析显示,有饮酒史及发热、乏力、纳差症状且较年长的患者更易伴发严重高胆红素血症(P<0.001).多因素Logistic回归显示,年龄、饮酒史、发热、乏力、纳差是急性乙型肝炎伴严重高胆红素血症的独立危险因素.结论 年龄、饮酒史、发热、乏力、纳差是急性乙型肝炎伴严重高胆红素血症的独立危险因素.
作者:孙超;解双双;肖迪;刘彩霞;于进红;刘莉;李强 刊期: 2012年第08期