学术投稿

联合转染VEGF和PCNA-ASODN对血管成形术后再狭窄的影响

王蕾艳;宋尚明;张红雨;由倍安;唐元升;崔连群;朱兴雷

关键词:血管内皮生长因子, 增殖细胞核抗原, 反义寡核苷酸, 再狭窄, 联合转染
摘要:目的 探讨联合转染血管内皮生长因子(VEGF)基因和增殖细胞核抗原反义寡核苷酸(PCNA-AsODN)对血管成形术后再狭窄的影响.方法 32只新西兰纯种大白兔随机平均分为对照组、转染VEGF组、转染PCNA-ASODN组、联合转染VEGF和PCNA-ASODN组(联合转染组).构建兔的股髂动脉球囊损伤术后再狭窄模型,以医用生物蛋白胶作为缓释载体,将300μgPCNA-ASODN或VEGF均匀喷布于处理血管段外膜.取损伤处理血管段标本,光学显微镜观察损伤血管内膜、中层结构和局部血栓形成情况;电子显微镜观察新生内膜内皮细胞及内膜、中膜,计算内膜/中膜(I/M)面积比与厚度比;采用RT-PCR法检测VEGF与PCNA基因的表达,采用免疫组化从蛋白质水平检测VEGF与PCNA的表达.结果 联合转染组与其他组相比,其血管内皮较完整、光滑,内膜轻度增生,平滑肌细胞排列规则,外膜无明显变化;I/M面积比与厚度比明显较低(P<0.05);RT-PCR检测VEGF表达水平明显升高(P<0.05);免疫组化检测血管组织中VEGF蛋白表达阳性率较高(P<0.05).结论 联合转染VEGF和PCNA-ASODN能更有效地抑制球囊损伤术后的血管内膜增生和再狭窄的发生.
山东大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 瑞舒伐他汀抗糖尿病性心肌病的实验研究

    目的 探讨瑞舒伐他汀对大鼠糖尿病性心肌病(DCM)的影响.方法 将雄性Wistar大鼠50只随机分为正常对照组(n=8)、DCM组(n=21)和DCM+瑞舒伐他汀组(n=21).DCM组和DCM+瑞舒伐他汀组腹腔注射链脲佐菌素(sTZ)建立DCM大鼠模型,DCM+瑞舒伐他汀组大鼠每天以瑞舒伐他汀20mg/kg灌胃,20周后评价各组的体质量、空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯及胆固醇.采用彩色多普勒超声心动图仪观测左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)、短轴缩短率(FS)及射血分数(EF),二尖瓣及三尖瓣瓣膜返流情况、二尖瓣口E波大速度、A波大速度、E/A的比值、E波减速时间(EDT')、等容舒张时间(IVRT')及主动脉血流大速度(APV)等改变.结果 ①注射STZ 1周后,与正常对照组相比,DCM组和DCM+瑞舒伐他汀组大鼠体质量均显著升高(p均<0.05),空腹胰岛素、血清胆固醇及甘油三酯均明显升高(P<0.01,P<0.05);实验末,与正常对照组相比,DCM组和DCM+瑞舒伐他汀组大鼠体质量显著下降(P均<0.01),空腹胰岛素水平明显降低(P均<0.05),空腹血糖及甘油三酯水平显著升高(P均<0.01),DCM组胆固醇水平显著升高(P<0.01);②超声心动图显示,与正常对照组相比,DCM组和DCM+瑞舒伐他汀组大鼠实验末LVIDd值及LVIDs值明显增加(P均<0.01),二尖瓣和三尖瓣瓣膜返流发生率显著增加(P均<0.05),E/A比值及LVEF 降低(P均<0.01);DCM+瑞舒伐他汀组大鼠LVIDd值及LVIDs值较DCM组减小(P均<0.05),房室瓣瓣膜返流发生率减少(P均<0.05),E./A比值及EF升高(P均<0.05).结论 瑞舒伐他汀对DCM大鼠的心功能和心肌重构有一定改善作用.

    作者:姜晓莉;安丰双;宋辉;安贵鹏;董哲;刘晓曼 刊期: 2011年第05期

  • 新型生物活性复合材料RGD-PLGA/HA体外细胞相容性的实验研究

    目的 研究新型多孔多肽聚乳酸乙醇酸/羟基磷灰石(RGD-PLGA/HA)支架材料的体外细胞相容性.方法 采用贴壁法对兔骨髓基质细胞(BMSCs)进行体外矿化诱导培养,扩增后与实验A组(RGD-PLGA/HA)、实验B组(PLGA/HA)分别进行体外复合培养,并通过定性及定量法检测BMSCs在材料表面的黏附能力、增殖活力,验证细胞材料复合体的成骨活性.结果 兔BMSCs在每组材料的表面均能生长,经体外诱导后在支架材料的表面形成钙结节,实验A组细胞的黏附及增殖能力均强于实验B组.结论 兔BMSCs与新型多孔RGD-PLGA/HA支架材料有良好的相客性.

    作者:张士杰;陈飞;蒋欣泉 刊期: 2011年第05期

  • 丙酮酸乙酯对人胰腺癌细胞的抑制作用

    目的 观察丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate,EP)对人胰腺癌细胞PANC-1和AsPC-1增殖、凋亡及高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)mRNA表达水平的影响.方法 采用MTT和FCM法分别检测EP与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)单独及联合作用(EP组,E组;5-FU组,F组;联合组,EF组)对PANC-1和AsPC-1细胞增殖和凋亡的作用;通过Real Time-PCR(RT-PCR)观察各用药组对PANC-1和AsPC-1细胞HMGBl mRNA表达水平的影响.结果 随着药物浓度的增加,各用药组细胞增殖活性及HMGBl mRNA表达水平逐渐降低,凋亡率逐渐增高.E0.5225F10、E1.0450F20、E20900F40、E3.1350F80组的胰腺癌细胞抑制率均比相应E组高(P<0.05),EF组的胰腺癌细胞凋亡率均比相应E组高(P<0.05),E3.1350F80、E41800F160组均比相应E组的胰腺癌细胞HMGB1 mRNA表达水平高(P<0.05).结论 EP可能通过对HMGBl表达的影响,抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,从而起到抗胰腺癌作用,但是其具体机制及在体内的作用有待进一步深入研究.

    作者:梁旭阳;程宝泉;贾俊英;王旭;任洪波 刊期: 2011年第05期

  • 骨髓间充质干细胞对INS-1细胞凋亡的影响

    目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对过氧化氢(H2O2)诱导胰岛β细胞凋亡的影响.方法 以H2O2作用于大鼠胰岛瘤细胞INS-1细胞构建凋亡模型,通过Transwell装置实现INS-1细胞与BMSCs共培养.实验分为4组:单独INS-1细胞培养组(A组);INS-1+H2O2处理组(B组);BMSC+INS-1 Transwell共培养组(C组);BMSC+INS-1+H2O2Transwell共培养组(D组).MTT法检测细胞存活率,Annexin-V/PI染色流式细胞技术检测细胞凋亡水平.结果 H2O2显著降低INS-1细胞存活率,引起INS-1细胞凋亡,且呈剂量依赖性,通过Tran-swell与BMSCs共培养后,由H2O2诱导的INS-1凋亡细胞比例下降,与单独H2O2刺激组相比,细胞凋亡率下降了约26.3%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BMSCs通过Transwell共培养显著抑制H2O2诱导的INS-1细胞凋亡,其作用机制可能与BMSCs旁分泌作用有关,为进一步利用BMSCs防治糖尿病提供了理论依据.

    作者:孙慧环;刘福强;龚蕾;肖芳;侯新国;孙宇;宋君;陈丽;王旭平 刊期: 2011年第05期

  • 经皮椎体成形术治疗老年人椎体骨质疏松压缩性骨折

    骨质疏松椎体压缩性骨折(osteoporotic vertebral compressin fracture,OVCF)在老年人中的发病率逐年上升,主要的临床症状是腰背疼痛[1-3].近年,经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PVP)在欧美等国得到广泛应用,被认为是治疗压缩性骨折、骨肿瘤、椎体骨质疏松症等疾病的有效方法.该法作为一种微侵人手术,其基本原理是把液态的骨水泥注入椎体内,以达到迅速止痛和恢复椎体强度的目的,具有创伤小、并发症少、疗效稳定等优点[4-6],PVP治疗OVCF临床疗效显著[7].我院2006年4月~2009年6月采用PVP技术治疗OVCF患者82例,取得了较显著的临床疗效,现报道如下.

    作者:艾尔肯·肉孜;王鑫 刊期: 2011年第05期

  • 白细胞介素-17对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞的影响

    目的 探讨白细胞介素-17(IL-17)及其抗体对哮喘小鼠肺中嗜酸性粒细胞(E0S)的影响.方法 随机将60只Balb/c雌性小鼠分为健康组(A)、对照组(B)、哮喘组(c)、IL-17抗体组(D)及IL-17组(E)各12只.A组不做特殊处理,B、C、D、E组采用卵蛋白致敏和激发的方法,建立哮喘模型并给予相应干预;采用HE染色肺组织病理切片观察炎性细胞浸润,采用ELISA法检测小鼠肺组织匀浆上清液中嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin-1).结果 C、D、E组小鼠气道炎症以EOS和中性粒细胞浸润为主,B组变化较轻,A组正常;Eotaxin-1浓度从高到低依次为C、D、E、B、A组(P<0.05),其差异有统计学意义.结论 外源性IL-17能够减少激发状态下哮喘小鼠肺中EOS的浸润.

    作者:王兆辉;姚慧 刊期: 2011年第05期

  • 糖皮质激素受体在小鼠单纯疱疹病毒性面瘫中的表达变化

    目的 通过建立1型单纯疱疹病毒(Hsv-1)致小鼠面瘫模型,探讨糖皮质激素受体(GR)在面瘫小鼠面部运动皮层及面神经核团中的表达变化规律.方法 选取89只4周龄Balb/c雌性小鼠随机分为空白对照组(n=8只)和实验组(n=81只),实验组用26G针头在右耳廓背面近耳根处皮肤连续搔刮后,将25μL HSV-1接种创面上,空白对照组不做处理.分别于面瘫后6、12、24、48、72 h及7 d取组织,采用蛋白质印迹法(western blot)、RT-PCR法、免疫组织化学技术方法检测小鼠中枢神经系统中糖皮质激素受体的表达变化规律.结果 实验组接种HSV-1后,其中44只出现面瘫,面瘫率为54.32%.GR mRNA在面瘫早期小鼠的大脑面部运动皮层及面神经核团中表达逐渐降低,6 h达低值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).之后逐渐升高,于48 h达峰值,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).之后又逐渐降低,7 d时已接近对照组,但其差异无统计学意义(P>0.05).GR mRNA表达变化规律与GR蛋白表达变化相一致.免疫组织化学显示在面神经核团中可见糖皮质激素受体阳性细胞表达,并且也存在先降低后升高的变化规律.结论 病毒性面瘫后糖皮质激素受体表达水平呈动态变化,提示糖皮质激素受体表达水平与面神经损伤的进展密切相关,对于临床上合理应用糖皮质激素治疗贝尔面瘫,防止激素抵抗现象具有指导意义.

    作者:姜振;王海波;李建峰;韩月臣;徐磊;刘闻闻;毛彦妍 刊期: 2011年第05期

  • 汶川地震后一年半绵阳、北川受灾群众心理卫生状况及其与五态人格的关系

    目的 调研汶川地震后一年半绵阳、北川受灾群众心理卫生状况及其与五态人格的关系.方法 用症状自评量表(sCL-90)和五态人格问卷调查绵阳和北川480名群众.结果 SCL-90总分≥160分(筛查阳性)者占21.2%,躯体化、强迫等7个因子得分与常模存在统计学差异(P<0.01).震后一年半SCL-90除躯体化以外的其他因子分均显著低于震后初期(P<0.001).农村受灾群众心理卫生状况差于城市.不同年龄组间SCL-90总分与因子分无统计学差异.太阳人格与强迫和人际敏感得分呈显著负相关;少阳人格与抑郁、焦虑等因子呈显著负相关;阴阳平和人格与恐怖因子得分呈显著负相关;少阴人格与SCL-90九项因子得分均无明显相关;太阴人格除与躯体化和强迫无明显相关外,与其他7个因子均呈显著正相关.结论 地震后一年半受灾群众心理卫生状况好于震后初期,低于全国正常水平,农村低于城镇,太阴人格特征者心理卫生状况偏差.灾区心理卫生工作仍需重视.

    作者:张伯华;胡霜;张德秀;宋婧杰;刘羽曦 刊期: 2011年第05期

  • EZH2和CTGF在肺腺癌中的表达和意义

    目的 研究果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)和结缔组织生长因子(CTGF)基因在肺腺癌中的表达和意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色法分别检测60例肺腺癌标本及相应的癌旁正常肺组织中EZH2和CTGF基因的mRNA和蛋白表达,分析EZH2和CTGF表达与肺腺癌临床参数之间的关系.结果 与CTGF的表达相反,EZH2基因的mRNA和蛋白水平在肺腺癌癌组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织(P<0.01),在低分化肺腺癌标本中的表达高于高分化腺癌(P<0.05),在晚期肺癌中的表达高于早期肺癌(P<0.05).EZH2和CTGF的表达均与患者的性别、年龄无关(P>0.05),与吸烟有关(P<0.05).结论 EZH2和CTGF可能分别作为癌基因和抑癌基因参与肺腺癌的发生、发展.

    作者:吕怡静;任敏;王博;葛汝青;张继东 刊期: 2011年第05期

  • 应用神经逆行示踪及激光显微切割技术精确分离mesostriatal亚群神经元

    目的 中脑内向纹状体投射的mesostriatal多巴胺能细胞亚群是导致帕金森病的关键神经元,本实验拟寻找该亚群投射神经元的分布及有效分离方法.方法 利用立体定位技术将绿色荧光逆行示踪剂注射到新生鼠纹状体内,24h后灌注取脑做冰冻切片;应用免疫荧光组织化学染色方法行酪氨酸羟化酶(TH)染色,采用激光显微切割技术将荧光示踪剂标记且呈TH染色阳性的神经元精确切割并收集.结果 荧光示踪的神经元呈TH阳性者即属于mesostriatal亚群神经元,主要分布于中脑黑质,应用激光显微切割技术可精确分离这些逆行示踪且TH染色阳性的神经元.结论 应用逆行荧光示踪和激光显微切割技术可精确分离mesostriatal亚群神经元.

    作者:杨淑华;高青;李春晓;王超;张静;李贵宝;李振华;孙晋浩 刊期: 2011年第05期

  • 山东部分社区盆底功能障碍性疾病的流行病学研究

    目的 调查山东省部分社区人群盆底功能障碍性疾病(PFD)的流行病学特征、患病相关因素以及对生活质量影响的情况.方法 采用问卷调查和常规体检方式,根据国际尿控学会的诊断标准,对山东省部分社区妇女进行健康查体时获得临床资料进行分析.结果 共调查2354人,有效问卷2326份,年龄跨度为19~70岁,平均年龄(39.54±15.13)岁,PFD的患病率为25.4%(591/2326),其中压力性尿失禁(SUI)和盆腔脏器脱垂(POP)的患病率分别为12.3%(286/2 326)、13.1%(305/2326),SUI和POP的患病率随着年龄的升高呈升高的趋势(P=0.001).调查显示,年龄、便秘、子宫切除术后、阴道分娩、产次、产程延长及会阴裂伤是SUI发生的相关因素;而年龄、便秘、子宫切除术后、阴道分娩、产次、产程延长、绝经是POP发生的相关因素.PFD对生活质量影响的严重程度和平均年龄无关,重度生活质量受损的患者就业率下降.结论 PFD的发病和年龄、便秘、子宫切除术后、阴道分娩、产次、产程延长有关,对患者生活质量有严重损害.

    作者:李霞;刘培淑;毛洪鸾;张小磊;郑靖芳 刊期: 2011年第05期

  • 胃癌中VEGF-A、VEGF-D和podoplanin的表达及其与淋巴道转移的研究

    目的 探讨胃癌患者血管内皮生长因子A和D(vascular endothelial growth factor-A and-D,VEGF-A and VEGF-D)在胃癌组织、癌旁组织、正常胃组织中的表达及其在胃癌进展中的作用.观察淋巴管内皮细胞podoplanin的表达,为研究胃癌淋巴道转移的分子机制提供形态学依据.方法 应用免疫组织化学SP法检测54例胃癌组织、癌旁组织和12例正常胃组织中VEGF-A、VEGF-D、podoplanin的表达,检测胃癌组织及癌旁组织中的微淋巴管密度(1ymphatic microvessel density,LMVD).结果 胃癌癌组织、癌旁组织中VEGF-A和VEGF-D表达阳性率明显高于正常胃组织(P<0.01),其中在淋巴结转移组两者的表达明显高于淋巴结未转移组(P<0.05).VEGF-A和VEGF-D在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.365,P=0.007),并与淋巴结转移有关(P<0.01).胃癌癌组织血管内皮podoplanin不染色,淋巴管内皮细胞podoplanin阳性表达,经计数微淋巴管数量,癌组织和癌旁组织LMVD明显高于正常组织,VEGF-A、VEGF-D阳性组LMVD值分别为(9.23±2.49)、(9.29±2.18),较阴性组(7.53±1.81)、(7.44±1.88)显著增高.结论 胃癌中VEGF-A与VEGF-D高表达与胃癌淋巴结转移密切相关,podoplanin可选择性的在胃癌组织淋巴管内皮表达,能明确地区分血管及淋巴管成分,可作为一个淋巴管内皮细胞较特异的标记物.由于微淋巴管密度在VEGF-A与VEGF-D阳性表达组癌组织中的表达明显增高,表明淋巴管数量的增加可能与两者协同作用有关.

    作者:田小林;罗庆伟;蒋志庆;林静 刊期: 2011年第05期

  • 京尼平与戊二醛鞣制牛心包材料的对比研究

    目的 观察京尼平作为一种新型固定生物瓣膜组织交联剂的可行性.方法 牛心包经脱细胞处理,分别用戊二醛和京尼平进行鞣制,光镜下观察脱细胞效果,电镜下观察胶原纤维排列;测试收缩温度;拉伸试验测定大载荷;Wistar大鼠臀大肌皮下埋藏牛心包片,于4周及8周后取出,分别测试京尼平与戊二醛鞣制的牛心包的钙、磷含量.结果 经脱细胞处理后,光镜下可见脱细胞处理的牛心包几乎没有细胞核,而未经脱细胞处理的牛心包可见弥漫存在的细胞核.电镜下可见京尼平鞣制的牛心包胶原纤维呈环状交联,戊二醛鞣制的牛心包胶原纤维呈网状交联,京尼平鞣制的牛心包胶原纤维排列较戊二醛鞣制的牛心包略为疏松,收缩温度略低于戊二醛鞣制的牛心包(P<0.05).大载荷无统计学差异(P>0.05).但京尼平鞣制牛心包的钙、磷含量显著低于戊二醛鞣制的牛心包(P<0.05).京尼平鞣制的牛心包8周的钙含量显著低于4周的钙含量(P<0.05).结论 京尼平鞣制的牛心包具有较高的强度和极低的钙、磷含量,且随时间延长京尼平鞣制的牛心包的钙含量有减少趋势,提示京尼平是一种很有前景的生物组织交联试剂.

    作者:王建光;刘天起;王雪梅;许莉;刘羽曦;王东;厉泉 刊期: 2011年第05期

  • 云南双江佤族、布朗族15个STR基因座遗传多态性及遗传关系分析

    目的 检测云南双江县佤族、布朗族15个STR基因座遗传多态性及与其他群体的遗传关系.方法 以Power PLex 16 system Kit复合扩增15个STR基因座(D3S1358、THO1、D21S11、D18S51、Penta E、D5S818、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、VWA、D8S1179、TPOX、FGA),用ABI PRISM 310遗传分析仪检测扩增产物,计算群体等位基因频率等法医学参数,并结合文献发表的国内其他群体的遗传学资料,运用CODIS系统13个基因座计算群体间的遗传距离.结果 15个STR基因座在佤族、布朗族中均具有较高的遗传多态性,适于群体的法医学应用.群体遗传距离比较中,佤族与布朗族近(0.0110),佤族与布依族及鄂温克族分别为0.030 2和0.024 3;佤族与汉族群体的遗传距离普遍较近,短为浙江汉族(0.0140).布朗族与布依族、鄂温克族遗传距离分别为0.0343和0.0309,与汉族群体的距离也较近,短为安徽汉族(0.0124).结论 15个STR基因座在云南双江佤族、布朗族中具有较高的遗传多态性,适于群体的法医学应用;群体分析对了解佤族、布朗族群体的起源、迁徙及其遗传关系有重要意义.

    作者:刘建兴;李利华;景强;胡利平;聂胜洁;姜良豹;许冰莹 刊期: 2011年第05期

  • 血浆尿嘧啶核苷测定及胞磷胆碱钠片和胶囊人体生物等效性研究

    目的 建立人血浆尿嘧啶核苷高效液相色谱测定法,进行胞磷胆碱钠健康志愿者生物等效性研究.方法 24例健康志愿者口服胞磷胆碱片或胶囊600mg,以阿莫西林为内标,采用高效液相色谱法测定尿嘧啶核苷经时血浓度,DAS软件计算尿嘧啶核苷主要药代动力学参数,评价两制剂的生物等效性.结果 尿嘧啶核苷回归方程为y=2.10x+0.57(r=0.9928),方法低检测限为0.05μg/mL,回收率95.57%~102.09%,日内、日间RSD均小于15%.血浆尿嘧啶核苷药后3.5 h达峰值,约为3.0μg/mL,然后逐渐降低,约8 h至基础值.AUC0-t、AUC0~∞和Cmax90%置信区间分别为85.3%~97.5%、85.3%~102.9%和89.5%~102.1%.结论 所建立方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,可用于人血浆嘧啶核苷测定.胞磷胆碱钠片和胶囊符合生物等效的假设,为生物等效制剂.

    作者:曹明亮;陈克广;刘晓燕;王本杰;魏春敏;袁桂艳;郭瑞臣 刊期: 2011年第05期

  • WCX纳米磁珠在子宫内膜癌血清蛋白质组中的应用

    目的 利用弱阳离子交换型(WCX)纳米磁珠联合表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析子宫内膜癌患者血清蛋白质谱,筛选潜在的特异性肿瘤标志物,探讨其临床意义.方法 应用WCX纳米磁珠联合SELDI-TOF-MS对24例子宫内膜癌患者及28例正常人血清标本进行蛋白质质谱分析,用Biomark Wizard软件分析差异蛋白峰,并在Swiss蛋白数据库中搜索鉴定差异蛋白,受试者工作特征(ROC)曲线评价该技术的应用价值.结果 在质荷比(m/z)2000-20000范围内,子宫内膜癌患者血清中筛选出与正常人血清有统计学意义的差异蛋白11个(P<0.05),其中6个高表达:m/z分别为4 175、5 315、7 970、8 047、15 930、16074;5个低表达:m/z分别为4 592、4675、7 019、9188、9 358.m/z为7 970的差异蛋白与子宫珠蛋白(UG)相符.应用ROC曲线分析,确定11个差异蛋白对子宫内膜癌有中等诊断价值,灵敏度为70.5%~96.4%,特异度为89.3%~100%.结论 WCX纳米磁珠联合SELDI-TOF-MS能在子宫内膜癌患者血清中筛选出灵敏度和特异度较好的差异表达蛋白,其有助于子宫内膜癌的筛查、早期诊断及预后监测.

    作者:栾力;管尚慧;杨圣思;程欢欢;王娜娜;董召刚;程玉峰 刊期: 2011年第05期

  • 人PDLIM4基因启动子报告基因载体的构建及其在人类肿瘤细胞中的表达

    目的 构建人PDLIM4基因启动子荧光素酶报告基因重组质粒pGL3-promoter,检测其在不同肿瘤细胞中的表达.方法 据Genebank中人PDLIM4基因启动子序列分别设计上下游引物,扩增其启动子片段,并插入到pGL3-Basic报告基因载体,分别得到含有3kb和1.2kb的PDLIM4基因启动子的两个报告基因质粒pGL3-PD-LIM4-3kb和pGL3-PDLIM4-1.2kb.序列为1.2kb的启动子利用Erase-a-base试剂盒,经外切酶Ⅲ从5'端逐步酶切得到5个含不同长度启动子序列的报告基因载体:pGL3-PDLIM4-1.2D1、pGL3-PDLIM4-1.2D2、pGL3-PDLIM4-1.2D3、pGL3-PDLIM4-1.2D4、pGL3-PDLIM4-1.2D5.将构建的报告基因载体分别瞬时转染以下细胞株:Heh、MDA-MB231、KB、PC-3、LNCaP,检测其荧光素酶表达活性.结果 所构建质粒经酶切、测序鉴定,其片段长度及序列均正确.转染结果显示,长片段的3kb和1.2kb启动子序列在所测试的细胞株中均有表达,但在人激素非依赖前列腺癌PC-3细胞株、人激素依赖前列腺癌LINCaP细胞株中表达较低.而不同长度的启动子报告基因质粒转染PC-3、LNCaP的结果显示,pGL3-PDLIM4-1.2kb表达活性强,pGL3-PDLIM4-970bp表达活性弱.结论 成功构建了7个分别含有不同长度的PDLIM4启动子报告基因载体,其在不同的肿瘤细胞株中均有不同程度的表达,而在前列腺癌细胞中表达较低.

    作者:蒋慧慧;胡志敏;李先哲;席广民;蒋汉明;苑辉卿 刊期: 2011年第05期

  • MLPA技术检测热性惊厥患儿SCN1A基因

    目的 探讨热性惊厥的临床特点及其与电压门控性钠离子通道α1亚单位基因(SCN1A)的关联.方法 收集34例热性惊厥患儿的临床资料及外周血并提取其DNA,采用多重连接依赖式探针扩增技术对热性惊厥患儿的sCN1A基因进行检测.结果 34例热性惊厥患儿中单纯性热性惊厥29例,复杂性热性惊厥5例,所有患儿均进行SCN1A基因检测,均未发现SCN1A基因外显子缺失或重复.结论 SCN1A基因外显子的缺失或重复可能不是热性惊厥的潜在病因.

    作者:张洪伟;王纪文 刊期: 2011年第05期

  • 肺结核患者血清SP-D检测的临床意义

    目的 检测肺结核患者血清中肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)的表达,探讨其在肺结核诊断中的意义.方法 采用ELISA方法检测101例肺结核患者、30例慢性阻塞性肺疾病患者(C0PD)、85例健康人血清中SP-D的水平并测定血清结核抗体,沉降法检测血沉,电阻法测定白细胞计数、中性粒细胞比例、淋巴细胞比例,芒图试验法进行结核菌素试验(PPD试验),抗酸染色检测痰中结核茵数量.结果 肺结核患者血清中SP-D的水平明显高于健康人、低于C0PD患者(P<0.05);ROC曲线显示肺结核患者血清SP-D的Cutoff值为0.26,在肺结核病诊断中敏感性为72.30%,特异性91.00%,诊断准确率为80.65%;PPD试验及结核抗体与血清SP-D具有相关性(x2分别为8.44、17.08,P均<0.01).结论 血清SP-D与肺结核疾病具有重要的相关性,有望成为肺结核诊断的一种辅助检测指标.

    作者:徐勇;胡华;迟晶宇;杨燕;鞠云飞;侯宝青;李学政 刊期: 2011年第05期

  • 济南市售食用鱼铅、镉、砷含量调查及污染状况评价

    目的 测定济南市售常见淡水鱼和海水鱼中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)的含量,并进行污染状况评价.方法 利用石墨炉原子吸收法测定Pb、Cd含量,原子荧光法测定As的含量,采用单因子污染指数法和尼梅罗综合污染指数法对不同鱼类的污染状况进行评价.结果 淡水鱼与海水鱼的Pb、Cd、As的平均含量分别为0.154 8、0.013 5、0.1093μg/g,Pb、Cd单因子污染指数和尼梅罗综合污染指数均小于1,海水鱼中鲈鱼、鲅鱼、黄花鱼As的两种指数均大于或接近1,带鱼和鲳鱼在1.883 6~3.181 0之间.结论 所采集鱼类Pb、Cd污染未超标,但As污染较严重.

    作者:汪晓静;刁飞燕;张静;郭冬梅;崔晞 刊期: 2011年第05期

山东大学学报(医学版)杂志

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